Influência dos fatores ambientais, de produção e do grau de amadurecimento nas propriedades antioxidantes e antimutagénicas de diferentes cultivares de Vaccinium spp, produzidas em Portugal

Dissertação para obtenção do Grau de Mestre em Tecnologia e Segurança Alimentar

Avaliação das propriedades antioxidantes e antimutagénicas de diferentes cultivares de Vaccinium spp, do grupo “Southern Highbush”, produzidas em Portugal

Dissertação para obtenção do Grau de Mestre em Tecnologia e Segurança Alimentar

Avaliação das propriedades antioxidantes e antimutagénicas de diferentes cultivares Vaccinium spp.: Partiot, Bluecrop, Duke, Earlyblue e O’Neal, produzidas na Sub-região do Baixo Vouga

Dissertação para obtenção do Grau de Mestre em Tecnologia e Segurança Alimentar

Characterization of blueberry fruits (Vaccinium spp.) and derived products

The objectives of this study were to physicochemically characterize and determine the antioxidant activities and anthocyanin contents of organic Rabbiteye blueberries grown in Southern Brazil and its derived products, in order to investigate the utility of food processing wastes as raw materials for developing products with beneficial health properties. The antioxidant capacity of the blueberries was superior to that of other fruits and juices. The pomace exhibited high activity, albeit lower than that of the fruit, while the flour and the dried blueberries lost 66% and 46% of the original antioxidant activity, respectively. The average anthocyanin contents of the fruits were moderate compared to other sources and species of blueberries. The pomace contains a large amount of anthocyanins while the flour and dried blueberries exhibited a 32% and 42% loss in anthocyanin content, respectively. The use of agro-industrial residues, in addition to adding value and minimizing the impact caused by the accumulation in the environment, can be directed toward the development of new products with bioactive properties.

Luminosidade e IBA no enraizamento de microestacas de mirtileiro dos grupos Rabbiteye e Southern Highbush

O objetivo deste trabalho foi avaliar o efeito de diferentes concentrações do ácido indolbutírico (0 - controle; 500; 1.000; 1.500 e 2.000 mg L-1) no enraizamento de microestacas de mirtileiro de espécie e grupos distintos (cultivar O'Neal, Vaccinium sp., grupo Southern highbush e cv. Aliceblue, Vaccinium ashei Reade, grupo Rabbiteye), associado ao efeito da luminosidade na fase inicial do enraizamento das microestacas (14 dias de escuro ou luminosidade natural). Após o tratamento com IBA, as microestacas foram colocadas em bandejas de poliestireno expandido contendo como substrato perlita + Plantmax® (1:1) e mantidas em telado equipado com nebulização intermitente. Aos 60 dias após o estaqueamento, avaliaram-se a porcentagem de microestacas enraizadas, porcentagem de microestacas sobreviventes, número médio de raízes, comprimento médio de raízes e a porcentagem de formação de calo. Através dos resultados obtidos, concluiu-se que, para o enraizamento de microestacas de mirtileiro das cultivares O'Neal e Aliceblue, não é necessária a aplicação de IBA. A presença de luz na fase inicial do enraizamento não interfere na capacidade de enraizamento das microestacas. O tratamento com escuro na fase inicial do enraizamento reduz a formação de calos, promovendo diminuição da sobrevivência das microestacas e do percentual de enraizamento.

Crescimento e conteúdo de nutrientes minerais em mudas de mirtileiro em sistema convencional e semi-hidropônico

