Debaryomyces hansenii UFV-1 Intracellular alpha-Galactosidase Characterization and Comparative Studies with the Extracellular Enzyme

Debaryomyces hansenii cells cultivated on galactose produced extracellular and intracellular alpha-galactosidases, which showed 54.5 and 54.8 kDa molecular mass (MALDI-TOF), 60 and 61 kDa (SDS-PAGE) and 5.15 and 4.15 pI values, respectively. The extracellular and intracellular deglycosylated forms presented 36 and 40 kDa molecular mass, with 40 and 34% carbohydrate content, respectively. The N-terminal sequences of the alpha-galactosidases were identical. Intracellular alpha-galactosidase showed smaller thermostability when compared to the extracellular enzyme. D. hansenii UFV-1 extracellular alpha-galactosidase presented higher k(cat) than the intracellular enzyme (7.16 vs 3.29 s(-1), respectively) for the p-nitrophenyl-alpha-D-galactopyranoside substrate. The K(m) for hydrolysis of pNP alpha Gal, melibiose, stachyose, and raffinose were 0.32, 2.12, 10.8, and 32.8 mM, respectively. The intracellular enzyme was acompetitively inhibited by galactose (K(i) = 0.70 mM), and it was inactivated by Cu(II) and Ag(I). Enzyme incubation with soy milk for 6 h at 55 degrees C reduced stachyose and raffinose amounts by 100 and 73%, respectively.

Molecular identification of Pichia guilliermondii, Debaryomyces hansenii and Candida palmioleophila

Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado de São Paulo (FAPESP)

Molecular identification of Pichia guilliermondii, Debaryomyces hansenii and Candida palmioleophila

Traditional phenotypic methods and commercial kits based on carbohydrate assimilation patterns are unable to consistently distinguish among isolates of Pichia guilliermondii, Debaryomyces hansenii and Candida palmioleophila. As result, these species are often misidentified. In this work, we established a reliable method for the identification/differentiation of these species. Our assay was validated by DNA sequencing of the polymorphic region used in a real-time PCR assay driven by species-specific probes targeted to the fungal ITS 1 region. This assay provides a new tool for pathogen identification and for epidemiological, drug resistance and virulence studies of these organisms.

Efeitos das deficiências de alguns micronutrientes em dois cultivares (Santa Rosa e UFV-1) de soja (Glycine max (L.) Merill)

Os cultivares de soja Santa Rosa e UFV-1 foram cultivados em solução nutritiva deficiente em B, Cu ou Zn. As plantas carentes em B não completaram o ciclo, enquanto as demais o fizeram. A carência de Cu afetou a produção de matéria seca e a de vagens mais que a falta de Zn. Quantitativamente, as deficiências induzidas afetaram a variedade UFV - 1 mais que a Santa Rosa.

Exigências minerais comparadas de dois cultivares de soja (Glycine max (L.) Merrill): Santa Rosa e UFV-1

Plantas de soja, cv. Santa Rosa e cv. UFV-1 foram cultivadas em solução nutritiva até a produção de vagens quando foram colhidas e analisadas. A variedade Santa Rosa mostrou-se menos exigente em N, P, K, Ca, Mg, Cu, Fe, Mn e Zn; a exigência de S foi igual e a de Cl maior que a da cv. UFV-1.

Efeitos das deficiências de macronutrientes em duas variedades de soja (Glycine max (L.) Merr.), Santa rosa e UFV-1, cultivadas em solução nutritiva

Duas variedades de soja, Santa Rosa e UFV-1 foram cultivadas em solução nutritiva deficiente em macronutrientes. Foi possível obter sintomas de carência, verificar o efeito das deficiências no crescimento, composição mineral e produção de vagens. Fez-se a diagnose foliar no caso de N, P e K e verificou-se o efeito do nivel de N na solução sobre a atividade da redutase de nitrato.

