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合成了13个标题化合物POCOCH_2CH_2SnCl_3·L(R=C_(1~5)烷基;L=DBSO,HMPA),通过元素分析、IR和~1H NMR进行了表征.n-PrOCOCH_2CH_2SnCl_3·DBSO的晶体结构分析表明,该晶体属正交晶系;空间群P2_12_12_1;a=1.062,b=1.427,c=1.635nm;Z=4.该化合物为含有分子内碳基配位和Lewis碱配体配位的具有畸变八面体构型的单分子有机锡化合物.研究了CH_3OCOCH_2CH_2SnCl_3·L和醇的酯交换反应,提出了分子内Lewis酸催化的反应机理.
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研究了高温高压下x·Li_8SiN_4-0.1(1-x)·Li_3N-0.9(1-x)·BN体系中立方氮化硼(cBN)的转化行为。Li_8SiN_4的存在可显著改善cBN晶体的发育,提高晶体质量。在4.2~5.5GPa,1340~1750℃范围内确定了x=4.8%时体系的cBN转化区,并对转化区内cBN转化率、平均生长速度、成核速度及破碎强度与转化温度和压力的关系进行了研究。
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把非线性光学(NLO)发色基团引入到聚合物主链中,既可以增大聚合物中NLO基团的含量,从而提高聚合物的宏观NLO系数,又能够提高NLO聚合物的极化稳定性。本文报道一种由酚酞环氧树脂(PPh)与对硝基苯胺(NA)得到的NLO聚合物的合成及其极化松弛。 所用酚酞环氧树脂系自制,环氧值0.427。对硝基苯胺北京化工厂产,分析纯。N,N-二甲基甲酰胺为中国医药公司售品,化学纯,用前减压蒸馏精制,乙醇、丙酮均为北京化工厂生产,分析纯。在氮气保护下将等当量的PPh与NA溶于DMF中于150℃反应6~8小时后,倒
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The Electrochemical stability of poly(3-methylthiophene) (PMT) thin film modified glassy carbon electrodes was investigated experimentally with successive cyclic voltammetry(CV) The effects of electrolyte solutions on the stability were studied. In the presence of small hydrated anions (less-than-or-equal-to 3.5nm) in the solution, the electroactivity of PMT films decreased with the characteristics of second order kinetics. In a solution with large hydrated anions (greater-than-or-equal-to 4 nm), PMT films have good stability. PMT/GO electrode can electrocatalyse the oxidation of Br- and Cl- anions, and loses its electroactivity rapidly. X-ray photoelectron spectra (XPS) have demonstrated that chlorine has bonded covalently onto the PMT structure after OV cycles in NaCl solutions.
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(Li.3DME)[eta(5)-C5H5)3NdC6H5], 1 was synthesized by the reaction of NdCl3.2LiCl, 2 equivalents of cyclopentadienylsodium and one equivalent of phenyllithium in THF at -78-degrees-C, and crystallized from THF and DME. The crystal structure of 1 was determined by X-ray diffraction method at -80-degrees-C. The crystal of 1 is triclinic, space group P1BAR with a = 15.752(6), b = 16.232(3), c = 23.038(7) angstrom, alpha = 108.81(2), beta = 93.31(3), gamma = 108.38(2)-degrees, Z = 6 and D = 1.33 g/cm3. Least-squares refinement (5732 observed reflections) led to a final R of 0.053. The complex consists of disconnected ion pairs of (Li.3DME)+ and [(eta(5)-C5H5)3NdC6H5]-. The neodymium atom was connected to three eta(5)-bonded cyclopentadienyls and one sigma-bonded phenyl in a distorted tetrahedral arrangement with Nd-C(sigma-) 2.593(17), 2.613(13) and 2.601(13) angstrom.
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用连续循环伏安法研究了电化学法制备的聚(3-甲基噻吩)(PMT)薄膜修饰玻璃碳电极在不同支持电解质溶液中的电化学稳定性。在易嵌入PMT的阴离子存在下,PMT电活性随扫描次数按表观二级反应降低;在难嵌入PMT的离子存在下,PMT具有良好稳定性;在含有氯、溴离子的水溶液中,PMT可将卤离子电催化氧化,并引起PMT电活性迅速下降。光电子能谱分析表明氯已键合到PMT结构上。
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在外部电极电容耦合式反应装置中,对聚四氟乙烯(PTFE)膜进行了辉光放电处理。通过电子自旋共振(ESR)谱研究了PTFE在处理过程中所产生的自由基,着重讨论了温度对ESR谱的影响。最后,以DPPH为内标,测定了处理后PTFE膜的自由基浓度,并考察了自由基在空气中的衰减情况。
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The population genetic structure of the crimson snapper Lutjanus erythropterus in East Asia was examined with a 427-bp hypervariable portion of the mtDNA control region. A total of 262 samples were collected and 75 haplotypes were obtained. Neutrality tests (Tajima's and Fu's) suggested that Lutjanus erythropterus in East Asia had experienced a bottleneck followed by population expansion since the late Pleistocene. Despite the low phylogeographic structures in mtDNA haplotypes, a hierarchical examination of populations in 11 localities from four geographical regions using analysis of molecular variance (AMOVA) indicated significant genetic differentiation among regions (Phi(CT) = 0.08564, p < 0.01). Limited gene flow between the eastern region (including a locality in the western Pacific Ocean and two localities in the East Sea) and three geographic regions of the South China Sea largely contributed to the genetic subdivision. However, comparisons among three geographic regions of the South China Sea showed little to no genetic difference. Populations of Lutjanus erythropterus in East Asia are inferred to be divided into two major groups: an eastern group, including populations of the western Pacific Ocean and the East Sea, and a South China Sea group, consisting of populations from northern Malaysia to South China. The results suggest that fishery management should reflect the genetic differentiation and diversity in East Asia. (c) 2006 International Council for the Exploration of the Sea. Published by Elsevier Ltd. All rights reserved.
