MHC class II expression is regulated in dendritic cells independently of invariant chain degradation

We have investigated the mechanisms that control MHC class II (MHC II) expression in immature and activated dendritic cells (DC) grown from spleen and bone marrow precursors. Degradation of the MHC II chaperone invariant chain (li), acquisition of peptide cargo by MHC II, and delivery of MHC II-peptide complexes to the cell surface proceeded similarly in both immature and activated DC. However, immature DC reendocytosed and then degraded the MHC II-peptide complexes much faster than the activated DC. MHC II expression in DC is therefore not controlled by the activity of the protease(s) that degrade Ii, but by the rate of endocytosis of peptide-loaded MHC II. Late after activation, DC downregulated MHC II synthesis both in vitro and in vivo.

The trans-membrane protein p25 forms highly specialized domains that regulate membrane composition and dynamics

Trans-membrane proteins of the p24 family are abundant, oligomeric proteins predominantly found in cis-Golgi membranes. They are not easily studied in vivo and their functions are controversial. We found that p25 can be targeted to the plasma membrane after inactivation of its canonical KKXX motif (KK to SS, p25SS), and that p25SS causes the co-transport of other p24 proteins beyond the Golgi complex, indicating that wild-type p25 plays a crucial role in retaining p24 proteins in cis-Golgi membranes. We then made use of these observations to study the intrinsic properties of these proteins, when present in a different membrane context. At the cell surface, the p25SS mutant segregates away from both the transferrin receptor and markers of lipid rafts, which are enriched in cholesterol and glycosphingolipids. This suggests that p25SS localizes to, or contributes to form, specialized membrane domains, presumably corresponding to oligomers of p25SS and other p24 proteins. Once at the cell surface, p25SS is endocytosed, together with other p24 proteins, and eventually accumulates in late endosomes, where it remains confined to well-defined membrane regions visible by electron microscopy. We find that this p25SS accumulation causes a concomitant accumulation of cholesterol in late endosomes, and an inhibition of their motility - two processes that are functionally linked. Yet, the p25SS-rich regions themselves seem to-exclude not only Lamp1 but also accumulated cholesterol. One may envision that p25SS accumulation, by excluding cholesterol from oligomers, eventually overloads neighboring late endosomal membranes with cholesterol beyond their capacity (see Discussion). In any case, our data show that p25 and presumably other p24 proteins are endowed with the intrinsic capacity to form highly specialized domains that control membrane composition and dynamics. We propose that p25 and other p24 proteins control the fidelity of membrane transport by maintaining cholesterol-poor membranes in the Golgi complex.

GAIP participates in budding of membrane carriers at the trans-Golgi network

Galpha interacting protein (GAIP) is a regulator of G protein signaling protein that associates dynamically with vesicles and has been implicated in membrane trafficking, although its specific role is not yet known. Using an in vitro budding assay, we show that GAIP is recruited to a specific population of trans-Golgi network-derived vesicles and that these are distinct from coatomer or clathrin-coated vesicles. A truncation mutant (NT-GAIP) encoding only the N-terminal half of GAIP is recruited to trans -Golgi network membranes during the formation of vesicle carriers. Overexpression of NT-GAIP induces the formation of long, coated tubules, which are stabilized by microtubules. Results from the budding assay and from imaging in live cells show that these tubules remain attached to the Golgi stack rather than being released as carrier vesicles. NT-GAIP expression blocks membrane budding and results in the accumulation of tubular carrier intermediates. NT-GAIP-decorated tubules are competent to load vesicular stomatitis virus protein G-green fluorescent protein as post-Golgi, exocytic cargo and in cells expressing NT-GAIP there is reduced surface delivery of vesicular stomatitis virus protein G-green fluorescent protein. We conclude that GAIP functions as an essential part of the membrane budding machinery for a subset of post-Golgi exocytic carriers derived from the trans-Golgi network.

Alternatively spliced products of the human kinesin light chain 1 (KNS2) gene

Conventional kinesin is a microtubule-based molecular motor involved in the transport of membranous and non-membranous cargoes. The kinesin holoenzyme exists as a heterotetramer, consisting of two heavy chain and two light chain subunits. It is thought that one function of the light chains is to interact with the cargo. Alternative splicing of kinesin light chain pre-mRNA has been observed in lower organisms, although evidence for alternative splicing of the human gene has not been reported. We have identified 19 variants of the human KNS2 gene (KLC1) that are generated by alternative splicing of downstream exons, but calculate that KNS2 has the potential to produce 285919 spliceforms. Corresponding spliceforms of the mouse KLC1 gene were also identified. The alternative exons are all located 3' of exon 12 and the novel spliceforms produce both alternative carboxy termini and alternative 3' untranslated regions. The observation of multiple light chain isoforms is consistent with their proposed role in specific cargo attachment.

