Variabilidade intratípica de HPV 16 em relação à origem étnica e HLA de uma população de alto risco para o câncer do colo do útero

A infecção por papilomavirus é a principal causa de desenvolvimento de neoplasias intraepiteliais cervicais (NIC) e câncer do colo do útero (CCU). Estudos epidemiológicos têm demonstrado que a persistência do genoma viral encontra-se associado a variantes moleculares específicas de papilomavirus humano (HPV) de alto risco. As moléculas HLA de classe II têm um importante papel na resposta imune. Associações entre HLA e CCU ou infecção por HPV tem sido demonstrado em diferentes populações. O nosso objetivo foi verificar se a variabilidade de HLA-DRB1 e DQB1 estavam associada ao CCU e NIC III em mulheres de Belém, uma população formada pelos 3 principais grupos étnicos humanos e uma área de alto risco para o CCU no Norte do Brasil. Foi investigada a existência de diferenças na distribuição de alelos HLA entre mulheres com CCU e NIC III portadoras de diferentes variantes de HPV-16 e mulheres citologicamente normais. Os genes HLA DQB1 e DRB1 foram tipados pelo método de PCR-SSO em 95 casos e 287 controles de mulheres com citologia normal atendidas em um centro de prevenção do colo do útero na mesma cidade. As variantes de HPV-16 foram tipadas por sequenciamento de um fragmento da região controladora do genoma viral (LCR). O polimorfismo na posição 350 do gene E6 foi tipado baseado em um protocolo de hibridização em pontos, para identificar a alteração na posição 350T→G. A magnitude das associações foi estimada por odds ratio (OR) e os respectivos intervalos de confiança (IC), ajustados para potenciais fatores de confusão. Uma associação positiva foi observada entre CCU e os haplótipos DRB1* 150 l-DQB1*0602, DRB1*04-DQB1*0301 e DRB1*1602-DQB1*0301. Ao contrário, DRB1*01-DQB1*0501 mostrou um efeito protetor. Os alelos DRB1*0804, DQB1*0402 apresentaram efeito protetor contra positividade por HPV. O alelo DQB1*0502 e o grupo DRB1*15 foram positivamente associados. Os nossos resultados mostram que as associações positivas de DRB1*1501 e DRB1*1602 podem ser atribuídas a variantes asiático-americanas quando comparado a variantes européias. O risco conferido a DRB1*1501 foi encontrado associado tanto a variantes E6350G quanto a variantes E6350T, entretanto, o maior efeito foi devido às variantes E6250T. A associação positiva de DRB1*1602 foi significativa somente no grupo de mulheres positivas para E6350G. Estes resultados estão de acordo com a composição étnica da população estudada bem como um maior potencial oncogênico de certas variantes. Nossos dados sugerem que a contribuição dos alelos HLA na susceptibilidade genética ao CCU difere de acordo com a distribuição das variantes de HPV em uma dada região geográfica ou grupo étnico.

Noticias sobre el virus del papiloma humano y su vacuna en la prensa valenciana (2006-2011)

La introducción de la vacuna contra el virus del papiloma humano (VPH) dirigida a mujeres adolescentes ha tenido en España un desarrollo no exento de cierta controversia. Asociada inicialmente al mensaje de «vacuna contra el cáncer de útero» que ofrecía una nueva posibilidad de lucha contra esa enfermedad, obtuvo una réplica que moderaba la euforia con un mensaje dirigido a probar evidencias. Mientras se administraba la segunda dosis de vacuna (febrero de 2009) ocurrió un suceso inesperado en Valencia relacionado con la aparición de acontecimientos adversos tras la administración de la vacuna en dos adolescentes, que tuvo un explosivo tratamiento mediático. Este estudio analiza el alcance y el contenido de las noticias aparecidas en dos periódicos regionales valencianos de gran tirada durante el sexenio 2006-2011 que mencionan al VPH, su vacuna y el cáncer de útero. Se discute la influencia que los mensajes emitidos hayan podido tener en la aceptabilidad de la vacuna.