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Myeloid differentiation factor 88 (MyD88) is a universal and essential adapter for the TLR/IL-1R family. In this report, the first mollusk Myd88 ortholog (named as CfMyd88) was cloned from Zhikong scallop (Chlamys farreri). The full-length cDNA of CfMyd88 was of 1554 bp, including a 5 '-terminal untranslated region (UTR) of 427 bp, a polyA tail, and an open reading frame (ORF) of 1104 bp encoding a polypeptide of 367 amino acids containing the typical TLR and IL-1R-related (TIR) domain and death domain (DD). Homology analysis revealed that the predicted amino acid sequence of CfMyd88 was homologous to a variety of previously identified Myd88s with more than 30% identity. The temporal expressions of CfMyd88 mRNA in the mixed primary cultured haemocytes stimulated by lipopolysaccharide (LPS) and peptidoglycans (PGN) were measured by real-time RT-PCR system. The mRNA expression of CfMyd88 decreased after stimulation with both LPS and PGN, and the lowest level was about 1/3 times (at 6 h) and 1/10 times (at 9 h) to that in the control group, respectively. The expression then recovered and was upregulated to two-fold at 9 h after LPS stimulation or to the original level at 12 It after PGN stimulation. The results suggest that the MyD88-dependent signaling pathway exists in scallop and was involved in the defense system. (c) 2007 Elsevier Ltd. All rights reserved.
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优良的种质是产业发展的重要保证,品种更新和养殖技术的发展已经给世界农业带来了令人瞩目的成就,然而我国水产生物的育种工作刚处于起步阶段,而育种技术的研究则更是滞后。借鉴陆生生物中发展起来的相对成熟的研究方法,可以帮助加快海洋生物遗传育种相关研究的进度。本研究以我国北方海区重要的海洋经济动物-皱纹盘鲍为研究对象,从表型遗传、数量性状遗传等2个方面开展了皱纹盘鲍的遗传育种研究,同时从幼鲍培育密度与分选效应等方面研究了皱纹盘鲍的中间培育技术。 主要结果如下: 1. 皱纹盘鲍的贝壳颜色遗传、食物对贝壳颜色表现型的影响,贝壳颜色与生长速度间的关系 将贝壳颜色为橘红色(O表型)的突变型皱纹盘鲍与贝壳颜色为绿色(G表型)的野生型皱纹盘鲍进行了连续2代的交配实验。结果表明:皱纹盘鲍橘红色的贝壳颜色相对于绿色的贝壳颜色为隐性性状,皱纹盘鲍的贝壳颜色表型受单位点、2个等位基因遗传控制,其中基因型为oo的个体,贝壳颜色的表现型为橘红色(O表型),而基因型为GG或Go的个体,贝壳颜色的表现型为野生型(G表型)。 为探讨食物类型对不同基因型皱纹盘鲍贝壳颜色表现型的影响,对不同贝壳颜色表型的个体投喂不同种类的食物,结果表明,除遗传因素外,皱纹盘鲍的贝壳颜色表现型显著地受食物类型的调控。其中oo基因型的个体,在摄食底栖硅藻(Navicula sp.)和红藻时,贝壳颜色的表型为橘红色;而在摄食褐藻、绿藻和以海带粉为唯一海藻源的人工配合饵料时,贝壳颜色的表型为黄色。