The trans-membrane protein p25 forms highly specialized domains that regulate membrane composition and dynamics

Trans-membrane proteins of the p24 family are abundant, oligomeric proteins predominantly found in cis-Golgi membranes. They are not easily studied in vivo and their functions are controversial. We found that p25 can be targeted to the plasma membrane after inactivation of its canonical KKXX motif (KK to SS, p25SS), and that p25SS causes the co-transport of other p24 proteins beyond the Golgi complex, indicating that wild-type p25 plays a crucial role in retaining p24 proteins in cis-Golgi membranes. We then made use of these observations to study the intrinsic properties of these proteins, when present in a different membrane context. At the cell surface, the p25SS mutant segregates away from both the transferrin receptor and markers of lipid rafts, which are enriched in cholesterol and glycosphingolipids. This suggests that p25SS localizes to, or contributes to form, specialized membrane domains, presumably corresponding to oligomers of p25SS and other p24 proteins. Once at the cell surface, p25SS is endocytosed, together with other p24 proteins, and eventually accumulates in late endosomes, where it remains confined to well-defined membrane regions visible by electron microscopy. We find that this p25SS accumulation causes a concomitant accumulation of cholesterol in late endosomes, and an inhibition of their motility - two processes that are functionally linked. Yet, the p25SS-rich regions themselves seem to-exclude not only Lamp1 but also accumulated cholesterol. One may envision that p25SS accumulation, by excluding cholesterol from oligomers, eventually overloads neighboring late endosomal membranes with cholesterol beyond their capacity (see Discussion). In any case, our data show that p25 and presumably other p24 proteins are endowed with the intrinsic capacity to form highly specialized domains that control membrane composition and dynamics. We propose that p25 and other p24 proteins control the fidelity of membrane transport by maintaining cholesterol-poor membranes in the Golgi complex.

IL-10 Mediates Suppression of the CD8 T Cell IFN-γ Response to a Novel Viral Epitope in a Primed Host

Priming to Ag can inhibit subsequent induction of an immune response to a new epitope incorporated into that Ag, a phenomenon referred to as original antigenic sin. In this study, we show that prior immunity to a virus capsid can inhibit subsequent induction of the IFN-gamma effector T cell response to a novel CD8-restricted antigenic epitope associated with the virus capsid. Inhibition does not involve Ab to the virus capsid, as it is observed in animals lacking B cells. CD8-restricted virus-specific T cell responses are not required, as printing to virus without CTL induction is associated with inhibition. However, IL-10(-/-) mice, in contrast to IL-10(+/+) mice, generate CD8 T cell and Ab responses to novel epitopes incorporated into a virus capsid, even when priming to the capsid has resulted in high titer Ab to the capsid. Furthermore, capsid-primed mice, unable to mount a response to a novel epitope in the capsid protein, are nevertheless able to respond to the same novel epitope delivered independently of the capsid. Thus, inhibition of responsiveness to a novel epitope in a virus-primed animal is a consequence of secretion of IL-10 in response to presented Ag, which inhibits local generation of new CD8 IFN-gamma-secreting effector T cells. Induction of virus- or tumor Ag-specific CD8 effector T cells in the partially Ag-primed host may thus be facilitated by local neutralization of IL-10.

EMA analysis of tongue function in children with dysarthria following traumatic brain injury

Primary objective : To investigate the speed and accuracy of tongue movements exhibited by a sample of children with dysarthria following severe traumatic brain injury (TBI) during speech using electromagnetic articulography (EMA). Methods and procedures : Four children, aged between 12.75-17.17 years with dysarthria following TBI, were assessed using the AG-100 electromagnetic articulography system (Carstens Medizinelektronik). The movement trajectories of receiver coils affixed to each child's tongue were examined during consonant productions, together with a range of quantitative kinematic parameters. The children's results were individually compared against the mean values obtained by a group of eight control children (mean age of 14.67 years, SD 1.60). Main outcomes and results : All four TBI children were perceived to exhibit reduced rates of speech and increased word durations. Objective EMA analysis revealed that two of the TBI children exhibited significantly longer consonant durations compared to the control group, resulting from different underlying mechanisms relating to speed generation capabilities and distances travelled. The other two TBI children did not exhibit increased initial consonant movement durations, suggesting that the vowels and/or final consonants may have been contributing to the increased word durations. Conclusions and clinical implications : The finding of different underlying articulatory kinematic profiles has important implications for the treatment of speech rate disturbances in children with dysarthria following TBI.