O mirtileiro possui alto potencial econômico, no entanto, sua expansão de cultivo é limitada pela dificuldade de propagação. O cultivo hidropônico possibilita melhor crescimento devido à eficiência no fornecimento de nutrientes. O objetivo deste estudo foi avaliar o crescimento e o conteúdo de nutrientes minerais de mudas micropropagadas de mirtileiro em sistema convencional e semi-hidropônico. Mudas das cultivares Bluebelle e Woodard, com 3 meses de aclimatização, foram submetidas a dois sistemas de cultivo: sistema convencional,em que foram mantidas em sacos de polietileno contendo Plantmax® + vermiculita (1:1) e irrigadas com solução nutritiva a cada 15 dias; e sistema semi-hidropônico, na qual permaneceram em floreiras plásticas contendo areia, sendo irrigadas com solução nutritiva diariamente. O delineamento experimental foi em blocos casualizados com quatro tratamentos, com quatro repetições compostas por doze plantas. Foram avaliados mensalmente a altura da parte aérea, número de brotações e comprimento médio das brotações, e aos 90 dias a massa fresca da parte aérea, massa fresca e seca radicular e análise nutricional das folhas. O sistema semi-hidropônico proporcionou melhores resultados para todas as variáveis avaliadas, em ambas as cultivares. As mudas cultivadas no sistema semi-hidropônico apresentaram teores de nutrientes mais elevados e adequados para esta cultura.

Enraizamento de microestacas de mirtileiro provenientes de microjardim clonal semi-hidropônico

O uso de microjardins clonais hidropônicos tem sido relatado com sucesso para espécies florestais e pode vir a se tornar uma excelente alternativa para espécies frutíferas de difícil propagação, como é o caso do mirtilo. O objetivo deste estudo foi avaliar o enraizamento de microestacas de mirtileiro provenientes de dois sistemas de cultivo (convencional e semi-hidropônico), submetidas a diferentes concentrações de AIB (ácido indolbutírico). As microestacas de mirtileiro das cultivares Bluebelle e Woodard foram submetidas a diferentes concentrações de AIB (0; 500; 1.000; 1.500 e 2.000 mg.L-1), acondicionadas em caixas plásticas contendo vermiculita e, aos 90 dias de cultivo, avaliou-se o seu rendimento. O delineamento experimental foi o inteiramente casualizado, com vinte tratamentos, contendo quatro repetições, compostas por dez microestacas cada. Foram avaliados as porcentagem de sobrevivência e de enraizamento, o comprimento da maior raiz, o número de brotações, o comprimento médio das brotações, o número de folhas e as massas fresca e seca radiculares. O sistema semi-hidropônico proporcionou um rendimento de microestacas significativamente superior ao convencional; entretanto, este material apresentou menores porcentagens de sobrevivência e enraizamento. Todos os tratamentos, inclusive aquele sem a presença de AIB, apresentaram porcentagens de enraizamento superiores a 50%.

Intensidade de poda na produção e na qualidade dos frutos de mirtileiro

O mirtileiro possui frutos com alto potencial antioxidante e nutracêutico. Este potencial pode ser influenciado pela severidade da poda nas plantas, principalmente em função do impacto na produção e dos efeitos do aumento da radiação solar incidente sobre os frutos. O objetivo do presente trabalho foi avaliar o efeito da intensidade da poda seca sobre a produção e os atributos de qualidade dos frutos de mirtileiro das cultivares Clímax, Bluegem e Powderblue, produzidas na mesorregiäo de Pelotas-RS. Para tal, foi conduzido um experimento no município de Morro Redondo-RS, durante a safra de 2012/2013, sendo utilizadas as cultivares grupo "Rabbiteye", Clímax, Bluegem e Powderblue. A poda foi realizada em três níveis de remoção de ramos: normal, média e leve, no dia 20 de julho de 2012. A intensidade de poda seca exerceu influência sobre a produção e o teor de fitoquímicos dos frutos de mirtileiros. A produção das plantas submetidas a poda leve foi maior que as submetidas a poda média e normal, sendo o mesmo observado em relação ao teor de compostos fenólicos das cvs. Bluegem e Powderblue, enquanto para o teor de antocianinas, a intensidade de poda teve efeito distinto sobre os atributos de qualidade físico-química das diferentes cultivares.

