997 resultados para Estatinas (Agentes cardiovasculares) Teses
Resumo:
As estatinas so frmacos inibidores competitivos da enzima hidroxi-3-metil-glutaril Coenzima A (HMGCoA) redutase, amplamente utilizados para o controle da hipercolesterolemia total e, em especial, para a reduo dos nveis sricos de LDLc (Low Density Lipoprotein cholesterol). Alm do efeito primrio, esses frmacos apresentam vrios efeitos secundrios, chamados de efeitos pleiotrpicos, envolvendo atividade anti-inflamatria, antitumoral e antiparasitria. Para o desenvolvimento de inovaes na rea de qumica medicinal imprescindvel avaliar o risco de efeitos adversos para sade ou, em outras palavras, a segurana teraputica do novo produto nas condies propostas de uso. Nesse sentido, o objetivo desse trabalho foi investigar a genotoxicidade de quatro anlogos inibidores da biossntese de lipdios, da classe das estatinas, em modelos experimentais in vitro, testados previamente contra o clone W2 de Plasmodium falciparum a fim de se obter o IC50 dessas molculas frente ao patgeno. Foram desenvolvidas quatro novas molculas (PCSR02.001, PCSR09.001, PCSR08.002 e PCSR10.002). Para a avaliao da toxicidade, foram realizados o teste de mutagenicidade bacteriana (teste de Ames), o ensaio de viabilidade celular utilizando o reagente WST-1 e o ensaio de induo de microncleos, ambos utilizando uma linhagem ovariana (CHO-K1) e uma linhagem heptica (HepG2). Levando em conta o fato de nenhuma das amostras ter induzido efeitos mutagnicos nas linhagens de S. enterica sorovar Typhimurium, e PCSR10.002 ter apresentado citotoxicidade sugere-se ento que este composto seja o mais txico. Comparativamente, PCSR10.002 foi mais genotxico e citotxico para a linhagem CHO-K1 do que para a linhagem HepG2. PCSR02.001 apresentou elevado potencial genotxico para clulas ovarianas, mas no foi capaz de induzir a formao de microncleos em clulas hepticas, apresentando, portanto um perfil similar ao observado em PCSR10.002. Assim como a atorvastatina, PCSR09.001 apresentou elevado potencial pr-apopttico para a linhagem de hepatcitos. J PCSR08.002, apresentou aumento na apoptose de CHO-K1. A induo de apoptose no necessariamente um evento negativo, j que pouco lesiva e responsvel pela eliminao de clulas danificadas. Porm, as respostas de apoptose induzidas por esse composto foram muito inferiores quelas induzidas pela atorvastatina (cerca de 4 vezes menor que a atorvastatina). PCSR08.002 foi aquele se mostrou menos txico e essa amostra foi a que teve menor risco relativo, em uma anlise global das respostas de citotoxicidade e no demonstrou ter potencial genotxico para as linhagens utilizadas nesse estudo. Conclui-se, portanto, que a anlise da atividade toxicolgica utilizando modelos experimentais in vitro dessas estatinas constitui um importante passo para o estabelecimento de novos candidatos frmacos com maior segurana.
Resumo:
Nosso objetivo foi determinar que tipo de estatina pode atenuar a leso pulmonar aguda (LPA) induzida por lipopolissacardeo (LPS) em camundongos da linhagem C57Bl/6. Trinta camundongos machos ( 23 g) foram divididos em 5 grupos (n=6 cada): grupo LPS (10 mg/kg) administrado intraperitonealmente (i.p.), LPS mais atorvastatina (10 mg/kg/dia; grupo LPS+A), LPS mais pravastatina (5 mg/kg/dia; grupo LPS+P) e LPS mais sinvastatina (20 mg/kg/dia; grupo LPS+S). O grupo controle recebeu salina i.p.. Em um grupo separado de camundongos (n=5), a soma das presses pulmonares resistivas e viscoelsticas (DeltaPtot) e elastncia esttica (E[st]) foram medidas. Um dia aps a administrao de LPS os camundongos foram sacrificados (24 h) por deslocamento cervical e logo em seguida foi realizado lavado broncoalveolar (LBA). Os pulmes foram removidos para anlise histopatolgica e homogeneizados para anlises bioqumicas (ELISA, catalase, superxido dismutase, mieloperoxidase, substncias reativas ao cido tiobarbitrico, carbonilao de protenas e mtodo de Griess). A quantidade de leuccitos foi menor no grupo LPS+P (p<0,01) e LPS+S (p<0,05) em comparao ao grupo LPS. Os nveis de MCP-1 e IL-6 reduziram no grupo LPS+P (p<0,01), enquanto o grupo LPS + S mostrou reduo apenas nos nveis de IL-6 (p<0,05) em comparao ao grupo LPS. Marcadores redox (superxido dismutase e catalase) foram menores no grupo LPS+A (p<0,01) em comparao ao grupo LPS. A peroxidao lipdica (malondialdedo e hidroperxidos) diminuiu em todos os grupos tratados (p<0,05) quando comparados ao grupo LPS. A mieloperoxidase foi menor no grupo LPS+P (p<0,01) quando comparado ao grupo LPS. DeltaPtot e E(st) foram, significativamente, maiores no grupo LPS do que nos outros grupos. Nossos resultados sugerem que atorvastatina e pravastatina, mas no a sinvastatina, exibiram aes anti-inflamatrias e antioxidantes na LPA induzida por LPS.