Dimensional X: a dificuldade na obten????o da informa????o em meio a problemas na gest??o de pessoas

Ant??nio foi convidado para assumir um cargo em que deveria gerenciar os sistemas de informa????o de um grande minist??rio. Com a miss??o inicial de fornecer uma informa????o sobre a for??a de trabalho, percebeu que havia problemas que iam muito al??m da simples utiliza????o desses sistemas, como a pol??tica de capacita????o de pessoal, a rotatividade de servidores, a falta de integra????o entre as ??reas e outros problemas na ??rea de gest??o de pessoas

G??nero, ra??a e espa??os de poder: o caso de Maria Ant??nia e Geraldo

O caso relata uma situa????o de promo????o em ??rg??o p??blico na qual dois funcion??rios ??? uma mulher negra e um homem branco - se mostram como candidatos ao cargo. S??o apresentados os perfis e habilidades profissionais dos dois servidores e, ao final, a decis??o tomada pelo Secret??rio, chefe de ambos. O estudo suscita discuss??es sobre pr??ticas discriminat??rias nos espa??os de poder das institui????es p??blicas e o papel do dirigente para combater ou difundir tais pr??ticas. Pode ser aplicado em cursos sobre lideran??a, gest??o de pessoas e ??tica e servi??o p??blico

Gentileza ou ass??dio: conflitos de g??nero e de ra??a nas rela????es de trabalho

Com o afastamento do chefe do setor por quest??es m??dicas, Carla, que j?? exercia eventualmente a chefia da equipe, tornou-se a substituta do cargo, s?? n??o contava com o ass??dio de Ricardo, funcion??rio querido por todos. As investidas foram ficando cada vez mais agressivas e Carla n??o sabia mais como lidar com a situa????o. Come??ou a ter problemas com a sua equipe e sofrer difama????es por parte de Ricardo. O cen??rio encontrado pelo chefe ao voltar da licen??a foi de uma equipe desestabilizada. O caso trata do tema de ass??dio moral, agregado ?? quest??o racial e de g??nero, e suscita discuss??o sobre como um dirigente deve atuar para evitar a pr??tica dos ass??dios moral e sexual na equipe que gerencia, bem como para remediar situa????es j?? consolidadas. Pode ser aplicado em cursos sobre lideran??a, gest??o de pessoas e ??tica e servi??o p??blico

H?? um g??nero mais adequado para determinada fun????o?

Carolina foi aprovada em concurso p??blico para cargo t??cnico de hidrot??cnico e assinou contrato de experi??ncia por 90 dias. Contudo, durante a realiza????o das atividades inerentes ao cargo, n??o recebeu nenhuma orienta????o do seu supervisor. No momento da avalia????o de desempenho, foi mal avaliada tanto pelo supervisor quanto por sua chefia, que desde o in??cio demonstrava que o cargo n??o era apropriado para mulheres. Por conta dessa avalia????o, Carolina buscou ajuda na Ouvidoria do ??rg??o, mas acabou sendo demitida. Optou, ent??o, por recorrer ?? Justi??a. O caso trata de situa????o na qual ?? colocada em xeque a quest??o de g??nero para determinada fun????o no servi??o p??blico. O estudo pode ser aplicado em cursos com enfoque em quest??es vinculadas ?? diversidade de g??nero, ??s posturas das chefias que lidam com avalia????o de desempenho, bem como ao papel da Ouvidoria

Passando do limite no ambiente de trabalho

Fernanda ?? servidora p??blica. Ap??s ter feito doutorado no exterior, retornou ao Brasil ??vida por aplicar seus novos conhecimentos em a????es desenvolvidas pelo minist??rio de origem. Contudo, seu novo superior imediato mostrou-se refrat??rio ?? servidora, demonstrando oposi????o sistem??tica e injustificada ??s suas ideias e ridicularizando-a em diversas oportunidades diante de seus pares e subordinados. As atribui????es de Fernanda foram paulatinamente retiradas, culminando na perda de seu cargo comissionado. A servidora tentou reagir, acionou o Departamento de Recursos Humanos do minist??rio e outros ??rg??os, mas nada adiantou. Fernanda, ao final, tomou uma atitude desesperada. O caso trata de ass??dio moral e de como tal situa????o se desenvolve dentro de um ??rg??o p??blico, sem que outros servidores e as unidades do ??rg??o se envolvam na quest??o. Ao final da narrativa, h?? quest??es para discuss??o que focam o ass??dio moral e seus desdobramentos

