5 resultados para Fluoretos Efeitos colaterais
em Repositório Institucional da Universidade de Aveiro - Portugal
Resumo:
Graas aos desenvolvimentos na rea da sntese de nanomaterais e s potentes tcnicas de caracterizao nanoescala conseguimos hoje visualizar uma nanopartcula (NP) como um dispositivo de elevado potencial teraputico. A melhoria da sua efectividade teraputica requer no entanto o aprofundamento e sistematizao de conhecimentos, ainda muito incipientes, sobre toxicidade, selectividade, efeitos colaterais e sua dependncia das prprias caractersticas fsico-qumicas da NP em anlise. O presente trabalho, elegendo como alvo de estudo uma substncia considerada biocompatvel e no txica, a hidroxiapatite (Hap), pretende dar um contributo para esta rea do conhecimento. Definiram-se como metas orientadoras deste trabalho (i) estudar a sntese de nanoparticulas de Hap (Hap NP), e a modificao das caractersticas fsico-qumicas e morfolgicas das mesmas atravs da manipulao das condies de sntese; (ii) estudar a funcionalizao das Hap NP com nanoestruturas de ouro e com cido flico, para lhes conferir capacidades acrescidas de imagiologia e teraputicas, particularmente interessantes em aplicaes como o tratamento do cancro (iii) estudar a resposta celular a materiais nanomtricos, com propriedades fsico-qumicas diversificadas. No que se refere sntese de Hap NP, comparam-se dois mtodos de sntese qumica distintos, a precipitao qumica a temperatura fisiolgica (WCS) e a sntese hidrotrmica (HS), em meios aditivados com io citrato. A sntese WCS originou partculas de tamanho nanomtrico, com uma morfologia de agulha, pouco cristalinas e elevada rea superficial especifica. A sntese HS temperatura de 180C permitiu obter partculas de dimenses tambm nanomtricas mas com rea especfica inferior, com morfologia de bastonete prismtico com seco recta hexagonal e elevada cristalinidade. Com o objectivo de aprofundar o papel de algumas variveis experimentais na definio das caractersticas finais das partculas de hidroxiapatite, designadamente o papel do io citrato (Cit), variou-se a razo molar [Cit/Ca] da soluo reagente e o tempo de sntese. Demonstrou-se que o io citrato e outras espcies qumicas resultantes da sua decomposio nas condies trmicas (180C) de sntese tem um papel preponderante na velocidade de nucleao e de crescimento dessas mesmas partculas e por conseguinte nas caractersticas fsico-qumicas das mesmas. Elevadas razes [Cit/Ca] originam partculas de dimenso micromtrica cuja morfologia discutida no contexto do crescimento com agregao. Com o objectivo de avaliar a citotoxicidade in vitro das nanopartculas sintetizadas procedeu-se esterilizao das mesmas. O mtodo de esterilizao escolhido foi a autoclavagem a 121 C. Avaliou-se o impacto do processo de esterilizao nas caractersticas das partculas, verificando-se contrariamente s partculas WCS, que as partculas HS no sofrem alteraes significativas de morfologia, o que se coaduna com as condies de sntese das mesmas, que so mais severas do que as de esterilizao. As partculas WCS sofrem processos de dissoluo e recristalizao que se reflectem em alteraes significativas de morfologia. Este estudo demonstrou que a etapa de esterilizao de nanopartculas para aplicaes biomdicas, por autoclavagem, pode alterar substancialmente as propriedades das mesmas, sendo pois criticamente importante caracterizar os materiais aps esterilizao. Os estudos citotoxicolgicos para dois tipos de partculas esterilizadas (HSster e WCSster) revelaram que ambas apresentam baixa toxicidade e possuem potencial para a modelao do comportamento de clulas osteoblsticas. Tendo em vista a funcionalizao da superfcie das Hap NP para multifunes de diagnstico e terapia exploraram-se condies experimentais que viabilizassem o acoplamento de nanopartculas de ouro superfcie das nanopartculas de Hidroxiapatite (Hap-AuNP). Tirando partido da presena de grupos carboxlicos adsorvidos na superfcie das nanopartculas de Hap foi possvel precipitar partculas nanomtricas de ouro (1,5 a 2,5 nm) na superfcie das mesmas adaptando o mtodo descrito por Turkevich. No presente trabalho as nanopartculas de Hap funcionaram assim como um template redutor do ouro inico de soluo, propiciando localmente, na superfcie das prprias nanopartculas de Hap, a sua reduo a ouro metlico. A nucleao do ouro assim contextualizada pelo papel redutor das espcies qumicas adsorvidas, designadamente os grupos carboxlicos