Non-enzymatic assay for glucose by using immobilized whole-cells of E. coli containing glucose binding protein fused to fluorescent proteins

Glucose monitoring in vivo is a crucial issue for gaining new understanding of diabetes. Glucose binding protein (GBP) fused to two fluorescent indicator proteins (FLIP) was used in the present study such as FLIP-glu- 3.2 mM. Recombinant Escherichia coli whole-cells containing genetically encoded nanosensors as well as cell-free extracts were immobilized either on inner epidermis of onion bulb scale or on 96-well microtiter plates in the presence of glutaraldehyde. Glucose monitoring was carried out by Förster Resonance Energy Transfer (FRET) analysis due the cyano and yellow fluorescent proteins (ECFP and EYFP) immobilized in both these supports. The recovery of these immobilized FLIP nanosensors compared with the free whole-cells and cell-free extract was in the range of 50–90%. Moreover, the data revealed that these FLIP nanosensors can be immobilized in such solid supports with retention of their biological activity. Glucose assay was devised by FRET analysis by using these nanosensors in real samples which detected glucose in the linear range of 0–24 mM with a limit of detection of 0.11 mM glucose. On the other hand, storage and operational stability studies revealed that they are very stable and can be re-used several times (i.e. at least 20 times) without any significant loss of FRET signal. To author's knowledge, this is the first report on the use of such immobilization supports for whole-cells and cell-free extract containing FLIP nanosensor for glucose assay. On the other hand, this is a novel and cheap high throughput method for glucose assay.

Eumicetoma de grãos pretos por Madurella grisea: registro de dois casos

Os Autores registram dois casos de eumicetoma de grãos pretos, com localização podal, procedentes da Bahia, provocados por Madurella grisea Mackinnon et al., 1949. São estudadas a estrutura dos grãos, bem como as características micromorfológicas do fungo em vida saprofítica. Acreditam os Autores que estas observações correspondem ao sétimo e oitavo casos registrados na literatura do país, provocadas por este fungo. Os Autores consideram nomen dubium ou nomina confusa as seguintes espécies de Madurella: M. ramiroi, M. oswaldoi, M. bovoi, M. tozeuri, M. mansonii, M. brumpti, M. reynieri, M. americana, M. lackawanna e M. ikedae, o mesmo ocorrendo com a chamada Rubromadurella mycetomi. As únicas espécies válidas são Madurella mycetomatis McGinnis, 1980 (=Madurella mycetomi Brumpt, 1905) e Madurella grisea Mackinnon et al., 1949. Nos dois casos registrados o tratamento com itraconazol, por um período de 3 meses não fez regredir as lesões, havendo ligeira melhora clínica.

Generation of high-affinity monoclonal antibodies of IgG class against native β-d-glucans from basidiomycete mushrooms

β-d-glucans from basidiomycete strains are powerful immunomodulatory agents in several clinical conditions. Therefore, their assay, purification and characterization are of great interest to understand their structure-function relationship. Hybridoma cell fusion was used to raise monoclonal antibodies (Mabs) against extracellular β-d-glucans (EBGs) from Pleurotus ostreatus. Two of the hybridoma clones (1E6-1E8-B5 and 3E8-3B4) secreting Mabs against EBGs were selected. This hybridoma cell line secreted Mabs of the IgG class which were then purified by hydroxyapatite chromatography to apparent homogeneity on native and SDS-PAGE. Mabs secreted by 1E6-1E8-B5 clone were found to recognize a common epitope on several β-d-glucans from different basidiomycete strains. This Mab exhibited high affinity constant (KA) for β-d-glucans from several mushroom strains in the range of 3.20 × 109 ± 3.32 × 103-1.51 × 1013 ± 3.58 × 107 L/mol. Moreover, they reacted to some heat-treated β-d-glucans in a different mode when compared with the native forms; these data suggest that this Mab binds to a conformational epitope on the β-d-glucan molecule. The epitope-binding studies of Mabs obtained from 1E6-1E8-B5 and 3E8-3B4 revealed that the Mabs bind to the same epitope on some β-d-glucans and to different epitopes in other antigen molecules. Therefore, these Mabs can be used to assay for β-d-glucan from basidiomycete mushrooms. © 2015 Elsevier Ltd. All rights reserved.

As Reformas Militares do Século XX Português – Da I República ao fim do Estado Novo

Dissertação apresentada para cumprimento dos requisitos necessários à obtenção do grau de Mestre em História Contemporânea

Mulher no país de Maria Lamas - A questão sem nome na obra para além do amor

Dissertação apresentada para cumprimento dos requisitos necessários à obtenção do grau de Mestre em Estudos sobre as Mulheres. As Mulheres na Sociedade e na Cultura

Fernando Pessoa e Maurice Maeterlinck. A voz e o silêncio na fragmentação da obra

Tese apresentada para cumprimento dos requisitos necessários à obtenção do grau de Doutor em Estudos Portugueses

Imagem, percepção e expressão. A estética em Wittgenstein

Dissertação de Doutoramento em Filosofia

Spatial analysis of suicide attack incidences in Kabul City

Dissertation submitted in partial fulfillment of the requirements for the Degree of Master of Science in Geospatial Technologies.

Uma Leitura Fenomenológica de Vergílio Ferreira

Tese apresentada para cumprimento dos requisitos necessários à obtenção do grau de Doutor em Filosofia.

