Transformation of Rat-1 fibroblasts with the v-src oncogene increases the tyrosine phosphorylation state and activity of the alpha subunit of Gq/G11.

Two major intermediaries in signal transduction pathways are pp60v-sre family tyrosine kinases and heterotrimeric guanine nucleotide-binding proteins. In Rat-1 fibroblasts transformed by the v-src oncogene, endothelin-1 (ET-1)-induced inositol 1,4,5-trisphosphate accumulation is increased 6-fold, without any increases in the numbers of ET-1 receptors or in the response to another agonist, thrombin. This ET-1 hyperresponse can be inhibited by an antibody directed against the carboxyl terminus of the Gq/G11 alpha subunit, suggesting that the Gq/G11 protein couples ET-1 receptors to phospholipase C (PLC). While v-src transformation did not increase the expression of the Gq/G11 alpha subunit, immunoblotting with anti-phosphotyrosine antibodies and phosphoamino acid analysis demonstrated that the Gq/G11 alpha subunit becomes phosphorylated on tyrosine residues in v-src-transformed cells. Moreover, when the Gq/G11 protein was extracted from control and transformed cell lines and reconstituted with exogenous PLC, AIF*4-stimulated Gq/G11 activity was markedly increased in extracts from v-src-transformed cells. Our results demonstrate that the process of v-src transformation can increase the tyrosine phosphorylation state of the Gq/G11 alpha-subunit in intact cells and that the process causes an increase in the Gq/G11 alpha-subunit's ability to stimulate PLC following activation with AIF-4.

Products of DNA mismatch repair genes mutS and mutL are required for transcription-coupled nucleotide-excision repair of the lactose operon in Escherichia coli.

To improve our understanding of the mechanism that couples nucleotide-excision repair to transcription in expressed genes, we have examined the effects of mutations in several different DNA repair genes on the removal of cyclobutane pyrimidine dimers from the individual strands of the induced lactose operon in UV-irradiated Escherichia coli. As expected, we found little repair in either strand of the lactose operon in strains with mutations in established nucleotide excision-repair genes (uvrA, uvrB, uvrC, or uvrD). In contrast, we found that mutations in either of two genes required for DNA-mismatch correction (mutS and mutL) selectively abolish rapid repair in the transcribed strand and render the cells moderately sensitive to UV irradiation. Similar results were found in a strain with a mutation in the mfd gene, the product of which has been previously shown to be required for transcription-coupled repair in vitro. Our results demonstrate an association between mismatch-correction and nucleotide-excision repair and implicate components of DNA-mismatch repair in transcription-coupled repair. In addition, they may have important consequences for human disease and may enhance our understanding of the etiology of certain cancers which have been associated with defects in mismatch correction.

Arabidopsis signal transduction mutant defective in chemically and biologically induced disease resistance.

Plants possess multiple resistance mechanisms that guard against pathogen attack. Among these are inducible systems such as systemic acquired resistance (SAR). SAR is activated by pathogen exposure and leads to an increase in salicylic acid (SA), high-level expression of SAR-related genes, and resistance to a spectrum of pathogens. To identify components of the signal transduction pathways regulating SAR, a mutant screen was developed that uses 2,6-dichloroisonicotinic acid as an activator of SAR gene expression and pathogen resistance, followed by assays for resistance to the fungal pathogen Peronospora parasitica. Mutants from this screen were subsequently examined to assess their defense responses. We describe here a recessive mutation that causes a phenotype of insensitivity to chemical and biological inducers of SAR genes and resistance. These data indicate the existence of a common signaling pathway that couples these diverse stimuli to induction of SAR genes and resistance. Because of its non-inducible immunity phenotype, we call this mutant nim1. Although nim1 plants fail to respond to SA, they retain the ability to accumulate wild-type levels of SA, a probable endogenous signal for SAR. Further, the ability of nim1 plants to support growth of normally incompatible races of a fungal pathogen indicates a role for this pathway in expression of genetically determined resistance, consistent with earlier findings for transgenic plants engineered to break down SA. These results suggest that the wild-type NIM1 gene product functions in a pathway regulating acquired resistance, at a position downstream of SA accumulation and upstream of SAR gene induction and expression of resistance.