Época de semeadura nos teores de óleo e proteína de dois cultivares de soja, UFV-1 e IAC-7, de ciclos tardios de maturidade

Estudou-se os efeitos de épocas antecipadas, normais e retardadas de semeadura, nos teores de óleo e proteína da semente de dois cultivares da soja, UFV-1 e IAC-7, de ciclos tardios de maturidade. O trabalho foi conduzido em condições de campo, no município de Campinas,S.P., em um Latossolo Roxo eutrófico, durante os anos agrícolas de 1979/80 e 1980/81, sendo as semeaduras a cada vinte dias no primeiro ano e mensais, à partir de 17/09, no segundo ano, sendo consideradas oito e sete épocas respectivamente a cada ano. A época de semeadura afetou o teor de óleo dos cultivares, nos dois anos do experimento. Os teores de óleo apresentaram maior variação com o ano agrícola do que com a época de semeadura. Dentro do mesmo ano, a variação através das épocas foi aleatória. A época de semeadura afetou o teor de proteína da semente apenas do cultivar IAC-7, nos dois anos. A variação não apresentou tendência definida através das épocas. Nas épocas antecipadas e normais de semeadura, a composição química da semente, com relação aos teores de ó leo e proteína não diferiu nos dois anos, para os dois cultivares. As diferenças apareceram em épocas retardadas.

Características fisiológicas dos cultivares de soja, UFV-1 e IAC-7, no florescimento, em diferentes épocas de semeadura e sua relação com a produção

Estudou-se os efeitos antecipadas, normais e retardadas de semeadura, nas características fisiológicas no florescimento, dos cultivares de soja, UFV-I e IAC-7, de ciclos tardios de maturidade e sua relação coma produção final de sementes. As características avaliadas foram: altura da planta, número de nós frutíferos, índice de área foliar e peso da matéria seca de folhas. O trabalho foi conduzido em condições de campo, no município de Campinas, SP, em um Latossolo Roxo eutrófico, durante os anos agrícolas de 1979/80, sendo as datas de semeadura a cada vinte dias no primeiro ano, ã partir de 05/10, e no segundo ano, mensais, à partir de 17/09, sendo consideradas oito e sete épocas respectivamente a cada ano. A antecipação afetou os valores de todas as características avaliadas, sendo menores, comparativamente àqueles obtidos nas épocas normais, no cultivar UFV-I. Os valores obtidos pelo cultivar IAC-7 foram idênticos nas épocas antecipadas e normais. 0 retardamento da época de plantio diminuiu drasticamente os valores de todas as características estudadas, nos dois culti vares. Todas as características avaliadas no florescimento correlacionaram-se com a produção de sementes, nos dois anos de experimento. Na comparação entre cultivares, em cada época, verificou-se que as diferenças observadas entre os mesmos não corresponderam à diferenças na produção de sementes. Concluiu-se que as características fisiológicas no florescimento são adequadas para avaliação do potencial produtivo dos cultivares nas diferen tes épocas, mas não entre cultivares numa mesma época.

Variação dos componentes da produção de dois cultivares de soja, UFV-1 e IAC-7, em função da época de semeadura

Estudaram-se os efeitos de épocas de semeadura antecipadas, normais e retardadas, na produção e em seus componentes, em dois cultivares de soja, UFV-1 e IAC-7. O trabalho foi desenvolvido em condições de campo, no município de Campinas, SP, em um Latossolo Roxo eutrófico, durante os anos agrícolas de 1979/ /80 e 1980/81. No primeiro ano, as semeaduras foram efetuadas a cada 20 dias, à partir de 5/10 e no segundo ano, mensais à partir de 17/09, sendo consideradas oito e sete épocas respectivamente à cada ano. Foram determinadas as seguintes características: produção de sementes, número de nós por planta, número de vagens por planta e peso de 100 sementes. A época de semeadura influenciou a produção e seus componentes, nos dois cultivares. Dos componentes avaliados o número de nós e o número de vagens por planta foram mais afetados do que o peso da semente. Cada cultivar apresentou o mesmo tipo de comportamento quanto ao número de nós e de vagens por planta, não ocorrendo o mesmo com o peso da semente, que no primeiro ano não foi afetado pela época de semeadura e no segundo, diminuiu de valor com o atraso na semeadura. As variações nos componentes da produção são mais acentuadas nas épocas de maior produção. O número de nós e de vagens por planta são características de maior determinação na produção de sementes.

