Optimization of immunofluorescence protocols for detection of biomarkers in colorectal and breast cancer tissues

Cancer remains an undetermined question for modern medicine. Every year millions of people ranging from children to adult die since the modern treatment is unable to meet the challenge. Research must continue in the area of new biomarkers for tumors. Molecular biology has evolved during last years; however, this knowledge has not been applied into the medicine. Biological findings should be used to improve diagnostics and treatment modalities. In this thesis, human formalin-fixed paraffin embedded colorectal and breast cancer samples were used to optimize the double immunofluorescence staining protocol. Also, immunohistochemistry was performed in order to visualize expression patterns of each biomarker. Concerning double immunofluorescence, feasibility of primary antibodies raised in different and same host species was also tested. Finally, established methods for simultaneous multicolor immunofluorescence imaging of formalin-fixed paraffin embedded specimens were applied for the detection of pairs of potential biomarkers of colorectal cancer (EGFR, pmTOR, pAKT, Vimentin, Cytokeratin Pan, Ezrin, E-cadherin) and breast cancer (Securin, PTTG1IP, Cleaved caspase 3, ki67).

Avaliação in vitro da capacidade de selamento de diferentes materiais usados como barreiras intra-coronal

Introdução: O adequado selamento do sistema de canais radiculatres (SCR) obtido através da obturação, evita a infiltração de micro-organismos entre as paredes do canal radicular e o material obturador, reduzindo a possibilidade de insucesso do tratamento endodôntico (TE). A falta de selamento coronal, o atraso da colocação da restauração permanente, a fratura da restauração coronal, assim como uma espessura inadequada da restauração provisória, inferior a 4mm, podem, entre outros factores, ser predisponentes para a recontaminação do SCR obturado. Sendo o selamento da entrada do SCR uma importante etapa do TE, neste estudo pretendeu-se avaliar diferentes materiais para tal procedimento, avaliando qual o material que proporciona menor infiltração. Materiais e métodos: Neste estudo foram utilizados 70 dentes humanos monocanalares, que foram divididos aleatoriamente em 6 grupos. Grupo I (15 dentes) foram selados com ionómero de vidro modificado por resina (Ionoseal - VOCO®), Grupo II (15 dentes) foram selados com ionómero de vidro modicifado por resina (GC Fuji II LC- GA America®), Grupo III (15 dentes) foram selados por um compósito fluído (GrandioSO Heavy Flow - VOCO®), Grupo IV (15 dentes) foram selados por um compósito nanohíbrido (GrandioSO - VOCO®). O Grupo V (5 dentes) e o Grupo VI (5 dentes) foram usados como controlo negativo e positivo, respectivamente. Os dentes foram submetidos a termociclagem de 500 ciclos, de 60 segundos de duração cada um, com variações de temperatura de 5°C - 55°C. Em seguida, foram imersos em corante azul de metileno a 2% para avaliação da infiltração dos materiais. Resultados: Em geral, Ionoseal® demonstrou maior infiltração de corante que os outros materiais, e quando comparado com os demais grupos a diferença foi significativa. Porem entre os grupos 1, 2 e 3 não houve diferença estatística significante. Conclusões: LC Fuji II®, GrandioSo® Nano partícula Flow e GrandioSo® Nano partícula podem ser usados como barreira intracanalar.

Imprensa brasileira no ocaso da belle époque

A Grande Guerra foi o acontecimento ápice de tensões acumuladas entre as potências da Europa ainda no começo da segunda década do século XX. O conflito deflagrado no verão de 1914 expandiu-se e envolveu nações de outros continentes, tornando-o mundial, com repercussões que extrapolaram os mais de quatro anos de batalhas oficiais – atualmente pode-se concluir que a Segunda Guerra Mundial nada mais foi do que a segunda parte de um conflito que não acabou de forma a contentar todos os países beligerantes. Entretanto, a Grande Guerra também demarcou o final de uma era conhecida como belle époque, um tempo que simbolicamente representava o apogeu cultural, econômico e social na Europa, inspirador do modelo civilizador em nações no novo mundo, inclusive no Brasil. Na Amazônia, sobretudo na capital do Estado do Pará, Belém, vivia-se ainda sob o imaginário da era da abundância provocada pela exportação da borracha nativa, cujo inicio ocorreu no final do século XIX e na primeira década do século passado. Nesse cenário, desenvolveu-se um jornalismo forte e muito sintonizado com as questões nacionais, regionais e de além-mar. Formado por intelectuais, políticos e escritores, o jornalismo paraense cobriu de forma sistemática os acontecimentos em torno da Grande Guerra, desde a morte do herdeiro do trono do Império Austro-húngaro, Francisco Ferdinando, até a paz ser selada. Com base neste panorâma, o objetivo desta investigação centra-se no esforço para compreender a natureza da cobertura jornalística dos jornais paraenses acerca da Primeira Guerra Mundial, tendo como objeto de análise três jornais diários que circulavam à época: Estado do Pará, Folha do Norte e A Tarde. Os dois primeiros eram jornais generalistas e de longo período de circulação. O terceiro foi um jornal vespertino, publicado entre setembro de 1915 e setembro de 1916, portanto, de caráter ocasional. Para alcançar esse objetivo, a metodologia usada compreende as análises quantitativa e qualitativa de conteúdo, conforme descrito por Sousa (2006). A primeira parte das análises centra-se em avaliar os dados relativos ao número de peças, de espaços dedicados ao tema da guerra, entre outros aspectos quantificáveis. Na segunda parte usou-se a análise qualitativa com base no estudo do diálogo establecido entre os aspectos da historiografia e os achados jornalísticos nos três jornais.

