986 resultados para MECANISMO REED
Resumo:
Dissertao apresentada na Faculdade de Cincias e Tecnologia da Universidade Nova de Lisboa para a obteno do grau de Mestre em Engenharia do Ambiente, perfil Gesto de Sistemas Ambientais
Caracterizao do efeito anti-tumoral de complexos organometlicos contendo 1,10-fenantrolina-5,6-diona
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Dissertao apresentada para a obteno do Grau de Mestre em Gentica Molecular e Biomedicina, pela Universidade Nova de Lisboa, Faculdade de Cincias e Tecnologia
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Dissertao para obteno do Grau de Mestre em Engenharia Informtica
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A presena de metais pesados no meio ambiente deve-se, principalmente, a actividades antropognicas. Ao contrrio do Cu e do Zn, que em baixas concentraes so essenciais para o normal funcionamento celular, no se conhece para o chumbo nenhuma funo biolgica. O chumbo apresenta efeitos txicos, e considerado possvel agente carcinogneo, sendo classificado como poluente prioritrio pela Agencia de Proteco Ambiental dos EUA (US-EPA). O presente trabalho teve como objetivo avaliar o papel da glutationa e do vacolo, como mecanismos de defesa, contra os efeitos txicos induzidos pelo chumbo, usando como modelo a levedura Saccharomyces cerevisiae. A levedura S. cerevisiae quando exposta a varias concentraes de chumbo, durante 3h, perde a viabilidade e acumula espcies reativas de oxignio (ROS). O estudo comparativo da perda de viabilidade e acumulao de ROS em clulas de uma estirpe selvagem (WT) e de estirpes mutantes, incapazes de produzir glutationa devido a uma deficincia no gene GSH1 (gsh1) ou GSH2 (gsh2) mostrou que as estirpes gsh1 ou(gsh2 no apresentavam um aumento da sensibilidade ao efeito toxico do chumbo. No entanto, o tratamento de clulas da estirpe WT com iodoacetamida (um agente alquilante que induz a depleo de glutationa) aumentou a sensibilidade das clulas a presena de chumbo. Pelo contrrio, o enriquecimento em GSH, atravs da incubao de clulas WT com glucose e uma mistura de aminocidos que constituem a GSH (acido L-glutmico, L-cistena e glicina), reduziu o stress oxidativo e a perda de viabilidade induzida por chumbo. A importncia do vacolo, como mecanismo de defesa, foi avaliada atravs da utilizao de um mutante sem qualquer estrutura vacuolar (vps16) ou de mutantes deficientes na subunidade cataltica A (vma1) ou B (vma2) ou no proteoltico - subunidade C (vma3) da V-ATPase. As clulas da estirpe vps16 apresentaram uma elevada suscetibilidade a presena de chumbo. As clulas das estirpes deficientes na subunidade A, B ou c da V-ATPase, apresentaram uma maior perda de viabilidade, quando expostas a chumbo, do que as clulas da estirpe WT, mas menor do que a da estirpe vps16 Em concluso, os resultados obtidos, no seu conjunto, sugerem que a glutationa esta envolvida na defesa contra a toxicidade provocada por chumbo; todavia, a glutationa, por si s, parece no ser suficiente para suster o stress oxidativo e a perda de viabilidade induzida por chumbo. O vacolo parece constituir um importante mecanismo de defesa contra a toxicidade provocada por chumbo. A V-ATPase parece estar envolvida na compartimentao de chumbo no vacolo.