A construção da parentalidade na interação com filhos com Síndrome de Down

No Brasil nasce uma criança com Síndrome de Down (SD) a cada 600 nascimentos, o que representa aproximadamente 8.000 bebês com SD por ano. As peculiaridades no desenvolvimento dessas crianças exigem que os pais desenvolvam habilidades especiais para contemplarem cada necessidade diferenciada da criança que poderia passar despercebida ou facilmente captada nas crianças sem nenhum tipo de Síndrome. A interação com os pais, agentes primordiais nesse processo, é essencial, inclusive, para minimizar os efeitos da Síndrome; porém pouco se tem estudado sobre a vivência dos cuidadores no encontro com a criança. Nesse contexto, objetivou-se compreender como se deu a construção do \"ser pai/mãe\" de uma criança com Síndrome de Down, desde o diagnóstico da Síndrome de Down até o momento da entrevista. Para tanto se utilizou o método clínico-qualitativo, através do estudo de caso coletivo. Como referencial teórico para análise a psicanálise winnicottiana. Realizou-se entrevistas semiabertas, individuais, face a face, com 5 casais de pais de crianças com Síndrome de Down, com idade de 7 a 10 anos. As entrevistas foram audiogravadas e transcritas na íntegra. Os resultados foram apresentados através de quatro categorias, a saber: \"Amor a segunda vista\" aborda o processo interativo inicial, os pais relatam o choque ao receber a notícia da Síndrome e os desafios na readaptação dos sonhos e expectativas. \"O ambiente lugar e não lugar\" descreve como os pais perceberam os diversos ambientes, alguns hostis que não contribuíram para que os mesmos pudessem ser acolhidos e potencializados na tarefa de cuidar desse filho, ressaltando que a ausência de suporte acarreta em sobrecarga na percepção dos pais; Por outro lado, consideram que o maior suporte que tiveram foi do parceiro, o que auxiliou na aceitação da notícia e em encontrar possibilidades de cuidado. \"Encontro Suficientemente Bom\" coloca em relevo a descrição dos participantes de que há maneiras diferentes de ajustar o cuidado na interação com seus filhos que perpassaram tanto por incômodos, quanto pela possibilidade do gesto criativo que se apresenta em atividades triviais e importantes do desenvolvimento. \"Trans-formações\" destaca às mudanças que os pais vivenciam ao poder se aproximar do filho \"real\", assumindo novos papéis, transformando-se através da abertura ao novo do outro e de si mesmos. A partir desse estudo pôde-se compreender que a relação vai se constituindo e se regulando reciprocamente, os cuidados precisam ser ajustados à demanda e possibilidade do outro. Compreendeu-se, ainda, que criatividade é a característica que permite que os pais sejam espontâneoss e recontruam significados e modos de interagir pessoais com seus filhos. Os pais entrevistados indicam que quanto mais lento e exigente o cuidado com seus filhos com Síndrome de Down, mais possibilidades de encontros surgem, e quando esses podem ser suficientemente bons, são \"trans-formadores\" para ambos: pais e filho. Ampliou-se a compreensão quanto a necessidade de acolhimento às angústias vividas, e suporte para o processo da construção da parentalidade.

Avaliação fenotípica das células T CD4+ reguladoras, Th17, Th22 e Tc22 nos indivíduos expostos não infectados por HIV-1

