Pollen analyses of sediment core GeoB1711-4 in the eastern South Atlantic

Influx of aeolian pollen trapped in marine sediments off Namibia provides a wind variation record for the last 135 kyr. The influx of major pollen components is derived from the southwest African desert/semi-desert zone and shows six periods during which enhanced southeast trade winds contributed to strong upwelling and reduced sea surface temperatures. The most prominent of these occurred during 17-23 cal. kyr, 42-56 kyr and before 130 kyr B.P. Correspondence between the pollen influx record and the Vostok deuterium isotope record suggests that pronounced glacial Antarctic cooling was accompanied by intensification of the southeast trades throughout the Late Quaternary. However, during 42-23 kyr B.P. the combination of strong Antarctic glaciation with a decrease of wind zonality induced by low latitude precessional insolation changes caused strong alongshore winds and Ekman pumping that resulted in strong upwelling and reduced sea surface temperatures without pollen influx enhancement.

Reversibly Photo-Crosslinkable Polycarbonate-Based Polymersomes for Drug Encapsulation and Delivery

This thesis describes the preparation of polymersomes from poly(ethylene glycol)-block-polycarbonate (PEG-PC) copolymers functionalized with pendant coumarin groups. Coumarin groups undergo photo-reversible dimerization when irradiated with specific ultraviolet wavelengths, so they can be used to prepare polymers with photo-responsive properties. In this case, the pendant coumarin groups enable stabilization of the polymersome membrane through photo-crosslinking of the hydrophobic block. Initially, several novel cinnamoyl and coumarin functionalized cyclic carbonate monomers were synthesized using ester, ether, or amide linkages. While the homopolymerization of these functionalized monomers proved challenging due to their high melting points, both cinnamoyl and coumarin functionalized monomers were successfully copolymerized with trimethylene carbonate (TMC) at 100 ℃ using a catalyst-free melt polymerization process where the TMC doubled as a solvent for the higher melting point monomer. Using this system, polycarbonate copolymers with up to 33% incorporation of the functionalized monomers were prepared. In addition, an investigation of some anomalous polymerization results identified previously unreported triethylamine-based catalysts for the melt polymerization of carbonate monomers. These studies also demonstrated that the catalyst-free polymerization of TMC occurs faster and at lower temperatures than previously reported. Subsequently, the photo-crosslinking of cinnamoyl and coumarin functionalized polycarbonates was compared and coumarin was identified as the more effective crosslinking agent when using 300-400 nm UV. An investigation of the photo-reversibility of the coumarin dimerization revealed no discernible change in the properties of crosslinked networks, but rapid photo-reversion in dilute solutions. The photo-crosslinking and photo-reversion kinetics of the coumarin functionalized polycarbonates were determined to be second-order in both cases. Finally, the self-assembly of PEG-PC diblock copolymers functionalized with coumarin was examined and both reverse solvent evaporation and solvent displacement were found to induce self-assembly, with hydrophilic mass fractions (f-factors) of 12-28% resulting in the formation of solid microparticles and nanoparticles and f-factors of 33-43% resulting in the formation of polymersomes. The stabilization of these polymersome membranes through photo-initiator-free photo-crosslinking was demonstrated with the crosslinking allowing polymersomes to withstand centrifugation at 12,000 x g. In addition, the encapsulation of calcein, as a model small molecule drug, in the stabilized polymersomes was successfully demonstrated using confocal microscopy.

Treatment of lean and diet-induced obesity (DIO) mice with a novel stable obestatin analogue alters plasma metabolite levels as detected by untargeted LC–MS metabolomics

Introduction: Obestatin is a controversial gastrointestinal peptide purported to have metabolic actions.

Objectives: This study investigated whether treatment with a stable obestatin analogue (PEG-OB(Cys10, Cys13)) changed plasma metabolite levels firstly in lean and subsequently in diet-induced obesity (DIO) C57BL6/J mice.

Methods: Untargeted LC-HRMS metabolomics experiments were carried out in ESI + mode with plasma extracts from both groups of animals. Data were normalised, multivariate and univariate statistical analysis performed and metabolites of interest putatively identified.