Resumo:
A atorvastatina, amplamente utilizada no tratamento de dislipidemias, frmaco inibidor da enzima 3-hidroxi-3-metilglutaril coenzima A redutase (HMG-CoA) redutase que atua na etapa limitante da sntese do colesterol nas clulas hepticas. O transporte hepatocelular da atorvastatina mediado principalmente pelo polipeptdeo transportador de nions orgnicos (OATP) 1B1, o qual altamente polimrfico geneticamente e est sujeito a interao com outros frmacos usados na clnica. O presente estudo teve como objetivo revisar a literatura cientfica baseada em estudos clnicos, in vitro e experimentais a fim de avaliar o impacto de polimorfismos genticos de OATP1B1 na disposio cintica, eficcia e toxicidade da atorvastatina. Os estudos clnicos demonstram que o polimorfismo c.521T>C, presente nos alelos SLCO1B1 *5 e *15, resulta em alterao funcional da atividade transportadora, sendo que indivduos homozigotos para o alelo raro C, apresentam maiores concentraes plasmticas de atorvastatina e seus metablitos ativos 2-hidroxiatorvastatina e 4- hidroxiatorvastatina. Entretanto, o aumento na concentrao plasmtica da atorvastatina e seus metablitos ativos em indivduos c.521 CC parece no ser acompanhado de reduo na concentrao dos mesmos no stio alvo, tendo em vista que no foram encontradas diferenas significativas na reduo da LDL-C ou colesterol total quando comparados aos indivduos homozigotos para o alelo selvagem. O alelo SLCO1B1*15 mostrou-se significativamente associado a miopatia induzida pela atorvastatina, apesar do pequeno nmero de pacientes investigados. Estudos in vitro em clulas expressando OATP1B1 so necessrios a fim de investigar o impacto do polimorfismo c.521T>C na concentrao de atorvastatina nos hepatcitos. Sugere-se ainda que estudos clnicos sejam conduzidos a fim de avaliar se a reduo da dose de...
Resumo:
A hipertenso arterial sistmica (HAS) um problema de sade pblica, geralmente associada a outras doenas, como obesidade, diabetes, doena renal, aterosclerose, acidente vascular cerebral (AVC) e identificado como um dos fatores de risco mais prevalentes para o desenvolvimento de doenas cardiovasculares. Orgos-alvo, como corao, rins, crebro e olhos, so comumente afetados em pacientes hipertensos. No entanto, o dano testicular causado pela hipertenso no foi claramente definido. A hipertenso um fator de risco bem estabelecido para a disfuno ertil, mas sua relao com o dano testicular e a fertilidade masculina no claramente compreendida. Este estudo avalia a morfologia testicular e alguns parmetros espermticos de ratos espontaneamente hipertensos (SHR), virgem de tratamento e tratados com enalapril. Ratos SHR foram distribudos em dois grupos, um grupo hipertenso (H), e um grupo tratado com enalapril (HE). Ratos Wistar-Kyoto (WKY) foram utilizados como controles. A presso arterial sistlica foi medida semanalmente, at o final do experimento. A concentrao de espermatozides, motilidade e viabilidade foram determinadas em amostras coletadas da cauda do epiddimo. Mtodos estereolgicos foram usados para analisar objetivamente a morfologia testicular macroscopicamente e microscopicamente. Todos os dados foram analisados por ANOVA com ps-teste de Tukey, considerando p <0,05. Ao final do experimento a presso arterial sistlica no grupo HE (153,9 mmHg 21,03 ) foi semelhante a dos animais pertencentes ao grupo WKY (153,4 24,41) e menor que a dos animais H (205,1 24,9). A concentrao espermtica do grupo H (1,31 x 107 sptz/ml 0,27) foi inferior do grupo WKY (2,11 x 107 sptz/ml 0,34), entretanto o controle da presso arterial com o enalapril melhorou este parmetro e a concentrao espermtica do grupo HE (2,46 x 107 sptz/ml 0,54) foi semelhante a do WKY. A densidade volumtrica vascular tambm foi alterada no grupo de hipertensos, enquanto que os animais do grupo HE foram semelhantes aos controles. O epitlio seminfero dos animais HE apresentou a maior densidade volumtrica, indicando um possvel efeito protetor indireto do enalapril na espermatognese. Neste modelo animal, a HAS promoveu alteraes morfolgicas no testculo, com conseqncias sobre a produo de espermatozides. O controle da presso arterial com o enalapril protegeu o testculo destas alteraes, restabelecendo a produo normal dos espermatozides.