Notificación de reacciones adversas a la vacuna frente al virus del papiloma humano en la Comunidad Valenciana (2007-2011)

Introducción: En 2009, 2 casos de convulsiones en adolescentes tras la administración de la vacuna tetravalente frente al virus del papiloma humano (VPH) generaron impacto mediático y afectaron negativamente la confianza del público en esta vacuna. Nuestros objetivos fueron describir las sospechas de reacciones adversas (SRA) notificadas al Centro Autonómico de Farmacovigilancia de la Comunidad Valenciana (CAFCV) tras la administración de la vacuna frente al VPH y comparar la tasa de notificación de síncope y convulsiones de esta vacuna con la de otras vacunas administradas en adolescentes. Material y métodos: Estudio descriptivo de las notificaciones de SRA relacionadas con esta vacuna recibidas por el CAFCV entre 2007 y 2011. Resultados: Las manifestaciones clínicas más comunicadas fueron mareos, cefalea y síncope. Las tasas de notificación de síncope o pérdida de conciencia y convulsiones con la vacuna frente al VPH fueron de 17 y 3,2 por 100.000 dosis administradas, respectivamente, y de 15 y 1,6 para síncope o pérdida de conciencia y convulsiones sincopales ocurridas el día de la vacunación. Las tasas de notificación de síncope o pérdida de conciencia y convulsiones fueron de 6,4 y 0,4 para otras vacunas. Conclusiones: Las tasas de notificación de síncope o pérdida de conciencia y convulsiones fueron mayores para la vacuna frente al VPH que para otras vacunas administradas en adolescentes; esto es consistente con la atención mediática originada por la vacuna y con hallazgos de estudios previos. No obstante, la información obtenida sobre las SRA a la vacuna sugiere un buen perfil de seguridad.

Características de los vídeos en español publicados en Youtube sobre la vacuna contra el virus del papiloma humano

Fundamentos: Internet constituye un recurso de búsqueda de información relacionada con la salud. El objetivo de este trabajo fue conocer las características de los vídeos en idioma español de YouTube relacionados con la vacuna contra el virus del papiloma humano (VPH). Métodos: Se realizó un estudio observacional a partir de una búsqueda en YouTube el 26 de julio de 2013, con las palabras claves: “vacuna virus papiloma humano”, “vacuna VPH”, “vacuna Gardasil”, “vacuna Cervarix”. Se establecieron categorías por tipo, fuente de publicación y predisposición favorable o no hacia la vacuna. Se registró el número de visitas, tiempo de duración de los videos y origen de los 20 vídeos más visitados. Resultados. Se encontraron 1.080 videos registrados, 170 fueron seleccionados y clasificados como: noticias locales (n=39; 37 favorables, 2 desfavorables; 2:06:29; 42972 visitas), noticias nacionales (n=32; 30/2; 1:49:27; 50138 visitas), creados por subscritores de YouTube (n=21; 13/8; 2:50:35; 144655 visitas), entrevistas (n=21; 20/1; 1:44:39; 10991 visitas), anuncios (n=21; 19/2; 0:27:05; 28435 visitas), conferencias (n=17; 15/2; 3:25:39; 27206 visitas), documentales (n=16; 12/4; 2:11:31; 30629 visitas), y noticias internacionales (n=3; 3/0; 0:11:33; 1667 visitas). De los 20 videos más reproducidos predominan los favorables a la vacunación (n=12; 0:43:43; 161.789 visitas) frente a los desfavorables (n=8; 2:44:14; 86.583 visitas). Conclusiones. Predominan los videos que tiene una opinión favorable hacia la vacuna contra el VPH, aunque los videos de contenido negativo son los más extensos y reproducidos.

Aceptabilidad de la vacuna contra el VPH en estudiantes universitarios españoles durante la etapa pre-vacunal: un estudio transversal

