552 resultados para E3
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Limplication des cellules B dans le dveloppement de lauto-immunit ne cesse dtre illustre par de rcentes publications. Les cellules prsentent des peptides du soi aux cellules T auto-ractives ce qui mne la production de cytokines pro-inflammatoires et danticorps auto-ractifs. Dans le prsent document, nous explorons la prsentation antignique et la modification post-traductionnelle du complexe majeur dhistocompatibilit II (CMH-II). MARCH1 est une E3 ubiquitine ligase qui cible le CMH-II et le relocalise le complexe vers les endosomes de recyclage. Ainsi, MARCH1 est un inhibiteur de la prsentation dantignes exognes. Ici, nous dmontrons que MARCH1 est exprim seulement dans la sous-population des cellules B folliculaires et que cette expression est perdue lors de lentre dans les centres germinatifs. Nous proposons que MARCH1 tablie une barrire de formation de centres germinatifs. Nous dmontrons le lien entre MARCH1 et la hausse de CMH-II la surface des cellules B la suite dun traitement lIL-10. De plus, nous avons test plusieurs stimuli activateurs des cellules B et dmontrons que MARCH1 est rgul la baisse dans tous les cas. De plus, nous mettons en valeurs le rle de la voie canonique dactivation de NF-B dans cette rgulation de MARCH1. Finalement, nous avons dvelopp un systme de lentivirus exprimant MARCH1 qui nous permet de forcer lexpression de MARCH1 dans des cellules rfractaires la transfection. Nous discutons de limplication de cette rgulation du CMH-II par MARCH1 dans le dveloppement de maladies auto-immunes.
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Les cellules T CD4+ humaines sont htrognes du point de vue de la permissivit linfection par le virus de limmunodficience humaine de type 1 (VIH-1). Notre laboratoire a pralablement dmontr que les cellules Th1 phnotype CXCR3+CCR6- sont relativement rsistantes linfection par le VIH-1 alors que les cellules Th1Th17 phnotype CXCR3+CCR6+ y sont hautement permissives. La rplication du VIH dpend de plusieurs facteurs cellulaires de restriction ou de permissivit agissant diffrentes tapes du cycle viral. Toutefois, malgr plusieurs avances, la comprhension des voies de signalisation cellulaire impliques dans la rgulation de la rplication du VIH est encore limite. Lobjectif majeur de ce projet de matrise est de caractriser les mcanismes molculaires de la permissivit et de la rsistance au VIH respectivement dans les cellules Th1Th17 et Th1. Ce mmoire est divis en quatre parties qui visent: (i) lidentification des voies canoniques et des fonctions biologiques diffremment rgules dans les cellules Th1Th17 versus Th1 par lanalyse de leur transcriptome au niveau du gnome entier; (ii) la validation de lexpression diffrentielle des gnes dintrt identifis par biopuces au niveau des transcrits et des protines; (iii) la caractrisation du rle fonctionnel de certains de ces facteurs (i.e., PPARG, AhR) sur la rplication du VIH dans les cellules Th1Th17 versus Th1; et (iv) lidentification du niveau auquel ces facteurs interfrent avec le cycle de rplication du VIH. Nos rsultats danalyse du transcriptome du gnome entier par Gene Set Enrichment Analysis et Ingenuity Pathway Analysis indiquent que les cellules profil Th1Th17 sont plus susceptibles lactivation cellulaire et lapoptose, favorisent plus linflammation et expriment moins fortement les gnes lis la dgradation protosomale compar aux cellules profil Th1. Ces diffrences dans la rgulation de diverses voies et fonctions biologiques permettent en partie dexpliquer la susceptibilit linfection par le VIH dans ces cellules. Nous avons ensuite confirm lexpression diffrentielle de certains gnes dintrt dans les cellules Th1Th17 (CXCR6, PPARG, ARNTL, CTSH, PTPN13, MAP3K4) versus Th1 (SERPINB6, PTK2) au niveau de lARNm et des protines. Finalement, nous avons dmontr le rle des facteurs de transcription PPARG et AhR dans la rgulation de la rplication du VIH. Lactivation de la voie PPARG par la rosiglitazone induit la diminution importante de la rplication du VIH dans les cellules T CD4+, alors que lactivation de la voie AhR par les ligands exognes TCDD et FICZ augmente de faon significative la rplication virale. Nous proposons que la voie PPARG agit comme un rgulateur ngatif de la rplication du VIH dans ces cellules, en interfrant avec la polarisation Th17 et probablement en inhibant lactivit transcriptionnelle du facteur NF-kB. Les rles des formes nuclaires versus cytoplasmiques du rcepteur Ahr semblent tre diamtralement opposs, dans la mesure o linterfrence ARN contre AhR sassocie galement laugmentation de la rplication virale. Il est ainsi possible que la forme cytoplasmique dAhR, connue par son activit E3 ligase, participe la dgradation protosomale des particules virales. Le mcanisme par lequel le AhR nuclaire versus cytoplasmique interfre avec la rplication virale est en cours dtude au laboratoire. Cette tude reprsente la premire caractrisation de lexpression diffrentielle de gnes au niveau du gnome entier de sous-populations T CD4+ permissives versus rsistantes linfection par le VIH. Nos rsultats identifient de nouvelles cibles molculaires pour de nouvelles stratgies thrapeutiques visant limiter la rplication du VIH dans les lymphocytes T CD4+ primaires.