Resumo:
A hipertenso uma das mais importantes causas de morte prematura no mundo. Estudos sobre a Euterpe oleracea Mart. (aa), uma planta tpica do Brasil e rica em polifenis, tm mostrado grande potencial teraputico contra a hipertenso, uma vez que seus benefcios podem ser associados s aes antioxidante, vasodilatadora e anti-hipertensiva. O rato espontaneamente hipertenso (SHR) um modelo experimental utilizado para o estudo da hipertenso essencial. Neste estudo, investigamos o efeito do tratamento crnico do extrato hidroalcolico do caroo de aa (ASE) sobre a hipertenso de SHR. Animais SHR e Wistar receberam tratamento com ASE (200 mg/Kg/dia) na gua de beber, ou veculo, desde 21 dias at 4 meses de idade e tiveram a presso arterial sistlica (PAS) aferida por pletismografia de cauda. Os efeitos vasodilatadores da acetilcolina (ACh) e nitroglicerina (NG) foram estudados em leito arterial mesentrico (LAM) perfundido e pr-contrado com norepinefrina. A atividade das enzimas superxido dismutase (SOD), catalase (CAT), glutationa peroxidase (GPx), os nveis de malondialdedo (MDA), a carbonilao de protenas e os nveis de nitrito foram avaliados em plasma, LAM, corao e rim por espectrofotometria. A expresso das protenas SOD e eNOS foram avaliadas por western blot em LAM e as alteraes vasculares pela espessura da tnica mdia em aorta. A PAS foi maior (p<0.05) nos animais SHR, e reduzida pelo tratamento com ASE. O efeito vasodilatador reduzido da ACh em SHR foi recuperado pelo ASE e o da NG no foi diferente entre os grupos. No houve diferena nos nveis de glicose e insulina em SHR comparados aos controles. Entretanto, a insulina se apresentou reduzida no grupo SHR+ASE. O nvel de renina foi maior nos SHR e normalizado pelo ASE (p<0.05). Os nveis de MDA no foram diferentes entre SHR e controles, entretanto o tratamento com ASE reduziu esses nveis em rim de SHR (p<0.05). Os nveis de carbonilao de protenas foram maiores em amostras de rim e corao de SHR e o ASE reduziu o dano sobre protenas (p<0.05), no tendo diferena em plasma e LAM. A atividade da SOD foi menor em amostras de rim nos animais SHR e aumentada pelo tratamento com ASE (p<0.05). Entretanto, a atividade aumentada da SOD em corao e LAM dos SHR, foi reduzida pelo tratamento com ASE, no havendo diferena em amostras de plasma. No houve diferena na atividade da GPx em amostras de LAM e corao dos diferentes grupos, porm sua atividade foi aumentada em rim dos SHR, e o tratamento com ASE normalizou essa atividade. Em plasma, a atividade da GPx foi reduzida em SHR e aumentada pelo tratamento (p<0.05). A atividade da enzima CAT foi reduzida em plasma e rim de SHR e o ASE aumentou sua atividade. No houve diferena em amostras de LAM, entretanto em amostras de corao o tratamento aumentou a atividade da CAT em SHR (p<0.05). Em amostras de plasma, corao e rim, no houve diferena nos nveis de nitrito entre os diferentes grupos, porm em amostras de LAM foram menores em SHR e SHR+ASE (p<0.05). A expresso das protenas eNOS e SOD apresentaram-se aumentadas em SHR (p<0.05) sem alterao com o tratamento. Os SHR apresentaram um aumento na espessura da camada mdia da aorta que foi reduzido (p<0.05) pelo ASE. Este estudo demonstrou que o tratamento crnico com ASE em SHR reduziu a hipertenso, preveniu a disfuno endotelial e o remodelamento vascular. O aumento da defesa antioxidante e reduo do dano oxidativo devem contribuir para os efeitos benficos de ASE. Portanto, sugerimos que o ASE pode ser uma ferramenta importante para o tratamento das alteraes cardiovasculares associadas hipertenso essencial.
Resumo:
Os transtornos psiquitricos so um problema de sade pblica, ocupando cinco das dez principais causas de incapacitao no mundo. O transtorno bipolar (TB) um transtorno de humor, segundo o DSM-IV (manual diagnstico e estatstico de doenas mentais), o qual afeta cerca de 1% da populao mundial. O TB do tipo I (TBI) o mais frequente entre os TBs e caracterizado pela presena de episdios manacos ou mistos acompanhados por episdios depressivos. Assim como outros transtornos psiquitricos, como a depresso, ansiedade e esquizofrenia, o TB representa um importante fator de risco cardiovascular, e pacientes com este transtorno apresentam mortalidade cardiovascular duas vezes maior que a populao em geral. No entanto, os exatos mecanismos envolvidos nesta relao permanecem desconhecidos. Estudos sugerem o envolvimento da via L-arginina-xido nitrico (NO) na patofisiologia do TB. O NO responsvel por diversas funes fisiolgicas, incluindo a inibio da funo plaquetria. A L-arginina, sua precursora, transportada em plaquetas pelo carreador y+L, ativando a enzima NO sintase (NOS), a qual produz NO e e L-citrulina. Uma vez produzido, o NO ativa a enzima guanilato ciclase (GC), levando ao aumento dos nveis de guanosina monofosfato cclica (GMPc). Adicionalmente, a L-arginina no exclusivamente utilizada pela NOS, ela tambm pode ser metabolizada pela arginase e produzir L-ornitina e uria. A biodisponibilidade do NO depende tanto de sua sntese como de sua degradao pelo estresse oxidativo ou pela inflamao. O objetivo deste estudo foi investigar detalhadamente a via L-arginina-NO-GMPc em plaquetas de pacientes com TBI, a expresso da arginase e outros marcadores de estresse oxidativo e inflamao. Vinte e oito pacientes com TB e dez indivduos saudveis foram includos no estudo. Nossos estudos mostraram uma reduo da atividade da NOS em todos os grupos de pacientes bipolares (fases de eutimia, depresso e mania), quando comparados aos controles. Isto ocorreu na presena de concentraes normais do substrato e de seu transporte, e da expresso inalterada das isoformas eNOS e iNOS. A expresso da arginase II no diferiu entre os grupos estudados, indicando que a disponibilidade da L-arginina no est sendo desviada para o ciclo de uria em plaquetas. A produo reduzida de GMPc foi observada mesmo com a expresso inalterada da GC. A atividade e marcadores de estresse oxidativo, avaliada atravs da quantificao da oxidao de protenas e atividade da catalase, no foram modificadas em plaquetas de pacientes com TB, enquanto que a atividade da SOD estava aumentada em todas as fases. Os nveis sricos da protena C-reativa (PCR), um marcador inflamatrio, esto aumentados em pacientes manacos, comparados aos controles. A reduzida produo de NO observada em plaquetas de pacientes bipolares pode ser um elo entre esta complexa associao entre TB e a doena cardiovascular.
