Sistema Essix MTM: uma alternativa estética para a movimentação

The increased interest in orthodontics by adults has led companies to develop new treatment alternatives that use less visible and more aesthetic orthodontic appliances. The aesthetic aligners stand out among the treatment options that attend these expectations. This paper presented some relevant aspects of these devices, as well as two cases treated with Essix MTM (Dentsply) system, in which all aesthetic and functional objectives proposed treatment have been achieved. The results of this study support the idea that, when properly indicated, aesthetic aligners are a viable treatment option within the clinical routine of the orthodontist.

Violence against children and adolescents: the importance of knowledge of the spectrum of bruise colors in its diagnosis

Introduction: One of the violence types more observed against children is the physical abuse, which produces many types of traumatic injuries. Contusions are common trauma signs and may indicate aggression when frequently present in locations where accidental injuries are rare. Contusions in skin undergo color changes with the passage of time, and such change in color is called “spectrum of bruise colors of Legrand du Saulle”. Thus, it is possible to estimate the age of the lesion based on the evaluation of color. Injuries caused by child abuse often reach regions of head, face and neck, because they are exposed and easily accessible. Therefore, the dentist is responsible with regard to the diagnosis and the actions to be undertaken against the cases of child abuse. Objective: To present and discuss the significance of the spectrum of bruise colors as a considerable visible trace in suspicion of violence against children and adolescents, during dentists’ clinical routine. Literature review: The study of the “spectrum of bruise colors of Legrand du Saulle” refers to the estimation of the age of the injury, in respect to the color change. The application of this study is of great value for identify if a lesion occurred from a single incident or from multiple incidents, especially in cases where it occurs in the same region of the body, indicative of repetitive trauma. Conclusion: The spectrum of bruise colors is very important for health professionals, such as dentists, for the identification or suspicion of cases of abuse against children and adolescents. As great part of the lesions originated of abuse involve the areas of head and neck, it is unacceptable that these professionals are unaware of the basic signs to help in early diagnosis, which is the case of the colors of the lesions. However, concerning the chronology of the spectrum of bruise colors, it is not possible to establish rigorous times.

Quality and dose optimization in hand computed radiography

The objective of the present study was to optimize a radiographic technique for hand examinations using a computed radiography (CR) system and demonstrate the potential for dose reductions compared with clinically established technique. An exposure index was generated from the optimized technique to guide operators when imaging hands. Homogeneous and anthropomorphic phantoms that simulated a patient's hand were imaged using a CR system at various tube voltages and current settings (40-55 kVp, 1.25-2.8 mAs), including those used in clinical routines (50 kVp, 2.0 mAs) to obtain an optimized chart. The homogeneous phantom was used to assess objective parameters that are associated with image quality, including the signal difference-to-noise ratio (SdNR), which is used to define a figure of merit (FOM) in the optimization process. The anthropomorphic phantom was used to subjectively evaluate image quality using Visual Grading Analysis (VGA) that was performed by three experienced radiologists. The technique that had the best VGA score and highest FOM was considered the gold standard (GS) in the present study. Image quality, dose and the exposure index that are currently used in the clinical routine for hand examinations in our institution were compared with the GS technique. The effective dose reduction was 67.0%. Good image quality was obtained for both techniques, although the exposure indices were 1.60 and 2.39 for the GS and clinical routine, respectively.

Fios ortodônticos superelásticos e sua aplicabilidade na clínica ortodôntica: revisão da literatura