derivados de grupos citratos que presidiram sntese das prprias nanopartculas de Hap. Estudou-se tambm a funcionalizao das Hap NP com cido flico (FA), uma molcula biologicamente interessante por ser de fcil reconhecimento pelos receptores existentes em clulas cancergenas. Os resultados confirmaram a ligao do cido flico superfcie das diferentes partculas produzidas HS e Hap-AuNPs. Graas s propriedades pticas do ouro nanomtrico (efeito plasmo) avaliadas por espectroscopia vis-UV e s potencialidades de hipertermia local por converso fototrmica, as nanoestruturas Hap-AuNPs produzidas apresentam-se com elevado interesse enquanto nanodispositivos capazes de integrar funes de quimio e terapia trmica do cancro e imagiologia. O estudo da resposta celular aos diversos materiais sintetizados no presente trabalho foi alvo de anlise na tentativa de se caracterizar a toxicidade dos mesmos bem como avaliar o seu desempenho em aplicaes teraputicas. Demonstrou-se que as Hap NP no afectam a proliferao das clulas para concentraes at 500 g/ml, observando-se um aumento na expresso gentica da BMP-2 e da fosfatase alcalina. Verificou-se tambm que as Hap NP so susceptveis de internalizao por clulas osteoblsticas MG63, apresentando uma velocidade de dissoluo intracelular relativamente reduzida. A resposta celular s Hap-AuNP confirmou a no citotoxicidade destas partculas e revelou que a presena do ouro na superfcie das Hap NP aumenta a taxa proliferao celular, bem como a expresso de parmetros osteognicos. No seu conjunto os resultados sugerem que os vrios tipos de partculas sintetizadas no presente estudo apresentam tambm comportamentos interessantes para aplicaes em engenharia de tecido sseo.
Resumo:
No presente trabalho, foi estudado um largo espectro de efeitos genotxicos e bioqumicos na tainha-garrento (Liza aurata). Nos Captulos II e III so descritos os efeitos de exposio de curta durao ao fenantreno, um hidrocarboneto aromtico policclico (HAP). A exposio de curta durao (16 horas) demonstrou a capacidade deste composto induzir a actividade da enzima de fase I da biotransformao, etoxiresorufina O-desetilase (EROD), provocar decrscimos de integridade no ADN heptico e aumento de anomalias nucleares eritrocticas (ANE). Em termos de respostas de stresse, os nveis plasmticos de cortisol e glucose aumentaram face exposio a este HAP. A exposio ao fenantreno induziu o decrscimo da glutationa peroxidase (GPx) nas guelras, enquanto que no fgado a actividade da GPx aumentou. No rim, a actividade da glutationa S-transferase (GST) foi inibida. Nas guelras, verificou-se um aumento da catalase. O fenantreno demonstrou igualmente a capacidade de induzir um aumento dos nveis de glutationa nas guelras e fgado. Estas respostas demonstraram a sensibilidade de L. aurata, a este HAP, realando a especificidade das respostas em termos de rgos. Apesar dos aumentos das defesas antioxidantes, o potencial txico deste composto foi demonstrado pelo aumento da peroxidao lipdica nos trs rgos. Nos captulos seguintes, so descritas as respostas de L. aurata capturada na Ria de Aveiro, em locais com diferentes perfis de contaminao, inicialmente no Outono de 2005 (Captulos III a IX) e posteriormente analisando respostas sazonais (Captulos X e XI). A anlise de respostas de stresse (cortisol, glucose e lactato) revelou que L. aurata capturada em Vagos (local contaminado por HAPs) apresentava nveis baixos de cortisol, enquanto que no Laranjo (local contaminado por mercrio) apresentavam elevados nveis de glucose e lactato. Relativamente s hormonas do eixo hipotlamo hipfise tiride (HHT), foram observados elevados nveis plasmticos da hormona estimuladora da tiride (TSH) nos organismos capturados no Laranjo, baixos nveis de tiroxina (T4) nos organismos da Barra (local sujeito a trfego naval) e baixos nveis de triiodotironina (T3) no Rio Novo do Prncipe (prximo de um antigo efluente de pasta de papel), Laranjo e Vagos. A avaliao das defesas antioxidantes, dano oxidativo e genotxico nas guelras, rim e fgado revelou diferenas significativas nas respostas dos rgos. L. aurata capturada na Barra apresentou dano oxidativo nas guelras (Captulo V). No rim foi detectada uma diminuio da integridade do ADN no Rio Novo do Prncipe e Vagos (Captulo VI), enquanto que no fgado foi observado dano lipdico na Gafanha e Vagos (Captulo VIII). O dano no esteve sempre associado a um decrscimo das defesas. As anlises da gua e do sedimento