孔石莼主要化学组分的提取分析及多糖生物活性的研究

孔石莼（Ulva pertusa Kjellm）是一种大型经济海藻，除了可直接食用外在医药方面也有广泛的应用。在古代医书上便记载有多种药用活性，我国民间也流传用孔石莼治疗中暑、水肿和小便不利等病症。本论文比较全面地分析了孔石莼多糖和类脂等主要化学组合，探讨用红外和核磁光谱来解释多糖结构，并首次研究了孔石莼多糖的体外抗肿瘤的体内降血脂活性。为进一步开发孔石莼资源做了部分基础性的工作。通过对提取扎石莼多糖和类脂的方法研究，确定了两种主要组仇的提取方法，得到了多糖样品WPS、APS、DWPS、DAPS和类脂样品。用化学和仪器分析方法对多糖样品进行了水分、灰分、硫酸基含量、总糖含量、特性粘度、元素分析、单糖分析、氨基酸分析、红外和核磁光谱分析等。结果表明：用乙醇脱脂后的脱脂孔石莼水提物（DWPS）得率最高，含硫酸基量和总糖量最高，特性粘度最小；孔石莼水提物（WPS）得率和含硫酸基量次之；孔石莼碱提物（APS）因深解性不好未能按常规方法测定其总糖含量，且未检测出水解硫酸根。孔石莼多糖的单糖要有鼠李糖、葡萄糖、木糖、糖醛酸等，并检测到少量的甘露糖和阿拉伯糖。谷氨酸、天冬西氨酸是多糖样品蛋白质中的主要氨基酸，D－3－OH－半胱氨酸含量亦较高。IR谱图中出现了硫酸基的吸收峰：~H－NMR及~(13)C－NMR谱图中出现了鼠李糖和糖醛酸的特征峰。类脂样品中，非极性类脂与极性类脂的比例约为1：2；GC－MS 分析结果表明，不饱和脂质含量达61.37％，其中多不饱和脂类占44.17％，n-3系列高度不饱和脂类占39.90％。三个多糖样品WPS、DWPS、DAPS进行抗口腔上皮癌（KB）和肝癌（Bel）肿瘤细胞体外实验，结果表明在5μg/ml的剂量时三个样品抑制率均在10％以下，无明显活性表现。以烟酸肌醇为阳性对照药，蒸馏水为空白对照，对孔石莼水提多糖WPS进行了三个剂量的降血脂动物实验。实验结果表明：脂蛋白改善情况有明显的剂量依赖性；中高剂量组可显著降低胆固醇、甘油酸三脂，明显改善脂蛋白胆固醇的含量分布：高剂量样品组（500mg/kg·d~(-1)）的药用活笥最高，与相同剂量的阳性对照药烟酸肌醇结果相比，药效理佳。并对孔石莼多糖血脂的机理进行了讨论。

肉食性鱼类补偿生长特性的研究

本文主要以花鲈[Lateolabrax．japonicus (C．& V．)]和褐牙鲆[Paralichthys olivaceus(T. & S.)]作为海洋肉食性鱼类的代表种类，根据鱼类生态生理学理论，通过设定不同饥饿时问下因子水平，研究两种鱼类摄食率、排粪率、转化效率和SGR等生态生理效率的状态变化。其目的在于研究高营养级鱼类在海洋生态系统中的下行控制作用(Top-down Effect)，以及肉食性鱼类的生态对策与鱼类资源补充机制的相互关系，为深入解析鱼类资源生产力及其持续利用海洋生物资源，提供科学依据。其主要研究结果概述如下：1．花鲈： 饥饿0(对照组)、4、8、12、16d后恢复投喂，过量投喂淡水桡足类，温度为19.5±2.0℃，初始体重为0.61-0.93g，平均体重为0．79g实验周期为28d。1.1饥饿时间对花鲈的体重损失率产生显著影响，受过饥饿的个体的湿重失率 (LR_W)与饥饿时间(t)的关系为：LR_W=2.2164t-3.6634(r~2=0.9767，p13d)的个体的排粪率显著大于其它各组，其它各组间排粪率差异不显著；2.2在整个实验周期36d内，对照组与经受3—8d饥饿的实验组的SGR显著大于经受饥饿时间大于lOd的实验组，饥饿3-8d的完全补偿生长，饥饿10-15d 的个体发生部分补偿生长，饥饿18d的个体不能补偿生长；经受饥饿个体的摄食率低于对照组；除了饥饿18d的个体的饵料转化率显著小于对照组外，其它各组的转化率没有显著差异；经受长时间饥饿(>13d)的个体的排粪率显著大于其它各组，其它各组问没有显著的差异。2．3平均体重为2．59g的褐牙鲆，饥饿至不可恢复点(PNR)的时间大于18d。3．花鲈和褐牙鲆在经受饥饿后的体重损失率与饥饿的时间正相关。在实验期间，花鲈体重损失率与饥饿时间成一次线性关系，褐牙鲆体重损失率与饥饿时间成对数函数关系。在饥饿后均会发生补偿生长。3.1比较研究结果，表明在适当时间饥饿后的个体均会发生补偿生长，其超生长速度与饥饿时间密切相关。花鲈在饥饿至不可恢复点的临界状态时发生最强烈的超生长现象，而褐牙鲆则是在饥饿3—5d后恢复投喂时可以观测到最高速度的超生长。3.2经受适当时间饥饿后的个体在短期内，其摄食率大于对照组的摄食强度。曾经饥饿的时间越长，花鲈在饥饿结束后的摄食率越高，褐牙鲆在饥饿结束后的高摄食率持续的时间越长。3.3经受适当时间饥饿后的个体，在短期内的转化率均会大于对照组的转化 效率，且随饥饿时间而加强；高转化效率持续的时间与饥饿时间无关。褐牙鲆的高转化率持续的时间很短，且很快下降至低于对照组的水平，其下降程度与饥饿时问成正相关，经受过度饥饿的花鲈和褐牙鲆转化率显著低于对照组。3．4花鲈的补偿生长是饵料转化率提高的结果；而褐牙鲆的补偿生长的原因则因其经受的饥饿程度而异。从饥饿后恢复投喂较短的时间周期(4d和6d)看，花鲈和褐牙鲆的补偿生长是转化率和摄食率共同提高的结果；但从饥饿后恢复投喂较长的时问周期(12d和1 8d)看，经受短期(4-8d)饥饿的花鲈的补偿生长是转化率显著提高的结果，而经受长期(12d)饥饿的花鲈的补偿生长是转化率显著提高的结果，褐牙鲆则是摄食率显著提高的结果。3．5从整个实验周期来看，对花鲈的饥饿降低了其生长速度和饵料转化率，但对褐牙鲆的短期饥饿(<8d)不会降低其生长速度，也不会影响一定时间(3-13d)饥饿的个体的饵料转化率。