Quebra de dormência e cultivo protegidona produção de plantas de mirtileiro

O objetivo deste trabalho foi avaliar o efeito da época de aplicação da cianamida hidrogenada (CH) em túnel baixo e campo aberto, na produção e no desenvolvimento de plantas de mirtileiro. O experimento consistiu na aplicação de cianamida hidrogenada em quatro épocas (29-06-12, 09-07-12, 19-07-12, 30-07-12) e dois sistemas de cultivo (túnel baixo e campo aberto), além de um tratamento adicional ou testemunha (sem aplicação de CH). O delineamento experimental foi em blocos ao acaso, com três repetições, sendo a cultivar utilizada a Powderblue. As variáveis analisadas foram: início da floração, porcentagem de brotação, comprimento de ramo, massa seca das folhas, teor de clorofila, produção, massa média de frutos, diâmetro médio de frutos, sólidos solúveis. A aplicação de CH em 29-06 e 09-07 antecipou a floração e a produção. Já a brotação foi antecipada quando a CH foi aplicada em 09-07 e 19-07. Em relação aos sistemas de cultivo, observou-se que o túnel baixo antecipou a floração e aumentou a produção. Conclui-se que a aplicação de cianamida hidrogenada, no final de junho/início de julho, antecipa o início da floração, da brotação e da produção, bem como o uso do túnel baixo que antecipa a floração e aumenta a produção.

MICROJARDIM CLONAL DE MIRTILEIRO EM SISTEMAS DE CULTIVO SEM SOLO

RESUMO O uso de microjardins clonais em sistemas de cultivo sem solo para fornecimento de material propagativo na cultura do mirtileiro (Vaccinium spp.) pode trazer grandes avanços na produção de mudas dessa cultura. O objetivo desta pesquisa foi avaliar a produção de microestacas e a sobrevivência de plantas matrizes de mirtileiro micropropagadas das cultivares Woodard e Aliceblue, em dois sistemas de cultivo. Os sistemas de cultivo utilizados foram o semi-hidropônico (floreiras com substrato de areia e fornecimento diário de solução nutritiva) e o com substrato organomineral (sacos plásticos com substrato comercial e fornecimento de solução nutritiva a cada 15 dias). Após o período de 90 dias do plantio das plantas matrizes, foram iniciadas as coletas de microestacas, as quais foram realizadas a cada 60 dias, com exceção do período de inverno, em que as coletas foram realizadas a cada 90 dias, totalizando ao final do experimento onze coletas. O experimento foi constituído como um fatorial 2 x 2 x 11 (sistemas x cultivares x coletas), em delineamento inteiramente casualizado, com três repetições de 12 plantas cada. Foram avaliadas a produção total de microestacas ao final das onze coletas, o número de microestacas produzidas por planta matriz a cada coleta, a sobrevivência das plantas matrizes ao final das onze coletas e a sobrevivência das plantas matrizes a cada coleta. Os resultados indicaram que o sistema semi-hidropônico foi superior ao substrato organomineral para a produção de microestacas de ambas as cultivares. A maior produtividade total de microestacas ocorreu no sistema semi-hidropônico combinado com a cultivar Aliceblue, com produção total média de 237,67 microestacas. Porém, nesta condição, houve menor sobrevivência das plantas matrizes. A produção de microestacas apresentou alternância ao longo das coletas. A sobrevivência das plantas matrizes diminuiu após sucessivas coletas. Após as coletas de verão, ocorreu maior mortalidade de plantas matrizes.

An investigation of sugar feeding by black flies (Diptera: Simuliidae)