During clinical routine, the orthodontist uses several materials, which include metallic alloys in the form of metallic wires. However, it is necessary that the professional has some knowledge of the properties of those wires. Different types of wires are commercially available: stainless steel wires, chrome-cobalt wires, nickel-titanium wires and beta-titanium wires. Among the nickel-titanium wires, there are three subdivisions: a conventional alloy and two superelastic alloys. The superelasticity, associated to the effect of form memory, is a property used in orthodontics to initiate the dental movement in the first phase of the orthodontic treatment. This property is considered to be biologically compatible with the effective dental movement. These wires are available at the market in different transformation temperatures, and they offer the best adaptation in the groove of the bracket, simplicity and a faster treatment. However, they present little formability, and they don’t accept solder. They are also more onerous than other wires. Moreover, the low rigidity of these wires doesn’t allow them to be used for the retraction of the anterior teeth or closing of spaces. Therefore, the coherent use of superelastic orthodontic wires is recommended, accompanied by a detailed diagnosis and planning, so the result will be an efficient orthodontic correction, accomplished in a shorter period of time.

Avaliação audiológica em pacientes com doenças reumáticas pediátricas

Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado de São Paulo (FAPESP)

Assessment of "non-recordable" electroretinograms by 9 Hz flicker stimulation under scotopic conditions

To refine methods of electroretinographical (ERG) recording for the analysis of low retinal potentials under scotopic conditions in advanced retinal degenerative diseases. Standard Ganzfeld ERG equipment (Diagnosys LLC, Cambridge, UK) was used in 27 healthy volunteers (mean age 28 +/- A SD 8.5 years) to define the stimulation protocol. The protocol was then applied in clinical routine and 992 recordings were obtained from patients (mean age 40.6 +/- A 18.3 years) over a period of 5 years. A blue stimulus with a flicker frequency of 9 Hz was specified under scotopic conditions to preferentially record rod-driven responses. A range of stimulus strengths (0.0000012-6.32 scot. cd s/mA(2) and 6-14 ms flash duration) was tested for maximal amplitudes and interference between rods and cones. Analysis of results was done by standard Fourier Transformation and assessment of signal-to-noise ratio. Optimized stimulus parameters were found to be a time-integrated luminance of 0.012 scot. cd s/mA(2) using a blue (470 nm) flash of 10 ms duration at a repetition frequency of 9 Hz. Characteristic stimulus strength versus amplitude curves and tests with stimuli of red or green wavelength suggest a predominant rod-system response. The 9 Hz response was found statistically distinguishable from noise in 38% of patients with otherwise non-recordable rod responses according to International Society for Clinical Electrophysiology of Vision standards. Thus, we believe this protocol can be used to record ERG potentials in patients with advanced retinal diseases and in the evaluation of potential treatments for these patients. The ease of implementation in clinical routine and of statistical evaluation providing an observer-independent evaluation may further facilitate its employment.

DXA, bioelectrical impedance, ultrasonography and biometry for the estimation of fat and lean mass in cats during weight loss

Background: Few equations have been developed in veterinary medicine compared to human medicine to predict body composition. The present study was done to evaluate the influence of weight loss on biometry (BIO), bioimpedance analysis (BIA) and ultrasonography (US) in cats, proposing equations to estimate fat (FM) and lean (LM) body mass, as compared to dual energy x-ray absorptiometry (DXA) as the referenced method. For this were used 16 gonadectomized obese cats (8 males and 8 females) in a weight loss program. DXA, BIO, BIA and US were performed in the obese state (T0; obese animals), after 10% of weight loss (T1) and after 20% of weight loss (T2). Stepwise regression was used to analyze the relationship between the dependent variables (FM, LM) determined by DXA and the independent variables obtained by BIO, BIA and US. The better models chosen were evaluated by a simple regression analysis and means predicted vs. determined by DXA were compared to verify the accuracy of the equations. Results: The independent variables determined by BIO, BIA and US that best correlated (p < 0.005) with the dependent variables (FM and LM) were BW (body weight), TC (thoracic circumference), PC (pelvic circumference), R (resistance) and SFLT (subcutaneous fat layer thickness). Using Mallows'Cp statistics, p value and r(2), 19 equations were selected (12 for FM, 7 for LM); however, only 7 equations accurately predicted FM and one LM of cats. Conclusions: The equations with two variables are better to use because they are effective and will be an alternative method to estimate body composition in the clinical routine. For estimated lean mass the equations using body weight associated with biometrics measures can be proposed. For estimated fat mass the equations using body weight associated with bioimpedance analysis can be proposed.