Results: In lean mice, 39 metabolites were significantly changed by obestatin treatment and the majority of these were increased, including various C16 and C18 moieties of phosphatidylcholine, phosphatidylethanolamine, phosphatidylserine and monoacylglycerol, along with vitamin A, vitamin D3, tyrosine, acetylcarnitine and 2α-(hydroxymethyl)-5α-androstane-3β,17β-diol. Decreased concentrations of glycolithocholic acid, 3-dehydroteasterone and various phospholipids were observed. In DIO mice, 25 metabolites were significantly affected and strikingly, the magnitudes of changes here were generally much greater in DIO mice than in lean mice, and in contrast, the majority of metabolite changes were decreases. Four metabolites affected in both groups included glycolithocholic acid, and three different long-chain (C18) phospholipid molecules (phosphatidylethanolamine, platelet activating factor (PAF), and monoacylglycerol). Metabolites exclusively affected in DIO mice included various phosphatidylcholines, lysophosphatidylcholines and fatty acyls, as well as creatine and oxidised glutathione.

Conclusion: This investigation demonstrates that obestatin treatment affects phospholipid turnover and influences lipid homeostasis, whilst providing convincing evidence that obestatin may be acting to ameliorate diet-induced impairments in lipid metabolism, and it may influence steroid, bile acid, PAF and glutathione metabolism.

LOTUS: A low cost, ultraviolet spectrograph

We describe the design, construction and commissioning of LOTUS; a simple, low-cost long-slit spectrograph for the Liverpool Telescope. The design is optimized for near-UV and visible wavelengths and uses all transmitting optics. It exploits the instrument focal plane field curvature to partially correct axial chromatic aberration. A stepped slit provides narrow (2.5x95 arcsec) and wide (5x25 arcsec) options that are optimized for spectral resolution and flux calibration respectively. On sky testing shows a wavelength range of 3200-6300 Angstroms with a peak system throughput (including detector quantum efficiency) of 15 per cent and wavelength dependant spectral resolution of R=225-430. By repeated observations of the symbiotic emission line star AG Peg we demonstrate the wavelength stability of the system is less than 2 Angstroms rms and is limited by the positioning of the object in the slit. The spectrograph is now in routine operation monitoring the activity of comet 67P/Churyumov-Gerasimenko during its current post-perihelion apparition.

The application of a novel, cell permeable activity-based probe for the detection of cysteine cathepsins.

Cysteine cathepsins, such as cathepsin S (CTSS), are implicated in the pathology of a wide range of diseases and are of potential utility as diagnostic and prognostic biomarkers. In previous work, we demonstrated the potency and efficiency of a biotinylated diazomethylketone (DMK)-based activity-based probe (ABP), biotin-PEG-LVG-DMK, for disclosure of recombinant CTSS and CTSS in cell lysates. However, the limited cell permeability of both the biotin and spacer groups restricted detection of CTSS to cell lysates. The synthesis and characterisation of a cell permeable ABP to report on intracellular CTSS activity is reported. The ABP, Z-PraVG-DMK, a modified peptidyl diazomethylketone, was based on the N-terminus of human cystatin motif (Leu-Val-Gly). The leucine residue was substituted for the alkyne-bearing proparcylglycine to facilitate conjugation of an azide-tagged reporter group using click chemistry, following irreversible inhibition of CTSS. When incubated with viable Human Embryonic Kidney 293 cells, Z-PraVG-DMK permitted disclosure of CTSS activity following cell lysis and rhodamine azide conjugation, by employing standard click chemistry protocols. Furthermore, the fluorescent tag facilitated direct detection of CTSS using in-gel fluorescent scanning, obviating the necessity for downstream biotin-streptavidin conjugation and detection procedures.

Nouveaux copolymères à base de thieno-pyrazine et thieno-thiadiazole pour l'électronique organique

