Estudo biológico, morfológico e molecular de duas cepas de Trypanosoma Cruzi (Kinetoplastida, Trypanosomatidae) isoladas de exemplares de Triatoma Sordida e Triatoma Rubrovaria (Hemiptera, Reduviidae)

A doença de Chagas, conhecida também como tripanossomíase americana, foi descrita por Carlos Ribeiro Justiniano das Chagas em 1909 em Lassance, Minas Gerais. Ela é causada pelo protozoário Trypanosoma cruzi e transmitido ao homem por insetos hemípteros conhecidos como barbeiros dos quais os gêneros mais importantes são Panstrongylus, Rhodinus e Triatoma. Essa zoonose atinge aproximadamente 10 milhões de pessoas em todo o mundo, principalmente na América Latina. Sabe-se que esse parasito apresenta grande variabilidade intraespecífica evidenciada por diferenças na patologia, virulência, constituição antigênica e habilidade de evasão à resposta imunológica e essa diversidade pode estar associada à sua adaptação e sobrevivência em diferentes hospedeiros. A diversidade patogênica, imunológica e morfológica inerente a esse flagelado dependem de fatores ainda indeterminados, como variação regional e individual da doença humana em infecções naturais e experimentais. Com o intuito de contribuir para ampliar o conhecimento sobre as populações de T. cruzi, propõe-se o estudo biológico, morfológico e molecular de duas cepas isoladas dos exemplares, Triatoma sordida (SI7) e Triatoma rubrovaria (QMM12) por Rosa et al. 2004; 2008 coletados nos Estados da Bahia e Rio Grande do Sul, respectivamente.

Síntese e avaliação biológica de novos compostos das séries LAPDESF FUR-PQ E LAPDESF FUR-TS contra Trypanosoma cruzi

Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado de São Paulo (FAPESP)

Estudo genotípico de seis cepas de Trypanosoma cruzi (Kinetoplastida, Trypanosomatidae) isoladas de exemplares de Rhodnius Montenegrensis, Triatoma Rubrovaria e Triatoma Sordida (hemiptera, reduviidae)

A doença de Chagas, causada pelo protozoário flagelado Trypanosoma cruzi, foi descrita pelo pesquisador brasileiro Carlos Chagas em 1909. É transmitida ao homem por insetos hemípteros conhecidos como barbeiros dos quais os gêneros mais importantes são Panstrongylus, Rhodnius e Triatoma. Essa zoonose representa um risco para aproximadamente 20 milhões de pessoas em todo o mundo, principalmente na América Latina. Para tentar explicar as diferentes manifestações observadas na doença de Chagas, vários estudos foram realizados com intuito de averiguar as possíveis correlações entre as formas clínicas com a variabilidade genética do parasito. Algumas hipóteses estão relacionadas provavelmente ao fato de a doença ser um processo multifatorial, em que tanto aspectos do parasito como do hospedeiro estão inter-relacionados ou ainda a escolha inadequada de alvos como marcadores de patogenicidade na tentativa de estabelecer a correlação entre as formas clínicas e a variabilidade genética do parasito. Com o intuito de contribuir para ampliar o conhecimento sobre as populações de T. cruzi, foi realizada a cinética de crescimento em meio LIT e o estudo genotípico de seis cepas de T. cruzi isoladas de exemplares de R. montenegrensis, T. rubrovaria e T. sordida por meio de marcadores genotípicos utilizando as sequência dos genes 24Sα do DNA ribossomal, HSP60 e GPI.

Estudo biológico, morfológico e molecular de duas cepas de Trypanosoma Cruzi (Kinetoplastida, Trypanosomatidae) isoladas de exemplares de Triatoma Sordida e Triatoma Rubrovaria (Hemiptera, Reduviidae)

A doença de Chagas, conhecida também como tripanossomíase americana, foi descrita por Carlos Ribeiro Justiniano das Chagas em 1909 em Lassance, Minas Gerais. Ela é causada pelo protozoário Trypanosoma cruzi e transmitido ao homem por insetos hemípteros conhecidos como barbeiros dos quais os gêneros mais importantes são Panstrongylus, Rhodinus e Triatoma. Essa zoonose atinge aproximadamente 10 milhões de pessoas em todo o mundo, principalmente na América Latina. Sabe-se que esse parasito apresenta grande variabilidade intraespecífica evidenciada por diferenças na patologia, virulência, constituição antigênica e habilidade de evasão à resposta imunológica e essa diversidade pode estar associada à sua adaptação e sobrevivência em diferentes hospedeiros. A diversidade patogênica, imunológica e morfológica inerente a esse flagelado dependem de fatores ainda indeterminados, como variação regional e individual da doença humana em infecções naturais e experimentais. Com o intuito de contribuir para ampliar o conhecimento sobre as populações de T. cruzi, propõe-se o estudo biológico, morfológico e molecular de duas cepas isoladas dos exemplares, Triatoma sordida (SI7) e Triatoma rubrovaria (QMM12) por Rosa et al. 2004; 2008 coletados nos Estados da Bahia e Rio Grande do Sul, respectivamente.