GG和Go基因型的个体,在摄食底栖硅藻、红藻时,贝壳颜色的表型为褐红色;在摄食褐藻、绿藻和以海带粉为唯一海藻源的人工配合饵料时,贝壳颜色的表型为绿色。该结果表明,相同基因型的皱纹盘鲍在摄食不同类型的食物时,贝壳表现型不同,即不同类型的食物可以导致2种基因型皱纹盘鲍的贝壳颜色表现型在一定范围内发生转换:oo基因型的个体,贝壳的颜色可以表现为橘红色或者黄色,不会出现野生型皱纹盘鲍的褐红色或绿色;而GG与Go基因型的个体,相应的贝壳颜色表型只能是褐红色或者绿色,不会出现oo基因型可能表现的橘红色或黄色。特定基因型的皱纹盘鲍,在摄食特定类型的食物时贝壳的相应部位可表现出特定的颜色。皱纹盘鲍的这种“食物-贝壳颜色”的相关性可作为一种形态标记,用于标识皱纹盘鲍的个体和群体,该标记技术可用于皱纹盘鲍的养殖技术和遗传学研究。 此外,选用了贝壳颜色遗传学实验中建立的贝壳颜色发生分离的家系为实验材料,以壳长为指标,分析比较了来自相同家系的O表型与G表型个体之间的生长速度。结果表明,在幼鲍发育至412天止的3-5个统计时段内,没有在同一家系来源的2种贝壳颜色表型个体之间检验到生长速度的显著差异。 2. 皱纹盘鲍不同选育群体及杂交群体的贝壳形态参数分析 在皱纹盘鲍的7个群体中(包括已经对生长速度为指标进行了多代人工选育的群体4个、野生群体之间直接杂交繁育的杂交F1群体3个),测量了4-6龄成体样本的壳长(L)、壳宽(W)、壳高(H)和壳重(Sw),并计算了L/(L+W+H)、W/(L+W+H)、H/(L+W+H)和Sw/(L×W×H)等4个壳形态学参数。用方差分析方法(MANOVA、ANOVA)统计并比较了这些壳形态参数在皱纹盘鲍群体间的遗传变异。结果表明,4个壳形态参数在不同群体间变异系数分别为0.34、0.74、2.62和6.54,其中,H/(L+W+H)与Sw/(L×W×H)在各供试群体间均具有较高的多态性且差异达显著水平,表明这2个参数在不同群体间存在较高的遗传变异。由于在活体情况下无法测量壳重(Sw)性状,建议以参数H/(L+W+H)为指标对皱纹盘鲍贝壳形态(如壳型)等进行人工选择。 3. 皱纹盘鲍成体阶段生长性状的遗传参数估计 采用巢式设计,分析了成体阶段不同发育期皱纹盘鲍的壳长与生长速率的遗传力、不同发育期的壳长性状之间的遗传相关、以及不同发育期的生长速率之间的遗传相关,结果表明:(1)壳长遗传力在受精后第70 、130、320、320、380、490与550天的雄性组分估计值分别为0.161 ± 0.075、0.312 ± 0.131、0.326 ± 0.331、0.135 ± 0.228、0.153 ± 0.185和0.180 ± 0.106;雌亲组分估计分别为0.312 ± 0.172、0.699 ± 0.168、0.695 ± 0.168、0.977 ± 0.407、0.427 ± 0.195和0.449 ± 0.027。(2)生长速率遗传力在受精后第320~380天、490 ~ 550天,雄、雌组分估计值分别为0.080 ± 0.120(雄)、 0.210 ± 0.191(雌)以及0.299 ± 0.146(雄)、0.306± 0.148(雌)。雌亲组分的壳长遗传力和生长速率遗传力估计值较大且均达显著水平,表明皱纹盘鲍在成体阶段依然受母性效应的影响。成体阶段生长性状遗传力水平的估计对制定科学的皱纹盘鲍育种方案有指导意义。(3)雄亲组分估计的不同发育期(第390 ~ 550天)壳长间遗传相关为0.597 ~ 1.000,雌亲组分估计为0.589 ~ 1.177。由雄亲、雌亲组分估计,受精后第320~380天与第490 ~ 550天两个发育阶段生长速率间遗传相关均接近于0。雌亲组分估计不同发育期壳长间遗传相关均达显著水平(t0.05, d.f.=13 = 4.33 ~ 11.69,P<0.01),表明壳长性状早期选择有效,即在皱纹盘鲍早期阶段依据壳长性状对个体进行择优或去劣可在后期阶段获得壳长较大的个体。由于使用的雄亲数目少(8个父系半同胞),实验中以雄亲组分估计的遗传参数误差较大。 4. 皱纹盘鲍选育系间的群体杂交 进行了皱纹盘鲍4个人工选育系之间的完全双列杂交实验,以群体交配的方式共建立了16个组合;此外,以大连“98”选群与汕头“S”选群为亲本,以群体交配的方式建立了4个交配组合。对不同方向的杂交组合进行了中亲杂种优势、超亲杂种优势以及配合力等方面的评价。 (1)测量了4个选育群体(R、97、S和J)及其各杂交组合在受精后第9、20和30天时的壳长,统计分析了不同选育系间壳长性状的差异、评价了不同方向杂交组合的中亲与超亲杂种优势、以及配合力。结果如下: 选育系群体内交配繁育的4个组合,在受精后第9、20和30天的壳长均有显著差异,其中,97 97组合在早期发育各阶段均为最小,分别为0.462 ± 0.023mm、0.698 ± 0.057mm和1.476 ± 0.234mm;S S组合的3次测量值均为最大,分别为0.522 ± 0.023mm、0.824 ± 0.084mm和1.798 ± 0.229mm。 