Une partie appréciable de la recherche moderne dans le domaine du photovoltaïque est basée sur des systèmes organiques sur couches minces. Les photo-détecteurs organiques ne diffèrent des technologies photovoltaïques solaires que par leurs structures chimiques au sein de la couche active, ainsi que par certaines propriétés nécessaires à leurs viabilités. Afin d’obtenir un matériau photoactif dans le proche infrarouge, la structure chimique doit être choisie et conçue de façon à placer ses bandes d’absorptions aux bons endroits. Un contrôle précis de la bande interdite du polymère dictera à quel point ce matériau peut servir à des fins de photo-détections. Les unités thieno-pyrazine et thieno-thiadiazole sont reconnues comme ayant un fort caractère électronique et viennent aisément produire des polymères à faible bande interdite lorsqu’ elles y sont incorporées. Au sein d’un système à hétérojonction de type donneur / accepteur, la miscibilité entre ces deux est cruciale et viendra justifier les performances finales d’un dispositif. Cette miscibilité dictera la morphologie de la couche active, qui est trop souvent imprévisible lors de la conception des structures chimiques des composés. On peut par contre penser à baser une étude sur une morphologie déjà établie, en balisant la structure globale du polymère, tout en modifiant ses fonctionnalités pour avoir un contrôle sur les propriétés électroniques finales. Une structure de poly (4,4’’-didodecyl-2,2’:5’,2’’-terthiophène) dont la morphologie est connue sera donc utilisée dans ce projet et une modification de son thiophène central viendra moduler son activité optique pour en faire un bon candidat en photo-détection infrarouge. Ces travaux ont permis de développer de nouveaux polymères conjugués et de vérifier leurs propriétés électro-optiques.

Fibronectin/phosphorylcholine coatings on fluorocarboned surfaces: a study upon adsorption and grafting processes

Depuis ces dernières décennies, le domaine des biomatériaux a connu un essor considérable, évoluant de simples prothèses aux dispositifs les plus complexes pouvant détenir une bioactivité spécifique. Outre, le progrès en science des matériaux et une meilleure compréhension des systèmes biologiques a offert la possibilité de créer des matériaux synthétiques pouvant moduler et stimuler une réponse biologique déterminée, tout en améliorant considérablement la performance clinique des biomatériaux. En ce qui concerne les dispositifs cardiovasculaires, divers recouvrements ont été développés et étudiés dans le but de modifier les propriétés de surface et d’améliorer l’efficacité clinique des tuteurs. En effet, lorsqu’un dispositif médical est implanté dans le corps humain, son succès clinique est fortement influencé par les premières interactions que sa surface établit avec les tissus et les fluides biologiques environnants. Le recouvrement à la surface de biomatériaux par diverses molécules ayant des propriétés complémentaires constitue une approche intéressante pour atteindre différentes cibles biologiques et orienter la réponse de l’hôte. De ce fait, l’élucidation de l’interaction entre les différentes molécules composant les recouvrements est pertinente pour prédire la conservation de leurs propriétés biologiques spécifiques. Dans ce travail, des recouvrements pour des applications cardiovasculaires ont été créés, composés de deux molécules ayant des propriétés biologiques complémentaires : la fibronectine (FN) afin de promouvoir l’endothélialisation et la phosphorylcholine (PRC) pour favoriser l’hémocompatibilité. Des techniques d’adsorption et de greffage ont été appliquées pour créer différents recouvrements de ces deux biomolécules sur un polymère fluorocarboné déposé par traitement plasma sur un substrat en acier inoxydable. Dans un premier temps, des films de polytétrafluoroéthylène (PTFE) ont été utilisés en tant que surface modèle afin d’explorer l’interaction de la PRC et de la FN avec les surfaces fluorocarbonées ainsi qu’avec des cellules endothéliales et du sang. La stabilité des recouvrements de FN sur l’acier inoxydable a été étudiée par déformation, mais également par des essais statiques et dynamiques sous-flux. Les recouvrements ont été caractérisés par Spectroscopie Photoéléctronique par Rayons X, immunomarquage, angle de contact, Microscopie Électronique de Balayage, Microscopie de Force Atomique et Spectrométrie de Masse à Ionisation Secondaire à Temps de Vol (imagerie et profilage en profondeur). Des tests d’hémocompatibilité ont été effectués et l’interaction des cellules endothéliales avec les recouvrements a également été évaluée. La FN greffée a présenté des recouvrements plus denses et homogènes alors que la PRC quant à elle, a montré une meilleure homogénéité lorsqu’elle était adsorbée. La caractérisation de la surface des échantillons contenant FN/PRC a été corrélée aux propriétés biologiques et les recouvrements pour lesquels la FN a été greffée suivie de l’adsorption de la PRC ont présenté les meilleurs résultats pour des applications cardiovasculaires : la promotion de l’endothélialisation et des propriétés d’hémocompatibilité. Concernant les tests de stabilité, les recouvrements de FN greffée ont présenté une plus grande stabilité et densité que dans le cas de l’adsorption. En effet, la pertinence de présenter des investigations des essais sous-flux versus des essais statiques ainsi que la comparaison des différentes stratégies pour créer des recouvrements a été mis en évidence. D’autres expériences sont nécessaires pour étudier la stabilité des recouvrements de PRC et de mieux prédire son interaction avec des tissus in vivo.

