The anthelmintic effect of plant extracts on Haemonchus contortus and Strongyloides venezuelensis

Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado de São Paulo (FAPESP)

Previous contact with Strongyloides venezuelensis contributed to prevent insulitis in MLD-STZ diabetes

Epidemiological and experimental studies support the idea that helminth infections can induce a protective effect against the development of autoimmune and allergic diseases. In this study we characterized the immune response induced by Strongyloides venezuelensis infection in C57BL/6 mice and then evaluated the effect of a previous contact with this helminth in the outcome of type 1 diabetes. Animals were initially infected with 2000 L3 larvae from S. venezuelensis and euthanized 22. days later. An acute phase, identified by a high amount of eggs per gram of feces, was established between days 7 and 9 post-infection. Recovery from infection was associated with a Th2 polarized response characterized by a significant level of serum IgG1 specific antibodies and also a significant production of IL-5 and IL-10 by spleen cells stimulated with S. venezuelensis soluble antigen. Immunization with soluble S. venezuelensis antigen associated with complete Freund's adjuvant followed by infection with S. venezuelensis protected mice from diabetes development induced by streptozotocin. Protection was characterized by a higher body weight gain, lower glycemic levels, much less severe insulitis and preserved insulin production. Together, these results indicate that S. venezuelensis contributed to protect C57BL/6 mice against experimental diabetes induced by streptozotocin. © 2013 Elsevier Inc.

Eficácia de extratovegetais em nematódeos parasitas: avaliação invitro em Haemonchus contortud e avaliação in vitro em Strongyloides venezuelensis

Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior (CAPES)

Efeito da infecção com Strongyloides venezuelensis no desenvolvimento da encefalite autoimune (EUA)

Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior (CAPES)

Infecção experimental de ratos (Rattus norvegivus) da linhagem Lewis por Strongyloides venezuelensis: dinâmica da infecção, uso de PCR para detecção do parasita e caracterização da resposta imune humoral

Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado de São Paulo (FAPESP)

EFFECT OF Bifidobacterium animalis ON MICE INFECTED WITH Strongyloides venezuelensis

The administration of viable Bifidobacterium animalis was tested to induce resistance against Strongyloides venezuelensis infection in mice. Effects on parasite burden, worm length, egg output, and intestinal mucosal histology were evaluated. The oral administration of B. animalis, strain 04450B, starting 14 days before the inoculation of nematode larvae significantly decreased the worm burden and egg output. In probiotic treated animals, the percent reduction of adult worms in the intestine was of 33% and the reduction of egg production was of 21%, compared with those of the control group. The duodenum villous height and villous/crypt ratio were significantly higher in probiotic-treated mice, indicating that this group could be experiencing less intestinal damage. The present findings revealed that the administration of B. animalis for the amelioration of host response to nematode infections is biologically plausible and could have some potential for impacting public health. Meanwhile, further study is needed to delineate the nature and identity of the factor(s) involved in these beneficial effects.

Efeito de múltiplas infecções com Strongyloides venezuelensis no desenvolvimento da encefalite autoimune experimental

A esclerose múltipla é uma doença desmielinizante do sistema nervoso central (SNC), considerada a principal causa de incapacidade neurológica em adultos jovens e está associada a substanciais custos econômicos, pessoais e sociais. Como não existe cura para a doença, estratégias profiláticas e/ou terapêuticas são necessárias. A encefalite autoimune experimental (EAE) em ratos Lewis é considerada um modelo adequado para a investigação destas estratégias. Nos últimos anos observou-se um aumento na incidência de doenças autoimunes e alérgicas em países desenvolvidos. A Hipótese da Higiene propõe que o contato com determinados antígenos ambientais (helmintos, micobactérias e lactobacilos) pode diminuir ou até impedir as manifestações clínicas dessas doenças. Neste contexto, o objetivo desta investigação foi avaliar o efeito de múltiplas infecções prévias com Strongyloides venezuelensis no desenvolvimento (características clínicas, imunológicas e histopatológicas) da EAE em ratos Lewis. Foram então realizadas quatro infecções com 4000 L3 em ratos Lewis fêmeas, utilizando-se a via subcutânea. Cerca de quinze dias após a última infecção, foi realizada a indução da EAE por imunização com proteína básica de mielina associada ao adjuvante completo de Freund contendo Mycobacterium butyricum. Vinte dias após a indução da doença, os animais foram submetidos à eutanásia e avaliados quanto ao peso, escore clínico da doença, quantificação de anticorpos anti-mielina e anti- S. venezuelensis e dosagens de citocinas... (Resumo completo, clicar acesso eletrônico abaixo)

Comparação da sensibilidade da técnica parasitológica (OPG) e da PCR para o diagnóstico de Strongyloides venezuelensis em fezes de ratos (Rattus norvegicus) da linhagem Lewis infectados experimentalmente