INTRODUÇÃO: A infecção por HIV-1 é um grave problema de saúde pública causando elevada taxa de morbidade e mortalidade. Entretanto, alguns indivíduos são considerados resistentes à infecção por HIV-1, mesmo após repetidas exposições ao vírus. Vários fatores imunológicos e genéticos podem estar associados a resistência à infecção, como ativação de componentes da imunidade inata e também devido ao baixo perfil de ativação das células T. É possível que nos indivíduos expostos e não infectados por HIV-1 (ENI) ocorra uma importante atuação das células T secretoras de IL-17 e IL-22, e também as células T reguladoras, pois são necessárias para a manutenção e homeostase das mucosas associadas ao intestino (GALT). OBJETIVO: Avaliar o fenótipo e a função de células TCD4+ e TCD8+ em casais sorodiscordante ao HIV-1, compostos por indivíduos ENI e os parceiros infectados por HIV-1. MÉTODOS: Os casais sorodiscordantes ao HIV-1, consistiam de 23 indivíduos expostos não-infectados (ENI), 14 mulheres e 9 homens, com mediana de 41 anos e 21 parceiros infectados por HIV-1 (HIV), 20 homens e 1 mulher com mediana de 41 anos. Os controles saudáveis foram 24 indivíduos (14 mulheres e 10 homens) com mediana de 37 anos. Os casais sorodiscordantes foram compostos por 16 heterossexuais e 7 homossexuais, com tempo de relacionamento de 13 anos. As frequências de células Th17, Th22 e Tc22, as células T polifuncionais foram analisadas em células mononucleares (CMNs) do sangue periférico, estimulados com peptídeos da região Gag do HIV-1 e da enterotoxina B do Staphylococcus aureus (SEB), a frequência de células T reguladoras, o perfil fenotípico de exaustão/diferenciação e a expressão da integrina alfa4?7 e CCR9 em células T, foram realizados por citometria de fluxo. RESULTADOS: No grupo HIV, as células T CD4+ e CD8+ do sangue periférico mostrou maior frequência de CD95 e PD-1 e baixa expressão de CD127 comparado ao grupo ENI e controle. A frequência de células Th17 em CMNs aumentou nos grupos ENI e HIV-1 na condição sem estímulo, contudo, após estímulo com os peptídeos da região p24 da Gag do HIV-1 induziu resposta somente no grupo HIV-1. O grupo ENI mostrou resposta antígeno-especifica somente para IL-22. Além disto, avaliando as células Tc22 e Th22, foi verificado aumento da resposta aos peptídeos da Gag e também ao SEB, nos grupos HIV e ENI. A presença de células T polifuncionais antígeno-especificas, secretoras de 5-4 citocinas, foi detectada apenas em células T CD38+ no grupo HIV, enquanto os indivíduos ENI mostraram resposta polifuncional por células T CD38- somente ao estímulo policlonal por SEB. Uma diminuição do número absoluto de células T reguladoras (CD4+CD25+CD127low/-Foxp3+) foi detectada no grupo HIV comparado ao ENI e controle, com maior expressão de moléculas HLA-DR e CD95. Além disto, foi detectado diminuição na frequência de células TCD8+ ?4?7+ no grupo ENI e de células TCD4+ alfa4beta7+ nos grupos ENI e HIV. Houve uma correlação positiva entre as células Tc22 e Th22 com as células TCD8+ e TCD4+ que expressam alfa4beta7, no grupo ENI e HIV-1. CONCLUSÃO: Os indivíduos ENI são capazes de desenvolver resposta antígeno-específicas relacionadas com a IL-22, que possui importante função na imunidade de mucosas. Além disto, mostram presença de células T polifuncionais com baixo perfil de ativação a estímulo policlonal. Os dados evidenciam que os indivíduos ENI, mostram indução de células Tc22, aumento de expressão de moléculas de migração para o intestino e equilíbrio entre as células efetoras e Treg, que em conjunto, devem exercer importante papel para a resistência à infecção por HIV-1

Parent-Child Interaction and Children's Self-Concept

This study is designed to investigate the relationships between marital communication, the quality of parents' ability to assist their children in joint problem-solving, and children's independent mastery attempts and perceived competence at problem-solving, and behavioral indicators of self-esteem. Couples' skill at regulating their own and their children's negative affect within the marital and parent-child family subsystems is hypothesized to predict the quality of their assistance, or scaffolding behavior, to their children during joint problem-solving. Further, the quality of parental scaffolding behavior is expected to predict children's independent mastery attempts, levels of perceived competence at problemsolving, and behavioral indicators of self-esteem. Families for the study will be those with children between 3 1/2 to six years of age recruited from subjects participating in a longitudinal study of communication in marriage being conducted at the Denver Center for Marital and Family Studies. Families will participate in three interaction tasks designed to tap parental scaffolding behavior during problemsolving with their children. Children will be administered self-report measures to tap their perceived competence at such problem-solving as those in the interaction tasks and parents will complete a questionnaire tapping the behavioral indicators of their child's self-esteem. Family interaction data will be coded with the use of a microanalytic coding system developed by this study, the Parent-Child Interaction Coding System. Marital communication data at three time points, premaritally, during the transition to parenthood , and concurrently, will be obtained from couples' interactions from the longitudinal study. The clinical significance of this study includes implications for training couples how to effectively regulate negative affect and offer their children sensitive assistance during joint problem-solving.