Parvalbumin-, calbindin-, and calretinin-immunoreactive neurons in the prefrontal cortex of the owl monkey (Aotus trivirgatus): A standardized quantitative comparison with sensory and motor areas

Recent studies have revealed regional variation in the density and distribution of inhibitory neurons in different cortical areas, which are thought to reflect area-specific specializations in cortical circuitry. However, there are as yet few standardized quantitative data regarding how the inhibitory circuitry in prefrontal cortex (PFC), which is thought to be involved in executive functions such as cognition, emotion and decision making, compares to that in other cortical areas. Here we used immunohistochemical techniques to determine the density and distribution of parvalbumin (PV)-, calbindin (CB)-, and calretinin (CR)-immunoreactive (ir) neurons and axon terminals in the dorsolateral and orbital PFC of the owl monkey (Aotus trivirgatus), and compared them directly with data obtained using the same techniques in 11 different visual, somatosensory and motor areas. We found marked differences in the density of PV-ir, CB-ir, and CR-ir interneurons in several cortical areas. One hundred and twenty eight of all 234 possible between-area pairwise comparisons were significantly different. The density of specific subpopulations of these cells also varied among cortical areas, as did the density of axon terminals. Comparison of PFC with other cortical areas revealed that 40 of all 66 possible statistical comparisons of the density of PV-ir, CB-ir, and CR-ir cells were significantly different. We also found evidence for heterogeneity in the pattern of labeling of PV-ir, CB-ir, and CR-ir cells and axon terminals between the dorsolateral and orbital subdivisions of PFC. These data are likely to reflect basic differences in interneuron circuitry, which are likely to influence inhibitory function in the cortex. Copyright (C) 2003 S. Karger AG, Basel.

Enhanced effector and memory CTL responses generated by incorporation of receptor activator of NF-kappa B(RANK)/RANK ligand costimulatory molecules into dendritic cell immunogens expressing a human tumor-specific antigen

The outcome of dendritic cell (DC) presentation of Ag to T cells via the TCR/MHC synapse is determined by second signaling through CD80/86 and, importantly, by ligation of costimulatory ligands and receptors located at the DC and T cell surfaces. Downstream signaling triggered by costimulatory molecule ligation results in reciprocal DC and T cell activation and survival, which predisposes to enhanced T cell-mediated immune responses. In this study, we used adenoviral vectors to express a model tumor Ag (the E7 oncoprotein of human papillomavirus 16) with or without coexpression of receptor activator of NF-kappaB (RANK)/RANK ligand (RANKL) or CD40/CD40L costimulatory molecules, and used these transgenic DCs to immunize mice for the generation of E7-directed CD8(+) T cell responses. We show that coexpression of RANK/RANKL, but not CD40/CD40L, in E7-expressing DCs augmented E7-specific IFN-gamma-secreting effector and memory T cells and E7-specific CTLs. These responses were also augmented by coexpression of T cell costimulatory molecules (RANKL and CD40L) or DC costimulatory molecules (RANK and CD40) in the E7-expressing DC immunogens. Augmentation of CTL responses correlated with up-regulation of CD80 and CD86 expression in DCs transduced with costimulatory molecules, suggesting a mechanism for enhanced T cell activation/survival. These results have generic implications for improved tumor Ag-expressing DC vaccines, and specific implications for a DC-based vaccine approach for human papillomavirus 16-associated cervical carcinoma.

Agroamigo

No Nordeste, a agricultura familiar representa 82,9% da ocupa????o de m??o de obra no campo. O Banco do Nordeste desenvolveu o Agroamigo, uma inova????o em metodologia de concess??o de cr??dito para os agricultores familiares de baixa renda. O Agroamigo possibilita aos agricultores serem atendidos em suas pr??prias comunidades, diminuindo os deslocamentos para a ag??ncia, al??m de receberem acompanhamento e orienta????o de um especialista em atividades rurais. Possibilita a educa????o financeira sobre endividamento, planejamento financeiro, poupan??a, melhores formas de alocar recursos, uso correto do cr??dito e a import??ncia do retorno do recurso para o governo federal. O Agroamigo ?? o maior programa de microfinan??as rural do Brasil, tendo recebido reconhecimento nacional e internacional por seu modelo. Por conceder cr??dito de forma gradual e sequencial, tem promovido o desenvolvimento sustent??vel das atividades financiadas e reduziu a inadimpl??ncia de 63,94% para 4,68%

Spade-PRO: Sistema de Prospec????o e An??lise de Desvios em Exames: provas objetivas