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La rgulation post-transcriptionnelle joue un rle de premier plan dans le contrle fin de lexpression gnique en permettant une modulation de la synthse de protines dans le temps et lespace, en fonction des besoins de la cellule. Ainsi, des protines reconnaissant des lments dARN prsents sur des transcrits peuvent influencer toutes les tapes de leur existence, soit leur pissage, leur export nuclaire, leur localisation subcellulaire, leur traduction et leur dgradation. Staufen1 (Stau1) est un membre de la famille des protines liant lARN double-brin qui contribue la rgulation post-transcriptionnelle par son implication dans des mcanismes qui vont promouvoir lpissage alternatif, le transport, la d-rpression de la traduction et linduction de la dgradation dARN messagers (ARNm) spcifiques. Lidentit des cibles potentielles de Stau1 est maintenant connue puisquune tude lchelle du gnome a montr que la protine sassocie prs de 7% du transcriptome des cellules HEK293T. Ces ARNm se classent dans un large ventail de catgories fonctionnelles, mais il est tout de mme intressant de noter quune grande proportion dentre eux code pour des protines relies au mtabolisme cellulaire et la rgulation de processus cellulaires. En considrant toutes ces informations, nous avons mis lhypothse que les diffrentes activits de Stau1 puissent tre modules afin de contrler adquatement lexpression des transcrits lis par la protine. Dans la mesure o certains ARNm faisant partie des complexes dfinis par la prsence de Stau1 codent pour des rgulateurs cls de la prolifration cellulaire, nous avons voulu examiner si lexpression de la protine varie au cours du cycle de division cellulaire. Nous avons montr que labondance de Stau1 est maximale en dbut de mitose et quelle diminue ensuite lorsque les cellules compltent la division cellulaire. Nous avons ensuite dcouvert que cette baisse dexpression de Stau1 en sortie de mitose dpend du complexe promoteur danaphase/cyclosome (APC/C). En soutien lide que Stau1 soit une cible de cette ubiquitine ligase de type E3, nous avons de plus dmontr que Stau1 est ubiquitin et dgrad par le protasome. Ce contrle des niveaux de Stau1 semble important puisque la surexpression de la protine retarde la sortie de mitose et entrane une diminution importante de la prolifration cellulaire. Par ailleurs, nous avons suppos que les diffrentes fonctions de Stau1 puissent galement tre sujettes une rgulation. Compte tenu que les activits de nombreuses protines liant lARN peuvent tre contrles par des modifications post-traductionnelles telles que la phosphorylation, nous avons voulu tester la possibilit que Stau1 soit phosphoryl. Limmunopurification de Stau1 et son analyse par spectromtrie de masse nous a permis didentifier trois phosphosites dans la protine. Lvaluation du rle de ces vnements de phosphorylation laide de mutants phoshomimtiques ou non-phoshorylables a rvl que la modification de Stau1 pourrait compromettre son association la protine UPF1. Comme cette interaction est ncessaire pour dstabiliser les transcrits lis par Stau1, nos rsultats suggrent fortement que la fonction de Stau1 dans la dgradation dARNm est rgule ngativement par sa phosphorylation. Toutes ces donnes mettent en lumire limportance des modifications post-traductionnelles telles que lubiquitination et la phosphorylation dans la modulation de lexpression et des fonctions de Stau 1. Somme toute, il est vraisemblable que ces mcanismes de contrle puissent avoir un impact significatif sur le destin des ARNm lis par Stau1, particulirement dans un contexte de progression dans le cycle cellulaire.