Incomplete fissures in severe emphysematous patients evaluated with MDCT: Incidence and interobserver agreement among radiologists and pneumologists

Objective: Pulmonary fissures completeness predicts efficacy in endobronchial valves (EBV) implantation, a new lobar volume reduction therapy for severe emphysematous patients. We assessed the incidence of incomplete fissures and the interobserver agreement in its evaluation with MDCT, in severe emphysematous patients prior to EBV implantation. Materials and Methods: Volumetric thin-section CT scans of 35 patients (CODP GOLD 3/4, heterogeneous emphysema) were retrospectively reviewed by 2 pneumologists, 1 general and 2 experienced chest radiologists, independently and blinded for treatment outcome, and the pulmonary fissures were classified as either complete or incomplete. Interobserver agreement was assessed with Kappa index (KI). Results: Agreement between all readers for the left oblique, right oblique and horizontal fissure was, respectively, moderate (KI = 0.53), fair (KI = 0.37) and moderate (KI = 0.42). Highest agreement (99/105 fissures) was observed among experienced radiologists, being for left oblique, right oblique and horizontal, respectively, almost perfect (KI = 0.79), perfect (KI = 1.0) and moderate (KI = 0.52). These 2 reviewers found that all of 35 patients had at least one incomplete fissure, with a proportion of incomplete fissures assigned as 74/65%, 85/85% and 91/88%, respectively for the left oblique, right oblique and horizontal fissures. Conclusions: Pneumologists and radiologists agreed fairly to moderately in fissures analysis, while the experienced chest radiologists reached the highest clinically adequate agreement of 94%. We believe that clinical routine visual analysis of the fissures integrity can be done with a good degree of confidence in MDCT images, and experienced readers might be required. Also, a higher than expected incidence of incomplete fissures was described in our studied population. (C) 2012 Elsevier Ireland Ltd. All rights reserved.

Comparison of different dosimetric methods for red marrow absorbed dose calculation in thyroid cancer therapy

Several dosimetric methods have been proposed for estimating red marrow absorbed dose (RMAD) when radionuclide therapy is planned for differentiated thyroid cancer, although to date, there is no consensus as to whether dose calculation should be based on blood-activity concentration or not. Our purpose was to compare RMADs derived from methods that require collecting patients' blood samples versus those involving OLINDA/EXM software, thereby precluding this invasive procedure. This is a retrospective study that included 34 patients under treatment for metastatic thyroid disease. A deviation of 10 between RMADs was found, when comparing the doses from the most usual invasive dosimetric methods and those from OLINDA/EXM. No statistical difference between the methods was discovered, whereby the need for invasive procedures when calculating the dose is questioned. The use of OLINDA/EXM in clinical routine could possibly diminish data collection, thus giving rise to a simultaneous reduction in time and clinical costs, besides avoiding any kind of discomfort on the part of the patients involved.

O uso da Classificação Internacional de Funcionalidade, Incapacidade e Saúde para acompanhamento de pacientes usuários de Implante Coclear.

Purpose: To characterize the profile of patients with cochlear implant as proposed by the International Classification of Functioning, Disability and Health for Children and Youth (ICF-CY). Methods: This is a descriptive, crosssectional retrospective study, which examined 30 medical records of patients using the cochlear implant of Centro de Pesquisas Audiológicas. To characterize the profile of the patients, the ICF-CY was used. Regarding the assessment, researchers relied on procedures performed in clinical routine, besides information registered in the medical record. After reviewing the information, it was related to codes from the ICF-CY; with the addition of a qualifier afterwards. Results: Overall, 55 codes from the ICF were related to the instruments to characterize this population. Regarding the Body Functions field, most participants did not have disabilities related to reception and expression of oral language and auditory functions, with only written language disabilities being found. These same findings were observed in the Activity and Participation Field. Regarding environmental factors, noise and the non-availability of technology resources to assist in the auditory comprehension of noise were characterized as a barrier, as well as the absence of speech therapy. Conclusion: This study concluded that most of the participating children showed no deficiency in the body functions, with difficulties being only reported in relation to school performance. Environmental factors (noise, non-availability of technological resources, absence of speech therapy) were characterized as a barrier. The need to expand assessments in the clinical routine was also noted.