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Dissertao para obteno do Grau de Mestre em Engenharia Informtica
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Dissertao apresentada na Faculdade de Cincias e Tecnologia da Universidade Nova de Lisboa para a obteno do Grau de Mestre em Engenharia Informtica
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Dissertao para obteno do Grau de Mestre em Gentica Molecular
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RESUMO:Os microrganismos reagem sbita descida de temperatura atravs de uma resposta adaptativa especfica que assegura a sua sobrevivncia em condies desfavorveis. Esta adaptao inclui alteraes na composio da membrana, na maquinaria de traduo e transcrio. A resposta ao choque trmico pelo frio induz uma represso da transcrio. No entanto, a descida de temperatura induz a produo de um grupo de protenas especficas que ajudam a ajustar/re-ajustar o metabolismo celular s novas condies ambientais. Em E. coli o processo de adaptao demora apenas quatro horas, no qual um grupo de protenas especficas so induzidas. Depois desde perodo recomea lentamente a produo de protenas.A ribonuclease R, uma das protenas induzidas durante o choque trmico pelo frio, uma das principais ribonucleases em E. coli envolvidas na degradao do RNA. uma exoribonuclease que degrada RNA de cadeia dupla, possui funes importantes na maturao e turnover do RNA, libertao de ribossomas e controlo de qualidade de protenas e RNAs. O nvel celular desta enzima aumenta at dez vezes aps exposio ao frio e estabiliza em clulas na fase estacionria. A capacidade de degradar RNA de dupla cadeia importante a baixas temperaturas quando as estruturas de RNA esto mais estveis. No entanto, este mecanismo desconhecido. Embora a resposta especfica ao cold shock tenha sido descoberta h mais de duas dcadas e o nmero de protenas envolvidas sugerirem que esta adaptao rpida e simples, continuamos longe de compreender este processo. No nosso trabalho pretendemos descobrir protenas que interactuem com a RNase R em condies ambientais diferentes atravs do mtodo TAP-tag e espectrometria de massa. A informao obtida pode ser utilizada para deduzir algumas das novas funes da RNase R durante a adaptao bacteriana ao frio e durante a fase estacionria. Mais importante ainda, RNase R poder ser recrutada para um complexo de protenas de elevado peso molecular durante o cold-shock.------------ABSTRACT:Microorganisms react to the rapid temperature downshift with a specific adaptative response that ensures their survival in unfavorable conditions. Adaptation includes changes in membrane composition, in translation and transcription machinery. Cold shock response leads to overall repression of translation. However, temperature downshift induces production of a set of specific proteins that help to tune cell metabolism and readjust it to the new environmental conditions. For Escherichia coli the adaptation process takes only about four hours with a relatively small set of specifically induced proteins involved. After this time, protein production resumes, although at a slower rate. One of the cold inducible proteins is RNase R, one of the main E. coli ribonucleases involved in RNA degradation. RNase R is an exoribonuclease that digest double stranded RNA, serves important functions in RNA maturation and turnover, release of stalled ribosomes by trans-translation, and RNA and protein quality control. The level of this enzyme increases about ten-fold after cold induction, and it is also stabilised in cells growing in stationary phase. The RNase R ability to digest structured RNA is important at low temperatures where RNA structures are stabilized but the exact role of this mechanism remains unclear. Although specific bacterial cold shock response was discovered over two decades ago and the number of proteins involved suggests that this adaptation is fast and simple, we are still far from understanding this process. In our work we aimed to discover the proteins interacting with RNase R in different environmental conditions using TAP tag method and mass spectrometry analysis. The information obtained can be used to deduce some of the new functions of RNase R during adaptation of bacteria to cold and in stationary growth phase. Most importantly RNase R can be recruited into a high molecular mass complex of protein in cold shock.