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Ladaptation des cellules leur environnement externe repose sur la transduction adquate de signaux rguls par une plthore d'vnements molculaires. Parmi ces vnements molculaires, les modifications post-traductionnelles (MPT) de protines aident intgrer, traduire et organiser de faon spatiotemporelle ces signaux pour que les cellules puissent ragir aux stimuli externes. Parmi les modifications post-traductionnelles, les petites protines de la famille de lUbiquitine (Ublps, Ubiquitin-like proteins) jouent un rle majeur dans presque toutes les voies de signalisation. Cette thse rapporte des tudes fonctionnelles et structurales des interactions covalentes et non covalentes entre SUMO (Small Ubiquitin related MOdifier), un membre de la famille des Ublps, et trois protines d'chafaudage, TIF1beta, le corpresseur universel des protines KRAB-multidoigt de zinc, PIAS1, une ligase E3 pour SUMO et PML, un suppresseur de tumeur. La premire tude rapporte l'identification et la caractrisation biochimique des sites de SUMOylation de TIF1beta. Nous avons dtermin que la modification covalente de six rsidus lysine par SUMO est essentielle lactivit de rpression de la transcription induit par TIF1beta. En outre, nous prsentons des vidences indiquant que la SUMOylation de TIF1 exige non seulement sa capacit homo-oligomriser, mais est aussi positivement rgule par son interaction avec le domaine KRAB des protines doigts de zinc. Partant de ce constat, nous postulons que les protines KRAB-multidoigt de zinc recrutent leur corpresseur TIF1beta des gnes cibles, mais aussi accentuent son activit rpressive grce l'augmentation de sa SUMOylation. Notre seconde tude rvle quen plus de rprimer la transcription en tant que MPT covalente, SUMO joue aussi un rle important dans la rpression en tant que partenaire non covalent dinteractions protine-protine. Nous avons montr que SUMO interagit simultanment avec deux enzymes de la machinerie de SUMOylation, lunique enzyme de conjugaison E2, UBC9, et la ligase E3 PIAS1 au sein dun complexe ternaire rpresseur. En outre, nous rvlons que la formation du complexe ternaire PIAS1:SUMO:UBC9 est module par le niveau de phosphorylation de rsidus srine juxtaposs un motif dinteraction avec SUMO (SIM) dans PIAS1. Ainsi, SUMO agit comme un adaptateur spcifique qui stabilise les interactions UBC9 E2: E3 PIAS1. Partant de ce constat, nous proposons que les enzymes E2 et E3 des autres systmes Ublps exploitent des mcanismes similaires dans le cadre de leur fonction Enfin, notre troisime tude explore la rgulation des interactions non covalentes de SUMO par la phosphorylation. En utilisant une combinaison d'tudes in vivo et in vitro, nous dmontrons que l'interaction entre SUMO1 et PML est rgi par la phosphorylation dpendant de CK2 sur quatre rsidus srine de PML. Les structures cristallographiques des complexes PML-SIM:SUMO1 rvlent que les phospho-srines de PML contactent des rsidus de la rgion basique de SUMO1. Sachant que la kinase CK2 peut tre induite par des kinases activables par le stress, ces rsultats suggrent que les interactions non-covalentes avec SUMO sont modules par le stress cellulaire. Sur la base de cette constatation, nous postulons que des vnements analogues affectent des protines contenant des squences SIM cibles par CK2. En rsum, cette tude rvle quen plus de son rle de MPT, SUMO peut fonctionner comme un adaptateur permettant des interactions spcifiques entre protines tel que pour les enzymes E3 et E2.
