67 resultados para soybean cake
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A peroxidase was extracted from Chinese soybean seed coat, and its thermostability and acid-stability were characterized. This peroxidase was immobilized into a self-gelatinizable grafting copolymer of polyvinyl alcohol with 4-vinylpyridine(PVA-g-PVP) to construct an acid-stable hydrogen peroxide biosensor. The effect of pH was studied for optimum analytical performances by amperometric and spectro-photometric methods, also the K-m(app) and the stability of the soybean peroxidase-based biosensor are discussed. At pH 3.0, the soybean peroxidase maintained its bioactivity and the enzyme electrode had a linear range from 0.01 to 6.2 mM with a detection limit of 1.0 x 10(-7) M. In addition, the main characteristics of different hydrogen peroxide sensors were compared.
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An acid-stable soybean-peroxidase biosensor was devel oped by immobilizing the enzyme in a sol-gel thin film. Methylene blue was used as a mediator because of its high electron-transfer efficiency. The sol-gel thin film and enzyme membrane were characterized by FT-IR, and the effects of pH, operating potential, and temperature were explored for optimum analytical performance by using the amperometric method. The H2O2 sensor exhibited a fast response (5 s), high sensitivity (27.5 mu A/mM), as well as good thermostability and long-term stability. In addition, the performance of the biosensor was investigated using flow-injection analysis (FIA).
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Using the LAMP method, a highly specific and sensitive detection system for genetically modified soybean (Roundup Ready) was designed. In this detection system, a set of four primers was designed by targeting the exogenous 35S epsps gene. Target DNA was amplified and visualized on agarose gel within 45 min under isothermal conditions at 65 degrees C. Without gel electrophoresis, the LAMP amplicon was visualized directly in the reaction tube by the addition of SYBR Green I for naked-eye inspection. The detection sensitivity of LAMP was 10-fold higher than the nested PCR established in our laboratory. Moreover, the LAMP method was much quicker, taking only 70 min, as compared with 300 min for nested PCR to complete the analysis of the GM soybean. Compared with traditional PCR approaches, the LAMP procedure is faster and more sensitive, and there is no need for a special PCR machine or electrophoresis equipment. Hence, this method can be a very useful tool for GMO detection and is particularly convenient for fast screening.
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The chlorophyll fluorescence in soybean leaves was observed by a portable fluorometer CF-1000 under field conditions. On clear days, F-0 increased while F, and F-v/F-m decreased gradually in the morning. At midday F-O reached its maximum while F-v and F-v/F-m reached their minimum. The reverse changes occurred in the afternoon. At dusk these parameters could return to levels near those at dawn. Following exposure to a strong sunlight for more than 3 h, the dark-recovery process displayed three phases: (1) slow increases in F-0, F-v and F-v/F-m within the first hour; (2) a faster decrease in F-0 and faster increases in F-v and F-v/F-m within subsequent two hours; (3) a slow decrease in F-0 and slow increases in F-v and F-v/F-m within the fourth hour. In comparison with darkness, weak irradiance had no stimulating effect on the recovery from photoinhibition. Hence the photoinhibition in soybean leaves is mainly the reflection of reversible inactivation of some photosystem 2 reaction centres, but not the result of D1 protein loss.
