Os emigrantes caboverdianos em Portugal: Identidade construída

Projecto organizado e realizado, para cumprimento dos requisitos necessários à obtenção do Grau de Mestre em Ciências da Comunicação – Cinema e Televisão

The role of literature: english textbooks and literature in secondary teaching in Portugal

Trabalho de Projecto apresentado para cumprimento dos requisitos necessários à obtenção do grau de Mestre em Ensino de Inglês

Caracterização da flutuação do tráfego na cidade de Lisboa

Dissertação para obtenção do Grau de Mestre em Engenharia Civil – Perfil Construção

Avaliação do tratamento de frutas e vegetais por radiação ionizante para grupos de risco

Dissertação para obtenção do Grau de Mestre em Engenharia Biomédica

Expressão em Escherichia coli de antigénios do Cell fusing agent virus (Flaviviridae: Flavivirus) como proteína de fusão

RESUMO: O Cell Fusing Agent Vírus (CFAV), considerado como o primeiro “flavivírus específicos de insectos” (ISF), parece estar exclusivamente adaptado aos seus hospedeiros, não replicando em células de vertebrados. Apesar de ter sido identificado há mais de três décadas (1975), a verdade é que muito pouco se conhece sobre a sua biologia. Dado o seu parentesco filogenético com alguns outros flavivírus encontrados naturalmente em mosquitos de diferentes géneros colhidos em diferentes regiões do globo, este vírus poderá ser usado como modelo para o estudo de ISF. No entanto, necessitam do desenvolvimento de ferramentas básicas, tais como clones moleculares ou baterias de soros contendo anticorpos que reconheçam uma ou mais proteínas codificadas pelo genoma viral, produzidas, por exemplo, a partir de antigénios virais produzidos de forma recombinante. Com este trabalho pretendeu-se a optimização de protocolos que permitiram a expressão e purificação parcial de quatro proteínas [duas proteínas estruturais (C e E) e duas não estruturais (NS3hel e NS5B)] do CFAV em E. coli, todas elas produzidas como proteínas de fusão com “caudas” (tags) de hexahistidina nos seus extremos carboxilo. Para a expansão do CFAV foram utilizadas células Aedes albopictus (C6/36). Após a realização da extracção do RNA viral e a obtenção de cDNA, procedeu-se amplificação, por RT-PCR, das regiões codificantes das proteínas C, E, NS3hel e NS5B, utilizando primers específicos. Os quatro fragmentos de DNA foram independentemente inseridos no vector pJTE1.2/blunt usando E. coli NovaBlue como hospedeira de clonagem e, posteriormente, inseridos em vectores de expressão pET-28b e pET-29b usando E. coli BL21(DE3)pLysS e Rosetta(DE3)pLysS como hospedeiras de expressão. Após da indução, expressão e purificação das proteínas recombinantes C, E, NS3hel e NS5B, foi confirmada a autenticidade destas proteínas produzidas através do método Western Blot com um anticorpo anti-histidina. --------- ABSTRACT: The Cell Fusing Agent virus (CFAV) considered as the first "insect- specific flavivirus" (ISF) and seems to be uniquely adapted to their hosts, not replicating in vertebrate cells. Although it has been known for more than three decades (1975), the truth is very little is known about its biology. Given its close phylogenetic relationship with other flavivirus naturally circulating in various genera of mosquitoes collected from different regions of the globe, this virus could be used as a model for the study of ISF. However, such studies require the development of experimental basic tools, such as molecular clones or serum batteries containing antibodies that recognize one or more proteins encoded by the viral genome, produced, for example, from viral antigens recombinant produced. In this work, we carried out the optimization of protocols that allowed the expression and partial purification of four proteins [two structural proteins (C and E) and two nonstructural proteins (NS3hel and NS5B)] CFAV in E. coli as fusion protein for c-terminal hexahistidine tags. For the expansion of the CFAV we used Aedes albopictus (C6/36) cells. After completion of the viral RNA extraction and cDNA obtained, amplification of the coding regions of the C, E, NS5B and NS3hel proteins was carried out by RT-PCR using specific primers. The four DNA fragments were independently inserted into the vector pJTE1.2/blunt using E. coli NovaBlue as cloning host and then inserted into expression vectors pET-28b and pET-29b using E. coli BL21(DE3)pLysS and Rosetta(DE3)pLysS as expression host. After induction, expression and purification of recombinant C, E, NS3hel and NS5B proteins Western Blot analyses with an anti-histidine antibody confirmed the authenticity of these proteins produced.

