The TEL/platelet-derived growth factor β receptor (PDGFβR) fusion in chronic myelomonocytic leukemia is a transforming protein that self-associates and activates PDGFβR kinase-dependent signaling pathways

The TEL/PDGFβR fusion protein is the product of the t(5;12) translocation in patients with chronic myelomonocytic leukemia. The TEL/PDGFβR is an unusual fusion of a putative transcription factor, TEL, to a receptor tyrosine kinase. The translocation fuses the amino terminus of TEL, containing the helix-loop-helix (HLH) domain, to the transmembrane and cytoplasmic domain of the PDGFβR. We hypothesized that TEL/PDGFβR self-association, mediated by the HLH domain of TEL, would lead to constitutive activation of the PDGFβR tyrosine kinase domain and cellular transformation. Analysis of in vitro-translated TEL/PDGFβR confirmed that the protein self-associated and that self-association was abrogated by deletion of 51 aa within the TEL HLH domain. In vivo, TEL/PDGFβR was detected as a 100-kDa protein that was constitutively phosphorylated on tyrosine and transformed the murine hematopoietic cell line Ba/F3 to interleukin 3 growth factor independence. Transformation of Ba/F3 cells required the HLH domain of TEL and the kinase activity of the PDGFβR portion of the fusion protein. Immunoblotting demonstrated that TEL/PDGFβR associated with multiple signaling molecules known to associate with the activated PDGFβR, including phospholipase C γ1, SHP2, and phosphoinositol-3-kinase. TEL/PDGFβR is a novel transforming protein that self-associates and activates PDGFβR-dependent signaling pathways. Oligomerization of TEL/PDGFβR that is dependent on the TEL HLH domain provides further evidence that the HLH domain, highly conserved among ETS family members, is a self-association motif.

Retinoic acid (RA) and As2O3 treatment in transgenic models of acute promyelocytic leukemia (APL) unravel the distinct nature of the leukemogenic process induced by the PML-RARα and PLZF-RARα oncoproteins

Acute promyelocytic leukemia (APL) is associated with chromosomal translocations always involving the RARα gene, which variably fuses to one of several distinct loci, including PML or PLZF (X genes) in t(15;17) or t(11;17), respectively. APL in patients harboring t(15;17) responds well to retinoic acid (RA) treatment and chemotherapy, whereas t(11;17) APL responds poorly to both treatments, thus defining a distinct syndrome. Here, we show that RA, As2O3, and RA + As2O3 prolonged survival in either leukemic PML-RARα transgenic mice or nude mice transplanted with PML-RARα leukemic cells. RA + As2O3 prolonged survival compared with treatment with either drug alone. In contrast, neither in PLZF-RARα transgenic mice nor in nude mice transplanted with PLZF-RARα cells did any of the three regimens induce complete disease remission. Unexpectedly, therapeutic doses of RA and RA + As2O3 can induce, both in vivo and in vitro, the degradation of either PML-RARα or PLZF-RARα proteins, suggesting that the maintenance of the leukemic phenotype depends on the continuous presence of the former, but not the latter. Our findings lead to three major conclusions with relevant therapeutic implications: (i) the X-RARα oncoprotein directly determines response to treatment and plays a distinct role in the maintenance of the malignant phenotype; (ii) As2O3 and/or As2O3 + RA combination may be beneficial for the treatment of t(15;17) APL but not for t(11;17) APL; and (iii) therapeutic strategies aimed solely at degrading the X-RARα oncoprotein may not be effective in t(11;17) APL.

Embryonic expression of the tumor-associated PAX3-FKHR fusion protein interferes with the developmental functions of Pax3

A unique chromosomal translocation involving the genes PAX3 and FKHR is characteristic of most human alveolar rhabdomyosarcomas. The resultant chimeric protein fuses the PAX3 DNA-binding domains to the transactivation domain of FKHR, suggesting that PAX3-FKHR exerts its role in alveolar rhabdomyosarcomas through dysregulation of PAX3-specific target genes. Here, we have produced transgenic mice in which PAX3-FKHR expression was driven by mouse Pax3 promoter/enhancer sequences. Five independent lines expressed PAX3-FKHR in the dorsal neural tube and lateral dermomyotome. Each line exhibited phenotypes that correlated with PAX3-FKHR expression levels and predominantly involved pigmentary disturbances of the abdomen, hindpaws, and tail, with additional neurological related alterations. Phenotypic severity could be increased by reducing Pax3 levels through matings with Pax3-defective Splotch mice, and interference between PAX3 and PAX3-FKHR was apparent in transcription reporter assays. These data suggest that the tumor-associated PAX3-FKHR fusion protein interferes with normal Pax3 developmental functions as a prelude to transformation.