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Experiments were performed, in a terrestrial environment, to study the migration and interaction of two drops with different diameters in matrix liquid under temperature gradient field. Pure soybean oil and silicon oil were used as matrix liquid and the drop liquid, respectively. The information on the motions of two drops was recorded by CCD camera system in the experiments to analyze the trajectories and velocities of the drops. Our experiments showed that, upon two drops approaching each other, the influence of the larger drop on the motion of the smaller one became significant. Meanwhile the smaller drop had a little influence on the larger one all the time. The oscillation of migration velocities of both drops was observed as they were approaching. For a short period the smaller drop even moved backward when it became side by side with the larger one during the migration. Although our experimental results on the behavior of two drops are basically consistent with the theoretical predictions, there are also apparent differences. 2006 Elsevier Ltd. All rights reserved. Keywords: Thermocapillary migration; Drop; Interaction; Oscillation 1. Introduction A bubble or drop will move when placed in another fluid with temperature gradient. This motion happens as a consequence of the variation of interfacial tension with temperature. Such a phenomenon is already known as Marangoni migration problem. With the development of microgravity science, bubble dynamics and droplet dynamics became a hot point problem of research because this investigation is very important for basic research as well as for applications in reduced gravity environment, such as space material science, chemical engineering and so on. Young et al. first investigated the thermocapillary migration of