两个方向杂交组合与选育系亲本群体内交配组合的平均值和高亲值比较,得到如下结果:(A)受精后第9天壳长表现正向中亲杂种优势的组合有6个、表现负向中亲杂种优势的组合6个,其中J 97组合的中亲优势率最高,为9.05%;R S组合最低,为-6.61%。正向高亲杂种优势组合有4个、负向高亲杂种优势组合有8个,其中S J组合的高亲优势率最高,为5.77%;R S组合最低,为-7.96%。(B)受精后第20天壳长表现正向中亲杂种优势的组合有7个、表现负向中亲杂种优势的组合5个,其中J 97组合的中亲优势率最高,为12.60%;J R组合最低,为-8.72%。正向高亲杂种优势组合有3个、负向高亲杂种优势组合有11个,其中J 97组合的高亲优势率最高,为12.20%;J R组合最低,为-12.67%。(C)受精后第30天壳长表现正向中亲杂种优势的组合有7个、负向中亲杂种优势的组合5个,其中97 S组合的中亲优势率最高,为24.08%;S 97组合最低,为-12.69%。正向高亲杂种优势组合有6个、负向高亲杂种优势组合有6个,其中97 S组合的高亲优势率最高,为15.95%;S J组合最低,为-19.44%。上述结果表明,皱纹盘鲍不同选育系之间的交配组合,杂种优势率差异很大,因此,通过组配实验,将杂种优势率高的交配组合选择出来应用于生产,可望显著提高目标性状的产量。 对早期发育阶段各生长期壳长性状,亲本一般配合力(GCA)、各杂交组合间特殊配合力(SCA)以及正反交(REC)效应值进行方差分析,结果表明:各亲本GCA差异显著,说明各选育群体存在显著的遗传差异,其中汕头选群“S”在测量的各个生长期均为正值且显著大于其它各亲本;特殊配合力(SCA)以及正反交(REC)效应值较大在各杂交组合间存在显著差异,说明在早期生长发育阶段非加性遗传效应(显性和上位效应)占主导地位。综合各个生长期亲本GCA和杂交组特殊配合力(SCA)以及正反交(REC)效应值,杂交组合97×S在早期生长阶段不仅有较高SCA值而且两个亲本也具有较大的GCA值,表明选育系97和S较适宜作为杂交亲本使用。 (2)大连“98”选群与汕头“S”选群进行2×2因子设计的群体杂交实验,比较了各交配组合早期存活相关性状如受精率、孵化率、变态率以及壳长性状,评价了两个方向杂交组合平均以及不同方向杂交组合的中亲杂种优势率。结果表明早期发育阶段各组合间的受精率无显著差异,而孵化率、变态率等两个杂交方向平均的中亲杂种优势率为5.49%与12.53%,高于壳长性状的优势率(0.936-1.534%)。方差分析结果表明不同方向的杂交组合在早期发育阶段存活相关性状以及壳长性状存在显著差异。孵化率、变态率性状,S×98的中亲杂种优势率分别为13.21%与21.10%,均高于98×S的-3.84%与3.85%;而第10和25d壳长性状,S×98的中亲杂种优势率为1.14%与-2.52%,低于98×S的1.93%与4.41%。 为进一步评价“98”选群与“S”选群不同交配组合在不同温度条件下的生长,进行了基因型与环境的互作研究。从“98”选群与“S”选群的4个交配组合中分别取5月龄幼鲍100头,各组合随机分成3组,每组1个重复,分别于12°C、16°C和 22°C温度条件下进行培育,比较各交配组合基因型与温度对幼鲍生长的影响。不同温度条件下,各组合壳长生长的方差分析结果表明,基因型和温度都能够对幼鲍生长以及最终壳长产生极显著的影响(P < 0. 01),它们的交互作用也达到显著水平(P < 0.05)。杂交子代的幼鲍壳长在12°C、16°C和 22°C温度条件下均表现出杂种优势,双向杂交的中亲杂种优势率分别为5.32%、5.55%和0.03%,表明低温条件(12°C),比高温条件(22°C)下有更强的杂种优势。汕头“S”选群的早期孵化率、变态率、生长性状以及低温条件下幼鲍生长性状的单亲杂种优势率分别为16.64%、42.49%、3.42~5.79%和5.73~9.15%,单亲杂种优势率较大,表明可通过杂交手段,显著地改良汕头“S”选群在早期发育阶段的生长速度、存活率以及幼鲍期的生长性状。本研究的结果支持了Lerner(1954)杂种优势的基因与环境互作学说。 5. 皱纹盘鲍幼鲍的中间培育技术研究 (1)对南方越冬方式的评价 目前,每年的11月前后,将6-7月龄幼鲍运往南方的闽东、闽中、闽南沿海越冬,翌年4月至6月再运回到北方(大连、山东半岛)的养殖模式已经普遍应用于皱纹盘鲍的实际生产,为评价南方越冬的幼鲍培育方式,本研究分别以不同幼鲍材料在闽东三都海湾进行了越冬培育实验。 