Specific PET-ligands for selected 5-HT and GABA A-receptor subtypes = PET-Liganden mit Spezifität für definierte 5-HT und GABA A-Rezeptor-Subtypen

Für diese Arbeit wurden sechs neue Benzodiazepinderivate, TC07, TC08, TC09, TC10, TC11 und TC12, hergestellt. Diese wurden mittels Radioligandenbindungsassay sowohl auf ihre Bindungseigenschaften für Membranen des Cerebellum, des Hippo-campus und des Cortex der Ratte hin untersucht, als auch für Membranen von HEK293 Zellen, die transient rekombinante GABAA Rezeptoren exprimierten. Zusätz-lich wurden kompetitive in situ Rezeptorautoradiographien an Rattenhirnschnitten mit den Liganden [3H]Ro15-4513 und [3H]R015-1788 durchgeführt. Zusammen ergaben sich aus diesen Experimenten deutliche Hinweise auf eine Selektivität der Verbindun-gen TC07, TC11 und TC12 für a5-Untereinheiten enthaltende GABAA Rezeptoren mit a5-Affinitäten im niedrigen nanomolaren Bereich. In vivo Bindungsexperimente in Ratten, mit [3H]Ro15-1788 als Tracer und TC07 als Kompetitor, ergaben, dass TC07 mehr [3H]Ro15-1788 im Vorderhirn als im Cerebellum verdrängt. Bezog man die regionale Verteilung der a5-Untereinheit des GABAA Rezep-tors im Rattenhirn mit ein – sehr wenige a5-Untereinheiten im Cerebellum, etwa 20 % der GABAA Rezeptor-Untereinheiten im Hippocampus – untermauerten diese Ergeb-nisse die Vermutung, TC07 könne a5-selektiv sein. Diese Daten bestätigten darü-berhinaus, dass TC07 die Blut-Hirn-Schranke passieren kann. Für elektrophysiologische Messungen mit TC07 und TC12 wurden die oben erwähnten transient transfizierten HEK293 Zellen verwendet, welche die GABAA Rezeptor Unte-reinheitenkombination a5b3g2 exprimierten. Das Dosis-Antwort Verhalten ergab keinen signifikanten Effekt für TC12. Die Daten von TC07 dagegen lassen auf einen schwach negativ modulatorischen Effekt schließen, was, zumindest theoretisch, die Möglichkeit eröffnet, TC07 auch als sogenannten cognitive enhancer einzusetzen. Der errechnete Ki-Wert lag in derselben Größenordnung wie der Ki-Wert, der anhand der Bindungsas-saydaten errechnet wurde. Insgesamt rechtfertigen die bisherigen Ergebnisse die radiochemische Markierung mit 18F von drei der sechs getesteten Verbindungen in der Reihenfolge TC07, TC12 und TC11. Des Weiteren wurde [18F]MHMZ, ein potentiell 5-HT2A selektiver Ligand und PET-Tracer einschließlich Vorläufer und Referenzverbindungen, mit hohen Ausbeuten syn-thetisiert (Herth, Debus et al. 2008). Autoradiographieexperimente mit Rattenhirn-schnitten zeigten hervorragende in situ Bindungseigenschaften der neuen Verbindung. Die Daten wiesen eine hohe Selektivität für 5-HT2A Rezeptoren in Verbindung mit einer niedrigen unspezifischen Bindung auf. [18F]MHMZ erfährt in vivo eine schnelle Metabo-lisierung, wobei ein polarer aktiver Metabolit entsteht, welcher vermutlich nicht die Blut-Hirn-Schranke passieren kann. Transversale, sagittale und coronale Kleintier-PET-Bilder des Rattenhirns zeigten eine hohe Anreicherung im frontalen Cortex und im Striatum, während im Cerebellum so gut wie keine Anreicherung festzustellen war. Diese Verteilung deckt sich mit der bekann-ten Verteilung der 5-HT2A Rezeptoren. Die in vivo Anreicherung scheint sich ebenfalls gut mit der Verteilung der in den Autoradiographieexperimenten gemessenen Bindung zu decken. Nach Berechnungen mit dem 4-Parameter Referenzgewebe Modell beträgt das Bindungspotential (BP) für den frontalen Cortex 1,45. Das Cortex zu Cerebellum Verhältnis wurde auf 2,7 nach 30 Minuten Messzeit bestimmt, was bemerkenswert nah an den von Lundkvist et al. für [11C]MDL 100907 publizierten Daten liegt. Abgesehen von der etwas niedrigeren Affinität waren die gemessenen in vitro, in situ und in vivo Daten denen von [3H]MDL 100907 und [11C]MDL 100907 sehr ähnlich, so dass wir ein [18F]Analogon in der Hand haben, das die bessere Selektivität von MDL 100907 verglichen mit Altanserin mit der längeren Halbwertszeit und den besse-ren Eigenschaften für die klinische Routine von 18F verglichen mit 11C verbindet. Die Ergebnisse von [18F]MHMZ rechtfertigenden weitere Experimente, um diesen Liganden für die klinische Routine am Menschen nutzbar zu machen.