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The experimental investigation of the thermocapillary drop migration in a vertical temperature gradient uns performed on ground. Silicon oil and pure soybean oil were used as experimental medium in drops and as continuous phases, respectively, in the present experiment. The drop migration, under the combined effects of buoyancy: and thermocapillarity, was studied for middle Reynolds numbers in order of magnitude O(10(1)). The drop migration velocities depending on drop diameters were obtained. The present experimental results show relatively small migration velocity in comparison with the one suggested by Young et nl. for linear theory of small Reynolds number. An example of flow patterns inside the drop was observed by PIV method.
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野大豆群体3和群体4属盐渍群体,其个体有的是抗盐的,有的是敏感的,有的是中等抗盐的,本文通过随机扩增多态性DNA (RAPD)和DNA扩增指纹(DAF)分析野大豆群体抗盐性与分子标记之间的关系,从而更好地研究野大豆群体的盐适应机理。通过12个RAPD引物和3个DAF引物扩增发现:引物OPF05,OPF19和OPH02的扩增产物中有与抗盐性可能相关的特异标记,分别是OPF05_(213);OPF19_(4361);OPF19_(1727);OPF19_(1400);OPF19_(700);OPH02_(1350)。这些特异标记在所研究的抗盐植株中都存在;在敏感型植株中都不存在;在中等抗盐植株中有的存在,有的不存在。以上表明野大豆群体的抗盐性与RAPD分子标记有一定的相关性。为进一步研究抗盐性的特异标记,本文对栽培大豆抗盐品种Morgan和文丰七号的特异DAF标记片断8-27_(240) (Zhong et al., 1997)进行了克隆测序,测序结果通过BLASTn程序与基因库中的基因序列进行同源比较,发现上的DNA序列中的19组(每组大约二十到三十个碱基)序列与基因库中的其它基因相应序列有很高的同源性,几乎全部100%同源。尤其目的序列第15个碱基到第33个碱基(共19个碱基)之间的序列与基因库中的25个基因的相应序列的同源性全部是100%,并且与之相比的基因大多来自动物和人。因而推测其有可能是保守区,而不是编码区。进一步用DNASIS软件分析其碱基组成(A/T含量是64.9%,G/C含量是35.1%)并进行翻译,结果同样表明此序列可能是一调控序列并非编码区。至于这段序列是否与抗盐紧密相关,这有待于以后把此序列转到敏感型植株中然后检测其抗性来验证。 本文还通过RAPD分析野大豆群体3和群体4的多态性,发现群体3的多态性明显高于群体4。野大豆群体3的抗盐性大于群体4早已通过生理指标的鉴定,至于多态性与抗盐性之间是否有必然联系,还需进一步研究讨论。利用RAPD数据,通过MEGA软件中的NJ计算遗传距离的方法对群体3和4进行聚类分析,研究野大豆群体间及群体内个体间的亲缘及进化关系,探讨野大豆群体盐适应机理的分子起源。
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本文通过根农杆菌(Agrobacterium tumfaciens)介导法分别将Signal和KDEL修饰的豇豆胰蛋白酶抑制剂(Cowpea trypsin inhibitor, CpTI)基因、豌豆外源凝集素(Pea lectin, P-Lec)和大豆Kunitz型胰蛋白酶抑制剂(Soybean Kunitz typsin inhibitor, SKTI)双价抗虫基因、雪花莲外源凝集素(Galanthus nivals agglutinin, GNA)基因以及高效复合启动子OM控制的苏云金杆菌(Bacillus thuringiensis, B.t.)杀虫毒蛋白基因导入了陆地棉(Gossypium hirsutum L.)栽培品种新陆早1号、新陆中2号、晋棉7号、冀合321、辽9和晋棉12号,并获得了大批转基因再生植株。 实验中对影响棉花转化和再生的一些条件进行了研究,从根农杆菌培养、棉花无菌苗的制备、转化操作和共培养等方面对转化条件进行了探讨;从激素配化、植物表达载体、外植体类型、基因型等方面对抗性愈伤组织的诱导进行了摸索;从激素、从碳源、培养容器、pH值、抗褐化剂及固化剂的选择等方面对影响植株再生的条件进行了优化。 