da Ria de Aveiro (Outono de 2005) revelaram elevadas concentraes de metais (Cd, Hg, Cu e Zn),principalmente, no Laranjo e Rio Novo do Prncipe. L. aurata capturada nestes locais apresentou os nveis mais elevados de metalotioninas hepticas (Captulo VII) que parecem responsveis pela inexistncia de danos no fgado (Captulo VIII). O dano oxidativo no ADN, avaliado atravs da quantificao dos nveis plasmticos de 8-hidroxi-2-desoxiguanosina (8-OHdG) e o dano clastognico/aneugnico, avaliado atravs da quantificao da frequncia de ANE, foram estudados, no Outono de 2005, em duas espcies de peixes (L. aurata e Dicentrarchus labrax - robalo) (Captulo IX). Os resultados revelaram grande sensibilidade de D. labrax em termos de dano oxidativo no ADN na Gafanha, Rio Novo do Prncipe e Vagos, enquanto que L. aurata apresentou dano oxidativo apenas no Laranjo. O aumento da frequncia de ANE apenas foi detectado em L. aurata, em Vagos, no se tendo detectado correlao entre estes dois parmetros. O estudo sazonal (Maio de 2006 a Maro de 2007) do dano oxidativo no ADN e frequncia de ANE em L. aurata (Captulo X) demonstrou a variao destes parmetros com a estao do ano, apesar de no se ter verificado correlao com os parmetros hidrolgicos determinados. No entanto, no local de referncia no se verificaram diferenas sazonais, o que sugere que estes biomarcadores reflectem variaes de biodisponibilidade de contaminantes. A anlise global dos resultados das diferentes estaes do ano revelou que L. aurata capturada no Rio Novo do Prncipe e em Vagos apresentou maior susceptibilidade a dano oxidativo no ADN. No entanto, apenas L. aurata capturada em Vagos apresentou frequncia de ANE superior do local de referncia. Os dados do estudo sazonal revelaram uma correlao entre dano oxidativo e ANE, sugerindo o stresse oxidativo como um possvel mecanismo envolvido na formao de anomalias. A integridade do ADN das guelras, rim, fgado e sangue de L. aurata foi igualmente estudada ao longo de um ano (Captulo XI), tendo-se verificado uma grande variabilidade ao longo deste perodo. No foi demonstrada sensibilidade a um perfil de contaminao especfico, tendo-se verificando variabilidade sazonal no local de referncia. Globalmente, os resultados demonstraram a importncia da utilizao de uma bateria de biomarcadores na monitorizao ambiental e a especificidade da resposta dos diferentes rgos de L. aurata.
Resumo:
A presente investigao teve como objectivo aplicar, em contexto experimental, alguns conceitos e tcnicas da Teoria do Movimento de Rudolf Laban numa aco de formao em regncia e avaliar os respectivos efeitos nas competncias gestuais dos regentes nela participantes. O estudo teve como base terica o principio de que a gestualidade do regente uma manifestao exterior de impulsos interiores (Laban, 1978:32) e que a msica, na sua essncia, uma forma simblica do sentimento humano, um movimento sonoro, um anlogo da vida emotiva. (Susanne Langer, 1980:28) Com a adopo destes pressupostos procurou dar-se coerncia s diferentes componentes envolvidas na problemtica desta investigao. A parte experimental do estudo teve quatro momentos distintos. No primeiro, foi realizada uma gravao-vdeo para documentar os desempenhos dos estagirios antes da realizao das formaes (gravao pre-test). No segundo momento, os estagirios tiveram ocasio de frequentar um curso de Movimento Laban ministrado por um especialista nesta matria, convidado para o efeito. Esta aco de formao terminou com uma gravao-vdeo, efectuada nas mesmas condies tcnicas e programticas da anterior (gravao post-test). Em terceiro lugar, realizou-se, sob orientao do autor do presente estudo, uma segunda aco de formao com o objectivo de plasmar os conceitos e tcnicas de Laban na gestualidade especfica da regncia. Como corolrio desta formao, foi realizado o ltimo registo-vdeo (gravao repost-test). Estas gravaes foram posteriormente editadas sem alteraes tcnicas e de contedo. Os dados, nelas constantes, foram analisados e avaliados por dois especialistas em regncia, a partir de questionrios previamente concebidos e fornecidos para o efeito. Aps leitura dos pareceres dos especialistas expressos nesses questionrios, o autor do presente estudo concluiu que a aplicao dos princpios e tcnicas de Laban ao ensino da regncia podem contribuir para promover, extensivamente, as competncias gestuais dos regentes, tanto no plano da sua funcionalidade, como na sua dimenso expressiva.