Introducción. El cáncer de cuello de útero (CCU), segunda causa de mortalidad por cáncer en mujeres, está asociado a la infección por virus de papiloma humano (VPH), cuya máxima prevalencia se sitúa entre los 20 y 24 años de edad. Desde 2006 se dispone de una vacuna contra el VPH. El objetivo de este estudio es evaluar los conocimientos sobre CCU, la infección por VPH y su vacuna, valorando su aceptabilidad en población universitaria. Métodos. Estudio transversal sobre 1.750 estudiantes de la Universidad de Alicante (2008) seleccionados al azar, proporcional por sexo y estudios, mediante un cuestionario ad-hoc validado. Se calcularon porcentajes, intervalos de confianza, tablas de contingencia según sexo, edad y tipo de estudios, calculando odds ratios ajustadas (OR). Resultados. Muestra con 58,6% mujeres y 6,6% de estudiantes biosanitarios. Un 87,3% dispuestos a vacunarse frente al VPH, el 94,3% vacunaría a sus hijas, un 48,0% había oído hablar de la vacuna. El 90,6% tiene bajos conocimiento sobre la infección por VPH y un 82,2% sobre la vacuna. Un 22,4% manifiesta conocer la asociación entre VPH y CCU. Las mujeres registran OR mayores en conocimientos y predisposición a vacunarse. La aceptabilidad de la vacuna contra VPH se asocia con el sexo y la confianza en las vacunas como método preventivo, la influencia de los conocimientos previos es escasa sobre la predisposición vacunal. Conclusiones. Alta aceptabilidad de la vacuna en el periodo estudiado. Aumentar la confianza hacia las vacunas puede influir en una mejor predisposición a vacunarse.

Aceptabilidad de la vacuna contra el virus del papiloma humano en madres de la provincia de Valencia (España)

Introducción: La Comunidad Valenciana inició en octubre del 2008 el programa de vacunación contra el virus del papiloma humano (VPH) en niñas de 14 años. El objetivo de este estudio es evaluar los conocimientos sobre la infección por VPH y su vacuna en madres de adolescentes e identificar los factores asociados a la predisposición de vacunar a sus hijas. Material y métodos: Estudio observacional transversal mediante cuestionario dirigido a madres de alumnas nacidas en 1995 matriculadas en centros de secundaria de la provincia de Valencia durante 2010-2011. Muestra aleatoria estratificada por conglomerados (n = 1.279). Análisis estadístico: porcentajes, intervalos de confianza, OR, contrastes chi al cuadrado y regresión logística multivariante. Resultados: Ochocientos treinta y tres cuestionarios completados (65,1%). El 76,6% de las madres habían vacunado a sus hijas contra el VPH. El 93,8% conocía la vacuna, sobre todo a través de la televisión (71,5%). El 78,5% recibió consejo favorable de un profesional sanitario, lo que mejoró la vacunación de sus hijas (OR: 2,4). Los conocimientos globales sobre la infección por VPH y la vacuna fueron bajos. La confianza de las madres en las vacunas como método preventivo mejora la vacunación contra VPH (OR: 3,8). El miedo a los efectos adversos (45,6%) fue el primer motivo de rechazo. Conclusiones: No parece que los medios de comunicación influyan en la decisión de vacunar. Sería conveniente minimizar la percepción de riesgo ante esta vacuna. El consejo del profesional sanitario actúa a favor de la vacunación si este interviene activamente en sentido positivo. Existe una brecha entre nivel de conocimientos y toma de decisión para vacunar.

Papilomatose oral : considerações a propósito de um caso clínico

Trabalho Final do Curso de Mestrado Integrado em Medicina, Faculdade de Medicina, Universidade de Lisboa, 2014

Impaired Antigen Presentation and Effectiveness of Combined Active/Passive Immunotherapy for Epithelial Tumors

Background: Although immunization with tumor antigens can eliminate many transplantable tumors in animal models, immune effector mechanisms associated with successful immunotherapy of epithelial cancers remain undefined. Methods: Skin from transgenic mice expressing the cervical cancer-associated tumor antigen human papillornavirus type 16 (HPV16) E6 or E7 proteins from a keratin 14 promoter was grafted onto syngeneic, non-transgenic mice. Skin graft rejection was measured after active immunization with HPV16 E7 and adoptive transfer of antigen-specific T cells. Cytokine secretion of lymphocytes from mice receiving skin grafts and immunotherapy was detected by enzyme-linked immunosorbent assay, and HPV16 E7-specific memory CD8(+) T cells were detected by flow cytometry and ELISPOT. Results: Skin grafts containing HPV16 E6- or E7-expressing keratinocytes were not rejected spontaneously or following immunization with E7 protein and adjuvant. Adoptive transfer of E7-specific T-cell receptor transgenic CD8(+) T cells combined with immunization resulted in induction of antigen-specific interferon gamma-secreting CD8(+) T cells and rejection of HPV16 E7-expressing grafts. Specific memory CD8(+) T cells were generated by immunotherapy. However, a further HPV16 E7 graft was rejected from animals with memory T cells only after a second E7 immunization. Conclusions: Antigen-specific CD8(+) T cells can destroy epithelium expressing HPV16 E7 tumor antigen, but presentation of E7 antigen from skin is insufficient to reactivate memory CD8(+) T cells induced by immunotherapy. Thus, effective cancer immunotherapy in humans may need to invoke sufficient effector as well as memory T cells.