海滨锦葵种子油脂提取及制备生物柴油研究

生物柴油是绿色清洁可再生能源，大力发展生物柴油对解决影响我国经济可持续发展的能源危机和环境危机具有重要意义。 本文就海洋滩涂能源油料植物海滨锦葵油脂的提取和制备生物柴油技术进行了研究。 1、利用超临界CO2流体萃取技术提取海滨锦葵籽油。结果表明超临界CO2流体萃取技术提取海滨锦葵籽油的最佳工艺参数为：萃取压力25MPa，萃取温度45℃，CO2流量18kg.h-1，萃取时间为120min，在该工艺条件下萃取三次，海滨锦葵籽油萃取率达到19.35%。 2、以海滨锦葵籽仁为原料，利用水酶法提取海滨锦葵籽仁油。水酶法提取海滨锦葵籽油的最佳工艺参数为：酶用量0.024ml.g-1，提取温度63℃，固液比1/6，提取时间为230min，在该工艺条件下海滨锦葵籽油提取率达到24.28%。 3、海滨锦葵油制备生物柴油的最佳工艺参数为：搅拌强度为1800r.min-1，催化剂KOH用量为海滨锦葵油质量的1%，醇油摩尔比6/1，反应时间50min，反应温度65℃，在该工艺条件下，酯交换反应三次，酯交换率达到97.8%。 4、利用固定化脂肪酶Novo435催化海滨锦葵油酯交换制备生物柴油。结果表明海滨锦葵油固定化脂肪酶催化法制备制备生物柴油的最优工艺参数为反应温度47℃，反应时间31h，催化剂用量18%，搅拌强度900r.min-1，醇油摩尔比3.2/1。在该工艺条件下酯交换率达到92.68%。 5、利用超临界法制备生物柴油，结果表明海滨锦葵油超临界法制备生物柴油的最佳工艺条件为：反应温度为300℃，反应压力为12MPa，反应时间为9min，搅拌强度为300r.min-1，醇油摩尔比为30/1。在此条件下，酯交换反应三次，酯交换率可达97.62%。 6、利用超声波辅助法制备生物柴油。结果表明海滨锦葵油超声波辅助法制备生物柴油的最佳工艺参数为：超声波功率为180W，催化剂KOH用量为海滨锦葵油质量的0.6%，反应温度65℃，醇油摩尔比7/1，在该工艺条件下酯交换反应三次，酯交换率达到99.85%。