Coordinated morphogenesis of epithelia during development of the Caenorhabditis elegans uterine-vulval connection.

Development of the nematode egg-laying system requires the formation of a connection between the uterine lumen and the developing vulval lumen, thus allowing a passage for eggs and sperm. This relatively simple process serves as a model for certain aspects of organogenesis. Such a connection demands that cells in both tissues become specialized to participate in the connection, and that the specialized cells are brought in register. A single cell, the anchor cell, acts to induce and to organize specialization of the epidermal and uterine epithelia, and registrates these tissues. The inductions act via evolutionarily conserved intercellular signaling pathways. The anchor cell induces the vulva from ventral epithelial cells via the LIN-3 growth factor and LET-23 transmembrane tyrosine kinase. It then induces surrounding uterine intermediate precursors via the receptor LIN-12, a founding member of the Notch family of receptors. Both signaling pathways are used multiple times during development of Caenorhabditis elegans. The outcome of the signaling is context-dependent. Both inductions are reciprocated. After the anchor cell has induced the vulva, it stretches toward the induced vulval cells. After the anchor cell has induced specialized uterine intermediate precursor cells, it fuses with a subset of their progeny.

The hybrid PAX3-FKHR fusion protein of alveolar rhabdomyosarcoma transforms fibroblasts in culture.

Pediatric alveolar rhabdomyosarcoma is characterized by a chromosomal translocation that fuses parts of the PAX3 and FKHR genes. PAX3 codes for a transcriptional regulator that controls developmental programs, and FKHR codes for a forkhead-winged helix protein, also a likely transcription factor. The PAX3-FKHR fusion product retains the DNA binding domains of the PAX3 protein and the putative activator domain of the FKHR protein. The PAX3-FKHR protein has been shown to function as a transcriptional activator. Using the RCAS retroviral vector, we have introduced the PAX3-FKHR gene into chicken embryo fibroblasts. Expression of the PAX3-FKHR protein in these cells leads to transformation: the cells become enlarged, grow tightly packed and in multiple layers, and acquire the ability for anchorage-independent growth. This cellular transformation in vitro will facilitate studies on the mechanism of PAX3-FKHR-induced oncogenesis.

Multimeric complexes of the PML-retinoic acid receptor alpha fusion protein in acute promyelocytic leukemia cells and interference with retinoid and peroxisome-proliferator signaling pathways.

The t(15;17) chromosomal translocation, specific for acute promyelocytic leukemia (APL), fuses the PML gene to the retinoic acid receptor alpha (RAR alpha) gene, resulting in expression of a PML-RAR alpha hybrid protein. In this report, we analyzed the nature of PML-RAR alpha-containing complexes in nuclear protein extracts of t(15;17)-positive cells. We show that endogenous PML-RAR alpha can bind to DNA as a homodimer, in contrast to RAR alpha that requires the retinoid X receptor (RXR) dimerization partner. In addition, these cells contain oligomeric complexes of PML-RAR alpha and endogenous RXR. Treatment with retinoic acid results in a decrease of PML-RAR alpha protein levels and, as a consequence, of DNA binding by the different complexes. Using responsive elements from various hormone signaling pathways, we show that PML-RAR alpha homodimers have altered DNA-binding characteristics when compared to RAR alpha-RXR alpha heterodimers. In transfected Drosophila SL-3 cells that are devoid of endogenous retinoid receptors PML-RAR alpha inhibits transactivation by RAR alpha-RXR alpha heterodimers in a dominant fashion. In addition, we show that both normal retinoid receptors and the PML-RAR alpha hybrid bind and activate the peroxisome proliferator-activated receptor responsive element from the Acyl-CoA oxidase gene, indicating that retinoids and peroxisome proliferator receptors may share common target genes. These properties of PML-RAR alpha may contribute to the transformed phenotype of APL cells.

