Absorption and metabolism of cyanidin-3-glucoside and cyanidin-3-rutinoside extracted from wild mulberry (Morus nigra L.) in rats

The mechanism of uptake of anthocyanins (as well as the type) from food in the intestine is not clear. Anthocyanin-rich extract from wild mulberry, composed of cyanidin-3-glucoside (79%) and cyanidin-3-rutino side (cy-3-rut) (19%), was orally administered to Wistar rats, and their concentrations were determined in plasma, kidney, and the gastrointestinal (GI) tract. The 2 glycosylated forms showed maximum concentration at 15 minutes after oral administration, both in plasma and kidney. The cyanidin-3-glucoside and cy-3-rut were found in plasma as glucuronides, as sulfates of cyanidin, and as unchanged forms. The area under the curve of concentration vs time (AUC(0-8h)) was 2.76 +/- 0.88 mu g hour/mL and 9.74 +/- 0.75 mu g hour/g for plasma and kidney, respectively. In spite of the low absorption, the increase in plasma anthocyanin level resulted in a significant increase in antioxidant capacity (P < .05). In the GI tract (stomach and small and large intestines), cyanidin glycosides were found unchanged, but a low amount of the aglycone form was present. Anthocyanin glycosides were no longer detected in the GI tract after 8 hours of administration. In vitro fermentation showed that the 2 cyanidin glycosides were totally metabolized by the rat colonic microflora, explaining their disappearance. In addition, the 2 products of their degradation, cyanidin and protocatechuic acid, were not detected in plasma and probably do not influence plasma antioxidant capacity. As found by the everted sac model, anthocyanins were transported across the enterocyte by the sodium-dependent glucose transporter. (c) 2008 Elsevier Inc. All rights reserved.

Does Cyclophosphamide Play a Protective Role Against Neuronal Loss in Chronic T. cruzi Infection?

In this study, we verified the possible role of cyclophosphamide (CY) in protecting or not against neuronal losses in young and aged male Calomys callosus chronically infected with the MORC-1 strain of Trypanosoma cruzi through numerical quantification of neurons from the myenteric plexus of the colon and quantification of nitric-oxide concentration (NO) during the acute and chronic phase of infection. For this purpose, groups of young C. callosus were infected with the MORC-1 strain of T. cruzi. A group of infected animals received i.p. 0.2 mg/ml genuxal dissolved in distilled water treatment with CY. NO concentration in aged animals displayed reduced levels when compared to those found in young animals. No significant alterations in the number of neurons were observed in young animals, but for aged ones, a protective role of CY in reducing neuron loss was noted, in addition to enhancing the neuronal volume, area, and perimeter. These results suggest that CY administration, depending on the dose and time span, can act as a protective agent against neuronal losses.

alpha-conotoxin EpI, a novel sulfated peptide from Conus episcopatus that selectively targets neuronal nicotinic acetylcholine receptors

We have isolated and characterized ol-conotoxin EpI, a novel sulfated peptide from the venom of the molluscivorous snail, Conus episcopatus, The peptide was classified as an cy-conotoxin based on sequence, disulfide connectivity, and pharmacological target. EpI has ho mology to sequences of previously described cu-conotoxins, particularly PnIA, PnIB, and ImI, However, EpI differs from previously reported conotoxins in that it has a sulfotyrosine residue, identified by amino acid analysis and mass spectrometry, Native EpI was shown to coelute with synthetic EpI, The peptide sequence is consistent with most, but not all, recognized criteria for predicting tyrosine sulfation sites in proteins and peptides, The activities of synthetic EpI and its unsulfated analogue [Tyr(15)]EpI were similar. Both peptides caused competitive inhibition of nicotine action on bovine adrenal chromaffin cells (neuronal nicotinic ACh receptors) but had no effect on the rat phrenic nerve-diaphragm (muscle nicotinic ACh receptors), Both EpI and [Tyr(15)]EpI partly inhibited acetylcholine-evoked currents in isolated parasympathetic neurons of rat intracardiac ganglia, These results indicate that EPI and [Tyr(15)]EpI selectively inhibit alpha 3 beta 2 and alpha 3 beta 4 nicotinic acetylcholine receptors.