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A cistite hemorrgica (CH) consiste em um processo inflamatrio difuso de origem infecciosa ou no que resulta em um sangramento da mucosa vesical. As CH crnicas recorrentes induzidas pela ciclofosfamida (CYP) so um desafio na prtica clnica pela alta morbidade e por vezes mortalidade dos pacientes. O tratamento da CH induzida pela ciclofosfamida consiste no uso de MESNA, disulfiram, N-acetil-cistena, anti-inflamatrio, oxignio hiperbrico, hiper-hidratao e irrigao vesical, mas novas terapias tm sido investigadas, inclusive usando produtos naturais. A espcie vegetal Chenopodium ambrosioides L., conhecida popularmente como mastruz, mastruo e erva-de-Santa-Maria, tem sido relatada pela populao como anti-inflamatrio e analgsico. O presente estudo investigou os efeitos do extrato bruto hidroalcolico de folhas de Chenopodium ambrosioides na CH induzida pela ciclofosfamida em ratos. Vinte e nove ratos receberam 150 mg/kg de CYP por via intraperitoneal (i.p.) para induo de CH e em seguida foram divididos em trs grupos: controle negativo (CN), tratados com soro fisiolgico a 0,9%; extrato bruto hidroalcolico de Chenopodium ambrosioides (EBHCa), tratado com dose nica de 50 mg/kg de extrato bruto hidroalcolico de Chenopodium ambrosioides (EBH) e controle positivo (CP), tratados com dose nica de 15 mg/kg de diclofenaco de potssio, todos por gavagem. Aps 48 horas da induo da CH os animais foram sacrificados para retirada da bexiga, que foi preparada para anlise histopatolgica e imuno-histoqumica. O EBH foi capaz de diminuir o peso da bexiga e histologicamente a inflamao aguda e crnica da bexiga, a extenso do infiltrado inflamatrio na parede vesical e a neoformao capilar do mesmo modo que o diclofenaco de potssio, quando comparados ao grupo CN. Observou-se ainda uma reduo da expresso imuno-histoqumica de cicloxigenase-2 (COX-2) e do fator nuclear kappa B (NFB) na bexiga. No presente estudo o EBH das folhas de Chenopodium ambrosioides apresentou atividade anti-inflamatria, semelhante ao diclofenaco de potssio, no tratamento da CH induzida pela CYP.
Resumo:
Por serem organismos filtradores, os mexilhes devem ser extrados para consumo somente de guas com padres microbiolgicos regulamentados pelo Conselho Nacional do Meio Ambiente, uma vez que intoxicaes alimentares de origem bacteriana so as consequncias mais comuns relacionadas ao consumo destes moluscos. Aps a retirada dos costes, estes organismos passam por processos de fervura, lavagem, acondicionamento em sacos plsticos e transporte at a chegada ao mercado onde so comercializados; etapas estas, realizadas sem cuidados asspticos. Objetivando avaliar a qualidade microbiolgica de mexilhes Perna perna coletados na praia de Itaipu, Niteri, RJ; aps a sua fervura; e comercializados no Mercado So Pedro, foram realizadas contagens de coliformes totais e termotolerantes e pesquisa de Escherichia coli, Salmonella spp. e Vibrio spp. por metodologia convencional e molecular em amostras obtidas destes locais. Pelo teste de disco-difuso foi observado o perfil de resistncia das cepas isoladas. Do total de amostras analisadas (27) apenas 3 dos mexilhes que sofreram processo de aferventao, 1 do comercializado e 3 do in natura, se encontravam dentro dos padres aceitveis pela legislao. No houve diferena significativa entre as contagens de coliformes termotolerantes dos diferentes mexilhes analisados, mas sim entre os perodos seco e chuvoso. Somente uma das nove coletas de gua mostrou-se prpria para o cultivo de mexilhes (at 14 CF/mL). Foram isoladas e caracterizadas fisiolgicamente, 77 estirpes da espcie E. coli, sendo confirmadas molecularmente por PCR os sorotipos EPEC, STEC e EAEC; 4 cepas Salmonella spp. sendo apenas uma confirmada por PCR; e das 57 cepas caracterizadas como Vibrio spp., 51 foram confirmadas por PCR, sendo 46 Vibrio spp., 2 V. cholerae, 1 V. vulnificus, 1 V. parahaemolyticus e 1 V. mimicus. Entre as estirpes de E. coli, 13% apresentaram multirresistncia e 15,6% apresentaram resistncia mltipla. A estirpe de Salmonella spp. se mostrou sensvel a todos os antimicrobiados testados. Das estirpes de Vibrio spp. testadas, 68,6% apresentaram multirresistncia e 72,5% apresentaram resistncia mltipla. A partir da pesquisa de genes direto do caldo de enriquecimento foi possvel detectar todos os genes pesquisados, com exceo para os sorotipos de Salmonella e V. cholerae. Baseado nos resultados do presente trabalho pode-se inferir que os mexilhes, amplamente comercializados no municpio de Itaip, podem se constituir em risco para a sade pblica dos consumidores no Rio de Janeiro, necessitando dos rgos competentes uma eficiente fiscalizao nos pontos de venda e cultivo destes moluscos.