栉孔扇贝凝集素家族基因研究

栉孔扇贝是我国北方重要的贝类养殖品种。自1997年以来爆发的栉孔扇贝大规模死亡，给地区经济造成了重大损失并且已经严重威胁扇贝养殖业的健康发展。然而，到目前为止，对扇贝免疫防御的分子机理了解还很少，深入研究扇贝免疫应答的分子机制是认识和了解病害发生和实现病害控制的关键问题之一。本研究采用了EST大规模测序结合cDNA锚定扩增的方法，从栉孔扇贝cDNA文库中克隆到五个C－型凝集素基因，并对其中部分基因进行了深入研究。 C－型凝集素CFLec－1的基因全长1785bp，其中含有5’非翻译区66bp，随后是666bp的开放阅读框；最后一条非常长的3’非翻译区1040bp，其中包含多个多聚腺甘酸加尾信号和polyA尾巴。栉孔扇贝CFLec－1编码221个氨基酸的蛋白，其N末端为15个氨基酸的信号肽。CFLec－1的成熟肽为206个氨基酸，其等电点为5.12，计算分子量为23.49kDa。SMART程序分析显示，C末端130氨基酸是一个标准的长型C－型凝集素结构域，其中四个半光胺酸（Cys104，Cys177，Cys193，Cys202）形成的两对二硫键维持了C－型凝集素的空间结构，而位于N末端的两个二硫键（Cys74，Cys85）构成了长型C－型凝集素结构域特有的一对额外二硫键。同源性分析表明，CFLec－1的C－型凝集素结构域与红原鸡的甘露糖受体中的C－型凝集素结构域有47％的相似度，与大西洋鲑的C－型凝集素受体C有31％的相似度。通过与其他同源的C－型凝集素结构域序列比对，发现了可能的糖结合位点EPD基域（Glu169-Pro170-Asp171）。通过RT－PCR研究CFLec－1在扇贝不同组织中的分布后发现，在健康扇贝中，CFLec－1在性腺中有中等程度的表达，在腮中有少量表达，在血淋巴和外套膜中有微量表达。经热处死的鳗弧菌刺激后，CFLec－1在几乎所有检测组织中的表达量都有明显的提高，其中，血淋巴中的表达量变化最为显著。这些结果说明CFLec－1是组成/诱导型基因，并且可能参与了黏膜防御。通过RT－PCR分析了CFLec－1在血淋巴中的表达特征后发现，在革兰氏阳性菌溶壁微球菌和革兰氏阴性菌鳗弧菌刺激后，CFLec－1的表达均显著高于对照组，并且成明显的随时间变化趋势。在大肠杆菌中表达的重组CFLec－1可以凝集革兰氏阴性菌大肠杆菌JM109，且凝集过程需要钙离子的参与。重组CFLec－1对大肠杆菌JM109有较弱的抑菌活性，对溶壁微球菌有明显的抑菌活性，对鳗弧菌没有抑菌活性。这一结果说明，CFLec－1可能不仅参与对入侵微生物的识别过程，而且可能作为效应分子起到了直接杀灭入侵微生物的作用。 CFLec-2的cDNA全长为708bp，其5’UTR为59bp。3’UTR为217bp。 CFLec-2的开放阅读框为432bp，编码160个氨基酸残基,其中包含5’信号肽17个残基。CFLec-2的编码区中含有一个C-型凝集素结构域。利用本研究中构建的原核表达载体，CFLec-2的成熟肽在大肠杆菌中被成功表达。 mCFLec-1的cDNA全长为2257bp，5’UTR17bp，3’UTR为713bp。mCFLec-1的开放阅读框为1527bp，编码508个氨基酸残基，其中包含17个氨基酸残基的信号肽序列。mCFLec-1的编码区含有三个串联的C-型凝集素结构域。利用本研究中构建的原核表达载体，mCFLec-2的成熟肽在大肠杆菌中被成功表达。 mCFLec-2的cDNA全长2086bp。其5’UTR长为18bp，3’UTR长为238bp。开放阅读框均为1776bp，编码609个氨基酸残基，其中包含N末端由18个氨基酸构成的信号肽。mCFLec-2的编码区包含四个C-型凝集素结构域。mCFlec-3的cDNA全长1897bp，其5’UTR和编码区与mCFLec-2几乎完全相同，只有个别碱基的差异。mCFlec-3的3’UTR为49bp。 本研究从扇贝机体本身的免疫机制入手，深入探讨其免疫机理，为进一步研究信号传导，了解扇贝先天性免疫的机制，为制定合理的研制策略提供坚实的理论基础；丰富和发展海水无脊椎动物免疫学的内容，为控制养殖生物疾病提供了新的思路；进一步通过高低等生物之间功能类似分子的同源性比对，为解释和阐明先天免疫这种已经存在数十亿年，从低等生物开始到人类仍旧保留且更加完善的免疫系统的奥秘和本质提供证据。