本文开创性地采用嫁接代替移栽,从而极大地提高了转化植株定植成活率,缩短了缓苗时间并增加了转化植株当代的繁殖系数。 在建立了一套较为高效的陆地棉转化及再生系统基础上,本文还进行了其它转化方式和转化体系的初步探讨。利用棉花幼嫩种子无菌苗下胚轴作为外植体,通过改变愈伤组织诱导培养基配方面提高胚性愈伤组织的诱导频率,进而得到更多的体细胞胚状和再生植株,缩短再生周期;尝试用胚性愈伤组织作为外植体的根农杆菌介导法转化,确定了一些与转化有关的条件;建立了一套棉花茎尖培养程序,为运用基因枪法轰击棉花茎尖分生组织或用根农杆菌直接转化茎尖分生组织,以克服根农杆菌转化棉花时体胚发生的基因型局限开辟了一条新途径。 本文还建立了一种快速鉴定转化植株后代的方法。这一简便方法还有助于进行转基因棉纯合系的筛选以及外源基因的遗传稳定性研究。 转基因植株经Npt-II ELISA、PCR、PCR Southern 检测证明外源抗虫基因CpTI、SKTI、P-lec、GNA以及B.t.基因已存在于转化植株基因组内。修饰的CpTI转基因植株抗棉铃虫(Heliothis armigera Hubner)试验结果表明,其杀虫效果显著优于前期未修饰的CpTI转化植株。P-lec和SKTI双价转基因植株抗棉铃虫试验结果表明,转基因植株对棉铃虫幼虫具有较强的杀虫活力。 目前,已获得转以上抗虫基因棉花T1代植株。为今后进一步将植物基因工程技术应用于棉花遗传改良打下了基础。
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当前分子生物学的方法以惊人的速度渗透到生命科学研究的各个领域。植物对不断变化的环境逐步适应的过程中,积累了丰富的遗传多样性。与此同时,人类活动空间的不断扩大已经严重威胁到其他生命的生存和繁衍,越来越多的物种以越来越快的速度在我们还没有来得及认识它们时就已经永远地消失了。加快物种鉴定和保护的步伐就必须发展更多能充分揭示物种遗传多样性的实验技术,从具有丰富遗传多样性的野生资源中寻找到更多能够服务于人类可持续发展的基因资源。本文以杨树杂交后代过氧化物同工酶和RAPD分析为基础,论证了我们改进的RAPD方法用于遗传分析的可行性。在前期工作的基础上,进一步测定了野大豆自然群体的耐盐性变异,并且用微卫星和RAPD分析的方法研究分子标记与DXA变异、植株耐盐性之间的关系。对四个可能与抗盐性有关的RAPD片段进行克隆、测序,并进行序列比较。由此得出以下结论: 1、在本文的实验条件下,杨树同工酶和RAPD分析均表明,RAPD标记在亲本及其杂交后代中性状比例符合孟德尔遗传规律,尽管有时也会出现遗传负载等机制引起的基因分布扭曲现象。 2、初步研究了个体发育阶段和环境条件对植株耐盐性的影响。结果表明,植物耐盐性不仅仅与外界的盐度有关,而且受发育阶段和其它环境条件(如,温度)的影响。但也发现了某些个体在各种条件下都具有较高的耐盐性,而且,不易受到其它环境条件的影响。 3、微卫星标记的结果表明,10对引物中的8对引物共检测到时17个等位基因,平均每对引物2.125个等位基因。本文的实验条件下,双核苷酸和三核苷酸的引物对扩增产物都没有出现“ghosts"条带或“打滑”现象。 4、有4个RAPD标记可能与野大豆群体的耐盐性有关,分别是OPCO8460bp、OPCO8213bp、OPCO2690bp、以及OPCO5270bp。测序结果与GenBank中的序列作同源性比较,结果显示,OPCO2_(690bp)与小麦、松树等植物的吉普赛性的逆转录转座子的部分区域(24--53)有很高的同源性(86-89%)。此外,OPCO2690bp与栽培大豆胞质谷氨酰胺合成酶(gs15)基因的启动子有高达95%的同源性。 5、本文实验条件下,RAPD扩增产物在限制性内切酶消化后,消化产物的多态性未见增大,也没有发现与耐盐性相关的多态位点。 6、野大豆自然群体DNA变异的研究中也可以应用SWAPP方法。
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生物固氮和植物光合作用作为全球生态系统的两个基本生物学过程, 在碳氮循环、自然生态系统的维持和演替,以及农业生产中起了重要作用。尽管过去关于共生固氮与光合作用的研究取得了巨大成就,但是,很少将两者直接联系起来。本研究通过比较低光效和高光效大豆接种高效固氮根瘤菌后固氮与光合作用的差异,比较接种根瘤菌和施用铵态氮肥对大豆光合生理的影响或光照强度对大豆光合固氮的影响,以及C4基因转化C3 豆科植物—苜蓿的研究,试图将两者偶联起来。研究获得以下结果: 1.用nifA和dct工程根瘤菌接种低光效和高光效大豆后,与出发菌株比,均提高了大豆的固氮和光合作用。