Association between the il28b rs12979860 polymorphism and therapy response in patients infected with genotype 1 of hepatitis c virus in Central Brazil

v. 45, n.2, p.152-160, abr/.jun. 2016.

Cemento endodontico iniettabile: ricerca del "carrier" mediante osservazioni di microscopia elettronica a scansione e misure di micro-permeabilita'

Questa tesi si pone l’obiettivo di individuare il corretto veicolo “carrier” per un cemento bioceramico premiscelato, iniettabile e pronto all’uso. Il suddetto cemento è creato per applicazioni di chiusura e otturazioni permanenti del canale radicolare. A tale scopo è stato analizzato anatomicamente il dente e sono state approfondite le patologie. In seguito si è posta particolare attenzione per l’endodonzia e la terapia endodontica ortograda. L’attenzione si è poi focalizzata sui cementi endodontici allo scopo di ricercare lo stato dell’arte circa le proprietà chimico-fisiche di cementi ampiamente utilizzati in odontoiatria quali il mineral trioxide aggregate (MTA) e il cemento da cui è derivato ossia il cemento Portland. La parte sperimentale dell’elaborato parte con l’idea di ricreare, presso il Centro di Ricerca Interdisciplinare di Biomineralogia, Cristallografia e Biomateriali del Dipartimento di Scienze della Terra e Geologico-Ambientali dell’Università di Bologna, un prodotto con le stesse caratteristiche di un cemento ad uso endodontico iniettabile attualmente in commercio. Si è quindi studiato non solo il comportamento ma si sono anche analizzate le caratteristiche superficiali al SEM del suddetto cemento additivato con differenti sostanze (acqua, PEG 400, etil-lattato, glicerina) in diverse quantità. Si è passati di poi a testare il campione dalle caratteristiche più vicine all’obiettivo su disco di dentina con il permeabilimetro di Pashley e successivamente, si sono osservati dischi di dentina dopo l’applicazione del cemento e dopo attacco acido al SEM.

Diffusion de la lumière dans les milieux complexes à base de cristaux liquides

Cette thèse présente les étapes de fabrication et les résultats de la caractérisation des modèles de tissu biologique fabriqués en utilisant des cristaux liquides et des polymères qui permettent de contrôler la diffusion et la transmission de la lumière par un champ électrique. Ce champ électrique entraîne un changement d’orientation des molécules de cristaux liquides, ce qui induit des variations locales de l’indice de réfraction dans ces matériaux. Nous avons utilisé ce contrôle de l’indice de réfraction pour contrôler le niveau de diffusion et de transmission dans différents types d’échantillons. Les échantillons utilisés sont faits a) de cristaux liquides purs, b) de sphères de polymère dans un environnement de cristaux liquides, c) de cristaux liquides ou de gouttelettes de cristaux liquides dans un environnement de polymère. Les travaux réalisés nous ont permis de proposer une méthode électro-optique pour simuler, à l’aide de cristaux liquides, des milieux diffusants tels que les tissus biologiques. Dans la recherche de modèles, nous avons montré qu’il est possible de contrôler, par la fréquence du champ électrique, des gouttelettes de cristaux liquides dispersées dans une matrice de polymère contenant des ions lithium. Une sensibilité sélective à la fréquence de la tension électrique appliquée en fonction de la taille des gouttelettes est observée. Par la suite, nous avons démontré l’effet de « quenching » interférentiel de la diffusion pour une sonde optique cohérente en étudiant des modèles non alignés (clustérisés) de cristaux liquides. Nous avons aussi démontré des applications potentielles de ce phénomène tel le filtrage en longueur d’onde par l’ajustement d’un champ électrique. Nous avons ensuite démontré que l’utilisation des cristaux liquides - dits « dual-frequency » - permet une modulation rapide des états ou des structures du matériau ainsi que de la transmission et de la diffusion de lumière de ce dernier. Enfin, nous avons aussi découvert que ces modèles peuvent être contrôlés pour retrouver le degré de polarisation de la lumière diffusée.