塔玛亚历山大藻（Alexandrium tamarense）对双壳的影响研究

本文选取麻痹性贝毒产毒藻塔玛亚历山大（Alexandrium tamarense）以及双壳类为研究对象，进行了塔玛亚历山大藻对双壳类生命活动的影响，麻痹性贝毒在紫贻贝体内累积、转化与排出动力学过程的初步研究。实验证实，塔玛亚历山大藻能对栉孔扇贝受精卵至早期D型幼虫的整个发育阶段产生不利影响，抑制受精卵的孵化。经多方验证，我们推测这一抑制作用主要是由塔玛亚历山大藻藻细胞表面物质引起的。通过塔玛亚历大藻对栉孔扇贝和墨西哥湾贝早期发育的影响研究发现：产毒藻对其受精卵、早期D形幼虫、眼点幼虫、仔贝都有明显的影响。（1）两株塔玛亚历山大藻（ATHK、ATCI02）都能抑制栉孔扇贝受精卵的孵化，EC50分别是（1010、1580cells/mL）。指数生长期的藻作用最强，并发现毒性作用可能来源于细胞表面一种不同于PSP的毒性物质。（2）ATHK对D形幼虫有致死作用，死亡率随作用时间的延长和藻密度的增加而增加。栉孔扇贝的早期D形幼虫暴露于细胞密度为10，000/cells/mL的ATHK中14天，死亡就率达100％；在实验密度10，000cells/mL的48小时急性致毒实验中，墨西哥湾扇贝的早期D形幼虫的游泳能力受到了一定程度的抑制。（3）实验条件下未发现ATHK对墨西哥湾扇贝眼点幼虫的变态、存活产生明显影响，但变态后稚贝的个体大小与对照组相比有明显差异，表明有毒藻对变态过程幼体的生长有影响。（4）在1小时、5小时的急性致毒实验中ATHK对墨西哥湾扇贝仔贝（壳高：5mm）的爬升能力产生了明显的抑制（1hEC50 ＝ 1，000cells/mL）。作用5小时后仔贝的附着率与对照组相比显著降低。两次48小时急性实验的结果都显示高密度的塔玛亚历山大藻（ATHK）能抑制紫贻贝成体的滤水率，平均EC50为6000cells/mL。以（产麻痹性贝毒）的塔玛亚历山大藻（ATHK）投喂紫贻贝（Mytilus edulis），研究了麻痹性贝毒在紫贻贝体内的累积、转化与排出规律。结果表明，在八天的累积实验阶段，紫贻贝消化腺和肌肉组织中的毒素含量均随实验时间的延长而逐渐增加；累积实验结束时，平均每只贝体内的毒素量为13.40nmol，累积率为12.45％（以每只贝的总染毒量为107.67nmol计），毒性水平为12.24μgSTXeq／100g，还未达到国际上公认的贝类食用卫生标准（80μgSTXeq／100g）；贻贝消化腺的累积能力远远高于肌肉组织，累积实验结束时，消化腺中的毒素含量为13.07nmol，累积率为12.14％，而肌肉组织中的毒素量只有0.33nmol，累积率只有0.31％。消化腺中累积的毒素占贝体内毒素总量的97.5％。在八天的排出实验阶段贝体内的毒素总量有下降的趋势，只有进一步延长自净的时间，才能得到更明了的排出规律。

海波破碎波谱研究及其应用

海波破碎过程研究的发展的分析出发，我们将把本文的工作重点放在（1）从 1988 年袁业立的改进了的破碎波统计模型出发（见第三节）导出海波破碎前后的海波谱之间的关系。（2）在一个破碎事件是在一个平均波峰间周期内完成的假定下导出波能耗散源函数的新的解析表达式，并将其用于 LGFD－II 型海浪数值预报模式，后者基本上是一个我们自己研制的第三代波浪数值模式（见第四节）。（3）从饱和谱型是由能量输入源函数，非线性能量转移源函数和能量耗散源函数综合平衡所导致的这一个观点出发，利用 Miles 输入源函数表达式，Hasselman 的非线性能量转移源函数表达式以及我们新导出的能量耗散函数表达式，导出饱和谱型（见第五节）。

海洋表层及次表层气泡测量及分析

波浪破碎过程中气泡云的产生，能够显著增强海-气界面湍流过程和气体交换速率，对于海洋上混合层动力学、生物和化学过程，以及上层海洋-低层大气生物地球化学与物理过程耦合研究具有极其重要的作用。目前对气泡谱分布的观测主要限于在实验室内完成，外海现场观测的工作相对较少。本文利用自行研制的高分辨率CCD成像系统，在实验室和外海对气泡分布进行了初步观测，对气泡在海气交换中的作用进行了分析。论文主要分为三部分：1 光机系统设计；2 现场测量技术；3 在海-气界面通量交换中的作用。分别简述如下： 1 本文设计了一套高分辨率CCD水下气泡拍摄光学系统，主要由CCD光学成像单元、背景光源和视频采集三部分组成； 2 用次高分辨率CCD成像系统，在实验室和外海对气泡分布进行了初步的观测，揭示了气泡的产生和消亡过程； 3 利用边缘检测算法对气泡边缘信息进行提取，以此对图像中的气泡粒径大小和个数自动进行统计，并利用统计结果计算气泡的平均体积通量、气体交换通量以及能量交换。