选择生产上壳长分别为18.37 ± 1.28 mm、15.89 ± 1.10 mm、14.55 ± 1.10 mm与10.59 ± 0.84 mm的幼鲍进行了为期6.5个月的越冬培育,实验结束时,存活率分别为95.56 ± 2.21%、90.55 ± 1.96%、83.97 ± 1.63%与63.30 ± 2.79%。回归分析表明,供试幼鲍在实验起始时的壳长与越冬阶段的存活率成正相关(P = 0.018 < 0.05)。该结果表明,提高幼鲍的规格可显著提高皱纹盘鲍的越冬成活率,因此对于实际生产而言,采取适当措施提高皱纹盘鲍越冬苗种的规格将大幅增加生产的收益,而采用生长速率快的品种、品系或提早采苗均可实现该目标。综合各规格组幼鲍,幼鲍在南方开放性水域进行越冬培育的平均存活率较高,可达到91.38±0.01%,从幼鲍南方越冬的存活曲线可以看出,幼鲍的死亡主要集中在从大连运至福建某地后的15天内,出现死亡高峰的原因可能是由于运输过程的胁迫。此外,2月及4月中下旬水温出现显著降低或回升时也有较明显的死亡出现。该部分结果,对皱纹盘鲍幼鲍的养成管理有指导意义,可以通过合理安排越冬时间、避开死亡的敏感期等措施减少苗种越冬阶段的死亡量。 以中国大连野生群体繁育的子一代为亲本(10♀,10♂),以群体交配的方式繁育F2代个体为实验材料,分别于南方海区以及北方室内升温水方式下进行生长、存活比较,结果表明南方越冬培育方式下,幼鲍壳长的日增长率为81.37-108.89 µm•day-1,与北方室内升温培育条件相比,壳长生长提高了1.08 ~ 1.68倍;而存活率无显著差异。皱纹盘鲍幼鲍南方越冬方式的优势主要体现在鲍鱼幼鲍的生长速度加快,同时节约养殖场的能耗 (2)幼鲍培育过程中的养殖密度与分选效应评价 以3种规格皱纹盘鲍幼鲍为材料比较幼鲍在4个培育密度以及分选或混养条件下壳长的平均日生长及特定生长率。在南方越冬培育方式下实验进行106天,多因素方差分析结果表明实验初始幼鲍的壳长以及培育密度对壳长的生长有显著影响,而且密度效应在不同幼鲍起始规格组中有不同表现;分选没有能够提高不同规格组的生长。本研究的结果对皱纹盘鲍幼鲍的越冬培育有一定的指导作用。
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扇贝是我国海水养殖的重要品种,但自1994年以来,养殖扇贝陆续爆发的大规模死亡,不但造成了巨大的经济损失,而且直接威胁到现有产业的生存和发展。引起扇贝大规模死亡原因是多方面的,其主要原因是养殖环境恶化、扇贝种质衰退和抗病力下降。因此,深入研究扇贝免疫防御机制,探讨提高机体抗病力的有效途径和方法,改良种质和培育抗病品系,无疑是解决目前困扰扇贝养殖业健康可持续发展的必经之路。 Toll样受体(TLRs)家族是新近发现的模式识别受体(PRRs),参与识别病原体相关的分子模式(PAMPs),在天然免疫系统中起着非常重要的作用。哺乳动物中Toll样受体信号通路还参与诱导树枝状细胞成熟、参与免疫耐受、参与凋亡发生发展、介导非感染性因素的识别等,被视为联系天然免疫和获得性免疫的桥梁。同时果蝇的Toll信号通路也是不具备获得性免疫的果蝇赖以抵御病毒、细菌和真菌感染,介导天然免疫反应的重要信号通路。 本研究采用大规模EST测序方法,结合Genome Walker库的构建和cDNA末端快速扩增技术,从栉孔扇贝克隆得到CfToll-1、CfMyd88、CfTRAF6和CfCactus这四个Toll样受体信号通路基因的全长cDNA,同时用荧光实时定量PCR技术检测了这些基因的组织分布及在脂多糖(LPS)和肽聚糖(PGN)刺激下的表达规律。 栉孔扇贝Toll样受体(CfToll-1)的cDNA序列全长4308 bp,包含5’非翻译区(UTR)211 bp,3597 bp的开放阅读框,500 bp的3’UTR,最后为18个腺嘌呤的ploy A 尾巴。开放阅读框编码1198个氨基酸的多肽,该多肽的估计分子量为137.41kd,估计的等电点为5.62,该多肽有信号肽,具有一个预测的跨膜区,因此是一种跨膜蛋白。经BLAST比对,CfToll-1基因与节肢动物多种Toll蛋白高度的相似性。SMART(Simple Modular Architecture Research Tool)软件分析,CfToll-1包含典型的Toll样受体的结构:富含亮氨酸的重复序列的胞外区(leucine-rich repeats, LRR),一段跨膜结构域,以及胞内区的TIR结构域(Toll/IL-1 receptor homologous region)。利用Real-time RT-PCR发现CfToll-1mRNA在扇贝体内普遍存在于血细胞、肌肉、外套膜、心、性腺和鳃组织中。利用体外培养的原代血细胞系研究不同浓度LPS刺激后CfToll-1的表达变化,结果显示低剂量(100ng.mL-1 )LPS 使CfToll-1 mRNA表达量减小,该变化在1.5h、3h 和9h组差异显著,虽然在6h组表达量稍有恢复,但尚未达到对照水平;用1μg.mL-1LPS处理细胞时, 6h组CfToll-1表达量明显上调,约为对照水平的2倍。