Resumo:
O presente trabalho prope estudar alguns aspectos da modelao ecolgica na Costa Portuguesa, nomeadamente o efeito fsico na distribuio de nutrientes e biomassa fitoplanctnica. O principal propsito foi implementar e validar um modelo acoplado tridimensional fsico e ecolgico, para a costa portuguesa, e aplic-lo numa rea limitada, a norte, por Vila do Conde e a sul pela Figueira da Foz centrada na regio de Aveiro, para estudar a distribuio, vertical e horizontal, de temperatura, nutrientes e biomassa fitoplanctnica. A regio em estudo est situada na costa oeste da Pennsula Ibrica e faz parte da Regio de Afloramento do Atlntico Norte. caracterizada por condies meteorolgicas onde a predominncia e prevalncia, durante uma grande parte do ano, de ventos de norte/noroeste, constitui um dos principais elementos foradores do transporte para o largo das guas costeiras e consequente subida das guas mais frias e profundas, ricas em nutrientes. A estas condies juntam-se as boas condies de luminosidade e temperatura essenciais ao desenvolvimento fitoplanctnico, que servir de alimento s espcies marinhas. Este facto, torna esta regio, uma zona de elevada riqueza biolgica favorvel ao desenvolvimento de vrias espcies marinhas, transformando este local num ecossistema de forte produtividade. O modelo foi calibrado e validado para a rea em estudo e simulou com sucesso, a resposta do sistema situao de ventos favorveis ao afloramento costeiro para a regio em estudo. Quando comparada com dados observados, os resultados mostram que o modelo capaz de prever satisfatoriamente as distribuies superficiais e na coluna de gua: da temperatura, dos nutrientes, do oxignio e da clorofila-a. Os resultados evidenciam o crucial papel desempenhado pelos processos fsicos no aumento de fitoplncton que ocorre ao longo de uma estreita rea da costa norte portuguesa, mostrando a estreita ligao entre a distribuio costeira de fitoplncton e a distribuio costeira de temperatura, superfcie. A produtividade do fitoplncton que ocorre nas guas costeiras no s atribuda disponibilidade de nutrientes mas tambm intensidade luminosa. A luz e a intensidade dos ventos de norte/noroeste so os factores chave no controlo dos blooms de fitoplncton observados nesta regio de afloramento, sobretudo no Vero, nomeadamente na camada de mistura pouco profunda e junto nutriclina. Deste modo os modelos numricos em associao com dados in situ e imagens de satlite podero ser considerados uma excelente ferramenta para a anlise e previso de cenrios, presentes e futuros, de aces praticadas sobre o meio ambiente.