西北太平洋环流及其对我国近海环流的影响

本论文介绍了MOM2.0模式的差分格式以及开边界情形的改进，较好地模拟了西北太平洋环流的季节变化和黄海冷水团环流结构。第三章计算了北太平洋环流的季节变化，模式先从年平均温盐场开始积分，积分8a后基本上达到动力平衡态，再以月平均海表面条件积分4a后达到季节平衡态。结果表明：1）PN断面黑潮流量冬季为29.0 * 10~6m~3/s （SV），夏季为32.2 * 10~6m~3/s （SV），这与Sverdrup关系相反，这主要是由于风应力涡度零线随季节变化而导致北赤道流在菲律宾以东的分叉线春夏季偏南而秋冬季偏北。2）由于层化影响，东海黑潮夏季较冬季表层流速明显地强化。3）在台湾以东，黑潮明显地分为黑潮主流与东分支，主流穿过苏澳海脊进入东海，然后经吐噶喇海峡进入日本以南海域，东分支则流向琉球群岛以东海域，然后也进入日本以南海域与前一个分支相汇合。4）与网格相关的Smagorinsky方案要比采用常数更能反映中尺度结构。第四章采用1997年7月的水文资料，计算了西北太平洋21.875°N～35.125°N、120.875°E～137.125°E°范围的环流，主要结果如下：在此期间，1）黑潮在台湾以东并不存在东分支流向琉球群岛以东海域；2）东海黑潮的流量约为30 * 10~6m~3/s（SV），日本以南黑潮流量厚大约为70 * 10~6m~3/s （SV）；3）在21.875°N～25°N之间大约有15 * 10~6m~3/s（SV）的流量向西流去。速度分布与流函数分布均表明这一支向西的海流大约在冲绳岛西南分为3支，主要分支转向东北沿冲绳以东海域向东北流去；4）琉球海流主要来自上述西向海流。第五章通过理论分析及数值模拟研究了底边界混合和地形热累积效应对黄海夏季斜压结构的影响。黄海的垂向混合系数为10～100cm~2/s。结果表明：1）不同强度的潮混合，导致黄海冷水团的温度分布完全不同，较强的潮混合造成了海底附近直立型温度分布。黄海的热传导特征时间尺度为几天。2）黄海冷水团的水平环流在垂直方向上分为两层，上层为气旋式环流，其流速较强而厚度较厚，下层为反气旋式环流，流速较弱而厚度较薄（约10～20m），二者的相对强弱与底边界混合的强弱关系不大。垂向积分环流则为气旋式的。3）黄海冷水团环流受温度分布影响，而后者受环流的平流效应的影响则较小。论文的主要创新有三点：1.发现PN断面黑潮流量的夏季略强于冬季的原因主要是因为风应力涡度零线随季节变化而导致北赤道流在菲律宾以东的分叉线春夏季偏南而秋冬季偏北。从动力学上阐述了PN断面黑潮流量季节变化的机制。2.在1997年7月黑潮在台湾以东并不存在东分支流向琉球群岛以东海；在21.875°N～25°N之间大约有15 * 10~6m~3/s的流量向西流去。速度分布与流函数分布均表明这一支向西的海流大约在冲绳岛西南分为3支，主要分支转向东北沿冲绳岛以东海域向东北流去；琉球海流在此期间主要来自上述西向海流。3.不同强度的潮混合，导致黄海冷水团的温度分布完全不同，较强的潮混合造成了海底附近直立型温度分布。黄海的热传导特征时间尺度为几天：黄海冷水团的水平环流在垂直方向上分为两层，上层为气旋式环流，其流速较强而厚度较厚，下层为反气旋式环流，流速较弱而厚度较薄（约10～20m），二者的相对强弱与底边界混合的强辫关系不大。垂直积分环流则为气旋式的。黄海冷水团环流受温度分布影响，而后者受环流的平流效应的影响则较小。