Resumo:
A utilizao de biomarcadores cardioespecficos vem sendo recomendado como ferramenta til na monitorao e identificao precoce de leso cardaca, em decorrncia do potencial de cardiotoxicidade da teraputica oncologica. O objetivo do presente estudo foi avaliar o nvel plasmtico do peptdeo natriurtico do tipo B (BNP) e da expresso gnica do BNP e outros genes relacionados a sua sntese, a interleucina-6 (IL-6), fator β1 de transformao de crescimento (TGF-β1) e procolgeno tipo I, mediante a associao dos agentes antineoplsicos docetaxel e ciclofosfamida (TC) e da radiao ionizante (IR) no corao de ratas Wistar, 2 meses aps o trmino do tratamento. Para isso, Ratas Wistar (3-4 meses, n=7) foram irradiadas no corao com dose nica de 20Gy, em um campo ntero-posterior de 2x2cm2, em acelerador linear com feixe de energia nominal de 6 MeV; outras (n=7) foram tratadas (4 ciclos, com 7 dias de intervalo) com docetaxel (12,5 mg/Kg) e ciclofosfamida (50 mg/Kg) e irradiadas aps 7 dias do tratamento quimioterpico. Como controle (n=7), animais no irradiados e no tratados com quimioterpicos. Aps 2 meses do fim do tratamento, a eutansia dos animais foi realizada. Amostras de plasma e tecido cardaco, ventrculo esquerdo (VE), foram coletadas. Por ensaio ELISA foi quantificada a concentrao plasmtica de BNP; parte do tecido cardaco foi fixado, includo em parafina e cortado em micrtomo, para assinalar a presena de BNP no VE, avaliao qualitativa, pela tcnica de imunohistoqumica (IHQ); e a outra parte para a tcnica RT-qPCR, onde foram avaliados a expresso relativa de mRNA dos genes do BNP, IL-6, TGF-β1 e procolgeno tipo I. Na IHQ o grupo controle apresentou uma marcao pontual, enquanto que os grupos tratados apresentaram uma marcao mais difusa, sendo que o grupo TC+IR foi o que apresentou maior disperso na marcao do BNP no tecido cardaco. Embora no tenha sido observado no ensaio ELISA uma diferena significativa entre as concentraes plasmticas de BNP dos grupos tratados em relao ao controle, nota-se uma tendncia de aumento no grupo TC+IR. Na analise por RT-qPCR, a expresso relativa de BNP foi similar ao apresentado no ELISA. O grupo TC+IR foi o grupo que apresentou maior expresso gnica de BNP, porm a diferena no significativa em relao ao controle. A nica anlise em que se obteve diferena na expresso gnica em relao ao controle foi a do gene IL-6 que apresentou expresso reduzida. Todos os demais genes analisados por RT-qPCR apresentaram uma expresso similar ao controle. Assim, os resultados obtidos sugerem que o BNP no se apresentou como um bom biomarcador cardioespecfico para identificao precoce de leso cardaca, no perodo a qual foi avaliado. As ratas Wistar, 2 meses aps a submisso do tratamento, no apresentaram um resultado diferenciado em relao ao controle, nos genes TGF-β1 e procolgeno tipo I, sugerindo ausncia de um quadro de remodelamento cardaco. Entretanto, apresentou reduo significativa do gene IL-6, no grupo TC+IR, propondo ao anti-inflamatria do BNP, que no mesmo grupo, apresentou uma tendncia de aumento em sua expresso gnica.
Resumo:
O nmero de mulheres jovens infectadas pelo HIV-1 vem crescendo desde o incio da epidemia da aids, principalmente nos pases em desenvolvimento, onde a frequncia de gravidez elevada. O desenvolvimento de estratgias para evitar a transmisso vertical tem aumentado o nmero de recm-nascidos no infectados nascidos de gestantes portadora do vrus. O objetivo da presente tese foi avaliar, in vivo e in vitro, o perfil de citocinas de neonatos no infectados, porm nascidos de mulheres infectadas pelo HIV-1. Os resultados demonstraram elevados nveis de citocinas pr-inflamatrias relacionadas ao fentipo Th17, associadas baixa produo de IL-10, tanto nos plasmas quanto nos sobrenadantes das culturas de clulas T ativadas obtidas do sangue do cordo umbilical de neonatos nascidos de gestantes infectadas pelo HIV-1 com cargas virais plasmticas(PVL) detectveis. De modo interessante, um perfil similar pr-inflamatrio foi observado em amostras de sangue perifrico de suas respectivas mes. Por outro lado, nveis elevados de IL-10, associados reduzida produo de citocinas inflamatrias, foram dosados no sangue e nos sobrenadantes das culturas de clulas T ativadas de gestantes que controlavam a PVL, assim como de seus neonatos. Com relao caracterizao fenotpica das clulas T maternas produtoras de IL-10, a anlise por citometria de fluxo demonstrou que essa citocina majoritariamente produzida por clulas T CD4+Foxp3-. Curiosamente, a replicao viral in vitro do HIV-1 foi inferior nas culturas das gestantes infectadas pelo HIV-1 e foi relacionada aos efeitos inibitrios da IL-10 sobre a produo de TNF-α. Por fim, os neonatos no infectados expostosin utero terapia antirretroviral (ART) apresentaram um menor peso ao nascer, e este achado foi inversamente correlacionado com os nveis perifricos maternos de TNF-α. Em concluso, nossos achados sugerem que gestantes que conseguem controlar a PVL, e o incremento na produo de IL-10 materna possam favorecer a expanso das clulas Tr-1, as quais podem auxiliar em reduzir o risco de transmisso vertical do HIV-1 por reduzir a taxa de replicao viral. Por outro lado, outros resultados tambm apresentados aqui, apesar de preliminares, revelaram efeitos adversos da replicao viral e da ART em gestantes infectadas pelo HIV-1 no desenvolvimento funcional das clulas T de neonatos no infectados. Esses dados podem ajudar a explicar por que algumas dessas crianas apresentam elevado risco morbidade e mortalidade devido a um estado basal de hipersensibilidade patolgica.