Understanding the relationship between central metabolism and virulence in the human pathogen Streptococcus pneumoniae

Dissertation presented to obtain the Ph.D. degree in Biochemistry

Controlo das linhas de produção: bolachas recheadas e milfolhas

Dissertação para obtenção do Grau de Mestre em Tecnologia e Segurança Alimentar

Modelo de Avaliação de risco em acidentes no ramo automóvel

Dissertação apresentada como requisito parcial para obtenção do grau de Mestre em Estatística e Gestão de Informação

Implicaturas Escalares e Propriedades Semânticas

Dissertação apresentada para cumprimento dos requisitos necessários à obtenção do grau de Mestre em Desenvolvimento e Perturbações da Linguagem na Criança, área de Especialização em Terapia da Fala e Perturbações da Linguagem

Caminhos para a intertextualidade no triângulo Eneida – Lusíadas – Mensagem. Uma leitura didática

Relatório apresentado para cumprimento dos requisitos necessários à obtenção do grau de Mestre em Ensino do Português e das Línguas Clássicas no 3.º Ciclo do Ensino Básico e no Ensino Secundário

Stress relacionado com o trabalho e burnout em técnicos de radiologia

RESUMO - O fenómeno stress relacionado com o trabalho é um tema atual, bastante debatido e alvo de diversas investigações. No entanto, os estudos portugueses sobre o stress relacionado com o trabalho em profissionais de saúde não são muito frequentes, apesar de desempenharem uma atividade considerada de alto risco em termos de stress. O síndrome de burnout é a consequência de prolongados níveis de stress relacionado com o trabalho e compreende três dimensões: exaustão emocional (EE), despersonalização (DSP) e realização pessoal (RP). O presente estudo demonstra-se como não experimental, descritivo e transversal que pretende contribuir para uma melhor compreensão do stress relacionado com o trabalho e burnout em técnicos de radiologia. Estudaram-se 73 técnicos de radiologia do Centro Hospitalar de Lisboa Central. 76,4% da população em estudo é do sexo feminino, 58,9% tem idades compreendidas entre os 41 e 60 anos, 53,4% dos profissionais são casados e 56,1% tem entre 1 e 20 anos de serviço como técnico de radiologia nos locais em estudo. Foram utilizados três questionários, um sócio-demográfico, o questionário Perceived Stress Scale (versão portuguesa do Instituto de Prevenção do Stress e Saúde Ocupacional) e o questionário Maslach Burnout Inventory (versão portuguesa traduzida pela Drª Alexandra Pinto. Verifica-se que 50,7% dos profissionais em estudo percecionam o seu nível de stress relacionado com o trabalho como elevado. Na análise da perceção do stress relacionado com o trabalho, foram os homens que surgiram com um nível mais elevado, assim como os profissionais dos 20 aos 40 anos, os solteiros e aqueles com um tempo de serviço entre 1 e 20 anos. Em relação ao burnout verificamos que 66,2% da população em estudo apresenta nível médio a elevado de EE, 57,9% de DSP e 66,2% de RP. Podemos verificar que são as mulheres que surgem com valores mais elevados de EE e RP, enquanto os homens apresentam valores mais elevados na dimensão DSP. Os mais novos (20 a 40 anos) e os solteiros apresentam nível médio a elevado de EE e DSP, enquanto os mais velhos (41 aos 60 anos) e os casados demonstram níveis mais elevados de RP. Estes dados demonstram um nível médio a elevado de burnout vivenciado pelos técnicos de radiologia dos hospitais em estudo.

An approach to teach Calculus/Mathematical Analysis (for engineering students) using computers and active learning – its conception, development of materials and evaluation

Dissertação para obtenção do Grau de Doutor em Ciências da Educação

Planos e programas – avaliação do impacte no ambiente e território

Dissertação para obtenção do Grau de Mestre em Engenharia do Ambiente, perfil Gestão e Sistemas Ambientais

Estudo da eficiência de adsorção de chumbo presente em meio líquido através da utilização de carvões obtidos na co-pirólise de diferentes resíduos

Dissertação para obtenção do Grau de Mestre em Energia e Bioenergia

Valorização do real: a condição solitária do herói ideológicamente comprometido em Les Justes de Albert Camus e Felizmente há Luar! de Sttau Monteiro

Dissertação apresentada para cumprimento dos requisitos necessários à obtenção do grau de Mestre em Línguas, Literaturas e Culturas