滤食性贝类对浅海养殖系统生源要素动态的影响

在浅海养殖系统中，生源要素的形态和动态对滤食性贝类生长有着重要影响，与此同时，滤食性贝类对系统中的生源要素的动态也具有重要作用，国外学者对此研究的比较多，但在我国研究甚少。在本论文中利用室内模拟实验和海上调查的方法，研究滤食性贝类的生物过滤、生物沉积及排泄作用对浅海养殖系统中生源要素动态的影响。室内模拟实验部分：1998年4月至6月间，在烟台利用室内规格相同的水池，建立了栉孔贝扇（Chlamys farreri）不同养殖密度单养、栉孔扇贝和海带（Laminaria japonica）混养、栉孔扇贝和海带、刺参（Apostichopus japonicus）多元化养殖等三种养殖模式，九个养殖系统和一个对照系统，实验中各池的温度、光照、盐度和换水量基本一致，定期测定实验池中颗粒有机碳（POC）、颗粒氮（PN）和水体及沉积物中营养盐的含量。实验结果表明：1 栉孔扇贝大量滤食水体中的颗粒物质，导致水体中颗粒物质浓度的降低，水体中POC和PN的现存量与栉孔扇贝的放养密度负相关，水体中颗粒物的缺乏会限制栉孔扇贝的生长，当POC、PN的现存量分别降低到0.09mg/L、0.015mg/L时，就会限制栉孔扇贝的生长。2 栉孔扇贝排泄代谢产物增加了水体中无机营养盐的浓度，栉孔扇贝排泄的氮以NH_4~+-N为主，占三氮的93.5%；海带可为栉孔扇贝生长提供一部分饵料。3 实验期间硅浓度低于或近于2umol/L，限制了硅藻的生长，实验后期水体中氮盐浓度降低，氮磷比小于10，可能限制了浮游植物的生长，减少了栉孔扇贝的饵料生物，从而抑制了栉孔扇贝的生长。4 在栉孔扇贝单养和贝藻参混养系列中，沉积物中有机物、有机碳、有机氮、有机磷及总磷的含量随栉孔扇贝放养密度的增大而减少。5 在贝藻混养系列中的栉孔扇贝生长好于单养系列，在贝藻参混养系列中的海带生长速度快于贝藻混养系列；单养和贝藻参混养模式中栉栉孔扇贝的日产量均以放养密度中等的（20个/m~2）养殖系统较高。海上调查部分：于1997年冬季、1998年春季和夏季，在烟台四十里湾海区进行了三次野外调查，分别在养殖海区和非养殖海区取得沉积物柱状样，测定沉积物中有机质和间隙水中无机营养盐的含量。实验结果表明：6 养殖区沉积物中有机质的含量大于非养殖区，平均高约22%。7 养殖海区沉积物间隙水中营养盐的浓度大于非养殖海区，其中养殖区NH_4~+-N、PO_4~(3-)-P 的浓度分别高于非养殖区50%和200%-400%，NO_3~--N, NO_2~--N 的浓度差别不明显；沉积物间隙水中营养盐浓度冬季较小，而春夏季浓度较高；氮盐以NH_4~+-N 为主，占90%以上。8 养殖海区沉积物－海水界面间营养盐扩散通量大于非养殖海区，烟台四十里湾沉积物－海水界面间NH_4~+-N, PO_4~(3-)-P, NO_3~--N, NO_2~--N 冬、春、夏三季平均扩散通分别为249.99 umol/m~2/d、3.78 umol/m~2/d、5.24 umol/m~2/d、0.83mol/m~2/d。

三种海洋红藻和两株放线菌次级代谢产物研究

海洋是一个巨大的天然产物宝库，约占地球表面积70%的海洋蕴藏着80%的生物资源。由于海洋生态环境的特殊性，导致海洋生物能够产生大量结构独特多变和活性特殊多样的代谢产物。我国海域辽阔，海洋资源丰富，为寻找结构新颖、生理活性独特的先导化合物，加强对海洋资源的开发利用，本论文对中国沿海的三种海洋红藻和两株放线菌次生代谢产物以及生物活性进行研究，为新药研究与开发提供模式结构和药物前体。 对红藻似瘤凹顶藻Laurencia similis乙酸乙酯萃取物进行分离纯化，从中得到单体化合物35个，通过波谱学方法（IR、MS、NMR等）鉴定了他们的结构。分别为：2, 2, 5, 5, 6, 6-sixibromo-3, 3-bi-1H-indole (1)，3,5-dibromo- 1-methyl-indole (2)，3',5',6,6'-tetrabromo-2,4-dimmethyldiphenyl ether (3)，1,2,5- tribromo-3-bromoamino-7-bromomethylnaphthalene (4)，2,5,8-tribromo-3-bromo- amino-7-bromomethylnaphthalene (5)，2,5,6-tribromo-3-bromoamino-7-bromo- methylnaphthalene (6), 2,5,6,5',6'-pentabromo-3,4,3',4'-tetramethoxybenzophenone (7), (4E)-1-bromo-5-[(1'S*,3'R*)-3'-bromo-2',2'-dimethyl-6'-methylenecyclohexyl] -3-methylpent-4-ene-2,3-diol (8)，4-hydroxy-Palisadin C (9)，Isopalisol (10)，Luzonensol (11)，Palisadin B (12)，Aplysistatin (13)，Palisadin A (14)，5-Acetoxypalisadin B (15)，Aristolan-1(10)- en-9-ol (16)，Aristol-8-en-1-one (17)，Aristolan-9-en-1-one (18)，Aristolan-1(10)-en- 9-one (19)，Aristofone (20)，Aristolan-1(10)-8-diene (21)，Aristolan-1,9-diene (22)，10-Hydroxyaristolan-9-one (23)，7,11,15-trimethyl-3-methylene-hexadecan-1,2-diol (24)，3β-Hydroxyergosta- 5,24(28)-dien-7-one (25)，Isofucosterol (26)，β-sitosterol (27)，豆甾-4-烯-3α,6β-二醇 (28)，Cholesta-5-en-3β-ol (29)，Stigmasterol (30)，2,3,5,6-四溴-吲哚 (31)，2,3,6-tribromo-1H-indole (32)，3,5,6-tribromo-1-methylindole (33)，3,5,6-tribromo -1H-indole (34)，2,3,5-tribromo-1-methylindole (35)，其中化合物1-9为新化合物，化合物10-15、20和化合物24-30均为首次从该种海藻中得到。对新化合物1-9进行PTP1B酶抑制剂活性筛选，新化合物1、3、7显示强的PTP1B酶抑制活性。 对红藻齐藤凹顶藻Laurencia saitoi乙酸乙酯萃取物进行分离纯化，从中得到单体化合物11个，通过波谱学方法（IR、MS、NMR等）鉴定了他们的结构，分别为：2-hydroxyl-Luzofuranone (1)，2-hydroxyl-Luzofuranone B (2)，4-hydroxyl-Palisudin C (3)，2-bromo-γ-ionone (4)，Aplysistatin (5)，5-Acetoxypalisadin B (6)，Palisadin B (7)，Palisadin A (8)，Pacifigorgiol (9)，豆甾-4-烯-3α,6β-二醇 (10)，2, 3, 5, 6-四溴-吲哚 (11)，其中化合物1-4为新化合物，所有化合物均为首次从该种海藻中得到。通过MTT法对分离得到的新化合物1-4进行肿瘤细胞毒活性筛选，结果显示4个新化合物对所测肿瘤细胞株均无明显的活性。 对红藻瘤状软骨凹顶藻Chondrophycus papillous乙酸乙酯萃取物进行分离纯化，从中得到单体化合物5个，通过波谱学方法（MS、NMR等）鉴定了他们的结构，分别为邻苯二甲酸二丁酯 (1)，邻苯二甲酸二异辛酯 (2)，胆甾醇 (3)，3,7,11,15-tetramethyl-hexadec-2-en-1-ol (4)，4-羟基苯甲醛 (5)，所有化合物均为首次从该种海藻中得到。 对海洋放线菌M159乙酸乙酯萃取物进行分离纯化，从中得到单体化合物13个，通过波谱学方法（MS、NMR等）鉴定了他们的结构，分别为：5-(4',6'-dihydroxy-6-methyloctyl)furan-2(5H)-one (A)，phenethyl alcohol (1)，4-羟基苯甲醛(2)，anthranilic acid (3)，4-Hydroxy-3-methoxy- phenyl-propionic acid (4)，5-(6,7-dihydroxy-6-methyloctyl)furan-2(5H)-one (5)，p-Hydroxyphenylethyl alcohol (6)，3-Indoleacrylic acid (7)，Indol-3-carboxylic acid (8)，Adenine cordyceposide (9)，腺嘌呤核苷(10)，尿嘧啶核苷(11)，Thymidine (12)，其中化合物A为新化合物。所有化合物均为首次从该株放线菌中得到。 对海洋放线菌L211乙酸乙酯萃取物进行分离纯化，从中得到单体化合物15个，通过波谱学方法（MS、NMR等）鉴定了7个结构，分别为：spatozoate (1)，anthranilic acid (2)，3-Indolylethanol (3)，1-Acetyl-β-carbolin (4)，p-Hydroxyphen- ylethyl alcohol (5)，Indole-3-acetic acid (6)，Indol-3-carboxylic acid (7)，所有化合物均为首次从该株放线菌中得到。