Brief of Amici Curiae Scholars of the Constitutional Rights of Children in Support of Petitioners in Obergefell v. Hodges

Supreme Court precedent establishes that the government may not punish children for matters beyond their control. Same-sex marriage bans and non-recognition laws (“marriage bans”) do precisely this. The states argue that marriage is good for children, yet marriage bans categorically exclude an entire class of children – children of same-sex couples – from the legal, economic and social benefits of marriage. This amicus brief recounts a powerful body of equal protection jurisprudence that prohibits punishing children to reflect moral disapproval of parental conduct or to incentivize adult behavior. We then explain that marriage bans punish children of same-sex couples because they: 1) foreclose their central legal route to family formation; 2) categorically void their existing legal parent-child relationships incident to out-of-state marriages; 3) deny them economic rights and benefits; and 4) inflict psychological and stigmatic harm. States cannot justify marriage bans as good for children and then exclude children of same-sex couples based on moral disapproval of their same-sex parents’ relationships or to incentivize opposite-sex couples to “procreate” within the bounds of marriage. To do so, severs the connection between legal burdens and individual responsibility and creates a permanent class or caste distinction.

Maddening the Minotaur : Dora Maar'a power over Pablo Picasso

Dora Maar is primarily viewed as Pablo Picasso’s mistress and muse in art historical scholarship, and scholars frequently analyze her work in terms of its evolution as a consequence of her relationship with Pablo Picasso, therefore asserting the power Picasso had over Maar. Through comparative analysis and socio-historical investigation, I assert that Maar’s strong personality, political awareness, and artistic vision profoundly influenced Picasso during the Spanish Civil War and World War II.

Anomalias congénitas associadas a técnicas de reprodução medicamente assistida

Trabalho Final do Curso de Mestrado Integrado em Medicina, Faculdade de Medicina, Universidade de Lisboa, 2014

A Defensive "stand-by reaction" at Critical Moments of the Reproductive Life Cycle

Investigation about the psychological experiences of the reproductive life cycle showed that in critical moments special reactions may happen. These reactions seem to be defensive in nature, are set in motion in order to promote some kind of emotional protection and are performed in two opposite directions: a) a decreasing of the contact with aggressive impulses and b) an increasing of the use of rationalization and denial of frustrating situations. Examples of those rearrangements were observed at samples of: 1) pregnant women in obstetric high-risk consultation, 2) infertile couples waiting for infertility consultations and 3) pregnant women waiting for amniocentesis results. These data seem to be in accordance with the classical psychological points of view: a) gestation should be considered as a period of protection, b) during pregnancy a “primary maternal preoccupation” (Winnicot, 1958) emerges leading to the mobilization of all resources available for pregnant women and c) along gestational development psychological changes show how flexible maternal functioning may become. What was not expected is that in the absence of pregnancy, infertile couples should behave very similarly to what it is observed when pregnancy is in danger or when medical problems about the mother’s or the baby’s health arise in the horizon. Due to its “freezing” consequences upon emotional development we propose that this kind of reaction will be designated as “stand-by reaction”.

Fibrose quística : fenótipo e genótipo : descrição de caso clínico

Trabalho Final do Curso de Mestrado Integrado em Medicina, Faculdade de Medicina, Universidade de Lisboa, 2014

Disfunção erétil

Trabalho Final do Curso de Mestrado Integrado em Medicina, Faculdade de Medicina, Universidade de Lisboa, 2014

Sexage et phylogénie, à partir des gènes CHD (-Z et -W) et COX-1, des oiseaux de proie du Québec et de perroquets d’attrait vétérinaire