Programa Bolsa Fam??lia: financiando fam??lias para o desenvolvimento

O estudo de caso trata da implementa????o do Bolsa Fam??lia, um programa de transfer??ncia de renda para fam??lias pobres, condicionada ao atendimento de exig??ncias espec??ficas por parte dos benefici??rios (comumente conhecida como ???transfer??ncia condicionada de renda???). Ap??s a descri????o dos antecedentes, apontando experi??ncias em n??vel local que inspiraram a pol??tica nacional, o autor apresenta as fases de implementa????o do programa, identificando dificuldades, cr??ticas recebidas e solu????es encontradas pelo governo federal. Em seguida, documenta impactos na redu????o da pobreza e da desigualdade social, e analisa a expans??o do espa??o p??blico originada da experi??ncia do Bolsa Fam??lia. O caso ilustra situa????o que suscita reflex??o e an??lise dos alunos com rela????o ao desenho e desenvolvimento de programa complexo de pol??tica social, podendo se desdobrar em novas pesquisas sobre o Bolsa Fam??lia, seus fatores cr??ticos e de sucesso

Desenvolvimento pessoal e profissional

O caso retrata a situa????o de um especialista em pol??ticas p??blicas e gest??o governamental (EPPGG), rec??m-empossado, sem experi??ncia no setor p??blico e que ?? nomeado em cargo de coordena????o em um minist??rio. Ele dever?? gerenciar uma equipe respons??vel pelo acompanhamento de projetos em ??mbito nacional que apresenta baixos resultados. A equipe ?? heterog??nea quanto ?? capacita????o, situa????o funcional e sal??rios, al??m de apresentar pontos de conflito. Ap??s avaliar a situa????o, o gestor apresenta aos superiores sugest??es de a????es visando melhorar o desempenho da equipe

Avalia????o do desempenho de servidores em est??gio probat??rio

Conforme a legisla????o, ao entrar em exerc??cio, o servidor nomeado para cargo de provimento efetivo ficar?? sujeito a est??gio probat??rio, per??odo durante o qual sua aptid??o e capacidade para o exerc??cio das atribui????es do cargo estar??o sujeitas ?? avalia????o peri??dica de desempenho. O caso relata duas situa????es de aplica????o da Lei n?? 8.112/90 no item referente ao est??gio probat??rio: uma experi??ncia positiva e outra negativa. Ilustra situa????o que poder?? contribuir em discuss??es sobre gest??o de pessoas e lideran??a

A diretriz ministerial: ou seria uma sugest??o?

Este ?? um caso com dilemas ??ticos gerenciais t??picos do servi??o p??blico. Aborda a situa????o de um ministro que, ap??s anos na oposi????o, assume o governo e encontra em sua equipe de assessores de alto escal??o uma pessoa que liderou uma pol??tica combatida por ele e a qual pretende reverter. O ministro pede ao coordenador da equipe que aja imediatamente para afastar essa assessora, mesmo sabendo que a autoridade para isso ?? a Comiss??o do Servi??o P??blico e n??o o Minist??rio. O caso suscita a an??lise das vari??veis envolvidas na situa????o, os riscos da a????o e da ina????o, e a discuss??o sobre quest??es ??ticas

A hist??ria de Henrique: quando as habilidades de l??der s??o testadas ap??s a ascens??o profissional

Henrique, funcion??rio antigo de um importante programa governamental, ?? promovido ao mais alto cargo do programa. Devido a algumas posi????es e a????es ortodoxas, colegas e superiores come??aram a questionar o estilo e as iniciativas de Henrique. Ele, por sua vez, ao identificar as cr??ticas, voltou-se para fora da institui????o, transformando-se em ???embaixador do programa???, com viagens semanais e cada vez mais ausente. Seus subordinados tamb??m come??aram a se queixar e o Ministro finalmente mostrou insatisfa????o a respeito. Ao final do caso, prop??e-se um exerc??cio de avalia????o sobre as habilidades de Henrique

Texto para discuss??o 2: a quest??o da estabilidade do servidor p??blico no Brasil: perspectivas de flexibiliza????o

A discuss??o em torno da estabilidade do servidor p??blico emerge a partir de um contexto marcado pela necessidade de transforma????es s??cio-pol??ticas e econ??micas. Essas tranforma????es implicam a reestrutura????o do Estado brasileiro, bem como da administra????o p??blica, tendo em vista a moderniza????o da burocracia, buscando garantir efici??ncia e efic??cia no atendimento do interesse p??blico