Resumo:
A sndrome da imunodeficincia adquirida (AIDS), causada pelo vrus da imunodeficincia humana (HIV), uma das mais destrutivas epidemias do mundo, e a infeco pelo HIV em mulheres jovens vem aumentando rapidamente nos dias atuais. Esse fato tem um impacto importante na transmisso vertical do vrus. Apesar da grande maioria dos casos de aids peditrica em todo mundo resultar da transmisso vertical, aproximadamente dois teros das crianas expostas ao HIV durante a vida fetal no so infectadas pelo vrus. Muitos trabalhos sugerem que durante a gestao doenas infecciosas maternas podem ter consequncias complexas para o desenvolvimento do feto, e poucos trabalhos tm explorado o impacto da exposio ao HIV sobre a responsividade imunolgica de crianas no infectadas a diferentes estmulos, particularmente na era das drogas antirretrovirais. Portanto, esse trabalho teve como objetivo avaliar eventos imunes em neonatos no-infectados expostos ao HIV-1 nascidos de gestantes que controlam (G1) ou no (G2) a carga viral plasmtica, usando neonatos no expostos como controle. Para tanto, sangue do cordo umbilical de cada neonato foi coletado, plasma e clulas mononucleares foram separados e a linfoproliferao e o perfil de citocinas foram avaliados. Os resultados demonstraram que a linfoproliferao in vitro induzido por ativadores policlonais foi maior nos neonatos do G2. Entretanto, nenhuma cultura de clula respondeu a um conjunto de peptdeos sintticos do envelope do HIV-1. A dosagem de citocinas no plasma e nos sobrenadantes das culturas ativadas policlonalmente demonstrou que, enquanto a IL-4 e IL-10 foram as citocinas dominantes produzidas nos grupos G1 e controle, a secreo de IFN-γ, IL-1, Il-6, IL-17 e TNF-α foi significativamente superior nos neonatos G2. Nveis sistmicos de IL-10 observados dentre os neonatos G1 foram maiores naqueles nascidos de mes tratadas com drogas inibidoras da transcriptase reversa do vrus. Por outro lado, nveis superiores de citocinas inflamatrias foram observados dentre estes nascidos de gestantes tratadas com terapia antirretroviral de alta eficcia. Em resumo, nossos resultados indicam uma responsividade imune alterada em neonatos expostos in utero ao HIV-1 e refora o papel do tratamento materno anti-viral com drogas menos potentes em atenuar tais distrbios.
Resumo:
A obesidade atinge propores epidmicas em pases industrializados e est relacionada a uma srie de doenas metablicas e circulatrias. Nesse contexto, a atividade fsica, tratamento no farmacolgico da obesidade, acessvel a diversas populaes e est relacionada com a reduo do risco cardiovasvascular mesmo. O objetivo deste trabalho foi avaliar, aps mudana ou no da dieta, associao ou no a um programa de treinamento aerbico (PTA) durante 8 semanas, a possvel reversibilidade dos danos causados por uma dieta hiperlipdica por 12 semanas. Para tal, 120 hamsters machos da espcie Mesocricetus auratus, com massa corporal de 60 g, foram distribudos em quatro grupos, cada um subdividido em trs subgrupos, com dez animais para diferentes anlises. Os grupos Obeso Controle (OBC) e Obeso Exercitado (OBEX) receberam a rao hiperlipdica por 20 semanas, com adio do PTA ao grupo OBEX nas ltimas 8 semanas. Os Obeso Rao Padro (OBRP) e Obeso Rao Padro/Exerccio (OBRP/EX) tiveram a rao modificada para comercial padro e adio do PTA ao grupo OBRP/EX aps as 12 semanas iniciais. Para as anlises microcirculatrias, a bolsa da bochecha foi usada para determinao do nmero mximo de extravasamentos induzidos por 30 min de isquemia seguida de reperfuso e da reatividade microvascular aps a aplicao tpica de acetilcolina e nitroprussiato de sdio. No sangue coletado foi avaliado o perfil lipdico, glicemias quinzenais e leptina. As expresses de eNOS e iNOS foram determinadas na aorta por imunoblotting e a composio corporal avaliada nos tecidos adiposos visceral, urogenital e retroperitoneal, retirados no dia do experimento. Os resultados foram analisados com os mtodos o teste estatstico de anlise de varincia (One Way ANOVA - Teste de Kruskal-Wallis), seguido pelo ps-teste de Dunn. Resultados mostram que a modificao diettica, associada ou no ao PTA, reduziu significativamente a massa corporal (p<0,0001), comprimento naso-anal (p=0,0011) e tecido adiposo (visceral [p<0,0001], urogenital [p=0.0004] e retroperitoneal [p= 0,0083]). Nas anlises sanguneas no foram encontradas diferenas com relao ao perfil lipdico e glicemia, j na leptina houve uma reduo significativa (p=0,0039). A anlise da reatividade microvascular mostrou melhora significativa na vasodilatao endotlio-dependente nos grupos submetidos modificao diettica associada ou no ao PTA. Nas medidas de permeabilidade a macromolculas houve reduo significativa no nmero de extravasamentos nos grupos submetidos modificao diettica associada ou no ao PTA, (5 min [p= 0,0207] e 10 min [p= 0,0057]). Houve um aumento na expresso de eNOS nos grupos submetidos modificao diettica associada ou no ao PTA, em comparao ao grupo OBC (p=0,0352). Os resultados mostraram que a modificao diettica, associada ao protocolo de treinamento aerbico melhora a vasodilatao endotlio-dependente, aumenta a expresso da xido ntrico sintase endotelial e reduz o nmero de extravasamentos induzidos por isquemia e reperfuso, mesmo sem melhoras nos marcadores bioqumicos tradicionais como glicemia e perfil lipdico.