Análise funcional das proteínas HrcA, GroES/GroEL e DnaK/DnaJ em Caulobacter crescentus

O operon groESL de C. crescentus apresenta dupla regulação. A indução deste operon por choque térmico é dependente do fator sigma de choque térmico σ32. A temperaturas fisiológicas, a expressão de groESL apresenta regulação temporal durante o ciclo celular da bactéria e o controle envolve a proteína repressora HrcA e o elemento CIRCE (controlling inverted repeat of chaperonin expression). Para estudar a atividade da proteína repressora in vitro, produzimos e purificamos de E. coli a HrcA de C. creseentus contendo uma cauda de histidinas e a ligação especifica ao elemento CIRCE foi analisada em ensaios de migração retardada em gel de poliacrilamida (EMRGP). A quantidade de DNA retardada pela ligação a HrcA aumentou significativamente na presença de GroES/GroEL, sugerindo que estas proteínas modulam a atividade de HrcA. Corroboração desta modulação foi obtida analisando fusões de transcrição da região regulatória de groESL com o gene lacZ, em células de C. crescentus produzindo diferentes quantidades de GroES/EL. HrcA contendo as substituições Pro81 AJa e Arg87Ala, aminoácidos que se localizam no domínio putativo de ligação ao DNA da proteína, mostraram ser deficientes na ligação a CIRCE, tanto in vitro como in vivo. Em adição, HrcA Ser56Ala expressa na mesma célula juntamente com a proteína selvagem produziu um fenótipo dominante-negativo, indicando que a HrcA de C. crescentus liga-se a CIRCE como um oligômero, provavelmente um dímero. As tentativas de obtenção de mutantes nulos para os genes groESL ou dnaKJ falharam, indicando que as proteínas GroES/GroEL e DnaK/DnaJ são essenciais em C. crescentus, mesmo a temperaturas normais. Foram então construídas no laboratório as linhagens mutantes condicionais SG300 e SG400 de C. crescentus, onde a expressão de groESL e de dnaKJ, respectivamente, está sob controle de um promotor induzido por xilose (PxyIX). Estas linhagens foram caracterizadas quanto á sua morfologia em condições permissivas ou restritivas, assim como quanto à capacidade de sobrevivência frente a vários tipos de estresse. As células da linhagem SG300, exauridas de GroES/GroEL, são resistentes ao choque térmico a 42°C e são capazes de adquirir alguma termotolerância. Entretanto, estas células são sensíveis aos estresses oxidativo, salino e osmótico. As células da linhagem SG400, exauridas de DnaKlJ, são sensíveis ao choque térmico, à exposição a etanol e ao congelamento, e são incapazes de adquirir termotolerância. Além disso, tanto as células exauridas de GroES/GroEL quanto as exauridas de DnaK/DnaJ apresentam problemas na sua morfologia. As células de SG300 exauridas de GroES/GroEL formam filamentos longos que possuem constrições fundas e irregulares. As células de SG400 exauridas de DnaK/DnaJ são apenas um pouco mais alongadas que as células pré-divisionais selvagens e a maioria das células não possuem septo. Estas observações indicam bloqueio da divisão celular, que deve ocorrer em diferentes estágios em cada linhagem.

European Energy and Industrial Policy Realigned: Risk or Opportunity for EU Eco-Innovation Strategy? IES Policy Brief Issue 2014/03/February 2014

Summary. Europe’s eco-innovation strategy fuses industrial, energy and environmental policy together in a concept for sustainable economic growth in the 21st century. The latest debate about high energy prices and their impact on energy-intensive industry shows, however, that the emphasis among the three policies has shifted over the years. Some adjustments are therefore necessary in order to reduce evolving inconsistencies. This Policy Brief describes the different dimensions of the EU’s industrial policy, and assesses the options available to policy-makers to increase the competitiveness of energy-intensive sectors without compromising the eco-innovation and sustainability agenda. If several key principles of the European sustainability agenda remain unchanged, strategic development is possible.

Sistema de gestão de energia e ativação de uma espoleta eletrónica

Os incêndios florestais constituem uma realidade que pode ser minimizada com o auxílio Forças Armadas, através de homens e de meios. O Projeto FIREND®, no qual este trabalho está inserido, tem como objetivo projetar uma munição que ao libertar uma substância química sobre o fogo, o impeça de se expandir e se possível, o extinga. O projétil tem 155mm de calibre e o seu compartimento de carga terá cerca de 7,5

Nervous and muscle system development in Phascolion strombus (Sipuncula)