Connaître le sexe d’un oiseau est important pour divers domaines notamment pour les vétérinaires, les écologistes ainsi que pour les éleveurs d’oiseaux qui veulent former des couples qui serviront à la reproduction. Plusieurs espèces d’oiseaux, juvéniles et adultes, n’ont pas de dimorphisme sexuel. L’utilisation de l’ADN est une façon rapide de déterminer le sexe à partir d’un échantillon de sang, de muscle, de plumes ou de fèces. Par contre, la méthode devrait être validée pour chaque espèce et idéalement, standardisée. Le premier objectif de cette étude est de développer une méthode de sexage par séquençage des oiseaux à partir des séquences du gène CHD, en utilisant les oiseaux de proie et les perroquets vus en clinique au Québec. Un deuxième objectif est de faire l’identification de l’espèce à sexer, à partir du gène mitochondrial COX-1 et aussi à partir des séquences CHD-Z et CHD-W, utilisés pour le sexage. Un troisième objectif est d’évaluer les séquences sorties (CHD-Z, CHD-W et COX-1) en vue d’une étude phylogénique. Une extraction d’ADN a été effectuée chez 27 espèces de perroquets, 34 espèces d’oiseaux de proie, une corneille (Corvus brachyrhynchos) et un poulet (Gallus gallus). Une amplification par PCR a été exécutée pour les exons partiels 23 et 24 du gène CHD. Le séquençage de cet amplicon permettait de savoir s’il s’agissait d’un mâle (séquence simple CHD-Z) ou d’une femelle (séquences CHD-Z et CHD-W qui se chevauchent). Afin d’avoir des séquences CHD-W distinctes, un sous-clonage a été fait chez les femelles de chaque espèce. De cette manière, les séquences partielles du gène CHD, Z et W, ont été trouvées pour les espèces échantillonnées. Une étude phylogénique a été effectuée avec les séquences de COX-1, CHD-Z et CHD-W grâce au site « Clustal-Omega ». La méthode de sexage des oiseaux par séquençage du gène CHD est standard et efficace. Le gène COX-1 permet une meilleure identification des espèces parentes et le gène CHD-Z est le plus utile pour étudier la phylogénie profonde.

The Fall of the East German Birth Rate After Unification: Crisis or Means of Adaptation? CES Germany & Europe Working Papers, No. 05.6, 26 June 1995

Since the fall of the Wall, Eastern Germans have drastically changed their demographic behavior. Marriages and births have dropped to an unprecedented low level. Our paper tracks birth rates of the East German population, past, present, and future. We propose a simulation model of future cohort fertility. The hypotheses we develop build on the historical record of reproductive behavior in the German Democratic Republic (GDR) since 1960 and on an analysis of the pattern of change between 1990 and 1994. The particular emphasis lies in the assumption that East German couples will rapidly westernize their family size by trying to reach completed fertility levels of the corresponding West German cohort. This implies that the resulting adaptation process includes the postunification crisis as a logical first step.

Essays on economics of marriage

A sociedade mudou nas últimas décadas abrindo a possibilidade para cientistas sociais estudarem essas mudanças e analisar os seus impactos na unidade familiar. Nesta tese pretendemos analisar como as decisões dos agentes com relação a decisão de casar e estudar pode estar conectado considerando que homens e mulheres têm preferências pelo casamento intragrupo. No modelo estudado encontramos que as preferências para o casamento intragrupo podem aumentar a proporção de homens e mulheres que decidem se casar e estudar. Mostramos também que empiricamente há um positive assortative mating entre pessoas com as mesmas características, tais como, educação, religião ou raça. Além disso, a probabilidade de casais casados na mesma religião aumenta a probabilidade dos casais estarem casados dentro do mesmo nível de escolaridade. Considerando as mudanças em como os casais se formam, a composição educacional e os retornos da educação que aconteceram no Brasil nos últimos anos, investiga-se os impactos dessas mudanças na desigualdade de renda dos casais. Calculamos cenários contrafactuais para o Coeficiente de Gini mantendo uma dessas três variáveis fixas em um determinado ano, comparando o contrafactual estimado com o Gini real. Se o casamento for formado aleatoriamente com relação à educação, o Coeficiente de Gini seria menor do que o real. Mantendo os retornos da educação fixos no ano de 2014 encontramos um Gini contrafactual menor do que o real.