Perfil de expresión del genoma humano de debaryomyces hansenii en respuesta a la osmoadaptación

Tesis (Doctor en Ciencias con Especialidad en Biotecnología) UANL, 2009.

The behavior of key enzymes of xylose metabolism on the xylitol production by Candida guilliermondii grown in hemicellulosic hydrolysate

A variety of raw materials have been used in fermentation process. This study shows the use of rice straw hemicellulosic hydrolysate, as the only source of nutrient, to produce high added-value products. In the present work, the activity of the enzymes xylose reductase (XR); xylitol dehydrogenase (XD); and glucose-6-phosphate dehydrogenase (G6PD) during cultivation of Candida guilliermondii on rice straw hemicellulosic hydrolysate was measured and correlated with xylitol production under different pH values (around 4.5 and 7.5) and initial xylose concentration (around 30 and 70 g l(-1)). Independent of the pH value and xylose concentration evaluated, the title of XD remained constant. On the other hand, the volumetric activity of G6PD increased whereas the level of XR decreased when the initial xylose concentration was increased from 30 to 70 g l(-1). The highest values of xylitol productivity (Q (P) a parts per thousand 0.40 g l(-1)) and yield factor (Y (P/S) a parts per thousand 0.60 g g(-1)) were reached at highest G6PD/XR ratio and lowest XR/XD ratio. These results suggest that NADPH concentrations influence the formation of xylitol more than the activity ratios of the enzymes XR and XD. Thus, an optimal rate between G6PD and XR must be reached in order to optimize the xylitol production.

Protease, peptidase and esterase activities by lactobacilli and yeast isolates from Feta cheese brine

Aims: The study of peptidase, esterase and caseinolytic activity of Lactobacillus paracasei subsp. paracasei, Debaryomyces hansenii and Sacchromyces cerevisiae isolates from Feta cheese brine. Methods and Results: Cell-free extracts from four strains of Lact. paracasei subsp. paracasei, four strains of D. hansenii and three strains of S. cerevisiae, isolated from Feta cheese brine were tested for their proteolytic and esterase enzyme activities. Lactobacillus paracasei subsp. paracasei strains had intracellular aminopeptidase, dipeptidyl aminopeptidase, dipeptidase, endopeptidase and carboxypeptidase activities. Esterases were detected in three of four strains of lactobacilli and their activities were smaller with higher molecular weight fatty acids. The strains of yeasts did not exhibit endopeptidase as well as dipeptidase activities except on Pro-Leu. Their intracellular proteolytic activity was higher than that of lactobacilli. Esterases from yeasts preferentially degraded short chain fatty acids. Lactobacilli degraded preferentially beta-casein. Caseinolytic activity of yeasts was higher than that of lactobacilli. Conclusions: The results suggest that Lact. paracasei subsp. paracasei and yeasts may contribute to the development of flavour in Feta cheese. Significance and impact of the Study: Selected strains could be used as adjunct starters to make high quality Feta cheese.

Qualidade microbiológica e ocorrência de leveduras em bebidas lácteas fermentadas, com adição de polpas de frutas, comercializada na região de São José do Rio Preto - SP

Conselho Nacional de Desenvolvimento Científico e Tecnológico (CNPq)

Qualidade microbiológica e ocorrência de leveduras em polpas congeladas de frutas

Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior (CAPES)

Verificação das boas práticas de fabricação (BFP) e análise da qualidade microbiológica de saladas adicionada de maionese comercializadas na cidade de São José do Rio Preto - SP

Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior (CAPES)