Role of two UDP-Glycosyltransferases from the L group of arabidopsis in resistance against pseudomonas syringae

The role of the salicylic acid (SA) glycosides SA 2-O-β-D-glucose (SAG), SA glucose ester (SGE) and the glycosyl transferases UGT74F1 and UGT74F2 in the establishment of basal resistance of Arabidopsis against Pseudomonas syringae pv tomato DC3000 (Pst) was investigated. Both mutants altered in the corresponding glycosyl transferases (ugt74f1 and ugt74f2) were affected in their basal resistance against Pst. The mutant ugt74f1 showed enhanced susceptibility, while ugt74f2 showed enhanced resistance against the same pathogen. Both mutants have to some extent, altered levels of SAG and SGE compared to wild type plants, however, in response to the infection, ugt74f2 accumulated higher levels of free SA until 24 hpi compared to wild type plants while ugt74f1 accumulated lower SA levels. These SA levels correlated well with reduced expression in PR1 and EDS1 in ugt74f1. In contrast, ugt74f2 has enhanced expression of Enhanced Disease Susceptibility 1 (EDS1) but a strong reduction in the expression of several jasmonate (JA)-dependent genes. Bacterial infection interfered with the expression of Fatty Acid Desaturase (FAD), Lipoxygenase2 (LOX2), carboxyl methyltransferase1 (BSMT1) and 9-cis-epoxycarotenoid dioxygenase (NCED3) genes in ugt74f1, thus promoting an antagonistic effect with SA-signalling and leading to enhanced bacterial growth. UGT74F2 might be a target for bacterial effectors since bacterial mutants affected in effector synthesis were impaired in inducing UGT74F2 expression. These results suggest that UGT74F2 negatively influences the accumulation of free SA, hence leading to an increased susceptibility due to reduced SA levels and increased expression of the JA and ABA markers LOX-2, FAD and NCED-3.

Structural Insight into Multivalent Galactoside Binding to Pseudomonas aeroginosa lectin LecA

Multivalent galactosides inhibiting Pseudomonas aeruginosa biofilms may help control this problematic pathogen. To understand the binding mode of tetravalent glycopeptide dendrimer GalAG2 [(Gal-β-OC6H4CO-Lys-Pro-Leu)4(Lys-Phe-Lys-Ile)2Lys-His-Ile-NH2] to its target lectin LecA, crystal structures of LecA complexes with divalent analog GalAG1 [(Gal-β-OC6H4CO-Lys-Pro-Leu)2Lys-Phe-Lys-Ile-NH2] and related glucose-triazole linked bis-galactosides 3u3 [Gal-β-O(CH2)n-(C2HN3)-4-Glc-β-(C2HN3)-[β-Glc-4-(N3HC2)]2-(CH2)n-O-β-Gal (n = 1)] and 5u3 (n = 3) were obtained, revealing a chelate bound 3u3, cross-linked 5u3, and monovalently bound GalAG1. Nevertheless, a chelate bound model better explaining their strong LecA binding and the absence of lectin aggregation was obtained by modeling for all three ligands. A model of the chelate bound GalAG2·LecA complex was also obtained rationalizing its unusually tight LecA binding (KD = 2.5 nM) and aggregation by lectin cross-linking. The very weak biofilm inhibition with divalent LecA inhibitors suggests that lectin aggregation is necessary for biofilm inhibition by GalAG2, pointing to multivalent glycoclusters as a unique opportunity to control P. aeruginosa biofilms.

Multivalency effects in Pseudomonas aeruginosa biofilm inhibition and dispersal by glycopeptide dendrimers targeting lectin LecA

The galactose specific lectin LecA partly mediates the formation of antibiotic resistant biofilms by Pseudomonas aeruginosa, an opportunistic pathogen causing lethal airways infections in immunocompromised and cystic fibrosis patients, suggesting that preventing LecA binding to natural saccharides might provide new opportunities for treatment. Here 8-fold (G3) and 16-fold (G4) galactosylated analogs of GalAG2, a tetravalent G2 glycopeptide dendrimer LecA ligand and P. aeruginosa biofilm inhibitor, were obtained by convergent chloroacetyl thioether (ClAc) ligation between 4-fold or 8-fold chloroacetylated dendrimer cores and digalactosylated dendritic arms. Hemagglutination inhibition, isothermal titration calorimetry and biofilm inhibition assays showed that G3 dendrimers bind LecA slightly better than their parent G2 dendrimers and induce complete biofilm inhibition and dispersal of P. aeruginosa biofilms, while G4 dendrimers show reduced binding and no biofilm inhibition. A binding model accounting for the observed saturation of glycopeptide dendrimer galactosyl groups and LecA binding sites is proposed based on the crystal structure of a G3 dendrimer LecA complex.

In Vitro Activity of the Novel Antimicrobial Peptide Dendrimer G3KL against Multidrug-Resistant Acinetobacter baumannii and Pseudomonas aeruginosa.