Resumo:
Nas ltimas dcadas verificou-se um aumento da contaminao dos solos com metais pesados resultante de processos antropognicos. As descargas de efluentes industriais, a actividade mineira e a aplicao de lamas residuais e de fertilizantes so as principais fontes de metais pesados. Em certas regies, a acumulao destes elementos nos solos tem atingido nveis preocupantes para o equilbrio dos ecossistemas. Vrios estudos tm demonstrado que os metais influenciam os microrganismos afectando adversamente o seu crescimento, morfologia e actividades bioqumicas resultando num decrscimo da biomassa e diversidade. Entre os microrganismos do solo, as bactrias pertencentes ao gnero Rhizobium tm um elevado interesse cientfico, econmico e ecolgico devido sua capacidade para fixar azoto. Deste modo, o trabalho desenvolvido ao longo desta tese incidiu sobre o efeito da toxicidade imposta pelos metais nas bactrias fixadoras de azoto, em particular em Rhizobium leguminosarum bv. trifolii e teve como principais objectivos: determinar o efeito dos metais pesados na sobrevivncia e na capacidade de fixar azoto dos isolados de rizbio; avaliar a influncia dos metais na diversidade das populaes de rizbio isoladas de solos contaminados; determinar os nveis de tolerncia do rizbio a diferentes metais e analisar a resposta ao stresse oxidativo imposto pelo cdmio. A Mina do Braal foi o local de estudo escolhido uma vez que os seus solos esto muito contaminados com metais em resultado da extraco de minrio durante mais de 100 anos. Foram escolhidos 3 solos com diferentes graus de contaminao, o solo BC com concentraes reduzidas de metais, escolhido por estar numa zona j fora da mina e designado por solo controlo e os solos BD e BA considerados medianamente e muito contaminados, respectivamente. O Pb e o Cd foram os metais predominantes nestes solos, assim como o metalide As, cujas concentraes ultrapassaram largamente os limites previstos na lei. Sendo as enzimas do solo boas indicadoras da qualidade do mesmo, foi determinada a actividade de algumas como a desidrogenase (DHA) e a catalase (CAT). Ambas as enzimas correlacionaramse negativamente com as concentraes de metais nos solos. A dimenso das populaes indgenas de rizbio nos solos contaminados (BD e BA) foi bastante baixa, 9,1 bactrias g-1 de solo e 7,3 bactrias g-1 de solo, respectivamente, quando em comparao com a populao do solo BC (4,24x104 bactrias g-1 de solo). Estes resultados parecem estar relacionados com o elevado contedo em metais e com o pH cido dos solos. A capacidade simbitica tambm foi afectada pela presena de metais, uma vez que os isolados originrios do solo BD mostraram menor capacidade em fixar azoto do que os isolados do solo controlo. A diversidade das populaes de rizbio foi determinada com recurso anlise dos perfis de plasmdeos, perfis de REP e ERIC-PCR de DNA genmico e perfis de protenas e lipopolissacardeos. No conjunto dos 35 isolados analisados foram identificados 11 plasmdeos com pesos moleculares entre 669 kb e 56 kb. Embora a incidncia de plasmdeos tenha sido superior nos isolados do solo BC verificou-se maior diversidade plasmdica na populao isolada do solo BD. Resultados similares foram obtidos com os perfis de REP e ERIC-PCR e perfis de protenas, que indicaram maior diversidade nas populaes dos solos contaminados (BD e BA), contrariamente ao verificado por outros autores. O grau de tolerncia aos metais pesados e ao arsnio dos vrios isolados testados dependeu do metal e do local de origem. No geral, os isolados do solo BD mostraram maior tolerncia aos metais do que os isolados do solo controlo, o que est de acordo com o esperado uma vez que geralmente as populaes dos locais contaminados so mais tolerantes. Contudo, os isolados do local mais contaminado (BA) foram muito tolerantes apenas ao chumbo mostrando-se sensveis aos restantes metais. A inoculao dos solos BC, BD e BA aps irradiao com estirpes seleccionadas de rizbio permitiu avaliar a sua sobrevivncia ao longo de 12 meses em condies mais realistas. Verificou-se que aps um decrscimo inicial, os isolados inoculados no solo BC conseguiram recuperar a dimenso das suas populaes para nmeros similares aos inicialmente introduzidos, contrariamente ao verificado no solo BD onde o nmero de rizbios decresceu ao longo dos 12 meses. As condies adversas do solo BA apenas permitiram a sobrevivncia de 4 isolados at aos 3 meses e apenas dois deles conseguiram sobreviver aps 12 meses, designadamente C 3-1 e A 17-3. Estes isolados possuem um plasmdeo de 669 kb que poder estar na base da sobrevivncia destas estirpes. Por outro lado, o ltimo isolado originrio do solo contaminado e por isso estar tambm mais adaptado a sobreviver s elevadas concentraes de Pb existentes no solo BA. Por fim, constatou-se que o cdmio, um dos metais presente em concentraes mais elevadas nos solos em estudo, um indutor de stresse oxidativo nos isolados de rizbio menos tolerantes o que foi confirmado pelo aumento de ROS e danos celulares ao nvel dos lpidos.