Cervical Cancer Control, Priorities and New Directions

Cervical cancer is caused by infection with a range of high risk oncogenic human papillomavirus (HPV) types, and it is now accepted that >99% of cervical cancer is initiated by HPV infection. The estimated lifetime risk of cervical cancer is nevertheless relatively low (less than I in 20 for most community based studies). Although sensitivity and specificity of the available diagnostic techniques are suboptimal, Screening for persistent HPV infection is effective in reducing the incidence of cervical cancer. Infection can be detected by molecular techniques or by cytological examination of exfoliated cervical cells. Persistent infection is the single best predictor of risk of cervical cancer.(1) The latest findings of HPV and cervical cancer research need to be widely disseminated to the scientific and medical societies that are updating screening and management protocols, public health professionals, and to women and clinicians. This report reviews current evidence, clinical implications and directions for further research in the prevention, control and management of cervical cancer. We report the conclusions of the Experts' Meeting at the EUROGIN 2003 conference. (C) 2003 Wiley-Liss, Inc.

Functional memory CD8+ T cells can be generated in vivo without evident T help

Synthetic cytotoxic T cell (CTL) epitope peptides provide an effective and safe means of vaccination against cancers and viruses, as these peptides can induce specific CD8+ effector T cells in vivo. However, the effector CD8+ T cells induced by the minimal CTL epitope peptides do not last past about 3 weeks after the induction and no functional memory CD8+ T cells are generated. It is held that simultaneous induction of CD4+ T cells by incorporating peptides containing T-helper epitopes in the vaccine at the time of primary vaccination are necessary for the induction of long-lived functional memory CD8+ T cells. We now report that, surprisingly, incorporation of medium length (>20 AA) peptides devoid of detectable T-helper epitopes in a minimal CTL epitope-based vaccine can also induce long-lasting! functional rumour antigen specific memory CD8+ T cells that are capable of promoting protection against tumour challenge. This observation may have implications for the formulation of therapeutic anti-cancer and anti-virus peptide vaccines where a strong induction of CD4 T help would be undesirable. (C) 2004 Elsevier Ltd. All rights reserved.

Phase 1 study of HPV16-specific immunotherapy with E6E7 fusion protein and ISCOMATRIX (TM) adjuvant in women with cervical intraepithelial neoplasia

Purpose: Persistent infection of cervical epithelium with high risk human papillomavirus (HPV) results in cervical intraepithelial neoplasia (CIN) from which squamous cancer of the cervix can arise. A study was undertaken to evaluate the safety and immunogenicity of an HPV 16 immunotherapeutic consisting of a mixture of HPV16 E6E7 fusion protein and ISCOMATRIX(TM) adjuvant (HPV16 Immunotherapeutic) for patients with CIN. Experimental design: Patients with CIN (n = 3 1) were recruited to a randomised blinded placebo controlled dose ranging study of immunotherapy. Results: Immunotherapy was well tolerated. Immunised subjects developed HPV16 E6E7 specific immunity. Antibody, delayed type hypersensitivity, in vitro cytokine release, and CD8 T cell responses to E6 and E7 proteins were each significantly greater in the immunised subjects than in placebo recipients. Loss of HPV16 DNA from the cervix was observed in some vaccine and placebo recipients. Conclusions : The HPV16 Immunotherapeutic comprising HPV16E6E7 fusion protein and ISCOMATRIX(TM) adjuvant is safe and induces vaccine antigen specific cell mediated immunity. (C) 2004 Elsevier Ltd. All rights reserved.