两者相比,nifA工程菌对低光效大豆黑农37号发挥了比较好的作用,大豆的光合作用参数,固氮活性和植物株高、株重等产量参数比dct工程菌好;dct工程菌接种高光效大豆黑农40号后,尽管固氮酶活性与nifA工程菌相比没有明显差异,但是大豆光合作用和产量参数有了比较明显的提高。 2.光照培养条件下,对大豆进行了接种根瘤菌(108细菌/ mL)、低氮(5 mmol/L (NH4)2SO4)和高氮(30 mmol/L (NH4)2SO4)处理。测定的大豆生长状况和光合作用系列参数结果表明:低氮处理的最好,接种根瘤菌的次之,高氮处理的最差。由此说明单纯接种根瘤菌满足不了大豆发育过程中的氮营养要求,其光合作用和生长受到不利影响。但是,高氮处理也并没有提高大豆的光合作用,其生长发育甚至受到抑制。该结果为生产实践中合理施肥提供了光合生理方面的参考。 3.接根瘤菌和不接根瘤菌的大豆在正常光强(150μmol photons m-2s-1)下生长三周后进行遮光(15μmol photons m-2s-1,7天)和复光(正常光强,7天)处理,大豆的光合作用有下降和回复。测定的一系列光合参数、叶绿素荧光参数,以及植物的生长生理参数结果表明:接根瘤菌大豆与不接根瘤菌的大豆对遮光的响应有不同。正常光照下,接种根瘤菌能促进大豆生长与光合作用;遮光处理后,根瘤菌对大豆的促进作用不显著。 4.获得了不同苜蓿品种的愈伤组织及其诱导的再生植株。并作了用小米、甘蔗的PEPC基因转化苜蓿的研究。由于在实验过程中,考虑转基因植物的安全性,着重于用甘露糖筛选转化体系的研究工作,忽略了用抗生素筛选转化体。用PCR法从苜蓿中扩增出甘露糖异构酶基因(pmi),表明苜蓿体内含有自己的甘露糖异构酶基因,使得甘露糖筛选没有成功。
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花粉是种子植物受精过程中雄性生殖细胞的载体,在有性生殖过程中起着非常重要的作用。花粉与柱头、花柱、子房等都有相互作用,起识别作用的是细胞壁蛋白,而花粉粒的壁有明显的两层:内壁和外壁。裸子植物花粉与被子植物相比具有萌发时间长、生长缓慢、授粉-受精时间长等特点。花粉的内壁与外壁在花粉萌发和生长过程中的功能仍然缺乏研究,但是迄今为止现有的分子生物学技术在获得裸子植物花粉壁突变体方面并没有发挥作用。本研究以裸子植物白皮松(Pinus bungeana)和青杄(Picea wilsonii)花粉为材料建立裸子植物花粉脱壁的体系,包 括脱外壁花粉和花粉原生质体的制备,即将花粉的两层壁逐层剥离,并在此基础上进行了细胞学研究。 本文首先建立了裸子植物脱外壁花粉的分离技术。实验表明低浓度的酶组合短暂酶解后,辅以机械研磨,可以释放出大量的脱外壁花粉。其中在这两种裸子植物中的处理稍有不同,白皮松的脱外壁花粉在含12%蔗糖,0.5%纤维素酶和0.3%离析酶的溶液,pH 5.8 ,孵育半小时,辅以一定力度机械研磨的方法获得,而青杄脱外壁花粉的条件是0.8%纤维素酶和0.5%离析酶、12%蔗糖的溶液,其它条件类似。 其次我们成功建立了一种快速、有效、可重复的分离白皮松和青杄花粉原生质体的系统,分离频率可高达70%。对白皮松而言,最好的分离条件是2% 纤维素酶、1.5%离析酶、15%蔗糖、pH 5.8,黑暗、24℃条件下轻微振荡、酶解6 小时。3%纤维素酶和2%离析酶组合比较适宜青杄花粉原生质体的分离,同时需要较低浓度的蔗糖溶液(12%)。青杄花粉原生质体要远大于白皮松花粉原生质体,前者直径为80µm,后者为40µm。强烈的FDA 荧光显示很好的活性。在制备的过程中,酶的浓度、酶的配比、酶解时间、渗透压调节剂、起始材料对分离率都有影响。 运用免疫荧光标记技术显示,脱外壁花粉的表面存在纤维素、果胶质、阿拉伯半乳聚糖蛋白(AGPs)和凝集素结合位点,其中纤维素在整个表面都有分布,但在萌发孔附近的荧光最强;白皮松脱外壁花粉表面有胼胝质的存在,主要位于靠近气囊的部位,而青杄脱外壁花粉表面未能检测到胼胝质;酸性果胶质在白皮松脱外壁花粉靠近萌发孔处的荧光稍弱于其它部位,而在青杄脱外壁花粉的表面近极端的荧光要强于远极端;白皮松脱外壁花粉表面有酯化果胶的沉积,而青杄脱外壁花粉表面缺失酯化果胶;白皮松和青杄两种植物脱外壁花粉表面均有阿拉伯半乳糖的分布,而白皮松脱外壁花粉的荧光要远强于青杄;白皮松和青杄脱外壁花粉表面有伴刀豆凝集素(Conconavalin agglutinin, Con A )和大豆凝集素(soybean agglutinin, SBA )结合位点的分布,而缺失麦胚凝集素(wheat germ agglutinin, WGA)结合位点。另外,傅立叶红外光谱(FTIR) 分析结果也同样支持上述结论。