Although much research has been conducted on blood-meal acquisition in adult female black flies (Diptera: Simuliidae), the same cannot be said for sugarmeals. Both sexes feed on sugar which provides energy for flight and it has been commonly held that nectar is the major carbohydrate source. This thesis addresses the question of whether a non-floral carbohydrate source, specifically homopteran honeydew, is ingested by male and female black flies. Black flies reared in the laboratory have been observed to readily ingest freshly excreted and older (dry) honeydew when presented with honeydew coated tamarack branches. Field work was conducted in Algonquin Park, Ontario in the spring and summer of 1993. Three separate studies were designed to test whether homopteran honeydew is an important carbohydrate source for black flies and whether flies from different habitats utilize different sugar sources. The sugars melezitose and / or stachyose are known to occur in a variety of homopteran honeydews and therefore were used as indicators of honeydew feeding by black flies. In the first study, black flies were collected with insect nets from a stand of Larix larcina heavily infested with honeydew - producing homopterans (Adelges lariciatus). Six black fly species were captured: Simulium venustum, S. rostra tum, S. vittatum, Stegopterna mutata, S. aureum and S. quebecense. Samples of honeydew and individual black flies were tested using thin layer chromatography (T. L. C.) with fructose, glucose, sucrose, turanose, melezitose, raffinose and stachyose as standards. All sugars except turanose and melezitose were found in the adelgid honeydew samples. Since the sugar melezitose was absent from ~ honeydew samples, stachyose was used to indicate that black flies were feeding from this particular honeydew source. Of the 201 black flies tested, 194 contained sugars which occurred in 16 combinations. Stachyose combinations excluding melezitose, present in 45.9 % of flies, were used to indicate that black flies had been feeding on the adelgid honeydew. In the second study, black flies were collected in the morning and evening on 8 collection dates, using a vehicle mounted insect net. The crops and midguts of 10 male and 10 female Simulium venustum were dissected on each sample date. In total the gut contents of 320 individual flies were analysed by T. L. C. The sugars identified from these flies were present in the following proportions: fructose (100.0%), glucose (100.0%), sucrose/turanose (50.4%), melezitose (30.3%), raffinose (18.8%) and stachyose (8.7%). These sugars occurred in fourteen different combinations. It is argued that the presence of melezitose and / or stachyose indicates that black flies had fed on homopteran honeydew. Significantly more female flies (40.0%) than male flies (27.5%) had fed on honeydew. In the third study, adult black flies were sampled by sweep netting vegetation in four habitats in the morning and evening on 8 collection dates. The habitats are as follows: (1) Davies Bog, (2) Abandoned Air Field (dominated by blueberries, Vaccinium spp.), (3) Deciduous Habitat and (4) Coniferous Habitat. Sugars in the crops and midguts of female flies were tested by T. L. C. and, for S. venustum, it was found that significantly fewer flies (18.8%) from the Air Field contained honeydew than from the other three sites (Davies Bog, 34.4%; Deciduous Habitat, 36.2%; Coniferous Habitat, 25.0%). Of the 1287 black flies tested individually by T. L. C. 441 (34.3%) contained melezitose and / or stachyose sugars indicating that this proportion of the population were feeding from Homopteran honeydew. It is therefore clear that floral (nectar) sugars are not the only source of carbohydrates available to black flies.

Identification Of Corynebacterium Spp. Isolated From Bovine Intramammary Infections By Matrix-assisted Laser Desorption Ionization-time Of Flight Mass Spectrometry.

Corynebacterium species (spp.) are among the most frequently isolated pathogens associated with subclinical mastitis in dairy cows. However, simple, fast, and reliable methods for the identification of species of the genus Corynebacterium are not currently available. This study aimed to evaluate the usefulness of matrix-assisted laser desorption ionization/mass spectrometry (MALDI-TOF MS) for identifying Corynebacterium spp. isolated from the mammary glands of dairy cows. Corynebacterium spp. were isolated from milk samples via microbiological culture (n=180) and were analyzed by MALDI-TOF MS and 16S rRNA gene sequencing. Using MALDI-TOF MS methodology, 161 Corynebacterium spp. isolates (89.4%) were correctly identified at the species level, whereas 12 isolates (6.7%) were identified at the genus level. Most isolates that were identified at the species level with 16 S rRNA gene sequencing were identified as Corynebacterium bovis (n=156; 86.7%) were also identified as C. bovis with MALDI-TOF MS. Five Corynebacterium spp. isolates (2.8%) were not correctly identified at the species level with MALDI-TOF MS and 2 isolates (1.1%) were considered unidentified because despite having MALDI-TOF MS scores >2, only the genus level was correctly identified. Therefore, MALDI-TOF MS could serve as an alternative method for species-level diagnoses of bovine intramammary infections caused by Corynebacterium spp.