Purification and characterization of a plant antimicrobial peptide expressed in Escherichia coli

MiAMP1 is a low-molecular-weight, cysteine-rich, antimicrobial peptide isolated from the nut kernel of Macadamia integrifolia. A DNA sequence encoding MiAMP1 with an additional ATG: start codon was cloned into a modified pET vector under the control of the T7 RNA polymerase promoter. The pET vector was cotransformed together with the vector pSB161, which expresses a rare arginine tRNA. The peptide was readily isolated in high yield from the insoluble fraction of the Escherichia coil extract. The purified peptide was shown to have an identical molecular weight to the native peptide by mass spectroscopy indicating that the N-terminal methionine had been cleaved. Analysis by NMR spectroscopy indicated that the refolded recombinant peptide had a similar overall three-dimensional structure to that of the native peptide. The peptide inhibited the growth of phytopathogenic fungi in vitro in a similar manner to the native peptide. To our knowledge, MiAMP1 is the first antimicrobial peptide from plants to be functionally expressed in E. coil. This will permit a detailed structure-function analysis of the peptide and studies of its mode of action on phytopathogens. (C) 1999 Academic Press.

Evidence for a network transcriptional control of promiscuous gene expression in medullary thymic epithelial cells

The expression of peripheral tissue antigens (PTAs) in the thymus by medullary thymic epithelial cells (mTECs) is essential for the central self-tolerance in the generation of the T cell repertoire. Due to heterogeneity of autoantigen representation, this phenomenon has been termed promiscuous gene expression (PGE), in which the autoimmune regulator (Aire) gene plays a key role as a transcription factor in part of these genes. Here we used a microarray strategy to access PGE in cultured murine CD80(+) 3.10 mTEC line. Hierarchical clustering of the data allowed observation that PTA genes were differentially expressed being possible to found their respective induced or repressed mRNAs. To further investigate the control of PGE, we tested the hypothesis that genes involved in this phenomenon might also be modulated by transcriptional network. We then reconstructed such network based on the microarray expression data, featuring the guanylate cyclase 2d (Gucy2d) gene as a main node. In such condition, we established 167 positive and negative interactions with downstream PTA genes. Silencing Aire by RNA interference, Gucy2d while down regulated established a larger number (355) of interactions with PTA genes. T- and G-boxes corresponding to AIRE protein binding sites located upstream to ATG codon of Gucy2d supports this effect. These findings provide evidence that Aire plays a role in association with Gucy2d, which is connected to Several PTA genes and establishes a cascade-like transcriptional control of promiscuous gene expression in mTEC cells. (C) 2009 Elsevier Ltd. All rights reserved.

Hematopoietic SCT modulates gut inflammation in experimental inflammatory bowel disease

Hematopoietic SCT (HSCT) and high-dose chemotherapy are being explored as therapy for various human refractory immune-mediated conditions, including inflammatory bowel diseases (IBD). Nevertheless, the exact immunological mechanisms by which the BM cells (BMCs) or immunosuppression provide remission from these diseases is not yet clear. In this work, we investigated the role of these therapies in the modulation of gut mucosal inflammation in an experimental model of IBD. Colitis was induced in mice by 2,4,6-trinitrobenzenesulfonic acid and after CY was administered (200 mg/kg) alone (CY group) or followed by BMCs infusion (HSCT group). Animals were followed for 60 days. Both HSCT and CY reduced the histopathological features of colitis significantly. Infused cells were localized in the gut, and a marked decrease of CD4(+) leukocytes in the inflammatory infiltrate on days +7 and +14 and of CD8(+) cells on day +7 was found in both treatments allied to impressive reduction of proinflammatory Th1 and Th17 cytokines. Although chemotherapy alone was the best treatment regarding the induction of immunosuppressive molecules, only HSCT resulted in increased survival rates compared with the control group. Our findings indicate that high-dose CY followed by HSCT is effective in the modulation of mucosal immunity and in accelerating immune reconstitution after BMT, thus providing valuable tools to support the development and understanding of novel therapeutic strategies for IBD. Bone Marrow Transplantation (2010) 45, 1562-1571; doi:10.1038/bmt.2010.6; published online 15 March 2010

Isolation and identification of the cyanotoxin cylindrospermopsin and deoxy-cylindrospermopsin from a Thailand strain of Cylindrospermopsis raciborskii (Cyanobacteria)

A strain of Cylindrospermopsis (Cyanobacteria) isolated from a fishpond in Thailand was examined for its taxonomy based upon morphology and 16S rRNA gene sequence. It was also examined for production of the hepatotoxic cyanotoxin called cylindrospermopsin (CYN) and deoxycylindrospermopsin (deoxy-CYN). The strain (CY-Thai) was identified as C. raciborskii (Woloszynska) Seenaya and Subba Raju based upon morphological examination which was confirmed by 16S rRNA gene sequences and phylogenetic comparisons based upon its 16S rRNA gene. The alkaloid heptatotoxin CYN was confirmed using mouse bioassay, HPLC and HPLC-MS/MS while deoxy-CYN was confirmed using HPLC-MS/MS. The mouse bioassay gave a minimum lethal dose at 250 mg dry weight cells/kg body weight within 24 h and 125 mg/kg at 72 h, with signs of poisoning the same as in literature reports for CYN. HPLC chromatographic comparison of the CY-Thai toxin with standard CYN gave the same retention time and an absorbance maximum at 262 nm. HPLC-MS/MS confirmed the presence of CYN (M + H 416) and deoxy-CYN (M + H 400). The CYN content in strain CY-Thai was estimated at 1.02 mg/g and approximately 1/10 of this amount for deoxy-CYN. This is the first report from Asia of a CYN, deoxy-CYN producing Cylindrospermopsis raciborskii. (C) 2001 Elsevier Science Ltd. All rights reserved.