On the development of novel cocaine-analogues for in vivo imaging of the dopamine transporter status

The present thesis is concerned with the development of novel cocaine-derived dopamine transporter ligands for the non-invasive exploration of the striatal and extra-striatal dopamine transporter (DAT) in living systems. The presynaptic dopamine transporter acquires an important function within the mediation of dopaminergic signal transduction. Its availability can serve as a measure for the overall integrity of the dopaminergic system. The DAT is upregulated in early Parkinson’s disease (PD), resulting in an increased availability of DAT-binding sites in the striatal DAT domains. Thereby, DAT imaging has become an important routine diagnostic tool for the early diagnosis of PD in patients, as well as for the differentiation of PD from symptomatically similar medical conditions. Furthermore, the dopaminergic system is involved in a variety of psychiatric diseases. In this regard, DAT-selective imaging agents may provide detailed insights into the scientific understanding of the biochemical background of both, the progress as well as the origins of the symptoms. DAT-imaging may also contribute to the determination of the dopaminergic therapeutic response for a given medication and thereby contribute to more convenient conditions for the patient. From an imaging point of view, the former demands a high availability of the radioactive probe to facilitate broad application of the modality, whereas the latter profits from short-lived probes, suitable for multi-injection studies. Therefore, labelling with longer-lived 18F-fluoride and in particular the generator nuclide 68Ga is worthwhile for clinical routine imaging. In contrast, the introduction of a 11C-label is a prerequisite for detailed scientific studies of neuronal interactions. The development of suitable DAT-ligands for medical imaging has often been complicated by the mixed binding profile of many compounds that that interact with the DAT. Other drawbacks have included high non-specific binding, extensive metabolism and slow accumulation in the DAT-rich brain areas. However, some recent examples have partially overcome the mentioned complications. Based on the structural speciality of these leads, novel ligand structures were designed and successfully synthesised in the present work. A structure activity relationship (SAR) study was conducted wherein the new structural modifications were examined for their influence on DAT-affinity and selectivity. Two of the compounds showed improvements in in vitro affinity for the DAT as well as selectivity versus the serotonin transporter (SERT) and norepinephrine transporter (NET). The main effort was focussed on the high-affinity candidate PR04.MZ, which was subsequently labelled with 18F and 11C in high yield. An initial pharmacological characterisation of PR04.MZ in rodents revealed highly specific binding to the target brain structures. As a result of low non-specific binding, the DAT-rich striatal area was clearly visualised by autoradiography and µPET. Furthermore, the radioactivity uptake into the DAT-rich brain regions was rapid and indicated fast binding equilibrium. No radioactive metabolite was found in the rat brain. [18F]PR04.MZ and [11C]PR04.MZ were compared in the primate brain and the plasma metabolism was studied. It was found that the ligands specifically visualise the DAT in high and low density in the primate brain. The activity uptake was rapid and quantitative evaluation by Logan graphical analysis and simplified reference tissue model was possible after a scanning time of 30 min. These results further reflect the good characteristics of PR04.MZ as a selective ligand of the neuronal DAT. To pursue 68Ga-labelling of the DAT, initial synthetic studies were performed as part of the present thesis. Thereby, a concept for the convenient preparation of novel bifunctional chelators (BFCs) was developed. Furthermore, the suitability of novel 1,4,7-triazacyclononane based N3S3-type BFCs for biomolecule-chelator conjugates of sufficient lipophilicity for the penetration of the blood-brain-barrier was elucidated.