Behavioral Changes Caused By Austrodiplostomum Spp. In Hoplias Malabaricus From The São Francisco River, Brazil.

Traira (Hoplias malabaricus) is a neotropical fish that is widely distributed in freshwater environments in South America. In the present study, we documented the occurrence of metacercariae of Austrodiplostomum spp. (Diplostomidae) in the eyes and cranial cavity of H. malabaricus and described parasite-induced behavioral changes in the host. The fish were collected from the upper São Francisco River, in the Serra da Canastra mountain range, Minas Gerais, transported alive to the laboratory, observed for 2 weeks, and subsequently examined for parasites. Of the 35 fish examined, 28 (80 %) had free metacercariae in the vitreous humor (mean intensity=95.4; mean abundance=76.3), and 24 (68.57 %) had free metacercariae in the cranial cavity, mainly concentrated below the floor of the brain, at the height of the ophthalmic lobe (mean intensity=12.91; mean abundance=8.85). Specimens of H. malabaricus with a high intensity of infection in the brain displayed changes in swimming behavior.

Molecular Genetic Variability Of Commercial And Wild Accessions Of Passion Fruit (passiflora Spp.) Targeting Ex Situ Conservation And Breeding.

Passiflora species are distributed throughout Latin America, and Brazil and Colombia serve as the centers of diversity for this genus. We performed cross-species amplification to evaluate 109 microsatellite loci in 14 Passiflora species and estimated the diversity and genetic structure of Passiflora cincinnata, Passiflora setaceae and Passiflora edulis. A total of 127 accessions, including 85 accessions of P. edulis, a commercial species, and 42 accessions of 13 wild species, were examined. The cross-species amplification was effective for obtaining microsatellite loci (average cross-amplification of 70%). The average number of alleles per locus (five) was relatively low, and the average diversity ranged from 0.52 in P. cincinnata to 0.32 in P. setacea. The Bayesian analyses indicated that the P. cincinnata and P. setacea accessions were distributed into two groups, and the P. edulis accessions were distributed into five groups. Private alleles were identified, and suggestions for core collections are presented. Further collections are necessary, and the information generated may be useful for breeding and conservation.

Bartonella Spp. Bacteremia In Blood Donors From Campinas, Brazil.

Bartonella species are blood-borne, re-emerging organisms, capable of causing prolonged infection with diverse disease manifestations, from asymptomatic bacteremia to chronic debilitating disease and death. This pathogen can survive for over a month in stored blood. However, its prevalence among blood donors is unknown, and screening of blood supplies for this pathogen is not routinely performed. We investigated Bartonella spp. prevalence in 500 blood donors from Campinas, Brazil, based on a cross-sectional design. Blood samples were inoculated into an enrichment liquid growth medium and sub-inoculated onto blood agar. Liquid culture samples and Gram-negative isolates were tested using a genus specific ITS PCR with amplicons sequenced for species identification. Bartonella henselae and Bartonella quintana antibodies were assayed by indirect immunofluorescence. B. henselae was isolated from six donors (1.2%). Sixteen donors (3.2%) were Bartonella-PCR positive after culture in liquid or on solid media, with 15 donors infected with B. henselae and one donor infected with Bartonella clarridgeiae. Antibodies against B. henselae or B. quintana were found in 16% and 32% of 500 blood donors, respectively. Serology was not associated with infection, with only three of 16 Bartonella-infected subjects seropositive for B. henselae or B. quintana. Bartonella DNA was present in the bloodstream of approximately one out of 30 donors from a major blood bank in South America. Negative serology does not rule out Bartonella spp. infection in healthy subjects. Using a combination of liquid and solid cultures, PCR, and DNA sequencing, this study documents for the first time that Bartonella spp. bacteremia occurs in asymptomatic blood donors. Our findings support further evaluation of Bartonella spp. transmission which can occur through blood transfusions.