A aplicação da CIF nos programas educativos individualizados das crianças e jardim de infância

A Classificação Internacional da Funcionalidade, Crianças e Jovens (CIF-CJ), usando uma linguagem comum e universal, permite a comunicação entre os diferentes profissionais e investigadores. Sustenta-se numa abordagem biopsicossocial que pressupõe um processo interactivo da participação com os contextos de vida da criança, classificando a criança quanto à sua funcionalidade, definindo perfis de funcionalidade. A reestruturação do Programa Educativo Individual (PEI) através do decreto-lei 3/2008, passa a incluir uma terminologia da CIF-CJ, para a determinação do Perfil de Funcionalidade e Plano de Intervenção. Devido à sua pertinência e actualidade foi objectivo deste estudo fazer a análise da aplicação da CIF nos Programas Educativos Individualizados das crianças da Creche e Jardim de Infância do Cabedelo, verificando se os conteúdos dos PEI das crianças tem ligação com as componentes da CIF-CJ, se são elaborados de modo a englobarem predominantemente os constructos ligados à Actividade e Participação e ao Ambiente segundo o modelo biopsicossocial, e se os constructos identificados no Perfil de Funcionalidade surgem como alvo no Plano de Intervenção. Seleccionámos uma amostra de 15 crianças com Necessidades Educativas Especiais (NEE) com idades entre os dois e os seis anos de idade. A metodologia foi mista iniciando com um estudo qualitativo seguido de uma metodologia quantitativa. Assim procedeu-se a uma análise de conteúdo dos PEI’s, utilizando as linking rules para os relacionar com a CIF-CJ, e posteriormente efectuou-se uma análise de frequências com recurso à estatística descritiva. Os resultados indicam existir uma ligação dos conteúdos dos PEI’s com os componentes da CIF-CJ. O Perfil de Funcionalidade e Plano de Intervenção centram-se na componente Actividades e Participação sendo os Factores do Ambiente menos citados em ambos os processos. Em relação à existência de correspondência dos constructos do Perfil de Funcionalidade com o Plano de Intervenção não há uma correspondência directa em grande parte dos códigos, havendo no entanto uma correspondência na mesma área ou em áreas diferentes mas relacionáveis entre si.

Residential property loans and performance during property price booms: evidence from European

Understanding the performance of banks is of the u tmost importance due to the impact the sector may have on economic growth and financial stability. Residential mortgage loans constitute a large proportion of the portfolio of many banks and are one of the key assets in the determination of performance. Using a dynamic panel model , we analyse the impact of res idential mortgage loans on bank profitability and risk , based on a sample of 555 banks in the European Union ( EU - 15 ) , over the period from 1995 to 2008. We find that banks with larger weight s in residential mortgage loans display lower credit risk in good market conditions . This result may explain why banks rush to lend on property during b ooms due to the positive effect it has on credit risk . The results also show that credit risk and profitability are lower during the upturn in the residential property cy cle. Furthermore, t he results reveal the existence of a non - linear relationship ( U - shaped marginal effect), as a function of bank’s risk, between profitability and residential mortgage exposure . For those banks that have high er credit risk, a large exposur e to residential loans is associated with increased risk - adjusted profitability, through a reduction in risk. For banks with a moderate to low credit risk, the impact of higher exposure are also positive on risk - adjusted profitability.