Resumo:
A obesidade, doena resultante do acmulo excessivo de gordura corporal, importante fator de risco para diabetes mellitus tipo 2, dislipidemias e doenas cardiovasculares, doenas de alta prevalncia em todo o mundo. O processo de transio nutricional decorrente da globalizao contribuiu para o crescente nmero de indivduos com obesidade, principalmente pela modificao nos hbitos alimentares da populao, com ampla incluso de produtos industrializados ricos em gordura saturada, sal e acar, denominada dieta ocidental. Os mecanismos pelos quais a obesidade induzida por dieta leva ao desenvolvimento de doenas cardiovasculares ainda no esto completamente esclarecidos na literatura, porm sabe-se que a obesidade leva ao comprometimento da funo cardaca e do metabolismo energtico, aumentando a morbidade e mortalidade. Em grande parte dos estudos relacionados obesidade, o metabolismo energtico celular comprometido associa-se disfuno mitocondrial. Neste contexto, torna-se importante avaliar a funo mitocondrial na obesidade, visto que as mitocndrias so organelas com funes-chave no metabolismo energtico. No presente estudo, avaliamos inicialmente o efeito obesognico da dieta ocidental em camundongos Swiss por 16 semanas a partir do desmame. Para tal, analisamos a ingesto alimentar, evoluo da massa corporal, ndice de Lee, peso das gorduras epididimal e retroperitoneal, peso e morfologia do fgado, relao entre o peso do fgado/massa corporal, peso do ventrculo esquerdo (VE)/massa corporal, glicemia de jejum e teste intraperitoneal de tolerncia glicose. Avaliamos tambm o consumo de oxignio das fibras cardacas atravs da respirometria de alta resoluo. Alm disso, o contedo das protenas envolvidas no metabolismo energtico: Carnitina Palmitoil Transferase 1 (CPT1), protena desacopladora 2 (UCP2), Transportadores de glicose 1 e 4 (GLUT1 e GLUT4), protena quinase ativada por AMP (AMPK), protena quinase ativada por AMP fosforilada (pAMPK), receptor de insulina β (IRβ) e substrato do receptor de insulina 1 (IRS-1) foi determinado por western blotting. Nossos resultados confirmaram o carter obesognico da dieta ocidental, visto que os camundongos submetidos a esta dieta (GO), apresentaram-se hiperfgicos (P<0,001) e obesos (72,031,82, P<0,001), com aumento progressivo no ganho de massa corporal. Alm do aumento significativo dos parmetros: ndice de Lee (362,902,44, P<0,001), gorduras epididimal e retroperitonial (3,310,15 e 1,610,11, P<0,001), relao entre o peso do fgado/massa corporal (0,060,003, P<0,001) e peso de ventrculo esquerdo (VE)/massa corporal (0,080,002, P<0,01), hiperglicemia de jejum (192,1014,75, P<0,01), intolerncia glicose (P<0,05, P<0,01) e deposio ectpica de gordura no fgado. A respirometria de alta resoluo evidenciou disfuno mitocondrial cardaca no grupo GO, com reduzida capacidade de oxidao de carboidratos e cidos graxos (P<0,001) e aumento do desacoplamento entre a fosforilao oxidativa e a sntese de ATP (P<0,001). Os resultados de western blotting evidenciaram aumento nos contedos de CPT1 (1,160,08, P<0,05) e UCP2 (1,080,06, P<0,05) e reduo no contedo de IRS-1 (0,600,08, P<0,05). No houve diferena significativa nos contedos de GLUT1, GLUT4, AMPK, pAMPK, pAMPK/AMPK e IRβ. Em concluso, o consumo da dieta ocidental resultou no desenvolvimento de obesidade com disfuno mitocondrial associada a alteraes no metabolismo energtico.