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Linfection par le VIH-1 est caractrise par une activation chronique du systme immunitaire et par une rduction graduelle du nombre de lymphocytes TCD4+, qui contribuent une dtrioration lente du systme immunitaire menant la phase SIDA. Paradoxalement, ce sont majoritairement des lymphocytes T CD4+ non infects qui sont dtruits et la cause de ce phnomne reste encore inconnue. Certaines protines virales, dont la protine accessoire Vpr, sont souponnes de jouer un rle dans ce processus. Synthtise tardivement, Vpr est incorpore lintrieur des virions, en plus dtre relche sous forme soluble dans le milieu extracellulaire. La principale fonction biologique de Vpr est linduction dun arrt de cycle en phase G2/M, via le recrutement du complexe dubiquitine E3 ligase CUL4A-DDB1VprBP et lactivation de la voie de dommage lADN contrle par la kinase ATR. Une tude dmontre que lactivation des voies de dommages lADN conduit lexpression de ligands du rcepteur activateur NKG2D, exprims par les cellules NK, dclenchant leurs fonctions cytolytiques. Chose intressante, plusieurs tudes suggrent que le VIH-1 rgule positivement lexpression des ligands de NKG2D la surface des lymphocytes T CD4+ infects. Cependant, le facteur viral impliqu dans ce processus reste encore indfini. Le but de cette thse tait dvaluer le rle de Vpr dans la modulation des fonctions cytolytiques des cellules NK et son implication potentielle dans la destruction des lymphocytes T CD4+. Nos travaux ont permis de dmontrer que lexpression de Vpr, seule ou dans le contexte de linfection, est suffisante afin daugmenter spcifiquement lexpression du ligand de NKG2D, ULBP2, au niveau de lymphocytes T CD4+ primaires. Consquemment, Vpr augmente ainsi la susceptibilit de ces cellules une lyse par des cellules NK autologues. Nous dmontrons que cette rgulation positive dULBP2 repose sur la capacit de Vpr de recruter le complexe dubiquitine E3 ligase DDB1-CUL4AVprBP et lactivation de la voie de dommage lADN ATR. Plus important encore, nous apportons des preuves que Vpr augmente galement lexpression dULBP2 au niveau des cellules non infectes lors dune infection de lymphocytes TCD4+ par le VIH-1. cet effet, nous montrons que lacheminement de Vpr au niveau de lymphocytes T CD4+ non infects via des particules virales dfectives est suffisant afin de rguler positivement ULBP2 et daugmenter leur lyse par des cellules NK autologues. De plus, nous dcrivons pour la premire fois que Vpr, sous forme soluble, a la capacit dinduire des dommages lADN et de rguler positivement ULBP2 suite la transduction de diffrents types cellulaires, incluant des cellules T. Globalement, nos rsultats dmontrent que Vpr est un facteur viral cl impliqu dans la rgulation positive des ligands de NKG2D induite par le VIH-1. Cette rgulation positive dULBP2 pourrait alors contribuer la destruction des lymphocytes T CD4+ infects et non infects via lactivation des fonctions cytolytiques des cellules NK. Une meilleure comprhension de la contribution de cette activit de Vpr dans la pathogense du VIH-1 a le potentiel de permettre le dveloppement de nouvelles cibles ou stratgies thrapeutiques contre le VIH-1.
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Le systme rnine-angiotensine-aldostrone (SRAA) rgule lhomostasie de la contraction des artres. Or, suivant la liaison de langiotensine II (Ang II) son rcepteur AT1, le SRAA est galement impliqu dans lactivation de voies de signalisation lorigine de linflammation et de lhypertrophie des cellules musculaires lisses vasculaires (CMLV), soit deux processus participant au remodelage vasculaire caractristique de diverses maladies cardiovasculaires, telles lhypertension et lathrosclrose. Ces pathologies sont les premires causes de mortalit naturelle en Amrique et les traitements les ciblant ne sont pas optimaux puisquils visent seulement quelques facteurs de risque qui leur sont associs. Ainsi, la dtermination des effecteurs intracellulaires rgulant ces voies dltres est ncessaire l'identification de nouvelles cibles thrapeutiques. Linflammation Ang II-dpendante dans les CMLV est attribue au facteur de transcription nuclear factor-kappa B (NF-B). Cependant, les processus molculaires couplant le rcepteur AT1 son activation sont peu caractriss. Ltude abordant cette question dmontre in vitro que NF-B est activ par la protine IB