Espécies do gênero Strongyloides são importantes parasitas de humanos e animais domésticos e aquelas que parasitam roedores são freqüentemente utilizadas como modelos experimentais para o estudo da estrongiloidíase. S. venezuelensis parasita ratos (Rattus norvegicus) e seu estudo tem permitido o entendimento de mecanismos imunológicos envolvidos na relação parasita–hospedeiro da estrongiloidíase humana e animal. O diagnóstico parasitológico de S. venezuelensis pode ser realizado pela detecção de ovos embrionados nas fezes, com o uso do OPG (ovos por grama de fezes), também empregado no monitoramento da infecção. Entretanto, essa técnica se mostra pouco sensível quando a carga parasitária é leve. Os métodos moleculares aumentam a sensibilidade e a especificidade das análises. A PCR tem se mostrado como uma técnica sensível e precisa na detecção de parasitas em tecidos e fezes de hospedeiros infectados. A fim de comparar a sensibilidade das técnicas de OPG e PCR em ratos Lewis infectados por S. venezuelensis, foram realizados dois protocolos no presente estudo. No Protocolo I foi comparada a sensibilidade das duas técnicas em amostras de ratos Lewis com diferentes cargas parasitárias. A PCR com o emprego par de primers descrito por Dorris et al. (2002) obteve melhores resultados que o OPG nos grupos inoculados com 40 L3, considerada como infecção leve. Entretanto, não foi verificada diferença estatística significativa entre as técnicas (P>0,05), provavelmente por terem sido utilizados poucos animais (n=10). O outro par de primers utilizado foi desenhado a partir de uma seqüência parcial do gene do rDNA de S. venezuelensis e não foi capaz de detectar a presença do DNA do helminto em nenhuma amostra desse grupo. Já nos grupos inoculados com 400 e 4000 L3, tanto a PCR com...(Resumo completo, clicar acesso eletrônico abaixo)

Efeito da infecção prévia com Strongyloides venezuelensis no desenvolvimento do diabetes experimental do tipo 1

O diabetes mellitus do tipo 1 (T1D) é uma doença autoimune cujo tratamento é parcialmente eficaz. A terapia existente visa apenas controlar a progressão da patologia através da injeção diária de insulina exógena, portanto, uma alternativa terapêutica ou profilática para a doença é necessária. A indução do T1D por administração de estreptozotocina (STZ) em camundongos C57BL/6 é considerada um modelo bastante adequado para a investigação dessas estratégias. Além disto, vários trabalhos demonstram que o contato com antígenos ambientais pode diminuir ou impedir as manifestações clínicas do T1D e de outras doenças autoimunes. Assim, o objetivo geral desta investigação foi avaliar o efeito da infecção prévia com Strongyloides venezuelensis no desenvolvimento do T1D. Inicialmente, acompanhamos a dinâmica da infecção em camundongos C57BL/6 para a determinação da resposta imune estabelecida na fase de recuperação da infecção, e posteriormente, avaliamos o efeito da infecção no T1D. Durante a fase de recuperação, caracterizada pelo desaparecimento de ovos nas fezes, ocorreu uma resposta imune de padrão misto (Th1/Th2) com predomínio de Th2, caracterizado pela presença de IgG1 e produção significativa de IL-4, IL-5 e IL-10. Este padrão de resposta determinou um efeito protetor discreto no desenvolvimento do T1D, caracterizado por diminuição do percentual de ilhotas com inflamação mais acentuada. Estes resultados mostram, portanto, que a infecção prévia com S. venezuelensis não impediu, de forma significativa, o desenvolvimento de insulite em modelo experimental de diabetes induzido por STZ

Dexamethasone reduces bronchial wall remodeling during pulmonary migration of Strongyloides venezuelensis larvae in rats

Strongyloidiasis is an intestinal parasitosis with an obligatory pulmonary cycle. A Th2-type immune response is induced and amplifies the cellular response through the secretion of inflammatory mediators. Although this response has been described as being similar to asthma, airway remodeling during pulmonary migration of larvae has not yet been established. The aim of this study was to identify the occurrence of airway remodeling during Strongyloides venezuelensis (S. v.) infection and to determine the ability of dexamethasone treatment to interfere with the mechanisms involved in this process. Rats were inoculated with 9,000 S. v. larvae, treated with dexamethasone (2 mg/kg) and killed at 1, 3, 5, 7, 14 and 21 days. Morphological and morphometric analyzes with routine stains and immunohistochemistry were conducted, and some inflammatory mediators were evaluated using ELISA. Goblet cell hyperplasia and increased bronchiolar thickness, characterized by edema, neovascularization, inflammatory infiltrate, collagen deposition and enlargement of the smooth muscle cell layer were observed. VEGF, IL1-beta and IL-4 levels were elevated throughout the course of the infection. The morphological findings and the immunomodulatory response to the infection were drastically reduced in dexamethasone-treated rats. The pulmonary migration of S. venezuelensis larvae produced a transitory, but significant amount of airway remodeling with a slight residual bronchiolar fibrosis. The exact mechanisms involved in this process require further study. (C) 2012 Elsevier Ireland Ltd. All rights reserved.