Summertime ciliate and copepod nauplii distributions and micro-zooplankton herbivorous activity in the Laizhou Bay, Bohai Sea, China

The abundance and biomass of ciliated protozoa and copepod nauplii were investigated at 21 grid stations and two anchored stations in the Laizhou Bay, Bohai Sea, China in June 1998. Dilution incubations were carried out to investigate micro-zooplankton grazing pressure at the anchored stations during spring tide and neap tide. The dominant species were Tintinnopsis amoyensis, T. chinglanensis, T. pallida and aloricate ciliates. A total of 13 species of tintinnids were found. The total abundance of ciliates and nauplii ranged from 30 to 2390 ind l(-1) at grid stations. Tintinnopsis amoyensis was the only ciliate found at the anchored stations and in concentrations which varied from 0 to 6700 ind l(-1). The spatial distribution of ciliates was patchy. Tintinnopsis amoyensis and T. pallida were distributed in the Weihe River mouth and Xiaoqinghe River mouth respectively. The aloricate ciliates, T. chinglanensis and Codonellopsis ostenfeldi dominated offshore in sequence. The water mixing process may affect the spatial pattern of the dominant ciliate species. The abundance and biomass of copepod nauplii were in the range of 0-140 ind l(-1) and 0-7 mu g C l(-1) respectively, with the peak appearing at grid station 15. The total biomass of ciliates and copepod nauplii was in the range of 1(.)5-25 mu g C l(-1). Water column biomass of ciliates and nauplii varied from 2(.)37 to 52(.)3 mg C m(-2). At the anchored stations, the phytoplankton growth rates ranged from undetectable to 0 21 d(-1) and micro-zooplankton grazing rates from 0 13 to 0(.)57 d(-1). The grazing pressure of micro-zooplankton were 12 to 43% of the chlorophyll standing stock and 84 to 267% of the chlorophyll (C) 2000 Academic Press.