Crianças com défices no controlo motor: contributo para a elaboração do core set da Classificação Internacional de Funcionalidade, Incapacidade e Saúde (CIF)

A CIF é um sistema de classificação adotado pela OMS, que serve de referência universal para descrever, avaliar e medir saúde e incapacidade, a nível individual e ao nível da população. Contudo, apesar do interesse internacional gerado em torno da CIF, esta é considerada uma classificação complexa e extensa, fato que despoletou a criação de core sets – listas de itens da CIF especificamente selecionados pela sua relevância na descrição e qualificação de uma determinada condição de saúde – como resposta a esta problemática. Até à data, foram desenvolvidos core sets para várias patologias comuns. Contudo, apesar do controlo motor ser uma área de investigação muito reconhecida nos últimos 20 anos, ainda não possui um core set próprio. Assim, o objetivo deste estudo é contribuir para o desenvolvimento de um core set, com base na CIF-CJ, dirigido para uma descrição abrangente das competências inerentes a crianças, dos 6 aos 18 anos de idade, com défices no controlo motor. Deste modo, recorreu-se a uma revisão da literatura sobre a temática em estudo, de modo a reunir informação para a construção de uma proposta a core set, posteriormente sujeita ao escrutínio de peritos, através do recurso ao método de Delphi. Após várias rondas, foi alcançado um consenso acerca da lista final de códigos CIF que constituem o core set final.

Controlo postural na sequência de movimento de sentado para de pé em crianças com alterações do desenvolvimento neuromotor

A Sequência de Movimento de Sentado para de Pé (SMSP) é um marco importante na independência funcional da criança, sendo a sua qualidade afetada em casos de alteração do controlo postural do tronco. É por isso motivo de especial foco neste estudo, como elemento avaliativo e interventivo. Este estudo tem como objetivo a análise da modificação de componentes motores relacionados com o controlo postural, durante a SMSP, em 5 crianças com alterações neuromotoras, face à aplicação de um programa de intervenção baseado no Tratamento de Neuro Desenvolvimento (TND). Foi para tal utilizada a análise cinemática da SMSP - nomeadamente as variáveis “variação do deslocamento dos segmentos cabeça e tronco” e “variação do ângulo perna-pé” entre o momento inicial e o seat-off – complementada com a aplicação do Teste de Medida da Função Motora 88 (TMFM-88) e a Classificação Internacional da Funcionalidade Incapacidade e Saúde-Versão Crianças e Jovens (CIF-CJ), bem como a avaliação de componentes de movimento com recurso a registo de imagem. A análise cinemática demonstrou uma diminuição do deslocamento dos segmentos cabeça e tronco na maioria dos casos, bem como uma maior mobilidade da tíbia sobre pé. Verificou-se um aumento do score final do TMFM-88, em todos os casos. A CIF-CJ não evidenciou alterações entre o início e o término do período de intervenção. O registo de imagem demonstrou alterações positivas visíveis no alinhamento de segmentos, nível de atividade, controlo postural, e recurso a estratégias compensatórias no conjunto postural sentado e na SMSP. Após o período de intervenção as crianças deste estudo evidenciaram modificações positivas nas variáveis em estudo, nomeadamente 1) diminuição do deslocamento dos segmentos cabeça e tronco na fase inicial da SMSP, 2) aumento da variação do ângulo perna-pé na fase inicial da SMSP, 3) aumento do score total da TMFM-88, 4) alteração positiva dos componentes de movimento alinhamento de segmentos e nível de atividade e 5) redução do recurso a estratégias compensatórias de movimento na SMSP. Estas modificações sugerem um controlo postural mais eficiente.

A class of singular first order differential equations with applications in reaction-diffusion

Agências Financiadoras: FCT e MIUR

Ajustes posturais antecipatórios no alcance em crianças com hemiparésia espástica

Objectivos: Verificar o comportamento dos Ajustes Posturais Antecipatórios no alcance, em três crianças com hemiparésia espástica, face à aplicação de uma intervenção em Fisioterapia baseada numa abordagem segundo o conceito de Bobath. Pretendeu-se também perceber as modificações ao nível das actividades e participação, bem como ao nível da capacidade de modificação das componentes neuromotoras. Metodologia: A avaliação foi realizada antes e três meses após a intervenção através da electromiografia de superfície, máquina fotográfica Canon EOS, Classificação Internacional de Funcionalidade para Crianças e Jovens (CIF-CJ) e Sistema de Classificação da Função Motora Global (GMFCS). Resultados: Verificou-se melhorias nos Ajustes Posturais Antecipatórios no alcance com os dois membros superiores, nomeadamente no tempo de activação e na duração da actividade muscular, bem como alterações positivas nas componentes neuromotoras, como na sequência de movimento de sentado para de pé, e de pé para sentado, e marcha mais especificamente na fase pendular com o membro inferior predominantemente comprometido. Também se verificou após a intervenção uma maior funcionalidade nas três crianças, verificando-se alterações positivas nos qualificadores nas actividades e participação. Conclusão: A intervenção com base no conceito de Bobath induziu mudanças positivas quanto à funcionalidade das crianças, reflectindo-se nos Ajustes Posturais Antecipatórios e na reorganização de componentes de movimento.