Recent interpretations of developmental gene expression patterns propose that the last common metazoan ancestor was segmented, although most animal phyla show no obvious signs of segmentation. Developmental studies of non-model system trochozoan taxa may shed light on this hypothesis by assessing possible cryptic segmentation patterns. In this paper, we present the first immunocytochemical data on the ontogeny of the nervous system and the musculature in the sipunculan Phascolion strombus. Myogenesis of the first anlagen of the body wall ring muscles occurs synchronously and not subsequently from anterior to posterior as in segmented spiralian taxa (i.e. annelids). The number of ring muscles remains constant during the initial stages of body axis elongation. In the anterior-posteriorly elongated larva, newly formed ring muscles originate along the entire body axis between existing myocytes, indicating that repeated muscle bands do not form from a posterior growth zone. During neurogenesis, the Phascolion larva expresses a non-metameric, paired, ventral nerve cord that fuses in the mid-body region in the late-stage elongated larva. Contrary to other trochozoans, Phascolion lacks any larval serotonergic structures. However, two to three FMRFamide-positive cells are found in the apical organ. In addition, late larvae show commissure-like neurones interconnecting the two ventral nerve cords, while early juveniles exhibit a third, medially placed FMRFamidergic ventral nerve. Although we did not find any indications for cryptic segmentation, certain neuro-developmental traits in Phascolion resemble the conditions found in polychaetes (including echiurans) and myzostomids and support a close relationship of Sipuncula and Annelida.

The Populist Message of Australian Country Music

Australian country music is influenced by American country music and Australian bush ballads. This music idealises genuine true blue inhabitants of an idealised rural heartland and fuses nationalism with agrarian mythology. The lyrics of a number of country songs contain a populist political message, which is frequently nationalistic but is a form of nationalism.

CARTEIRAS DE INVESTIMENTOS UMA APLICAÇÃO A PARTIR DO MODELO ELTON-GRUBER

Atualmente, nota-se uma intensa movimentação de capitais financeiros, seja por conta de fusões e incorporações de empresas, seja pela expansão natural do próprio capitalismo, levando então as organizações a buscarem alternativas de financiamento com menores custos, isso quando consideradas as taxas de juros praticadas por instituições financeiras. Concomitantemente a isso, autoridades monetárias, circunstancialmente buscam a redução das taxas de juros que norteiam a economia, no intuito de se atrair novos investimentos produtivos e ainda preservar aqueles existentes. De maneira até paradoxal, a redução das taxas de juros promulgada por autoridades, não exibe a mesma proporção de redução daquelas praticadas pelo mercado. Este aspecto leva os indivíduos, sejam eles gestores de investimentos ou não, a buscarem alternativas de investimentos que proporcionem ganhos monetários superiores àqueles que são fundamentados nas taxas estabelecidas pelas autoridades monetárias. Conciliando a busca de recursos por organizações e a busca por maiores ganhos monetários por parte dos investidores, o mercado de capitais se torna uma alternativa relevante. De modo a conseguir os melhores resultados nesse ambiente, há necessidade de se utilizar modelos e outros instrumentos que propiciem a melhor relação entre risco e retorno, haja vista que todo investidor emite ao menos alguma aversão ao risco. Vários são os instrumentos disponíveis para realizar essas relações, entretanto, muitos deles não acessíveis ao investidor na condição de pessoa física. E mediante esse aspecto, o modelo desenvolvido por Edwin Elton e Martin Gruber surge como alternativa a qualquer investidor, seja por suas características construtivas, seja por sua operacionalidade.

IMPACTOS DO PROCESSO DE PRIVATIZAÇÃO NA CULTURA ORGANIZACIONAL DE UMA GRANDE EMPRESA, SOB A ÓTICA DE SEUS COLABORADORES. UM ESTUDO DE CASO SOBRE O BANESPA BANCO DO ESTADO DE SÃO PAULO S.A.

As dinâmicas que envolvem as organizações são relacionadas à perpetuação e ao crescimento delas. Esse crescimento pode ser pautado num processo orgânico ou, o que é mais freqüente no mundo contemporâneo, através de fusões e aquisições. Um dos tipos de aquisição envolve um agente público: o estado. A esse processo dá-se o nome de privatização. Este trabalho utilizou como foco o processo de privatização vivido por uma grande empresa do setor financeiro nacional não pelo seu lado financeiro, nem mercadológico. O trabalho analisou o processo de privatização do Banco do Estado de São Paulo S.A. Banespa - sob o aspecto de sua cultura organizacional. Foram analisados os seguintes constructos da cultura organizacional: socialização de novos membros, políticas de recursos humanos, processo de comunicação, organização do processo de trabalho, histórico da empresa, valores e sentimentos. Primeiramente foi realizado um levantamento bibliográfico a fim de contextualizar os processos de fusões e aquisições, nos quais a privatização se enquadra. Foi realizado um levantamento relativo aos aspectos ligados à globalização, à cultura organizacional, à relação cultura e privatização e aos aspectos ligados à cultura brasileira. A análise foi realizada em dois momentos, para permitir a avaliação dos impactos provocados pelo processo de privatização na cultura da empresa: antes e depois da privatização. A particularidade deste trabalho está no fato de que as informações relativas ao processo foram obtidas junto a ex colaboradores do Banespa. Foram selecionados antigos funcionários que viveram ambos os momentos. As informações para análise saíram de entrevistas roteirizadas para a identificação dos elementos culturais a serem investigados. Entre os dois momentos foi descrito e analisado também o processo da privatização pela ótica dos antigos colaboradores. A pesquisa identificou a figura do banespiano como um importante elemento cultural, que também foi analisado nos dois momentos apresentados. Com a análise das entrevistas, o autor procurou identificar as conseqüências para a cultura organizacional do Banespa do processo de privatização ocorrido no final do ano 2000.(AU)