kinase (IKK) dans les CMLV exposes lAng II et que cette kinase est rgule par deux voies de signalisation indpendantes, mais complmentaires afin dassurer son activation rigoureuse et soutenue. Lune des voies est prcoce et dpend des seconds messagers ainsi que de deux nouveaux effecteurs sous-jacents au rcepteur AT1, soit la E3 ligase TNF receptor-associated factor 6 (TRAF6) et la IKK kinase transforming growth factor-beta-activated kinase 1 (TAK1) tandis que la seconde est tardive et rsulte de la signalisation mitogen-activated protein kinase kinase 1/2 (MEK1/2) - extracellular signal-regulated kinase 1/2 (ERK1/2) - ribosomal S6 kinase (RSK). Linhibition conjointe de ces voies abroge compltement la rponse inflammatoire, ce qui indique quelles en sont la seule source. Ainsi, linhibition dIKK pourrait suffire contrer linflammation implique dans le remodelage vasculaire associ une suractivation du SRAA. Une dcouverte des plus novatrices dcoule de cette tude, qui veut que la E3 ligase TRAF6 est un nouvel effecteur des rcepteurs coupls aux protines G et est lorigine de la formation dun nouveau type de second messager, soit des chanes libres de poly-ubiquitines. Les mcanismes molculaires la base de lhypertrophie Ang II-dpendante dans les CMLV sont galement peu dfinis. Or, suivant la parution dun article dmontrant quIKK dans les cellules cancreuses participe aux mcanismes dinitiation de la traduction en rponse au facteur de ncrose tumorale (TNF) via la phosphorylation de la protine Tuberous sclerosis 1 (TSC1) et donc lactivation du complexe mammalian target of rapamycin (mTORC1), une hypothse a t mise selon laquelle cette kinase serait implique dans la synthse protique Ang II-dpendante dans les CMLV. Les expriences effectues in vitro dans des CMLV exposes lAng II dmontrent quIKK induit la phosphorylation de TSC1 ainsi que lactivation de mTORC1 et de ses substrats S6 kinase 1 (S6K1) et translational regulators eukaryotic translation initiation factor 4E-binding protein (4E-BP1), deux protines impliques directement dans lhypertrophie. Par ailleurs, la synthse protique au niveau des CMLV exposes lAng II est rduite de 75% suivant la diminution de lexpression dIKK et suivant la surexpression dun mutant de TSC1 dont le site consensus dIKK a t modifi, faisant de cette kinase un mdiateur majeur au niveau de ce processus. Ainsi, in vitro IKK en rponse lAng II est en amont de deux processus impliqus dans un remodelage vasculaire lorigine de maladies cardiovasculaires. De plus, plusieurs facteurs de risque de ces pathologies convergent lactivation dIKK, ce qui en fait une cible thrapeutique particulirement attrayante. Qui plus est, ladministration dun inhibiteur dIKK des rats diminue non seulement la synthse protique dpendante de lAng II au niveau de laorte et des artres msentriques, mais galement la synthse de la protine pro-inflammatoire VCAM-1 par les cellules composant laorte, ce qui confirme son envergure en tant que cible.
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Enfermer le porteur de linformation gntique dans le noyau a oblige la cellule a cr un systme de transport complexe, qui permet lexport dun ARNm du noyau au cytoplasme. Le mcanisme gnral de lexport des ARNm est encore mal connu, mme si les facteurs principaux ont t dcouverts il y a longtemps. De rcents progrs en microscopie nous ont permis dtudier directement le comportement des ARNm durant le processus dexport. Durant ma maitrise, nous avons t capables de localiser et suivre des ARNm en temps rel pour la premire fois chez Saccharomyces cerevisiae. Nous avons cr un gne rapporteur en mettant le gne GLT1 sous le contrle du promoteur GAL1. Nous avons aussi marqu lARNm de GLT1 avec plusieurs boucles PP7. LARNm sera visible aprs lattachement de plusieurs protines PP7-GFP aux boucles. En utilisant la technique dimagerie en cellules vivantes, nous sommes capable de visualiser et suivre chaque ARNm, depuis son relchement du site de transcription jusqu lexport. Une fois relch du site de transcription, lARNm diffuse librement dans le nucloplasme, mais une fois la priphrie nuclaire, il commence scanner lenveloppe nuclaire avant dtre export. Nous avons trouv que le scanning dpend de la prsence des Myosin Like Proteins (Mlp1p et Mlp2p), protines qui forment le panier nuclaire, car suite la dltion de MLP1 et MLP2, les ARNm ntaient plus capable de scanner . Nous avons galement