Characterization of cancer/testis antigen MAGE-A11 for immunotherapy of prostate cancer

Les antigènes testiculaires du cancer sont des cibles idéales pour l’immunothérapie du cancer car ce sont des protéines immunogéniques dont l’expression est restreinte aux cellules germinales et au cancer. Le but de cette étude est d’évaluer le potentiel de MAGE-A11, un antigène testiculaire du cancer, comme cible pour développer un vaccin contre le cancer de la prostate. Pour ce faire, l’anticorps monoclonal 5C4 qui a la capacité de reconnaître la présence de MAGE-A11 dans les tissus fixés et inclus en paraffine a été produit. De plus, l’expression de MAGE-A11 a été analysée sur plusieurs lignées de cellules cancéreuses. Il a été démontré que MAGE-A11 est exprimé dans plusieurs types de cancers notamment dans le cancer du côlon et du cerveau. Finalement, nous avons identifié trois épitopes du CMH classe II HLA-DR1 dans la protéine MAGE-A11 confirmant ainsi l’immunogénicité de cet antigène et son potentiel comme cible pour l’immunothérapie du cancer.

Estudo comparativo da queima rápida com a queima tradicional nas propriedades de materiais cerâmicos de base argilos

Dutra, R. P. S.; Varela,M. L.; Nascimento, R. M. ; Gomes, U. U. ; Martinelli1, A. E. ; Paskocimas, C. A. Estudo comparativo da queima rápida com a queima tradicional nas propriedades de materiais cerâmicos de base argilosa. Cerâmica [online]. 2009, vol.55, n.333, pp. 100-105. ISSN 0366-6913. doi:Disponivem em: . Acesso em: 04 out. 2010.

Artificial Skin - Culturing of Different Skin Cell Lines for Generating an Artificial Skin Substitute on Cross-Weaved Spider Silk Fibres

Background: In the field of Plastic Reconstructive Surgery the development of new innovative matrices for skin repair is in urgent need. The ideal biomaterial should promote attachment, proliferation and growth of cells. Additionally, it should degrade in an appropriate time period without releasing harmful substances, but not exert a pathological immune response. Spider dragline silk from Nephila spp meets these demands to a large extent. Methodology/Principal Findings: Native spider dragline silk, harvested directly out of Nephila spp spiders, was woven on steel frames. Constructs were sterilized and seeded with fibroblasts. After two weeks of cultivating single fibroblasts, keratinocytes were added to generate a bilayered skin model, consisting of dermis and epidermis equivalents. For the next three weeks, constructs in co-culture were lifted on an originally designed setup for air/liquid interface cultivation. After the culturing period, constructs were embedded in paraffin with an especially developed program for spidersilk to avoid supercontraction. Paraffin cross-sections were stained in Haematoxylin & Eosin (H&E) for microscopic analyses. Conclusion/Significance: Native spider dragline silk woven on steel frames provides a suitable matrix for 3 dimensional skin cell culturing. Both fibroblasts and keratinocytes cell lines adhere to the spider silk fibres and proliferate. Guided by the spider silk fibres, they sprout into the meshes and reach confluence in at most one week. A well-balanced, bilayered cocultivation in two continuously separated strata can be achieved by serum reduction, changing the medium conditions and the cultivation period at the air/liquid interphase. Therefore spider silk appears to be a promising biomaterial for the enhancement of skin regeneration.

Thermodynamic modeling and microcalorimetry of nanostructured materials for capacitive thermal management of electronics

Transient power dissipation profiles in handheld electronic devices alternate between high and low power states depending on usage. Capacitive thermal management based on phase change materials potentially offers a fan-less thermal management for such transient profiles. However, such capacitive management becomes feasible only if there is a significant enhancement in the enthalpy change per unit volume of the phase change material since existing bulk materials such as paraffin fall short of requirements. In this thesis I propose novel nanostructured thin-film materials that can potentially exhibit significantly enhanced volumetric enthalpy change. Using fundamental thermodynamics of phase transition, calculations regarding the enhancement resulting from superheating in such thin film systems is conducted. Furthermore design of a microfabricated calorimeter to measure such enhancements is explained in detail. This work advances the state-of-art of phase change materials for capacitive cooling of handheld devices.