ISCOMATRIX (TM) adjuvant: An adjuvant suitable for use in anticancer vaccines

Human Papillomavirus type 16 (HPV16) E6 and E7 oncoproteins are associated with cervical cancer development and progression and can therefore be used as target antigens for cancer immunotherapy. In this study we evaluated the immunogenicity in mice, of different vaccine formulations using recombinant HPV16 derived E6E7 or E7GST fusion proteins. When co-administered with ISCOMATRIX(TM) adjuvant, these E6E7 proteins consistently induced E7 specific CTL, in vivo tumor protection, antibody and DTH responses. ISCOMATRIX(TM) adjuvant has been developed for use in the formulation of novel human vaccines and has been evaluated for safety and toxicity in human trials. A formulation containing aluminum hydroxide (Al(OH)(3)) gave a lesser degree of E7 specific antibody, and no local E7 specific CTL response but similar DTH and tumor protection. These findings demonstrate the potential of ISCOMATRIX(TM) adjuvant to stimulate both cellular and humoral immune responses to endogenously processed target antigens, and hence is the preferred adjuvant when CTL responses are desirable. (C) 2004 Elsevier Ltd. All rights reserved.

Gene codon composition determines differentiation-dependent expression of a viral capsid gene in keratinocytes in vitro and in vivo

By establishing mouse primary keratinocytes (KCs) in culture, we were able, for the first time, to express papillomavirus major capsid (L1) proteins by transient transfection of authentic or codon-modified L1 gene expression plasmids. We demonstrate in vitro and in vivo that gene codon composition is in part responsible for differentiation-dependent expression of L1 protein in KCs. L1 mRNA was present in similar amounts in differentiated and undifferentiated KCs transfected with authentic or codon-modified L1 genes and had a similar half-life, demonstrating that L1 protein production is posttranscriptionally regulated. We demonstrate further that KCs substantially change their tRNA profiles upon differentiation. Aminoacyl-tRNAs from differentiated KCs but not undifferentiated KCs enhanced the translation of authentic L1 mRNA, suggesting that differentiation-associated change to tRNA profiles enhances L1 expression in differentiated KCs. Thus, our data reveal a novel mechanism for regulation of gene expression utilized by a virus to direct viral capsid protein expression to the site of virion assembly in mature KCs. Analysis of two structural proteins of KCs, involucrin and keratin 14, suggests that translation of their mRNAs is also regulated, in association with KC differentiation in vitro, by a similar mechanism

Hepatitis B surface antigen vector delivers protective cytotoxic T-lymphocyte responses to disease-relevant foreign epitopes

Although hepatitis B surface antigen (HBsAg) per se is highly immunogenic, its use as a vector for the delivery of foreign cytotoxic T-lymphocyte (CTL) epitopes has met with little success because of constraints on HBsAg stability and secretion imposed by the insertion of foreign sequence into critical hydrophobic/amphipathic regions. Using a strategy entailing deletion of DNA encoding HBsAg-specific CTL epitopes and replacement with DNA encoding foreign CTL epitopes, we have derived chimeric HBsAg DNA immunogens which elicited effector and memory CTL responses in vitro, and pathogen- and tumor-protective responses in vivo, when the chimeric HBsAg DNAs were used to immunize mice. We further show that HBsAg DNA recombinant for both respiratory syncytial virus and human papillomavirus CTL epitopes elicited simultaneous responses to both pathogens. These data demonstrate the efficacy of HBsAg DNA as a vector for the delivery of disease-relevant protective CTL responses. They also suggest the applicability of the approach of deriving chimeric HBsAg DNA immunogens simultaneously encoding protective CTL epitopes for multiple diseases. The DNAs we tested formed chimeric HBsAg virus-like particles (VLPs). Thus, our results have implications for the development of vaccination strategies using either chimeric HBsAg DNA or VLP vaccines. HBsAg is the globally administered vaccine for hepatitis B virus infection, inviting its usage as a vector for the delivery of immunogens from other diseases.

RNA interference for the treatment of cancer

RNA interference (RNAi) is the latest new technology in the field of genetic medicine in which specific genes can be turned off, or silenced, so as to affect a therapeutic outcome. It can be highly specific, works in the nanomolar range and is far more effective than the antisense approaches popular 10-15 years ago. Here we review the field and explore the potential role of RNAi in cancer therapy, highlighting recent progress and examining the hurdles that must be overcome before this promising technology is ready for clinical use. (C) 2006 Prous Science. All rights reserved.