FUSÃO E AQUISIÇÃO UMA ANÁLISE ATRAVÉS DO TESTE DE MÉDIA NO SETOR DE AGÊNCIAS DE PUBLICIDADE

A transição do século XX para o século XXI trouxe consigo uma série de mudanças, em especial às organizações, que vivenciaram evoluções de ordem tecnológica impactantes em sua estrutura administrativa e econômica. As agências de publicidade, apesar de terem um enfoque voltado ao aspecto criativo, não deixam de ser organizações, e assim como as demais também vivenciam este ciclo de mudanças, que aparenta ser ininterrupto. A importância do planejamento estratégico e financeiro e do atendimento integrado aos clientes proporcionou às agências novas perspectivas de funcionamento, e nelas enquadram-se as fusões/aquisições. Agências internacionais optaram por participar do mercado publicitário brasileiro através de fusões/aquisições; estas ocorreram com agências de bastante expressão no mercado internacional, mas também com agências menos conhecidas, mas que demonstraram a realização de bons trabalhos no setor. Através deste estudo realizou-se uma análise a respeito do mercado de fusões e aquisições de agências de publicidade, em especial, sob a perspectiva financeira. Através da base de dados lançada no Software SPSS foi aplicado o Teste T. Constatou-se que as agências de publicidade no Brasil entre 1999 a 2009 não apresentaram diferenças de média em relação ao faturamento, independente de terem passado ou não pelo processo de fusão/aquisição. Este crescimento pouco representativo demonstra que as fusões/aquisições tendem a ocorrer por diversos motivos e não se restringem exclusivamente ao aspecto financeiro, a perspectiva de bom atendimento ao cliente, visando o planejamento estratégico no âmbito publicitário, tende a ser um deles.

Comunicação e Governança Corporativa: a informação on-line das empresas do Novo Mercado com o investidor pessoa física

O estudo pretende mostrar que a clareza semântica e a fácil navegabilidade nos sites de Relações com Investidores são essenciais para a comunicação com os investidores individuais bem como para a sua compreensão das Boas Práticas da Governança Corporativa adotadas pelas empresas que aderiram ao Novo Mercado da Bovespa. O trabalho está dividido em quatro etapas. O primeiro capítulo explica o que é Governança Corporativa, como esse conceito foi implementado no Brasil, apresenta o mercado de ações, o Novo Mercado e aborda os temas relacionados ao setor financeiro. Em seguida, aborda a evolução da comunicação empresarial e como as organizações tiveram que adaptar a sua cultura organizacional e os canais de comunicação devido à constante e ininterrupta série de transações (aquisições, fusões e incorporações) que acontecem no Brasil desde 1994, com o início do Plano Real. Esse processo proporcionou uma alteração geopolítica, cultural, econômica e social nas corporações. Ainda nesse capítulo o estudo apresenta as características dos canais que as organizações utilizam para se comunicar com os públicos de referência. Mostra também como a internet e as demais mídias digitais se integraram nesse processo corporativo, a relação com os investidores, os sites de RI das empresas do Novo Mercado e o perfil do investidor individual. Por último, o estudo apresenta a avaliação dos sites de RI, os critérios adotados para analisar a construção das homepages e demais páginas. Nesse ponto, o objetivo foi avaliar a clareza semântica, ou seja, a maneira como as informações são transmitidas para os investidores individuais, a acessibilidade desse canal de comunicação como a quantidade de cliques necessária para ter acesso a qualquer informação e se os sites possuem espaços específicos para esse público. Finalmente, são apresentados os resultados e uma análise da comunicação empresarial dessas empresas antes e depois da entrada das mesmas no Novo Mercado da Bovespa e as considerações finais.(AU)