Sistema desenvolvido e aplicado durante a Opera????o Tormenta para identificar suspeitos de fraudar as provas objetivas de concursos p??blicos. O Sistema de Prospec????o e An??lise de Desvios em Exames (Spade-PRO) serviu de base para auditar os concursos p??blicos realizados pela Pol??cia Federal nos anos de 2001, 2004 e 2009. Em raz??o da efetividade do sistema, a sua utiliza????o foi estendida para os concursos p??blicos realizados pelas seguintes institui????es: Ag??ncia Nacional de Avia????o Civil (Anac), Ag??ncia Brasileira de Intelig??ncia (Abin), Tribunal de Justi??a do Estado de S??o Paulo (TJSP) e para o Exame da Ordem dos Advogados do Brasil (OAB). Os dados obtidos, utilizados nas a????es criminais que apuraram a responsabilidade pelas fraudes, foram fundamentais para evitar o ingresso ilegal de pessoas no servi??o p??blico. O sistema ser?? utilizado pela Pol??cia Federal para auditar os pr??ximos concursos do ??rg??o e est?? dispon??vel para ser aplicado por qualquer institui????o que solicite a realiza????o da auditoria em seus processos seletivos

Vistorias de aeronaves: centraliza????o do planejamento e controle

A ideia da centraliza????o surgiu objetivando que os usu??rios da avia????o civil em todo o pa??s tivessem um tempo de espera igual para a realiza????o de vistorias. A partir do dia 4 de janeiro de 2010, foi institu??da a forma centralizada do controle das vistorias de aeronaves visando ?? melhoria e agilidade do processo. Trata- se de uma centraliza????o virtual, pois cada inspetor permaneceu sediado em seu pr??prio local de origem, por??m cumprindo as miss??es definidas pela coordena????o central, a fim de atender a vistoria em qualquer ponto do territ??rio nacional

Caixas receptoras de correspond??ncias confeccionadas com material recicl??vel

Os Correios t??m como miss??o facilitar as rela????es pessoais e empresariais mediante a oferta de servi??os de correios com ??tica, competitividade, lucratividade e responsabilidade social. Fundamentada em objetivos estrat??gicos, como o de obter padr??es de qualidade e produtividade requeridos pelas partes interessadas e aumentar a percep????o da sociedade em rela????o ?? atua????o da ECT como empresa socialmente respons??vel, a Ag??ncia de Conchas/DR/SPI implantou a????o socioambiental e educacional com a comunidade: a instala????o de caixas receptoras de correspond??ncia em suas resid??ncias, utilizando materiais recicl??veis. O projeto proporcionou ganhos significativos para a Ag??ncia e para os mun??cipes na presta????o de um servi??o com maior qualidade e agilidade a partir da melhoria gradativa das condi????es de entrega nos novos bairros atendidos pelo servi??o, al??m da satisfa????o e do reconhecimento da sociedade com a a????o de inclus??o social

Cart??o do cidad??o

O pagamento dos benef??cios sociais, efetuado no guich?? de caixa das ag??ncias, era um processo lento e oneroso ao cidad??o e ?? CAIXA. Envolvia elevado quantitativo de atendentes e significativo tempo para a execu????o de rotinas inerentes, principalmente no que diz respeito ?? qualifica????o e ?? identifica????o do trabalhador, ao tratamento da documenta????o e ?? coleta de assinatura no documento de pagamento, gerando elevado custo operacional. Em 1995, a CAIXA lan??ou o Cart??o do Trabalhador, que permitia o acompanhamento de lan??amentos do Fundo de Garantia do Tempo de Servi??o (FGTS) e acesso ao saldo de cotas de sua participa????o no Programa de Integra????o Social (PIS), mas n??o tinha a funcionalidade de saque de benef??cios e n??o atendia os benefici??rios do Abono Salarial e do Seguro- Desemprego. A necessidade de aperfei??oar e integrar os processos de atendimento e pagamento desses produtos sociais levou ?? cria????o do Cart??o do Cidad??o, que proporcionou melhoria significativa na qualidade do atendimento ao cidad??o e minimizou os custos operacionais

Avalia????o de desempenho: como avaliar os servidores de forma justa?