Mécanisme de salissage et de nettoyage en surface de matériaux polymères

Résumé: Le développement de l’industrie des polymères fourni de plus en plus de choix pour la formulation de matériaux pour les couvre-planchers. Les caoutchoucs, le PVC et le linoleum sont les polymères habituellement utilisés dans l’industrie des couvre-planchers. Ce projet répond à un problème de facilité de nettoyage des couvre-planchers de caoutchouc qui sont reconnus pour être mous, collants et ayant une surface rugueuse. L’INTRODUCTION couvrira l’état actuel de la recherche sur les couvre-planchers, surtout en regard au problème de la «nettoyabilité». La théorie pertinente et les informations générales sur les polymères, les composites polymériques et la science des surfaces seront introduites au CHAPITRE 1. Ensuite, le CHAPITRE 2 couvrira la méthode utilisée pour déterminer la nettoyabilité, l’évaluation des résultats ainsi que l’équipement utilise. Le CHAPITRE 3, discutera des premières expériences sur l’effet de la mouillabilité, la rugosité et la dureté sur la facilité de nettoyage des polymères purs. Plusieurs polymères ayant des surfaces plus ou moins hydrophobes seront investigués afin d’observer leur effet sur la nettoyabilité. L’effet de la rugosité sur la nettoyabilité sera investigué en imprimant une rugosité définie lors du moulage des échantillons; l’influence de la dureté sera également étudiée. Ensuite, un modèle de salissage/nettoyage sera établi à partir de nos résultats et observations afin de rationaliser les facteurs, ou « règles », qui détrminent la facilité de nettoyage des surfaces. Finalement, la réticulation au peroxyde sera étudiée comme une méthode de modification des polymères dans le but d’améliorer leur nettoyabilité; un mécanisme découlant des résultats de ces études sera présenté. Le CHAPITRE 4 étendra cette recherche aux mélanges de polymères; ces derniers servent habituellement à optimiser la performance des polymères purs. Dans ce chapitre, les mêmes tests discutés dans le CHAPITRE 3 seront utilisés pour vérifier le modèle de nettoyabilité établi ci-haut. De plus, l’influence de la non-miscibilité des mélanges de polymères sera discutée du point de vue de la thermodynamique (DSC) et de la morphologie (MEB). L’utilisation de la réticulation par peroxyde sera étudié dans les mélanges EPDM/ (E-ran-MAA(Zn)-ran-BuMA) afin d’améliorer la compatibilité de ces polymères. Les effets du dosage en agent de réticulation et du temps de cuisson seront également examinés. Finalement, un compatibilisant pré-réticulé a été développé pour les mélanges ternaires EPDM/ (E-ran-MAA(Zn)-ran-BuMA)/ HSR; son effet sur la nettoyabilité et sur la morphologie du mélange sera exposé.

Composites and foams based on polylactic acid (PLA)

Cette étude est destinée à la production et à la caractérisation des composites d’acide polylactique (PLA) et des fibres naturelles (lin, poudre de bois). Le moussage du PLA et ses composites ont également été étudiés afin d’évaluer les effets des conditions de moulage par injection et du renfort sur les propriétés finales de ces matériaux. Dans la première partie, les composites constitués de PLA et des fibres de lin ont été produits par extrusion suivit par un moulage en injection. L’effet de la variation du taux de charge (15, 25 et 40% en poids) sur les caractéristiques morphologique, mécanique, thermique et rhéologique des composites a été évalué. Dans la deuxième étape, la poudre de bois (WF) a été choisie pour renforcer le PLA. La préparation des composites de PLA et WF a été effectuée comme dans la première partie et une série complète de caractérisations morphologique, mécanique, thermique et l’analyse mécanique dynamique ont été effectués afin d’obtenir une évaluation complète de l’effet du taux de charge (15, 25 et 40% en poids) sur les propriétés du PLA. Finalement, la troisième partie de cette étude porte sur les composites de PLA et de renfort naturel afin de produire des composites moussés. Ces mousses ont été réalisées à l’aide d’un agent moussant exothermique (azodicarbonamide) via le moulage par injection, suite à un mélange du PLA et de fibres naturelles. Dans ce cas, la charge d’injection (quantité de matière injectée dans le moule: 31, 33, 36, 38 et 43% de la capacité de la presse à injection) et la concentration en poudre de bois (15, 25 et 40% en poids) ont été variées. La caractérisation des propriétés mécanique et thermique a été effectuée et les résultats ont démontré que les renforts naturels étudiés (lin et poudre de bois) permettaient d’améliorer les propriétés mécaniques des composites, notamment le module de flexion et la résistance au choc du polymère (PLA). En outre, la formation de la mousse était également efficace pour le PLA vierge et ses composites car les masses volumiques ont été significativement réduites.