trouv que la partie C-terminale de Mlp1p tait ncessaire au scanning . De plus, suite la dltion du gne TOM1, gne codant pour une ubiquitine ligase, les ARNm ont un comportement similaire aux ARNm dune souche mlp1/mlp2, suggrant que le scanning permet Tom1p dubiquitiner Yra1p, ce qui causera son relchement de lARNm. galement, nous avons montr que les ARNm endognes MDN1 et CBL2 scannent aussi la priphrie nuclaire. Ensemble, nos rsultats suggrent que le scanning est un processus par lequel passent tout les ARNm nuclaire lorsquils se retrouvent la priphrie du noyau, pour initier plusieurs tapes de rarrangements ncessaires leurs export. De plus, nous avons examin le rle de Yhr127p, une protine nouvellement identifie qui se lie lARN. Aprs avoir marqu cette protine avec la GFP, nous avons montr quelle forme des foci dans le noyau et que ces derniers vont disparaitre suite larrt de la transcription. La dltion de YHR127 conduit une augmentation de la transcription de quelques gnes spcifiques, mais naffecte pas la capacit de la cellule exporter les ARNm. Nos rsultats suggrent que cette protine joue un rle dans la rgulation de la transcription et/ou dans la stabilit de lARNm.
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Am Fachgebiet Massivbau (Institut fr Konstruktiven Ingenieurbau IKI) des Fachbereichs Bauingenieurwesen der Universitt Kassel wurden Bauteilversuche an zweiaxial auf Druck-Zug belasteten, faserfreien und faserverstrkten Stahlbetonscheiben durchgefhrt. Dabei wurden die Auswirkungen der Querzugbeanspruchung und der Rissbildung auf die Druckfestigkeit, auf die Stauchung bei Erreichen der Hchstlast sowie auf die Drucksteifigkeit des stabstahl- und faserbewehrten Betons an insgesamt 56 faserfreien und faserverstrkten Beton- und Stahlbetonscheiben untersucht. Auf der Grundlage der experimentell erhaltenen Ergebnisse wird ein Vorschlag zur Abminderung der Druckfestigkeit des gerissenen faserfreien und faserbewehrten Stahlbetons in Abhngigkeit der aufgebrachten Zugdehnung formuliert. Die Ergebnisse werden den in DIN 1045-1 [D4], Eurocode 2 [E3, E4], CEB-FIP Model Code 1990 [C1] und ACI Standard 318-05 [A1] angegebenen Bemessungsregeln fr die Druckstrebenfestigkeit des gerissenen Stahlbetons gegenbergestellt und mit den Untersuchungen anderer Wissenschaftler verglichen. Die bekannten Widersprche zwischen den Versuchsergebnissen, den vorgeschlagenen Modellen und den Regelwerken aus U.S.A., Kanada und Europa knnen dabei weitgehend aufgeklrt werden. Fr nichtlineare Verfahren der Schnittgrenermittlung und fr Verformungsberechnungen wird ein Materialmodell des gerissenen faserfreien und faserbewehrten Stahlbetons abgeleitet. Hierzu wird die fr einaxiale Beanspruchungszustnde gltige Spannungs-Dehnungs-Linie nach Bild 22 der DIN 1045-1 auf den Fall der zweiaxialen Druck-Zug-Beanspruchung erweitert.
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La bacteriemia asociada a catter afecta a pacientes en las unidades de cuidado intensivo con una alta morbilidad, mortalidad y aumento de los costos al sistema de salud. Los recin nacidos son la poblacin de ms alto riesgo por el mayor uso de catteres centrales. Objetivo: Caracterizar factores de riesgo para bacteriemia asociada a catter en la Unidad de Cuidado Intensivo Neonatal de la Fundacin Cardioinfantil entre 2005 - 2010 Materiales y mtodo: Estudio descriptivo de corte transversal, incluy todos los recin nacidos con diagnostico de bacteriemia asociada a catter. Se analiz la informacin utilizando frecuencias y medidas de tendencia central. Resultados: Se encontraron 50 pacientes con diagnostico de bacteriemia asociada a catter. 50% de gnero masculino, 52% con edad gestacional al nacimiento menor a 36 semanas y 24% con peso menor a 1500 gramos al momento de la insercin del catter. La edad fue de 24.2 das al momento de la insercin del catter. En el 66% de los pacientes el sitio de insercin fue el miembro superior, siendo el Sthaphylococcus Epidermidis el germen con el 50% de las bacteriemias. Conclusin: La bacteriemia asociada a catter afecta paciente prematuros, de bajo peso sin diferencias en genero. La manipulacin de dichos dispositivos, el sitio de insercin, el uso previo de antibiticos, la duracin del catter y el uso de nutricin parenteral son factores que estn asociados al mayor riesgo de infeccin. Siendo el Staphylococcus Epidermidis el germen mas frecuente.