The in vitro activity of the novel antimicrobial peptide dendrimer G3KL was evaluated against 32 Acinetobacter baumannii (including 10 OXA-23, 7 OXA-24, and 11 OXA-58 carbapenemase producers) and 35 Pseudomonas aeruginosa (including 18 VIM and 3 IMP carbapenemase producers) strains and compared to the activities of standard antibiotics. Overall, both species collections showed MIC50/90 values of 8/8 μg/ml and minimum bactericidal concentrations at which 50% or 90% of strains tested are killed (MBC50/90) of 8/8 μg/ml. G3KL is a promising molecule with antibacterial activity against multidrug-resistant and extensively drug-resistant A. baumannii and P. aeruginosa isolates.

Die Kultur der Croton

Von Ph. Harms

Bacteriemias por Pseudomonas Aeruginosa : análisis comparativo

Objetivos: Analizar características clínicas y morbimortalidad de las bacteriemias por Pseudomonas aeruginosa comparadas con Klebsiella spp en pacientes hospitalizados en un Servicio de Clínica Médica de adultos. Material y métodos: Estudio protocolizado, descriptivo, observacional de 15 años de duración. Criterio de inclusión: 2 o más hemocultivos positivos para el germen. Los datos fueron procesados en EPI Info 6.04. El criterio de significación se estableció para un error alfa menor del 5%. Resultados: Se detectaron en el período de estudio 282 bacteriemias por bacilos gram negativos de las cuales 19 fueron por Pseudomonas aeruginosa (6.7%) y 76 por Klebsiella (26.9%). No se encontraron diferencias significativas entre ambas en cuanto a edad media [53.9 años (DS±17.9 ) vs 58.7 años (DS±15.2)], sexo (femenino: 26.3 vs 38.2%) ni complicaciones (77.8 vs 77.3%). La presencia de neutropenia (52.6 vs 9.2%)(p<0.0001), comorbilidad mayor (94.7 vs 68.4%)(p<0.05), neoplasias (47.4 vs 22.4%)(p<0.05), uso de corticoides (21.1 vs 3.9%)(p<0.05), e inmunosupresores (31.6 vs 7.9%)(p<0.01), trombocitopenia (77.7 vs 49.3%) (p<0.05) y leucopenia (52.6 vs 21.3%)(p<0.01) fueron más frecuentes en las bacteriemias por P. aeruginosa. Resultó más frecuente la hipoalbuminemia (88.5 vs 37.5%)(p<0.001) en las bacteriemias por Klebsiella spp. No se encontraron diferencias significativas en cuanto a puerta de entrada conocida (78.9 vs 77.6%), anemia (84.2 vs 71.2%), complicaciones infecciosas (84.2 vs 73.7%), descompensación de comórbidas (55.6 vs 51.3%) y encefalopatía (36.8 vs 57.9%)(pNS). La mortalidad precoz (dentro de los 7 días) fue significativamente mayor en el grupo de las bacteriemias por P.aeruginosa (57.1 vs 12%) (p<0.01), sin diferencias en la mortalidad global (36.8 vs 32.9%) (pNS). Conclusiones: Las bacteriemias por P.aeruginosa comparadas con las producidas por Klebsiella spp. se asociaron significativamente a mayor frecuencia de neoplasias, leucopenia, trombocitopenia y neutropenia, comorbilidad mayor, uso de corticoides e inmunosupresores, y a mortalidad precoz.

Corrosão do betão armado induzida por carbonatação e pela presença de cloretos

Este trabalho centra-se na problemática da corrosão do betão armado induzida por carbonatação e pela presença de cloretos. Após uma pequena reflexão sobre a durabilidade das estruturas de betão armado e da diminuição da sua vida útil por efeitos de corrosão, é feita uma descrição mais detalhada dos principais efeitos resultantes da carbonatação e da presença de cloretos. São identificados os factores externos e internos que influenciam o aparecimento da carbonatação e da sua progressão (profundidade) e apresentados os métodos mais correntes que permitem a quantificação e previsão deste fenómeno. São também abordadas as causas e efeitos da presença de cloretos, nomeadamente no que diz respeito aos mecanismos de transporte, aos factores que influenciam a velocidade e penetração, bem como os métodos que permitem a determinar a presença de cloretos nas estruturas. De seguida são abordados aspectos relacionados com a protecção e reabilitação de estruturas afectadas pelos dois processos de degradação, nomeadamente a utilização de técnicas electroquímicas, de revestimentos, armaduras especiais e inibidores de corrosão. Por fim, é apresentado um caso de estudo envolvendo os muros de contenção situados num complexo habitacional do concelho de Câmara de Lobos, em parte afectados pelos processos abordados no trabalho, onde são apresentados alguns resultados dos ensaios laboratoriais para a quantificação da carbonatação e o teor de cloretos. O estudo realizado permitiu tirar ilações interessantes quer sobre cada um dos processos, quer sobre o efeito conjunto da carbonatação e presença cloretos, dado que a presença da carbonatação influencia directamente a penetração de cloretos e potencia os seus efeitos. Tendo em conta a morfologia da Madeira e o facto de a construção ser feita a pouca distância do mar, pretende-se que o trabalho possa servir de apoio quer à realização de novos projectos, quer à protecção/reabilitação de estrutura.