证实细菌结构脂多糖对CfToll-1基因的表达有影响,且这种影响有剂量依赖效应。 栉孔扇贝Myd88同源基因(CfMyd88)的cDNA序列全长1554bp,包含5’UTR 427 bp,1101bp的开放阅读框,最后为18个腺嘌呤的ploy A 尾。CfMyd88的开放阅读框可编码367个氨基酸的多肽,该多肽的估计分子量为42.37kD,估计的等电点为5.71。利用SMART程序分析发现CfMyd88编码了Death和TIR结构域, 这两个结构域是Myd88特征结构。BLAST程序发现扇贝的序列与数据库哺乳动物的Myd88基因高度同源。原代培养的扇贝血细胞在受到PGN刺激后,CfMyd88 mRNA表达在1.5小时开始下调,直到9小时下调至对照表达量的1/10,证实肽聚糖结构对CfMyd88基因的表达有影响。 栉孔扇贝TRAF6同源基因(CfTRAF6)的cDNA序列全长2510bp,包含5’UTR 337 bp,1965bp的开放阅读框,3’UTR 208bp,最后为21 个腺嘌呤的ploy A 尾巴。CfTRAF6开放阅读框编码655个氨基酸的多肽,该多肽的估计分子量为74.09kD,估计的等电点为6.01。InterPro Scan在线分析发现CfTRAF6有典型的TRAF蛋白家族的特征结构,包括的一个指环结构,两个锌指结构,一个MATH (the meprin and TRAF homology)结构域以及Coiled-coil区域。CfTRAF6的序列与数据库多物种的TRAF6高度同源,同源性最高的是乌贼序列(Identity=68)和鼠类(Identity=45%)。利用Real-time RT-PCR,发现CfTRAF6在各组织普遍存在,在性腺中的表达最高。原代培养的扇贝血细胞在受到不同浓度PGN刺激后,与CfMyd88的情况一样,CfTRAF6的表达量变化减少,且这种变化随剂量的增加更加明显。 栉孔扇贝Cactus同源基因(CfCactus)的cDNA序列全长2488bp,包含5’UTR 181 bp,840bp的开放阅读框, 3’UTR 1467bp,最后为19个腺嘌呤的ploy A 尾巴。CfCactus的开放阅读框编码279个氨基酸的多肽,该多肽的估计分子量为31.37 kD;估计的等电点为4.74,与果蝇的Cactus基因的等电点相近(4.5)。利用SMART程序分析发现CfCactus主要编码了ANK结构域(ankyrin repeats)。Cactus基因为哺乳动物NF-κB抑制蛋白IκB的同源分子,BLAST 程序发现扇贝的序列与数据库多物种的Cactus或IκB基因高度同源。同源性最高的是太平洋牡蛎(Identity=35%)和圆尾鲎(Identities = 44%)。对CfTCactus mRNA在扇贝的血细胞、性腺、 肠的组织表达进行分析,并同时与CfTRAF6和CfMyd88的表达量进行了对比,发现CfCactus的表达水平明显高于这两个基因,而且CfTRAF6的基因表达量也高于CfMyd88,表现出级联放大效应。正常情况下,三个基因在性腺的表达量最高,推测这条通路可能和发育等功能密切相关。 通过本研究我们首次在双壳类软体动物找得到与果蝇Toll蛋白家族高度同源的CfToll-1基因,同时发现其他三个在Toll样受体信号传递过程中起重要作用的基因,其中包括在软体动物中获得的第一个Toll样受体的接头分子-CfMyd88基因,该结果直接证明软体动物具有与哺乳动物和节肢动物高度类似Myd88依赖的Toll样受体信号通路。同时通过这些基因组织分布的研究以及细菌结构LPS和PGN对这条通路上基因表达的影响,证明扇贝Toll信号通路可能与在果蝇中一样,参与扇贝的发育和免疫防御等多种功能。
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能量代谢指动物在进行生理活动(如摄食、消化以及动物的活动等)时所消耗能量的总和,一般以动物的呼吸率利排泄率来估计动物的能量代谢。其主要研究内容是闸明生物能量代谢的基木规律以及与环境闪子的关系。菲律宾蛤仔(Ruditapesphil ippmarum)是我国一种重要的养殖贝类,关于其能量代谢的研究却较少,这种状况妨碍了菲律宾蛤仔养殖生态理论的完善和养殖技术的提高。本研究主要对菲律宾蛤仔呼吸率和排泄率的基本规律(能量代谢与体重的关系、能量代谢的昼夜变化)及其与环境因子(饵料浓度、水温、栖息底质环境)的关系进行探讨。研究结果如下:1.不同体重菲律宾蛤仔代谢率小同。实验川菲律宾蛤仔分三种大小:l(干肉重为0.07-0.14g)、ll(干肉重0.27-0.34g)、III(干肉重0.45~0.63g)。温度包括:26℃(八月)、20℃(十月)、1 5℃(十二月)、9℃(一月)。