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El marcaje de protenas con ubiquitina, conocido como ubiquitinacin, cumple diferentes funciones que incluyen la regulacin de varios procesos celulares, tales como: la degradacin de protenas por medio del proteosoma, la reparacin del ADN, la sealizacin mediada por receptores de membrana, y la endocitosis, entre otras (1). Las molculas de ubiquitina pueden ser removidas de sus sustratos gracias a la accin de un gran grupo de proteasas, llamadas enzimas deubiquitinizantes (DUBs) (2). Las DUBs son esenciales para la manutencin de la homeostasis de la ubiquitina y para la regulacin del estado de ubiquitinacin de diferentes sustratos. El gran nmero y la diversidad de DUBs descritas refleja tanto su especificidad como su utilizacin para regular un amplio espectro de sustratos y vas celulares. Aunque muchas DUBs han sido estudiadas a profundidad, actualmente se desconocen los sustratos y las funciones biolgicas de la mayora de ellas. En este trabajo se investigaron las funciones de las DUBs: USP19, USP4 y UCH-L1. Utilizando varias tcnicas de biologa molecular y celular se encontr que: i) USP19 es regulada por las ubiquitin ligasas SIAH1 y SIAH2 ii) USP19 es importante para regular HIF-1, un factor de transcripcin clave en la respuesta celular a hipoxia, iii) USP4 interacta con el proteosoma, iv) La quimera mCherry-UCH-L1 reproduce parcialmente los fenotipos que nuestro grupo ha descrito previamente al usar otros constructos de la misma enzima, y v) UCH-L1 promueve la internalizacin de la bacteria Yersinia pseudotuberculosis.
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Introduccin: la historia natural de la hemorragia en el tallo cerebral secundaria a un angioma cavernoso es benigna. Sin embargo, el riesgo de recurrencia y de mayor discapacidad parece incrementarse con el tiempo a pesar del tratamiento recibido; hecho que plantea dudas acerca de si el manejo quirrgico de estas lesiones ofrece mayor beneficio sobre el manejo mdico despus del primer evento hemorrgico. El objetivo del estudio fue evaluar el riesgo de resangrado y el grado de discapacidad final en los angiomas cavernosos del tallo cerebral segn el tratamiento recibido. Mtodos: estudio observacional, analtico tipo cohorte. Se incluyeron pacientes con un primer sangrado en el tallo cerebral secundario a angioma cavernoso que fueron tratados en el Instituto Nacional de Neurologa y Neurociruga (INNN) de Ciudad de Mxico. Resultados: noventa y nueve (99) pacientes fueron incluidos en un periodo de 25 aos (1990-2015). Treinta y siete (37) recibieron tratamiento quirrgico y sesenta y dos (62) recibieron tratamiento mdico tras su primer sangrado. El promedio de edad fue de 38 aos (DS: 14,17) para el grupo que recibi tratamiento mdico y 36 aos (DS: 12,82) para los que recibieron tratamiento quirrgico. La incidencia acumulada de resangrado para el tratamiento mdico fue de 5,1 por 100 aos/persona y para el tratamiento quirrgico de 3,9 por 100 aos/persona (p = 0,016). Se realiz un anlisis estratificado donde no se encontr ninguna asociacin entre resangrado y edad o sexo del paciente. Se evalu la discapacidad final con la escala de Rankin (mRs) sin encontrar diferencias significativas entre tratamientos (p=0.77). Por ltimo, se realiz un modelo explicativo de regresin logstica binaria donde se encontr que la edad superior a 55 aos (OR: 2.19 IC 95%: 1.67-47,6), el tamao mayor a 15 mm (OR: 2,5 IC 95%: 3,8-45,9) y la recurrencia del sangrado (OR: 1,7 IC 95%: 1,63-18,7) son factores asociados a un desenlace desfavorable en cuanto a discapacidad final. Discusin y Conclusiones: en los pacientes con angioma cavernoso del tallo cerebral que han presentado un primer evento de sangrado no se encontr una diferencia estadsticamente significativa entre el tratamiento mdico o quirrgico al evaluar la discapacidad funcional con la escala de Rankin modificada, a pesar de evidenciar una diferencia significativa en la incidencia acumulada de resangrado por grupos de tratamiento. El tamao de la lesin, la recurrencia del sangrado y la edad superior a 55 aos son factores asociados a un desenlace desfavorable en este grupo de pacientes.