Levier synthétique de silice : une approche pour fonctionnaliser les surfaces hydroxylées

La présente recherche couvre les premiers essais d’une nouvelle méthode de fonctionnalisation chimique de surfaces hydroxylées. La méthode consiste à faire réagir ladite surface avec un réactif en excès, le tétrachlorure de silicium (SiCl4), rendant celle-ci chimiquement réactive à n’importe quel alcool externe ajouté par la suite au milieu. L’alcool externe modifie les propriétés de surface du substrat dépendamment de sa composition. Une multitude de fonctionnalités chimiques peuvent être présentes sur l’alcool externe et ce sont elles qui dictent les nouvelles propriétés de surface. Dans l’étude présente, les substrats étudiés ont été la cellulose microcristalline commerciale (MCC), la fibre de chanvre délignifiée et la corde de lin. La MCC est une cellulose fortement hydrolysée et purifiée ayant une structure cristalline la rendant insoluble. L’absence d’impuretés pouvant engendrer des interférences est la raison majeure pour laquelle ce substrat a été employé en premier. Avec des alcools tels que le 1-décanol, le 10-undécènol et le PEG-400, les propriétés de surfaces ont été ajustées et ont permis les premières applications comme substrat fibreux dans des composites de LDPE et de PLA. Une fois modifiés avec le 1-décanol et le 10-undécènol, les substrats ont montré des propriétés surfaciques hydrophobes n’absorbant plus l’eau et montrant des angles de contacts supérieurs à 90o avec celle-ci. Des mélanges à 17 et à 50 % massiques de ces substrats modifiés ont donc été faits avec le LDPE et une caractérisation complète des composites a été effectuée. Les tests mécaniques des composites modifiés de 17 % massique de MCC et de corde ont démontré une claire adhésion substrat-matrice par l’augmentation de la contrainte maximale ainsi que de l’élongation à la rupture. Pour ce qui est des substrats avec PEG-400, la fonctionnalisation a été démontrée et des composites MCC-PLA ont été faits. La modification de la MCC a engendré un changement des propriétés mécaniques sans toutefois surpasser le PLA de départ. Néanmoins, dans tous les cas, l’adhésion substrat-matrice a été améliorée par la réaction et a pu être démontrée par l’étude des fractures et des coupes microtomes au MEB. Finalement, la dispersion et les interactions à l’intérieur des composites de MCC à 17 et à 50 % ont été observées par rhéologie. Les composites modifiés ont montré une meilleure dispersion comparativement aux composites de MCC qui eux engendrent même la formation de réseau substrat-substrat.

Fc-fusion mimetics

The Fc-fusion mimetic RpR 2 was prepared by disulfide bridging conjugation using a PEG in the place of the Fc. RpR 2 displayed higher affinity for VEGF than aflibercept caused primarily by a slower dissociation rate, which can prolong a drug at its site of action. RpRs have considerable potential for development as stable, organ specific therapeutics.

An anti-TNF--α antibody mimetic to treat ocular inflammation

Infliximab is an antibody that neutralizes TNF-α and is used principally by systemic administration to treat many inflammatory disorders. We prepared the antibody mimetic Fab-PEG-Fab (FpFinfliximab) for direct intravitreal injection to assess whether such formulations have biological activity and potential utility for ocular use. FpFinfliximab was designed to address side effects caused by antibody degradation and the presence of the Fc region. Surface plasmon resonance analysis indicated that infliximab and FpFinfliximab maintained binding affinity for both human and murine recombinant TNF-α. No Fc mediated RPE cellular uptake was observed for FpFinfliximab. Both Infliximab and FpFinfliximab suppressed ocular inflammation by reducing the number of CD45+ infiltrate cells in the EAU mice model after a single intravitreal injection at the onset of peak disease. These results offer an opportunity to develop and formulate for ocular use, FpF molecules designed for single and potentially multiple targets using bi-specific FpFs.