Síntese e avaliação biológica de novos compostos das séries LAPDESF FUR-PQ E LAPDESF FUR-TS contra Trypanosoma cruzi

Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado de São Paulo (FAPESP)

Gastrin-Releasing Peptide Receptor Antagonism Induces Protection from Lethal Sepsis: Involvement of Toll-like Receptor 4 Signaling

In sepsis, toll-like receptor (TLR)-4 modulates the migration of neutrophils to infectious foci, favoring bacteremia and mortality. In experimental sepsis, organ dysfunction and cytokines released by activated macrophages can be reduced by gastrin-releasing peptide (GRP) receptor (GRPR) antagonist RC-3095. Here we report a link between GRPR and TLR-4 in experimental models and in sepsis patients. RAW 264.7 culture cells were exposed to lipopolysaccharide (LPS) or tumor necrosis factor (TNF)-alpha and RC-3095 (10 ng/mL), Male Wistar rats were subjected to cecal ligation and puncture (CLP), and RC-3095 was administered (3 mg/kg, subcutaneously); after 6 h, we removed the blood, bronchoalveolar lavage, peritoneal lavage and lung. Human patients with a clinical diagnosis of sepsis received a continuous infusion with RC-3095 (3 mg/kg, intravenous) over a period of 12 h, and plasma was collected before and after RC-3095 administration and, in a different set of patients with systemic inflammatory response syndrome (SIRS) or sepsis. GRP plasma levels were determined. RC-3095 inhibited TLR-4, extracellular-signal-related kinase (ERK)-1/2, Jun NH2-terminal kinase (JNK) and Akt and decreased activation of activator protein 1 (AP-1), nuclear factor (NF)-kappa B and interleukin (IL)-6 in macrophages stimulated by LPS. It also decreased IL-6 release from macrophages stimulated by TNF-alpha. RC-3095 treatment in CLP rats decreased lung TLR-4, reduced the migration of cells to the lung and reduced systemic cytokines and bacterial dissemination. Patients with sepsis and systemic inflammatory response syndrome have elevated plasma levels of GRP which associates with clinical outcome in the sepsis patients. These findings highlight the role of GRPR signaling in sepsis outcome and the beneficial action of GRPR antagonists in controlling the inflammatory response in sepsis through a mechanism involving at least inhibition of TLR-4 signaling. Online address: http://www.molmed.org doi: 10.2119/molmed.2012.00083

ROLE OF FOCAL ADHESION KINASE IN LUNG REMODELING OF ENDOTOXEMIC RATS

Despite significant advances in the care of critically ill patients, acute lung injury continues to be a complex problem with high mortality. The present study was designed to characterize early lipopolysaccharide (LPS)-induced pulmonary injury and small interfering RNA targeting focal adhesion kinase (FAK) as a possible therapeutic tool in the septic lung remodeling process. Male Wistar rats were assigned into endotoxemic group and control group. Total collagen deposition was performed 8, 16, and 24 h after LPS injection. Focal adhesion kinase expression, interstitial and vascular collagen deposition, and pulmonary mechanics were analyzed at 24 h. Intravenous injection of small interfering RNA targeting FAK was used to silence expression of the kinase in pulmonary tissue. Focal adhesion kinase, total collagen deposition, and pulmonary mechanics showed increased in LPS group. Types I, III, and V collagen showed increase in pulmonary parenchyma, but only type V increased in vessels 24 h after LPS injection. Focal adhesion kinase silencing prevented lung remodeling in pulmonary parenchyma at 24 h. In conclusion, LPS induced a precocious and important lung remodeling. There was fibrotic response in the lung characterized by increased amount in total and specific-type collagen. These data may explain the frequent clinical presentation during sepsis of reduced lung compliance, oxygen diffusion, and pulmonary hypertension. The fact that FAK silencing was protective against lung collagen deposition underscores the therapeutic potential of FAK targeting by small interfering RNA.