Growth of eight Pacific abalone families at three temperatures

Growth rates, measured as shell length and body weight daily growth, were studied in the eight families of Pacific abalone, Haliotis discus hannai Ino, reared at 12, 16 and 20 degrees C for 40 d respectively. The results show that J(1)Rh family grew the best at 12 degrees C, with growth rates of (32.88 +/- 4.66) mu m/d and (5.24 +/- 1.84) mg/d. C(1)Jm family had the highest growth rates of (58.00 +/- 2.00) mu m/d and (9.71 +/- 1.21) mg/d at 16 degrees C. J(1)Jm family ranked the first at 20 degrees C, with growth rates of (66.00 +/- 1.76) mu m/d and (10.99 +/- 0.34) mg/d. RjRh family had the slowest growth rates at all three temperatures. Shell length growth rates were 18.25, 33.00 and 43.13 mu m/d respectively, while body weight growth rates were 2.47, 2.56 and 4.75 mg/d respectively. Both temperature and family had significant effect on growth rates (P<0.05). At 16 and 20 degrees C, maternal effects on growth rates were not significant (P>0.05), but paternal effects on growth rates were significant (P<0.05). Results of this study indicate genetic difference among the families and importance of selecting male breeders in the commercial hatchery.

Possible suppression of exogenous beta-1,3-glucanase gene gluc78 on rice transformation and growth

Three genes encoding for fungal cell wall degrading enzymes (CWDE), ech42, nag7O and gluc78 from the biocontrol fungus Trichoderma atroviride were transformed into rice mediated by Agrobacterium tumefaciens singly and in all possible combinations. A total of more than 1800 independently regenerated plantlets in seven different populations (for each of the three genes and each of the four gene combinations) were obtained. Our data indicated that gluc78 gene had negative effects on transformation frequency and plant growth. Some regenerated plants with gluc78 gene were stunted; spontaneously produced brown specks; could not tassel. The combination with either one of the two other genes (ech42, nag70) present in the same T-DNA region reduced the negative effect of gluc78 on plant growth. These results indicated that expression of several genes in one T-DNA region interfered with each other and expression of exogenous gene in recipient plant was a complex behavior. (c) 2007 Published by Elsevier Ireland Ltd.

黄头鹡鸰鸟生长能学的研究

在黄头鹡鸰(Motacillacitreola)自然生长状态下 ,通过测定雏鸟气体代谢和身体组织能量积累的方法 ,研究了它们在生长期间的能量投入 .最小能量投入在 0～ 1d (d为日龄 ,用t表示 ) ,为 10 82kJ/d . 1只雏鸟需要能量为 414 2 6kJ,其中生产能为 15 3 14kJ,用于维持的能量是 2 6 1 12kJ .

Diversities in hepatic HIF-1, IGF-I/IGFBP-1, LDH/ICD, and their mRNA expressions induced by CoCl2 in Qinghai-Tibetan plateau mammals and sea level mice

Ochotona curzoniae and Microtus oeconomus are the native mammals living on the Qinghai-TibetanPlateau of China. The molecular mechanisms of their acclimatization to the Plateau-hypoxia remain unclear. Expressions of hepatic hypoxia-inducible factor (HIF)-1 alpha, insulin-like growth factor-I (IGF-I)/IGF binding protein (BP)-1(IGFBP-1; including genes), and key metabolic enzymatic genes [lactate dehydrogenase (LDH)-A/isocitrate dehydrogenase (ICD)] are compared in Qinghai-Tibetan- Plateau mammals andsea- level mice after injection of CoCl2 (20, 40, or 60 mg/ kg) and normobaric hypoxia (16.0% O-2, 10.8% O-2, and 8.0% O-2) for 6 h, tested by histochemistry, Western blot analysis, ELISA, and RT-PCR. Major results are CoCl2 markedly increased 1) HIF-1 alpha only in mice, 2) hepatic and circulatory IGF-I in M. oeconomus, 3) hepatic IGFBP-1 in mice and O. curzoniae, and 4) LDH-A but reduced ICD mRNA in mice (CoCl2 20 mg/kg) but were unchanged in the Tibetan mammals. Normobaric hypoxia markedly 1) increased HIF-1 alpha and LDH-A mRNA in mice and M. oeconomus (8.0% O-2) not in O. curzoniae, and 2) reduced ICD mRNA in mice and M. oeconomus (8.0% O-2) not in O. curzoniae. Results suggest that 1) HIF-1 alpha responsiveness to hypoxia is distinct in lowland mice and plateau mammals, reflecting a diverse tolerance of the three species to hypoxia; 2) CoCl2 induces diversities in HIF-1, IGF-I/IGFBP-1 protein or genes in mice, M. oeconomus, and O. curzoniae. In contrast, HIF-1 mediates IGFBP-1 transcription only in mice and in M. oeconomus (subjected to severe hypoxia); 3) differences in IGF-I/IGFBP-1 expressions induced by CoCl2 reflect significant diversities in hormone regulation and cell protection from damage; and 4) activation of anaerobic glycolysis and reduction of Krebs cycle represents strategies of lowland-animals vs. the stable metabolic homeostasis of plateau- acclimatized mammals.