Therapeutisches Drug Monitoring in der ambulanten Psychopharmakotherapie

Während Therapeutisches Drug Monitoring (TDM) im klinischen Alltag der stationären Behandlung in der Psychiatrie bereits fest etabliert ist, kommt es in der ambulanten Betreuung von psychisch Kranken bislang noch selten zum Einsatz. Ziel dieser Arbeit war es zu klären, wie TDM im ambulanten Bereich eingesetzt wird, wann seine Anwendung sinnvoll ist und ob es Hinweise gibt, dass TDM zu einer besseren Psychopharmakotherapie beitragen kann. rnEine Grundvoraussetzung für den Einsatz von TDM ist die Messbarkeit des Arzneistoffes. Am Beispiel des Antipsychotikums Flupentixol wurde eine Quantifizierungsmethode entwickelt, validiert und in die Laborroutine integriert. Die neue Methode erfüllte alle nach Richtlinien vorgegebenen Anforderungen für quantitative Laboruntersuchungen. Die Anwendbarkeit in der Laborroutine wurde anhand von Untersuchungen an Patienten gezeigt. rnEine weitere Voraussetzung für eine TDM-geleitete Dosisanpassung ist die Kenntnis des therapeutischen Referenzbereiches. In dieser Arbeit wurde exemplarisch ein Referenzbereich für das Antipsychotikum Quetiapin ermittelt. Die Untersuchung verglich darüber hinaus die neu eingeführten Arzneiformulierung Quetiapin retard mit schnell freisetzendem Quetiapin. Es zeigte sich, dass die therapiebegleitenden Blutspiegelkontrollen beider Formulierungen mit der Einstellung des Blutspiegels auf den therapeutischen Bereich von 100 - 500 ng/ml die Wahrscheinlichkeit des Therapieansprechens erhöhen. Bei den verschiedenen Formulierungen musste unbedingt auf den Zeitpunkt der Blutentnahmen nach Einnahme geachtet werden.rnEs wurde eine multizentrische Querschnittsuntersuchung zur Analyse von TDM unter naturalistischen Bedingungen an ambulanten Patienten durchgeführt, und zwar in Ambulanzen, in denen TDM als fester Bestandteil der Therapieüberwachung genutzt wurde und in Ambulanzen, in denen TDM sporadisch engesetzt, bzw. neu eingeführt wurde. Nach dieser Erhebung schien die Anwendung von TDM zu einer besseren Versorgung der Patienten beizutragen. Es wurde festgestellt, dass in den Ambulanzen mit bewusster Anwendung von TDM mehr Patienten mit Blutspiegeln im therapeutischen Bereich vorkamen als in den Ambulanzen mit nur sporadisch durchgeführten Blutspiegelmessungen. Bei Letzteren betrug die mittlere Anzahl an Medikamenten pro Patient 2,8 gegenüber 2,2 in den anderen Ambulanzen, was mit höheren Nebenwirkungsraten einherging. Die Schlussfolgerung, dass