实验共设四个饵料浓度:2.28±0.25,6.454±0.44,10.284±0.82,15.414±1.56mgTPM/L(TPM,总颗粒物),饵料中POM(颗粒有机物)含量都为4.68±1.64 mg/L。常温下菲律宾蛤仔代谢率随着体重的增大而增大。15℃、20~C、26℃时蛤仔呼吸率与干肉重呈明显的幂函数关系R=aW~b,a值变动范围为0.1076-0.3309;b值变动范围为0.239l~0.8381;蛤仔排泄率与干肉重也呈明显的幂函数关系N=aW~b,a值变动范围为14.213~68.362:b值变动范围为0.3673-1.1 532。9℃(饵料浓度为2.28±0.25mgTPM/L)、20℃(饵料浓度为10.284-0.82mgTPM/L)、26℃(饵料浓度为6.454±0.44mgTPM/L)时不同体重蛤仔氧氮比差异显著,其它情况下不同体重蛤仔氧氮比差异不显著。2.常温下菲律宾蛤仔代谢率受饵料浓度的影响,不同大小蛤仔受饵料浓度的影响程度不同。I组蛤仔呼吸率受饵料浓度的显著影响,II组III组蛤仔呼吸率只在9℃(一月)和26~C(八月)时受饵料浓度的显著影响。26℃时影响最显著,26℃时I组蛤仔在饵料浓度为2.28±0.25,6.45±0.44,l0.28±0.82,15.4l±1.56mgTPM/L时呼吸率分别是O.086,0.146,0.073,0.093(mlO_2/h);ll组蛤仔在上述浓度饵料中呼吸率分别是0.138,0.214,0.J 26,0.12l(mlO_2/h);III组蛤仔在上述浓度饵料中呼吸率分别是0.129,0.266,0.186,0.192(mlO_2/h)。菲律宾蛤仔呼吸率在饵料浓度为6.45±0.44 mgTPM/L时最高,蛤仔呼吸率在其它饵料浓度时都会降低。菲律宾蛤仔排泄率在饵料浓度为10.28±0.82 mgTPM/L和15.4l士1.56mgTPM/L时显著高于其它浓度组,9℃时这种趋势更明显,9℃时饵料浓度为2.28±0.25,6.454±044,lO.284±0.82,15.41±1.56mgTPM/L中I组蛤仔排泄率分别是4.297,2.874,8.003,6.658(μgNH_3-N/h);II组蛤仔在上述浓度饵料中排泄率分别是4.011,3.609,10.427,12.732(μgNH_3-N/h);III组蛤仔在上述浓度饵料中排泄率分别是2.28 l,6.452,10.283,15.417(μgNH_3-N/h)。3.菲律宾蛤仔代谢率受自然温度的显著影Ⅱ向。I组蛤仔在9℃、15℃、20℃、26℃时呼吸率平均为0.057,0.085,0.039,O.099;II组蛤仔在上述四个温度中呼吸率平均为0.08,O.128,0.089,0.149(mlO_2/h),I组和II组蛤仔在9℃和20~C时呼吸率较低,在26℃时呼吸率最高。III组蛤仔在上述四个温度中呼吸率平均为0.09,O.1 59,O.143,O.193(mlO_2/h),在9℃时llI组蛤仔呼吸率显著低于其它温度组。温度为9℃、15℃、20℃、26℃时l组蛤仔排泄率平均为5.458,13.169,4.946,11.138(μgNH_3-N/h):II组蛤仔在上述温度中排泄率平均为7.695,23.578,8.319,23.90l(μgNH_3-N/h);III组蛤仔在上述温度中排泄率平均为11.738,27.443,15.658,35.407(μgNH_3-N/h),蛤仔排泄率在15℃和26℃时均高于9℃和20℃。4.摄食状态与饥饿状态菲律宾蛤仔代谢率有明显不同。26℃时蛤仔静止状态呼吸率平均为0.336(m102/g干重.h),摄食状态呼吸率平均为0.656(ml0_2干重.h),摄食状态呼吸率比静止状态平均升高了0 32(ml0_2/g干重.h);26℃时蛤仔静止状态排泄率平均为39.471(μgNH_3-N/g干重.h),摄食状态排泄率平均为88.08(μgNH_3-N/g干重.h),摄食状态排泄率比静止状态排泄率平均升高了48.6(μgNH_3-N/g干重.h)。摄食状态代谢率平均是静止状态的2~3倍。根据摄食引起的呼吸率和排泄率升高量得出每氧化产生lμgNH_3-N需0_2量平均为7.05μl。5.人工控制温度对菲律宾蛤仔代谢率有明显影响。不同大小蛤仔受温度的影响程度不同。在温度5℃、10℃、l 5℃、20℃、26℃,I组和II组蛤仔呼吸率都随着温度的升高而升高,在10℃~l5℃和20℃~26℃这二个温度变化范围内呼吸率变化最大,在20℃~26℃时I组蛤仔呼吸率变动范围为O.85~1.04(m10_2/g干重.h)、II组蛤仔变动范围为0.57~0.86(ml0_2/g干重.h)。III组蛤仔呼吸率只在5℃~l0℃时明显增高,变动范围为0.09~0.5l(m10_2/g干重.h),在10℃~26℃范围内变化不大。