Na Ag??ncia Nacional de Melhorias, ??rg??o p??blico federal, os servidores t??cnico-administrativos recebem a Gratifica????o de Compensa????o do Vencimento (GCV), a qual ?? paga conforme o desempenho dos servidores, aferido anualmente. Entretanto, o processo de avalia????o de desempenho ocorre de forma injusta e com muitas disfun????es. O desempenho dos servidores n??o ?? efetivamente avaliado, como no caso da equipe do Cl??udio, que possui um servidor com desempenho aqu??m dos demais servidores, mas que recebe a mesma pontua????o

Atendimento programado do Instituto Nacional do Seguro Social

Em agosto de 2005, foi criada a Diretoria de Atendimento do Instituto Nacional do Seguro Social (Dirat/INSS), com a incumb??ncia de priorizar a redu????o do atendimento presencial, ampliando os mecanismos de atendimento remoto da popula????o. Entre as a????es para a melhoria do atendimento est??o a implanta????o do agendamento eletr??nico programado, a amplia????o dos servi??os de teleatendimento e a gest??o das vagas disponibilizadas pelas Ag??ncias da Previd??ncia Social. Esse trabalho resultou em um atendimento resolutivo, utiliza????o mais racional da for??a de trabalho nas Ag??ncias e redu????o do tempo de espera por atendimento nas filas das Ag??ncias da Previd??ncia Social

Valores e decis??es dif??ceis

Logo no in??cio do caso, o leitor ?? colocado no papel de membro de um conselho respons??vel por uma ag??ncia rural de sa??de (??rg??o da realidade p??blica canadense) com um grande d??ficit or??ament??rio. Cabe ao conselho examinar a proposta de or??amento para o pr??ximo ano fiscal, levando em considera????o uma s??rie de fatores importantes para a adequada presta????o de servi??os de sa??de para a regi??o. O caso apresenta um hist??rico dos servi??os prestados pela ag??ncia, vis??o e valores do ??rg??o, servi??os prestados, desafios, detalhes or??ament??rios, demandas p??blicas e contexto pol??tico. Ao final, o leitor ?? incitado a tomar decis??es referentes a cortes no or??amento. O caso presta-se ao ensino de temas como gest??o or??ament??ria, planejamento e processo decis??rio

Projeto Hospitais Sentinela: uma estrat??gia de vigil??ncia para a p??s-comercializa????o de produtos de sa??de

O Projeto Hospitais Sentinela, criado em 2002, ?? uma experi??ncia inovadora que congrega a Ag??ncia Nacional de Vigil??ncia Sanit??ria, Anvisa, o Sistema Nacional de Vigil??ncia Sanit??ria, SNVS, o Programa para o Desenvolvimento das Na????es Unidas, PNUD, e 180 hospitais escolhidos entre os maiores e mais complexos servi??os do pa??s para a cria????o de uma rede sentinela que objetiva obter informa????es qualificadas a respeito da qualidade dos produtos e do seu perfil de risco-benef??cio, tendo em vista o subs??dio de a????es de regula????o de mercado. O projeto tamb??m contribui para a melhoria da qualidade da aten????o ?? sa??de, por meio da busca ativa, bem como da investiga????o de eventos adversos nesses servi??os e da ado????o de medidas para a redu????o e para o controle de riscos relacionados ??s tecnologias em sa??de, inovadoras ou n??o. A avalia????o de desempenho do projeto revela-se como uma estrat??gia poderosa e de custo reduzido para a obten????o de informa????o sobre a qualidade e seguran??a de produtos sujeitos ?? vigil??ncia sanit??ria, bem como para a observa????o da difus??o, uso racional, efetividade, seguran??a e custo de novas pr??ticas em sa??de. Esses aspectos da avalia????o de desempenho do projeto possibilita recomend??-la como ferramenta de trabalho para estados e munic??pios que desejem qualificar a aten????o hospitalar em seus territ??rios

Revis??o dos Procedimentos de P??s-Registro de Medicamentos

O Grupo de Trabalho (GT) de revis??o do regulamento t??cnico para p??s-registro de -medicamentos da Anvisa vem trabalhando na desburocratiza????o e celeridade dos procedimentos regulat??rios referentes ?? atualiza????o de dados do medicamento ap??s a obten????o de seu registro. Esses s??o itens de fundamental import??ncia para o est??mulo da produ????o e da qualidade dos medicamentos comercializados no pa??s. Foi feita uma classifica????o das modifica????es p??s-registro de medicamentos conforme o risco sanit??rio, a complexidade de an??lise e testes farmacot??cnicos. A abordagem permitiu efici??ncia da an??lise t??cnica e, uma vez que esses procedimentos tornaram-se mais c??leres, houve maior previsibilidade nas a????es de p??s-registro com a ado????o dos novos fluxos e prazos de an??lise