Morphological and molecular characterization of Strongyloides ophidiae (Nematoda, Strongyloididae)

Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado de São Paulo (FAPESP)

Importance of immunoglobulin E (IgE) in the protective mechanism against gastrointestinal nematode infection: looking at the intestinal mucosae

This review discusses experimental evidences that indicate the IgE participation on the effector mechanisms that leads to gastrointestinal nematode elimination. Data discussed here showed that, for most experimental models, the immune response involved in nematode elimination is regulated by Th-2 type cytokines (especially IL-4). However, the mechanism(s) that result in worm elimination is not clear and might be distinct in different nematode species. Parasite specific IgE production, especially the IgE produced by the intestinal mucosae or associated lymphoid organs could participate in the intestinal elimination of Trichinella spiralis from infected rats. Intestinal IgE may also be important to the protective mechanism developed against other gastrointestinal nematodes that penetrate the murine duodenum mucosa tissue, such as Strongyloides venezuelensis and Heligmosomoides polygyrus. At least in Trichinella spiralis infected rats, the results indicated that intestinal IgE might work independently from mast cell degranulation for worm elimination.

IgG Antibody responses in mice coinfected with Toxocara canis and other helminths or protozoan parasites

The immune response expressed by IgG antibodies in BALB/c mice experimentally infected with Toxocara canis, was studied with the aim of verifying the possible in vivo cross-reactivity between antigens of T. canis and other parasites (Ascaris suum, Taenia crassiceps, Schistosoma mansoni, Strongyloides venezuelensis and Toxoplasma gondii). Experiments included three groups of mice: one infected only by T. canis, another with one of the other species of parasites and a third concomitantly infected with T. canis and the other species in question. Animals were bled by orbital plexus at 23, 38 and 70 days post infection (p.i.). Sera were analyzed for anti-Toxocara antibodies by ELISA and Immunoblotting, using excretion-secretion antigens (ES), obtained from culture of third-stage larvae of T. canis. For all experiments a control group comprised by ten non-infected mice was used. Only in the case of A. suum infection, in these experimental conditions, the occurrence of cross-reactivity with T. canis was observed. However, in the case of co-infection of T. canis - S. mansoni, T. canis - S. venezuelensis and T. canis - T. crassiceps the production of anti-Toxocara antibodies was found at levels significantly lower than those found in mice infected with T. canis only. Co-infection with S. mansoni or S. venezuelensis showed lower mortality rates compared to what occurred in the animals with single infections. Results obtained in mice infected with T. canis and T. gondii showed significant differences between the mean levels of the optical densities of animals infected with T. canis and concomitantly infected with the protozoan only in the 23rd day p.i.

Atividade anti-helmíntica in vitro e in vivo de compostos fitoquímicos para o controle de nematóides gastrointestinais de ovinos

Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior (CAPES)

IgG Antibody responses in mice coinfected with Toxocara canis and other helminths or protozoan parasites

The immune response expressed by IgG antibodies in BALB/c mice experimentally infected with Toxocara canis, was studied with the aim of verifying the possible in vivo cross-reactivity between antigens of T. canis and other parasites (Ascaris suum, Taenia crassiceps, Schistosoma mansoni, Strongyloides venezuelensis and Toxoplasma gondii). Experiments included three groups of mice: one infected only by T. canis, another with one of the other species of parasites and a third concomitantly infected with T. canis and the other species in question. Animals were bled by orbital plexus at 23, 38 and 70 days post infection (p.i.). Sera were analyzed for anti-Toxocara antibodies by ELISA and Immunoblotting, using excretion-secretion antigens (ES), obtained from culture of third-stage larvae of T. canis. For all experiments a control group comprised by ten non-infected mice was used. Only in the case of A. suum infection, in these experimental conditions, the occurrence of cross-reactivity with T. canis was observed. However, in the case of co-infection of T. canis - S. mansoni, T. canis - S. venezuelensis and T. canis - T. crassiceps the production of anti-Toxocara antibodies was found at levels significantly lower than those found in mice infected with T. canis only. Co-infection with S. mansoni or S. venezuelensis showed lower mortality rates compared to what occurred in the animals with single infections. Results obtained in mice infected with T. canis and T. gondii showed significant differences between the mean levels of the optical densities of animals infected with T. canis and concomitantly infected with the protozoan only in the 23rd day p.i.