I组和II组蛤仔排泄率随着温度的升高而升高,变动幅度较大,在5℃~26℃范围内其排泄率变动范围为10.32~81.53(μgNH_3-N/g干重.h);而 III组蛤仔排泄率只在5℃~15℃时随着温度的升高而升高,其排泄率变动范围为6.75~23.77(μgNH_3-N/g干重.h),在15℃~26℃范围内几乎不变。III组蛤仔的适温范围比I组和II组蛤仔广。菲律宾蛤仔在5℃和10℃时氧氮比变化明显,变动范围为2.76~11.44,在15~26℃时变化不大。6.菲律宾蛤仔代谢率有明显的日节律性,呈正弦曲线型变化。蛤仔夜问代谢率明显升高。I组蛤仔夜间呼吸率平均为0.867(m10_2/g干重.h),白天呼吸率平均为O.504(m10_2/g干重.h);II组蛤仔夜间呼吸率平均为0.438(m10_2/g干重.h),白天呼吸率平均为0.36l(m102/g干重.h);III组蛤仔夜间呼吸率平均为0.409(m10_2/g干重.h),白天呼吸率平均为0.252(m102/g干重.h)。在22:00-23:00菲律宾蛤仔呼吸率最高。7.底质环境对菲律宾蛤仔的代谢率有明显影响。在饥饿状态下菲律宾蛤仔在泥沙底质中呼吸率平均为l 406(m10_2/g干重h),在无泥沙环境中呼吸率平均为O.963(ml0_2/g干重.h);摄食状态下菲律宾蛤仔在泥沙底质中呼吸率平均为1.59l(m102/g干重.h),在无泥沙环境中呼吸率平均为1.115(m10_2/g干重.h)。在饥饿状态下菲律宾蛤仔在泥沙底质中排泄率平均为78.934(μgNH_3-N/g 干重.h),在无泥沙环境巾排泄率平均为45.043(μgNH_3-N/g干重.h);摄食状态下菲律宾蛤仔在泥沙底质中排泄率平均为87.12l(μgNH_3-N/g干重.h),在无泥沙底质中排泄率平均为58.354(μgNH_3-N/g干重.h)。蛤仔在泥沙环境中呼吸率和排泄率都明显升高。
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采用FDBN柱前衍生高效液相色谱法测定了藏药材波棱瓜中氨基酸的含量。结果表明,波棱瓜中氨基酸总量为189.4g·kg^-1,其中8种必需氨基酸含量占氨基酸总量的33.47%。
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当今社会,随着系统复杂度越来越高以及对系统可靠性、安全性要求的日益提高,故障诊断越来越受到人们的重视,在这其中,非线性系统由于自身的特点,一直是故障诊断中的一个热点和难点。本文针对这个问题,对非线性系统传感器故障诊断的若干关键技术进行了深入研究,旨在建立一种相对通用的非线性系统传感器故障诊断方法。本论文研究的主要内容包括系统数据故障特征提取、故障检测、故障识别等。对于故障数据的特征提取问题,在深入分析现有各种算法的基础上,结合非线性传感器数据的特点,将现有的局部线性嵌入映射算法(LLE)引入到故障诊断中来。LLE算法克服了传统线性方法如主元分析(PCA)法在非线性系统上应用的局限,同时也具有以下几个突出的优点:1、能够很好的表达数据的内在流形结构,保留数据特征,这点在故障诊断中有重要的意义,可以比较好的保留原有数据的故障特征;2、不存在局部最优解;3、算法本身参数的选择很少,适合于工程应用。特征提取的研究为后续的故障检测与故障诊断打下基础。同时对原有的LLE算法本身存在的一些缺陷做了一定的改进,完善了其在故障诊断中的应用。LLE算法假设每个数据点及其近邻是局部线性的,因此近邻的选择就不能改变数据的固有流形。从这个概念出发,引入切空间距离代替传统的欧式空间距离,使近邻点的选择更加符合局部线性的要求,从而能更好的提高数据的输入/输出映射质量。针对LLE算法中内在维数难以估计的问题,在算法中应用分形中相关维的计算方法,用线性拟和方法改进了G-P算法,实现了线性区域的自动选择,提高了内在维数估计的精度。最后,通过核函数估计的方法,建立一个数据投影模型,可以实现实时数据到特征空间的直接投影,避免重复的计算权重矩阵,减少了计算复杂度。特征提取之后,针对故障检测问题,提出了一种基于空间分布的故障检测方法,通过将系统数据与高维空间分布相结合,把同一状态下的系统数据近似成为同一分布下的样本采样,检测实时数据是否服从系统正常状态下的分布,从而完成数据的故障检测。同时,结合LLE算法中的核函数投影方法,实现了数据在投影的同时完成故障判别,减少了计算复杂度。在故障检测的基础上,提出了基于投影寻踪的方法进行故障识别。对原有的投影寻踪的应用方法做了一定的修改,通过对最优投影向量的模式匹配完成故障的识别。首先建立各种故障状态下与正常数据之间的最优投影向量的数据库,然后将实时数据的最优投影向量与历史故障进行模式匹配,从而完成故障识别。为了提高投影向量寻找的速度与精度,采用粒子群优化算法,这也可以同时避免算法陷入局部极值点。最后,在总结全文的基础上,讨论了基于局部线性嵌入映射算法在理论及应用上有待于进一步研究的若干问题。