das Einstellen der Blutspiegel auf den therapeutischen Bereich auch tatsächlich zu besseren Therapieeffekten führte, konnte mit der Studie nicht valide überprüft werden, da die Psychopathologie nicht adäquat abgebildet werden konnte. Eine weitere Erkenntnis war, dass das reine Messen des Blutspiegels nicht zu einer Verbesserung der Therapie führte. Eine Verbesserung der Anwendung von TDM durch die Behandler wurde nach einer Schulung festgestellt, die das Ziel hatte, die Interpretation der Blutspiegelbefunde im Kontext mit patienten- und substanzspezifischen Informationen zu verbessern. Basierend auf dieser Erfahrung wurden Arzneistoffdatenblätter für die häufigsten angewandten Antipsychotika und Antidepressiva entwickelt, um damit die ambulanten Ärzte für eine eigenständige Befundinterpretation zu unterstützen. rnEin weiterer Schwerpunkt der Untersuchungen an ambulanten Patienten war die Aufdeckung von Non-Compliance durch TDM. Ein neu entwickeltes Verfahren, durch Berechnung der Streuung der mittleren Blutspiegel, erwies sich als geeignetes Instrument zur Compliance-Kontrolle in der Clozapin-Langzeittherapie. Es war etablierten anderen Verfahren überlegen. Demnach hatten Patienten ein erhöhtes Rückfallrisiko, wenn der Variationskoeffizient von nur drei nacheinander gemessenen Blutspiegeln größer als 20 % war. Da für die Beurteilung des Variationskoeffizienten das Messen von nur drei aufeinander folgenden Blutspiegeln notwendig war, kann diese Methode leicht in den ambulanten Alltag integriert werden. Der behandelnde Arzt hat so die Möglichkeit, einen rückfallgefährdeten Patienten noch vor seiner psychopathologischen Verschlechterung zu erkennen und ihn beispielsweise durch engmaschigeres Supervidieren vor einem Rückfall zu bewahren.rnAlles in allem konnte durch die eigenen Untersuchungen an psychiatrischen Patienten, die unter naturalistischen Bedingungen behandelt wurden, gezeigt werden, wie die Voraussetzungen für die Anwendung von TDM geschaffen werden, nämlich durch die Etablierung und Validierung einer Messmethode und durch die Evaluierung eines therapeutischen Referenzbereiches und wie TDM bei adäquatem Einsatz, nach Verbesserung der Compliance und des Kenntnisstandes der behandelnden Ärzte im praktischen und theoretischen Umgang mit TDM, die Versorgung ambulanter psychiatrischer Patienten unterstützen kann.

Präklinische Evaluierung von therapeutischer Vakzinierung zur Effizienzsteigerung der adoptiven Immuntherapie von Cytomegalovirus-Erkrankungen