SMALL INTERFERING RNA TARGETING FOCAL ADHESION KINASE PREVENTS CARDIAC DYSFUNCTION IN ENDOTOXEMIA

Sepsis and septic shock are associated with cardiac depression. Cardiovascular instability is a major cause of death in patients with sepsis. Focal adhesion kinase (FAK) is a potential mediator of cardiomyocyte responses to oxidative and mechanical stress. Myocardial collagen deposition can affect cardiac compliance and contractility. The aim of the present study was to determine whether the silencing of FAK is protective against endotoxemia-induced alterations of cardiac structure and function. In male Wistar rats, endotoxemia was induced by intraperitoneal injection of lipopolysaccharide (10 mg/kg). Cardiac morphometry and function were studied in vivo by left ventricular catheterization and histology. Intravenous injection of small interfering RNA targeting FAK was used to silence myocardial expression of the kinase. The hearts of lipopolysaccharide-injected rats showed collagen deposition, increased matrix metalloproteinase 2 activity, and myocyte hypertrophy, as well as reduced 24-h +dP/dt and -dP/dt, together with hypotension, increased left ventricular end-diastolic pressure, and elevated levels of FAK (phosphorylated and unphosphorylated). Focal adhesion kinase silencing reduced the expression and activation of the kinase in cardiac tissue, as well as protecting against the increased collagen deposition, greater matrix metalloproteinase 2 activity, and reduced cardiac contractility that occur during endotoxemia. In conclusion, FAK is activated in endotoxemia, playing a role in cardiac remodeling and in the impairment of cardiac function. This kinase represents a potential therapeutic target for the protection of cardiac function in patients with sepsis.

Hypertonic saline solution reduces the inflammatory response in endotoxemic rats

OBJECTIVE: Volume replacement in septic patients improves hemodynamic stability. This effect can reduce the inflammatory response. The objective of this study was to evaluate the effect of 7.5% hypertonic saline solution versus 0.9% normal saline solution for volume replacement during an inflammatory response in endotoxemic rats. METHODS: We measured cytokines (serum and gut), nitrite, and lipid peroxidation (TBARS) as indicators of oxidative stress in the gut. Rats were divided into four groups: control group (C) that did not receive lipopolysaccharide; lipopolysaccharide injection without treatment (LPS); lipopolysaccharide injection with saline treatment (LPS + S); and lipopolysaccharide injection with hypertonic saline treatment (LPS + H). Serum and intestine were collected. Measurements were taken at 1.5, 8, and 24 h after lipopolysaccharide administration. RESULTS: Of the four groups, the LPS + H group had the highest survival rate. Hypertonic saline solution treatment led to lower levels of IL-6, IL-10, nitric oxide, and thiobarbituric acid reactive substances compared to 0.9% normal saline. In addition, hypertonic saline treatment resulted in a lower mortality compared to 0.9% normal saline treatment in endotoxemic rats. Volume replacement reduced levels of inflammatory mediators in the plasma and gut. CONCLUSION: Hypertonic saline treatment reduced mortality and lowered levels of inflammatory mediators in endotoxemic rats. Hypertonic saline also has the advantage of requiring less volume replacement.

Septic shock in older people: a prospective cohort study

Abstract Background Septic shock is the first cause of death in Intensive Care Units. Despite experimental data showing increased inflammatory response of aged animals following infection, the current accepted hypothesis claims that aged patients are immunocompromised, when compared to young individuals. Results Here, we describe a prospective cohort study designed to analyze the immune profile of this population. Conclusion Older people are as immunocompetent as the young individual, regarding the cytokines, chemokines and growth factors response to devastating infection.

A importância das práticas no desenvolvimento da literacia emergente

A investigação tem demonstrado que as crianças, informalmente, atribuem valor e significado à escrita. Desta forma, quanto mais precoce for o contacto e o envolvimento da criança com o código escrito, maior será o seu desenvolvimento (Martins, 2007). Assim sendo, o jardim-de-infância deverá ser organizado num ambiente promotor de aprendizagens, por forma a possibilitar à criança o contacto com o código escrito (Mata, 2008). Tendo por base tal premissa, este estudo pretende conhecer, compreender e identificar as práticas na promoção da Literacia Emergente em contexto de jardim-de-infância, caraterizando as conceções e a funcionalidade da leitura e da escrita. Tendo-se procedido a um conjunto de atividades neste âmbito numa sala de 5 anos, para verificar qual o desenvolvimento das crianças a esse nível. O estudo é de carácter qualitativo e interpretativo sendo que para a recolha de dados recorreu-se à entrevista, observação e análise de documentos. Estes surgem em diversos suportes, sendo que são produzidos pelas crianças e recolhidos pela estagiária. A apresentação dos dados surge tripartida. Primeiramente, apresentam-se as estratégias utilizadas pela educadora, seguidamente as atividades pensadas em conjunto com a educadora e a estagiária e finalmente os dados produzidos pelas crianças, quer de forma induzida pela estagiária, quer de forma espontânea. Os resultados obtidos neste estudo evidenciam que a educadora tem práticas conducentes ao desenvolvimento da Literacia Emergente, sendo que as crianças revelaram comportamentos ao nível da conceptualização e funcionalidade da escrita. O envolvimento precoce e sistemático que as crianças do estudo possuem com o código escrito, permite-lhes estabelecer hipóteses sobre a combinação e distribuição de letras para que as possam ler (Martins & Niza, 1998; Batista, Viana & Barbeiro, 2011). As crianças revelaram ainda conhecimentos acerca da funcionalidade da escrita em diferentes contextos, bem como a apropriação de regras gramaticais próximas das regras do código escrito (Cunha & Cintra, 2005). O presente estudo sugere estudos mais abrangentes a outras populações, bem como a outras educadoras com diferentes opções educativas com o intuito de melhorar as práticas no âmbito da Literacia Emergente, e consequentemente o desempenho das crianças a este nível.