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Proyecto para Primaria realizado por los centros de Espaa, CEIP les Moreres (Tarragona); Italia, Scuola di Badesi (Cerdea); y Portugal, Scuola EB 2 e3 (Palmeira). Material centrado en las reas de Ciencias Econmicas y Sociales, Educacin Artstica y Musical, Historia y Cultura, Lenguas y Matemticas, Fsica y Qumica. Introduce en el estudio de la Edad Media europea a travs de las aproximaciones a monumentos del entorno con actividades que van desde las figuras geomtricas y vidrieras hasta la msica y la danza del pasado, pasando por actividades sobre el mercado y la alimentacin el oficio y el gremio de alfareros u otras sobre castillos y monasterios.
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El artculo forma parte del monogrfico de la revista dedicado a: la educacin emprendedora: un reto plural
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Comparison of donor-acceptor electronic couplings calculated within two-state and three-state models suggests that the two-state treatment can provide unreliable estimates of Vda because of neglecting the multistate effects. We show that in most cases accurate values of the electronic coupling in a stack, where donor and acceptor are separated by a bridging unit, can be obtained as da = (E2 - E1) 12 Rda + (2 E3 - E1 - E2) 2 13 23 Rda2, where E1, E2, and E3 are adiabatic energies of the ground, charge-transfer, and bridge states, respectively, ij is the transition dipole moments between the states i and j, and Rda is the distance between the planes of donor and acceptor. In this expression based on the generalized Mulliken-Hush approach, the first term corresponds to the coupling derived within a two-state model, whereas the second term is the superexchange correction accounting for the bridge effect. The formula is extended to bridges consisting of several subunits. The influence of the donor-acceptor energy mismatch on the excess charge distribution, adiabatic dipole and transition moments, and electronic couplings is examined. A diagnostic is developed to determine whether the two-state approach can be applied. Based on numerical results, we showed that the superexchange correction considerably improves estimates of the donor-acceptor coupling derived within a two-state approach. In most cases when the two-state scheme fails, the formula gives reliable results which are in good agreement (within 5%) with the data of the three-state generalized Mulliken-Hush model
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PDGF is a potent chemotactic mitogen and a strong inductor of fibroblast motility. In Swiss 3T3 fibroblasts, exposure to PDGF but not EGF or IGF-1 causes a rapid loss of actin stress fibers (SFs) and focal adhesions (FAs), which is followed by the development of retractile dendritic protrusions and induction of motility. The PDGF-specific actin reorganization was blocked by inhibition of Src-kinase and the 26S proteasome. PDGF induced Src-dependent association between the multifunctional transcription/translation regulator hnRNP-K and the mRNA-encoding myosin regulatory light-chain (MRLC)-interacting protein (MIR), a E3-ubiquitin ligase that is MRLC specific. This in turn rapidly increased MIR expression, and led to ubiquitination and proteasome-mediated degradation of MRLC. Downregulation of MIR by RNA muting prevented the reorganization of actin structures and severely reduced the migratory and wound-healing potential of PDGF-treated cells. The results show that activation of MIR and the resulting removal of diphosphorylated MRLC are essential for PDGF to instigate and maintain control over the actin-myosin-based contractile system in Swiss 3T3 fibroblasts. The PDGF induced protein destabilization through the regulation of hnRNP-K controlled ubiquitin-ligase translation identifies a novel pathway by which external stimuli can regulate phenotypic development through rapid, organelle-specific changes in the activity and stability of cytoskeletal regulators.