Resumo:
Os enterococos esto amplamente distribudos no ambiente. Nos seres humanos, compem a microbiota do trato gastrintestinal, da cavidade oral e do trato geniturinrio. Nas ltimas dcadas, esses microrganismos se tornaram importantes agentes etiolgicos de infeces hospitalares. Uma caracterstica marcante desses microrganismos a resistncia intrnseca a vrios antimicrobianos utilizados habitualmente no tratamento de infeces, alm de alguns fatores que tem sido relacionado virulncia de enterococos. Este estudo investigou a presena de enterococos em amostras de infeco e colonizao de pacientes hospitalizados, profissionais de sade, dietas hospitalares e manipuladores de alimentos. Foram analisadas 276 amostras de colonizao, de quadros de infeco, dietas orais e manipuladores de alimento. No foram recuperadas amostras dos profissionais de sade. Todas as amostras foram submetidas a testes convencionais de caracterizao do gnero e espcies. Testes de susceptibilidade aos antimicrobianos foram empregados pelo mtodo de disco difuso, alm da CIM para vancomicina e teicoplanina. A produo de biofilme e a expresso da gelatinase tambm foram avaliadas. Os genes de resistncia a gentamicina, estreptomicina e vancomicina e os genes de virulncia cylA, esp e fsr foram pesquisados pela tcnica de PCR. O polimorfismo gentico foi determinado por PFGE. A espcie E. faecalis foi a prevalente nas amostras isoladas de colonizao e infeco (42,2% e 81,9%, respectivamente). E. casseliflavus (58,9%) foi a mais freqente dentre as amostras das dietas hospitalares e E. faecium (46,7%) de manipuladores. Dentre as amostras de colonizao as maiores taxas de resistncia foram observadas para eritromicina (76,3%) e ciprofloxacina (53,9%). Dentre as amostras de infeco, >70% foram resistentes a eritromicina, ciprofloxacina e tetraciclina. Resistncia a nveis elevados de gentamcina (HLR-GE) e estreptomicina (HLR-ST) foi detectada em 24,6% e 20,4% das amostras, respectivamente, e todas foram portadoras dos respectivos genes. A maioria das amostras de colonizao (52,6%) e infeco (55,7%) foram multirresistentes. A taxa para resistncia a nveis elevados de vancomicina foi de 5,2% e todas eram portadoras do gene vanA. Em relao a formao de biofilme, 70,2% foram produtoras, com uma maior freqncia dentre as de infeco. A expresso de gelatinase foi detectada em 28,9% e 44,3% das amostras de colonizao e infeco, respectivamente. Nenhuma das amostras isoladas das dietas hospitalares e de manipuladores expressou gelatinase. Nas amostras pertencentes as espcies E. faecalis e E. faecium (n=109) 16,5%, 51,4% e 48,6% apresentaram produtos de amplificao referentes aos genes cylA, esp e fsr, respectivamente. A anlise do polimorfismo gentico revelou uma extensa diversidade dentre as amostras pertencentes as espcies E. faecalis e E. faecium, no acarretando um perfil eletrofortico prevalente. Entretanto, foi observado um perfil nico dentre as amostras de E. gallinarum resistentes a vancomicina (vanA). Este estudo mostrou que amostras de enterococos isoladas de diferentes fontes, no s de quadros infecciosos, podem representar um risco para a populao, apontando para uma maior reflexo quanto ao papel desses microrganismos nas infeces humanas, particularmente no ambiente hospitalar.
Resumo:
Os mecanismos de ao citotxica do inibidor de histona deacetilase LBH589 foram investigados em associao com o quimioterpico cisplatina (CDDP) em duas linhagens derivadas de cncer de pulmo de no pequenas clulas (CPNPC). Os resultados foram analisados em relao ao tipo de morte celular associada s alteraes em enzimas relacionadas ao metabolismo energtico e a via glicoltica. Para realizao do trabalho, foram utilizadas as linhagens tumorais A549 (selvagem para o gene de p53) e Calu-1 (nulo para o gene de p53) tratadas com LBH589 em combinao ou no com CDDP. Foram realizadas curvas de tempo e dose-resposta com as drogas isoladamente pelo ensaio de viabilidade celular (MTT) nas duas linhagens para a escolha das melhores condies para o nosso estudo. As condies dos tratamentos isolados com reduo da viabilida celular menores que o IC50 de cada frmaco foram selecionados para realizao dos tratamentos combinados. As avaliaes de apoptose foram realizadas por citometria de fluxo pelo ensaio de Anexina V/PI, e com a marcao de protenas por Western Blotting. As protenas relacionadas a via glicoltica foram avaliadas por Western Blotting e a expresso de RNAm por qPCR. Os resultados demonstraram que o LBH589 combinado a CDDP foi capaz de induzir apoptose em 70% das clulas (Calu-1) e 54,9% (A549) no tempo de 24 horas, e 90% (calu-1) e 62,1% (A549) em 48 horas, independendo, portanto, do status da p53. Os nveis de expresso de enzimas relacionadas com o metabolismos energtico tambm sofreram alteraes nos tratamentos estudados. O LBH589 induziu aumento de cerca de 4x dos nveis de RNAm de HK isoformas I e II em ambas as linhagens. Houve tambm um aumento na expresso proteica das isoformas de HK I e II. Outras enzimas relacionadas a via glicoltica como PFKP, PKM2 e LDHA foram analisadas e apresentaram reduo da expresso proteica, principalmente na presena do LBH589. A combinao da CDDP com LBH589 parece ser promissora para o tratamento de CPNPC induzindo apoptose atravs de alteraes no metabolismo energtico tumoral.