Avaliação cefalométrica das alterações transversais e verticais ocorridas em pacientes submetidos à expansão rápida da maxila assistida cirurgicamente

O objetivo desta pesquisa foi de avaliar as alterações dentárias e esqueléticas nos sentidos transversal e vertical produzidas pela Expansão Rápida da Maxila Assistida Cirurgicamente (ERM-AC). A amostra foi composta por 17 pacientes com idade média de 24 anos e 1 mês, sendo 11 do sexo feminino e 6 do masculino, que apresentavam uma deficiência de crescimento transversal da maxila, e não tinham sido submetidos a tratamento ortodôntico previamente e necessitavam de ERM-AC como parte de seus tratamentos ortodônticos. Todos os pacientes foram radiografados nas fases pré-expansão, imediatamente após o período de três meses de contenção com o próprio aparelho, totalizando assim uma amostra de 51 telerradiografias em normal frontal. Medidas angulares e lineares foram obtidas a partir dos traçados cefalométricos e analisadas estatisticamente. Concluiu-se que a ERM-AC produziu um aumento da cavidade nasal e da largura maxilar, que permaneceu constante após o período de três meses de contenção. As distâncias intermolares superior e inferior aumentaram após a expansão da maxila, e se mantiveram estáveis, durante o período de contenção. Houve afastamento entre os incisivos centrais superiores, sendo o movimento maior em nível apical em relação às coroas, o que produziu uma divergência das raízes após a expansão. Após o período de contenção, houve maior movimento das coroas às suas posições originais. Avaliando o comportamento vertical da face, notou-se um aumento da altura facial ântero-inferior. (AU)

Implementação da Pedagogia Genológica com Alunos com Necessidades Educativas Especiais - Contributos para uma Literacia Inclusiva

O presente Relatório inscreve-se no Mestrado de Educação Especial – Domínio Cognitivo-Motor e apresenta a investigação que visou testar a eficácia da pedagogia Reading to Learn (R2L), de David Rose (2013), junto de um grupo de alunos do 8ºano de escolaridade, com Necessidades Educativas Especiais no domínio cognitivo (ainda que sem o diagnóstico de Incapacidade Intelectual), a usufruírem de medidas de Educação Especial ao abrigo do Decreto-Lei 03/2008 de 07 de janeiro, numa Escola com 2º e 3º ciclos, de um Agrupamento de Escolas de grande dimensão, na zona oeste do país. Recorreu-se a um desenho Quasi-Experimental, no qual participaram 29 alunos distribuídos por um «grupo de intervenção» de cinco elementos com NEE e dois «grupos de testemunho» (1 e 2), compostos por cinco alunos com NEE e 19 sem NEE, respetivamente. O estudo foi composto por pré-teste, intervenção exclusiva para o grupo-alvo e pós-teste, procedendo-se à análise dos textos narrativos produzidos nos momentos inicial e final do estudo, e comparando-se o desempenho de uns e outros, mediante o nº de palavras e qualidade dos textos, aferida mediante referencial de análise do próprio programa R2L. Os resultados apurados apontam para um impacto bastante positivo do Programa R2L implementado junto do «grupo de intervenção», denotando-se uma evolução progressiva e significativa quer na extensão, quer na qualidade dos textos produzidos pelo grupo dos alunos sujeitos à intervenção. Do mesmo modo, percebeu-se que, do momento de pré-teste para o pós-teste, se registou uma diminuição da diferença entre «grupo de intervenção» e «grupo de testemunho 2», tanto na extensão como qualidade dos textos produzidos, enquanto as prestações dos elementos do «grupo de testemunho 1» tiveram melhorias menos expressivas. Também a opinião das docentes de Educação Especial, que acompanham os alunos intervencionados, confirma uma melhoria no plano das aprendizagens, decorrente de um maior envolvimento, motivação e capacidade de organização dos textos escritos.