Aggressive Pituitary Lesion with a Remarkably High Ki-67

Os raros tumores pituitários agressivos são chamados carcinomas quando são detectadas metástases, sejam sistêmicas e/ou em sistema nervoso central. Alguns casos estão associados com superprodução de hormônio, mas a maioria é diagnosticada em função dos sintomas locais. Essas neoplasias são geralmente refratárias aos tratamentos atuais. Uma mulher com 51 anos de idade apresentou dor de cabeça de início súbito, paralisia de braço esquerdo e hipoestesia facial esquerda. A tomografia e a ressonância magnética revelaram um tumor pituitário invadindo os seios esfenoidal e cavernoso esquerdos. Os dados laboratoriais excluíram hipersecreção hormonal. A paciente foi submetida à cirurgia transesfenoidal, e os achados histológicos mostraram uma neoplasia com Ki-67 estimado em 75%. As imagens excluíram tanto um tumor oculto primário quanto disseminação sistêmica ou do sistema nervoso central. Três semanas após a cirurgia, a condição neurológica apresentou piora com início de ataxia, ptose bilateral, oftalmoplegia e aumento do tamanho da lesão, levando à intervenção cirúrgica por craniotomia, seguida por apenas algumas sessões de radioterapia devido à progressão grave da doença. A paciente veio a óbito depois de quase dois meses das manifestações iniciais. O caso ilustra a agressividade de algumas lesões pituitárias, a eficácia limitada das modalidades atuais de tratamento, como a cirurgia ou a radioterapia, e as limitações da classificação atual de tumores pituitários. Até onde sabemos, esse caso corresponde a uma das neoplasias pituitárias mais agressivas descritas até hoje, com um nível muito alto de Ki-67 (75%) e sobrevida curta (2 meses). O nível de Ki-67 pode ser de valor prognóstico em tumores pituitários. A classificação da Organização Mundial da Saúde (OMS) para tumores pituitários deveria ser revisitada.

Arte e poder na obra de Mário-Henrique Leiria

Dissertação apresentada para cumprimento dos requisitos necessários à obtenção do grau de Mestre em Estudos Portugueses

The national physics and chemistry exams and the learning of sciences

Dissertação apresentada para obtenção do Grau de Doutor em Ciências da Educação, pela Faculdade de Ciências e Tecnologia da Universidade Nova de Lisboa

António Manuel Pinto Barbosa, economista e governante

António Manuel Pinto Barbosa (1917-2006), incluído entre os “Cem portugueses que moldaram o século XX” no Expresso Revista foi biografado por João César das Neves e Francisco Azevedo e Silva num livro publicado em 1999, cujo capítulo 7 o intitula “Decano dos economistas”. A sua actividade na Faculdade de Economia da Universidade Nova de Lisboa, que fundou em 1978 e onde foi homenageado em 1989, e sobretudo na Academia das Ciências de Lisboa foram porém menosprezadas nesse trabalho. Este elogio tenta reparar a falha, focando ainda o problema dos desequilíbrios da balança de pagamentos que tanto o preocuparam na Europa e no mundo, na medida em que interagem perigosamente com os desequilíbrios orçamentais, hipotecando a riqueza das nações. Aos complementos de texto acrescem anexos com referências e trabalhos consultados, o processo individual na Academia e contribuições recentes para a análise dos desequilíbrios externos na Zona Euro no espírito de Pentti Kouri (1949-2009).

António Manuel Pinto Barbosa, economista e governante

António Manuel Pinto Barbosa (1917-2006), economista e governante, foi incluído pelo Expresso Revista entre os “Cem portugueses que moldaram o século XX”. Biografado por João César das Neves e Francisco Azevedo e Silva num livro publicado em 1999, cujo capítulo 7 o intitula “Decano dos economistas”, mas a sua actividade na Faculdade de Economia da Universidade Nova de Lisboa, que fundou em 1978 e onde foi homenageado em 1989, e sobretudo na Academia das Ciências de Lisboa, é menos conhecida. Este escrito tenta reparar a falha e foca ainda o problema dos desequilíbrios da balança de pagamentos na Europa e no mundo que tanto o preocuparam, na medida em que interagem perigosamente com os desequilíbrios orçamentais, hipotecando a riqueza das nações. Inclui o elogio pronunciado em sessão conjunta da Academia das Ciências de Lisboa, 14/11/13 (cadeira nº 18L), o discurso de aceitação por Pedro Soares Martínez, decano da secção de direito e ciência política da Academia (cadeira 11L), pronunciado na mesma sessão, e um testemunho de Manuel Jacinto Nunes, que sucedeu a Pinto Barbosa enquanto decano dos economistas portugueses e da secção de economia e finanças da Academia (cadeira 8L), mas não estava na sessão. Seguem-se complementos incluíndo excertos duma análise dos desequilíbrios externos na Zona Euro no espírito de Pentti Kouri (1949-2009).

Authenticité et hyperréalité dans la ville de Macau: les formes complexes du nouveau tourisme asiatique

Ce texte essaie d’interpréter les relations qui s’établissent entre les processus de construction/négociation des identités culturelles et les processus de touristification de l’espace des villes. Les dynamiques culturelles associées au tourisme intègrent des représentations dont la forme convoque, très souvent, les concepts d’authenticité et d’hyperréalité. L’espace des villes devenues des pôles touristiques est lui aussi souvent marqué par ces deux formes culturelles. C’est, comme ce texte essaie de le montrer, le cas de Macao : le Centre Historique (« Patrimoine Mondial »), un réseau de musées (une vingtaine) et un réseau de casinos (une trentaine) constituent les éléments soumis à cette logique de production de l’espace urbain. Les formes culturelles en question – formulées, dans la théorie, comme deux formes indépendantes (et même incompatibles) – coexistent ici dans une réalité culturelle et urbaine complexe et très instable. Son interprétation exige des formes d’abordages nouvelles qui convoquent – en même temps - plusieurs échelles spatiales.