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RESUMO: Os Staphylococcus aureus resistentes meticilina (MRSA, do ingls methicillin-resistant Staphylococcus aureus) so um dos principais agentes responsveis por infees hospitalares. Os MRSA so resistentes a praticamente todos os antibiticos -lactmicos devido a dois mecanismos principais: produo de -lactamase (bla), codificada pelo gene blaZ, e produo de uma protena de ligao penicilina (PBP2a, do ingls penicillin binding protein 2), codificada pelo gene mecA. Estes dois genes so regulados por sistemas homlogos, constitudos por um sensor-transdutor (BlaR1 e MecR1) e um repressor (BlaI e MecI), de tal modo que ambos os sistemas so capazes de co-regular os genes mecA e blaZ, embora com eficincias de induo muito diferentes. De facto, a induo mediada pelo sistema mecI-mecR1 to lenta que se acredita que este sistema no est funcional na maioria das estirpes MRSA. No entanto, dados recentes do nosso laboratrio, demonstram a ausncia de relao entre a presena do gene mecI e o nvel de resistncia meticilina em estirpes MRSA epidmicas, e tambm que, o fentipo de resistncia da grande maioria das estirpes no perturbado pela sobre-expresso em trans do repressor mecI. Curiosamente, as duas estirpes em que a expresso da resistncia foi afetada pela sobre-expresso do mecI so negativas para o locus da -lactamase, o que sugere que este locus pode interferir diretamente com a represso do gene mecA mediada pelo MecI. Nesta tese de mestrado esta hiptese foi explorada usando estratgias de biologia molecular e ensaios fenotpicos da resistncia aos -lactmicos. Os resultados obtidos demonstram que a presena do plasmdeo nativo da -lactamase no s anula a represso mediada pelo MecI, como tambm aumenta o nvel de resistncia das estirpes parentais. Vrias hipteses foram ento formuladas para explicar estas observaes. Dados preliminares, em conjunto com evidncias experimentais publicadas, sugerem que o BlaI forma hetero-dmeros com o MecI que, aps a induo, so inativados eficientemente pelo BlaR1. Em concluso, estes resultados apresentam novas perspetivas para o mecanismo de regulao do mecA e para uma nova importante funo do opero da -lactamase para o fentipo das estirpes MRSA.-------------------ABSTRACT: Methicillin-resistant Staphylococcus aureus (MRSA) is an important nosocomial pathogen and is also emerging in the community. MRSA is cross-resistant to virtually all -lactam antibiotics and has acquired two main resistance mechanisms: production of -lactamase (bla), coded by blaZ, and production of penicillin binding protein 2a (PBP2a), coded by mecA. Both genes are regulated by homologous sensor-transducers (BlaR1 and MecR1) and repressors (BlaI and MecI), and coregulation of mecA and blaZ by both systems has been demonstrated, although with remarkable different efficiencies. In fact, induction of mecA by mecI-mecR1 is so slow that it is believed it is not functional in most MRSA strains. However, recent data from our laboratory has unexpectedly demonstrated that not only there is no correlation between the presence of mecI gene and the resistance level in epidemic MRSA strains, but also that for most strains there were no significant changes on the resistance phenotype upon the mecI overexpression in trans. Interestingly, the two strains in which mecI overexpression affected the resistance expression were negative for the bla locus, suggesting that this locus may interfere directly with the MecI-mediated repression of mecA and account for those puzzling observations. In this master thesis we have explored this hypothesis using molecular biology strategies and phenotypic analysis of -lactam resistance. The data obtained demonstrate that the presence of a wild-type plasmid containing the bla locus not only disrupts the MecImediated repression, but also significantly enhances the expression of resistance. Several preliminary hypotheses were formulated to explain these observations and preliminary data, together with published evidence, support the working model that BlaI forms functional hetero-dimers with MecI, which upon induction are readily inactivated by BlaR1. These results provide new insights into the regulatory mechanism(s) of mecA and open new perspectives for the role of -lactamase operon in the MRSA phenotype.
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Dissertao para obteno do Grau de Mestre em Engenharia do Ambiente, perfil de Engenharia Ecolgica
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Este artigo procura evidenciar o empreendedorismo enquanto mecanismo de resposta (re)insero social, entendido enquanto necessidade ou oportunidade. Para alm da apresentao do empreendedorsimo enquanto opo individual, destaca-se o papel que as universidades e institutos politcnicos devem assumir no desenvolvimento do esprito empreendedor no cluster dos recm-licenciados.
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Dissertao apresentada na Faculdade de Cincias e Tecnologia da Universidade Nova de Lisboa para obter o Grau de Mestre em Engenharia Qumica e Bioqumica
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pp. 391-401
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Dissertao para obteno do Grau de Mestre em Engenharia Civi
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Apresenta-se o caso clnico de uma doente seropositiva para o vrus da imunodeficincia humana (VIH+) com um quadro de esofagite idioptica com excelente resposta teraputica com talidomida, associando-se regresso do sndrome febril que se manifestara concomitantemente. O mecanismo de aco da talidomida nestes casos desconhecido, mas poder estar relacionado com os efeitos do frmaco sobre o sistema imunitrio ou dever-se a um efeito anti-retroviral directo.