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GCTE(全球变化和陆地生态系统),作为IGBP的核心计划之一,其目的是研究陆地生态系统与全球气候变化及人类社会经济和土地利用改变之间相互作用的耦合机理关系,预测生态系统结构、功能的未来变化。其中,植物个体水平的生理生态学模型研究是GCTE中必不可少的重要环节,它不仅可以揭示植物在个体水平上对全球变化的动态响应机制,而且可通过揭示大尺度响应所隐含的微观生物学机理,为大尺度研究提供重要的生理学参数和规律,在全球变化各尺度研究中发挥着不可替代的作用。本文主要围绕植物个体的生理生态学模型开展了如下研究:在开顶式气室CO2倍增大豆生长实验基础上,建立描述植物主要生理过程的生理生态模型,分析植物个体的光合作用、气孔传导度、蒸腾作用以及水分利用效率在全球场变化下的动态响应机制;在此基础上,建立起以统计性天气模型驱动的植物个体生长发育系统动力学模型,通过敏感度分析探讨植物个体的生理生态特性,如光合、呼吸、绿色及非绿色生物量等,对全球变化,特别是对CO2增加,气温升高及降水改变共同作用的响应机制;针对固氮植物的特点,将前一模型发展成为基于共生固氮和同化过程相互作用机制的植物个体生理生态系统动力学模型,模拟不同CO2浓度、气候变化以及固氮与不固氮条件下植物个体生物量的动态响应,并分析CO2浓度、气候条件和是否具固氮能力在对植物生长发育影响方面的相互作用;以中间锦鸡儿为研究材料进行水分控制实验,观测水分对植物同化物分配等过程的影响;将水分利用效率模型应用到NECT样带的主要植物种,得出各植物种的描述其水分利用效率特性的参数,结合样带上各植被类型的结构特征,得到沿样带各植被类型在植物种类组成方面的水分利用效率参数;应用系统聚类分析、因子分析等多元统计方法对样带上锡林河流域122种植物的化学成分与植物类群和所处生境的关系进行了定量分析。结果表明: 1)CO2倍增情况下,净光合速率提高45%,其中光量子效率显著增加,而CO2传导系数略有下降;气孔传导度、蒸腾速率下降约30%;水分利用效率随CO2浓度增加几乎呈线性增长,倍增后提高近一倍。(当气温,水分适宜,光合有效辐射为1000μmol photons m-2 s-1); 2)在北京地区仅CO2倍增而气候条件维持现状的情况下可导致大豆总生物量峰值提高70%,绿色部分提高56%,其中,全生育期内总净光合量增加,而单位干重的暗呼吸速率下降;由于受同化物分配中物候因素的影响,绿色生物量比总生物量提前10日左右到达其峰值。 3)CO2浓度增加和具固氮能力在模拟范围内对植物生长均产生正效应;而在水分为植物生长限制因子的干旱半干旱地区,降水增加对植物生长产生正效应,气温升高则具负效应; 4)随着C供给条件的好转,具固氮能力对植物生长的影响增强;反之随植物吸收N能力的提高,C供给对植物生长的作用加剧。 5)气温、降水在对植物生长发育影响方面,随着一方条件的好转,另一方对植物生长产生的效应增强; 6)具固氮能力对植物生长的正效应随气候条件的好转而增强,气候变化对植物生长的影响随植物具备了固氮能力而加剧; 7)气候条件越恶劣,如在此半干旱区变得更为干旱,CO2浓度增加对植物生长的正效应越加显著;且随CO2浓度的增加,气候因子的效应逐渐减弱。这主要是因CO2增加提高了植物个体的水分利用效率,从而使得CO2的正效应在水分胁迫下更为明显;同时由于水分利用效率的提高,使得植物个体抵御和适应外界环境变化,特别是由气温、降水改变导致的水分条件变化,的能力得到增强。 8)锦鸡儿水分生理生态实验的初步结果表明,土壤水分状况影响着植物的同化物分配,随着水分胁迫的加剧,同化物分配向根部集中,植物的根冠比增加。 9)沿样带水分递减梯度,植被类型在植物种类组成方面的反映水分利用效率特性的参数kv逐渐增加,从而显示出随着水分条件的不足,植被类型中耐旱品种,尤其是C4种增加;人为活动干扰,主要是对草场等的过度利用而导致的盐渍化、沙化,使得退化了的植被类型中k_v值显著提高,表明原有的植物种逐渐被耐旱、耐盐碱的品种,特别是C4植物所代替;在样带动上,这种由于人为活动干扰所引起的植被类型在植物种类组成方面反映水分利用效率特性的参数kv的变化明显大于因样带水分梯度改变而带来的变化。 10)锡林河流域草原植物化学成分一方面与植物类群有关,受自身历史演化的决定,另一方面更受到所处生境条件的极度大影响和制约。其中,禾本科、豆科植物分别具有明显的化学成分特征;撂荒地群落与自然群落中植物、沙质与非沙质生境中植物化学成分差异较显著;因子分析中认为存在大量元素与微量元素两个公共因子,豆科与禾本科相比,豆科植物因其固氮能力,所含大量元素水平较高,而禾本科植物因细胞壁硅质化,含微量元素稍高;沙质生境因其养分贫瘠,植物的大量与微量元素均较非沙质生境中的低;特别是本区地带性土壤-栗钙土与特异性生境沙带中的疏林沙土相比,疏林沙土上植物大量与微量元素含量较栗钙土区植物明显偏低。