Klinische Manifestationen einer Cytomegalovirus (CMV)-Infektion gefährden den therapeutischen Erfolg der hämatopoetischen Stammzelltransplantation (HSCT). Dabei stellt insbesondere die Reaktivierung von latentem CMV im HSCT-Rezipienten das häufigste Infektionsrisiko dar. Die Inzidenz der CMV-Erkrankung kann durch Rekonstitution adoptiv transferierter CMV-spezifischer CD8 T-Zellen im HSCT-Rezipienten reduziert werden. Das Modell der sogenannten adoptiven Immuntherapie wurde zunächst im murinen Modell entwickelt und bereits in klinischen Studien bestätigt. Jedoch ist der adoptive Transfer (AT) aufgrund der nur limitiert zur Verfügung stehenden therapeutisch effektiven Zellzahlen zurzeit in der klinischen Routine nicht einsetzbar.rnZiel dieser Arbeit war daher die präklinische Evaluierung einer Kombinationstherapie aus AT einer limitierten Anzahl CMV-spezifischer T-Zellen und deren in vivo Expansion durch therapeutische Vakzinierung nach HSCT. Zur Testung dieser Therapie wurde ein murines Modell auf der Grundlage von rekombinanten murinen CMV (mCMV) und rekombinanten HCMV Dense Bodies (DB) etabliert. Beide exprimieren das gut charakterisierte MHC-Klasse-I Kb-restringierte SIINFEKL-Peptid (OVA257-264) des Ovalbumins (OVA) bzw. die Funktions-verlustmutante SIINFEKA als Modellantigen. In den rekombinanten mCMV, mCMV-Δm157Luc/m164-SIINFEKL/-A (mCMV-SIINFEKL/-A), wurde mittels orthotopen Peptid-austauschs das m164257-265 Peptid des gp36,5/m164 Proteins deletiert und durch das SIINFEKL- bzw. SIINFEKA-Peptid ersetzt. Anhand von Priming-Analysen konnte gezeigt werden, dass nach Infektion von C57BL/6 Mäusen mit mCMV-SIINFEKL SIINFEKL-spezifische T-Zellen nachweisbar sind und das im CMV-Genom integrierte SIINFEKL funktional prozessiert und präsentiert wird. Parallel hierzu konnte nach Immunisierung mit DB-SIINFEKL in vivo ein SIINFEKL-spezifisches CD8 T-Zell-Priming induziert werden. In weiteren Experimenten konnte nach DB-SIINFEKL-Immunisierung im poplitealen Lymphknoten sowie in der Milz eine Proliferation von adoptiv transferierten CD8 T-Zellen beobachtet werden. Die anschließenden Challenge-Versuche zeigten, dass eine DB-SIINFEKL-Immunisierung epitopspezifisch vor einer hoch dosierten Challenge-Infektion mit mCMV-SIINFEKL schützt. Im AT-Modell konnte gezeigt werden, dass adoptiv transferierte OT-I Zellen hämatoablativ behandelte Rezipienten epitopspezifisch vor einer mCMV-SIINFEKL-Infektion schützen können, wobei der erzielte Schutz durch zusätzliche Vakzinierung mit DB-SIINFEKL deutlich verbessert werden konnte. Im Anschluss konnte im HSCT-Rezipienten erstmals eine durch zusätzliche Vakzinierung signifikante Verbesserung des protektiven Potenzials adoptiv transferierter OT-I Zellen bestätigt werden. Diese Verstärkung der Protektion ermöglicht die Reduktion der Anzahl der für den Schutz benötigten Zellzahl und erhöht damit die Effizienz der adoptiven Immuntherapie.

Proteomics-driven approach for the detection of breast cancer biomarkers

Breast cancer (BC) is the most often diagnosed cancer entity of women worldwide. No molecular biomarkers are usable in the clinical routine for the early detection of BC. Proteomics is one of the dynamic tools for the successful examination of changes on the protein level. In this thesis different proteomics-based investigations were performed for the detection of protein and autoantibody biomarkers in serum samples of BC and healthy (CTRL) subjects. First, protein levels of candidates from previous profiling studies were investigated via antibody-microarray platform. Three proteins were found in distinct levels in both groups: secretoglobin family 1D member 1, alpha-2 macroglobulin and inter-alpha-trypsin inhibitor heavy chain family member 4. The second part was dedicated to the de novo exploration of potentially immunogenic tumor antigens (TA’s) with immunoprecipitation and Western immunoblotting followed by identification over mass spectrometry. Autoantibody levels were verified in individual serum profiling via the protein microarray platform. Two autoantibody’ cohorts (anti-Histone 2B and anti-Recoverin) were found in different levels in both groups. The findings of this PhD thesis underline deregulated serum protein and autoantibody levels in the presence of BC. Further investigations are needed to confirm the results in an independent study population.