Características microbiológicas e clínicas das infecções por Acinetobacter spp. e Pseudomonas aeruginosa em Unidade de Terapia Intensiva Cardíaca de um Hospital Universitário do Rio de Janeiro

As infecções em cirurgia cardíaca ainda apresentam um cenário importante nas infecções associadas à assistência a saúde (IAAS), favorecendo ao paciente à aquisição de infecções por micro-organimos multirreristentes. Este trabalho teve como objetivo avaliar o perfil de resistência a antimicrobianos, verificar a presença de genes que codificam as enzimas dos tipos oxacilinases e metalo-beta-lactamases e descrever as características demográficas e clínicas dos pacientes colonziados/infectados por Acinetobacter spp. e P.aeruginosa internados no Centro de Terapia Intensiva Cardíaca do HUPE no período de 2005 a 2010. A maioria das 46 amostras de Acinetobacter spp e das 35 de P.aeruginosa foram de origem respiratória seguido de sangue. A maioria das amostras de A. baumannii apresentou altos percentuais de resistência a: ceftazidina, cefepime, piperacilina-sulbactam, ciprofloxacin, ceftriaxona e CIM ≥32 μg/mL para os carbapenêmicos. Uma amostra foi resistente a Polimixina B. O gene blaOXA-23 foi detectado em 65% das amostras e uma amostra apresentou o gene blaOXA-24. Não foram detectados os genes blaOXA-58-like e blaOXA-143. Para P. aeruginosa os percentuais de resistência para todos os antimicrobianos foram inferiores a 32%. Quatro amostras apresentaram resistência intermediária a polimixina B e nenhum gene de resistência foi detectado. Os prontuários dos pacientes foram analisados a fim de associar as características clínicas com os processos infecciosos identificados e seu desfecho clínico. Na análise por tipo de micro-organismo associado ao processo infeccioso à idade acima de 70 anos, DM e uso da ventilação mecânica por tempo prolongado foi maior no grupo dos pacientes que apresentaram infecção por P.aeruginosa. O IAM, a ICC em internações anteriores e suas complicações (choque cardiogênico e arritmia) tiveram impacto na mortalidade na série de pacientes (p<0,05). A insuficiência renal entre todas as comorbidades foi à única que teve associação com a mortalidade (OR= 8,3). Não houve associação entre a mortalidade e o micro-organismo que causou a infecção (Acinetobacter spp. p=0,3 e P.aeruginosa p=0,2) ou a resistência a carbapenêmicos (p=0,5). Foram observados dois casos de mediastinte por Acinetobacter spp. e dois por P. aeruginosa sendo um achado inédito no Brasil até o momento.

Caracterização fenotípica e molecular de amostras de Enterococcus isoladas em um hospital universitário da cidade do Rio de Janeiro

Os enterococos estão amplamente distribuídos no ambiente. Nos seres humanos, compõem a microbiota do trato gastrintestinal, da cavidade oral e do trato geniturinário. Nas últimas décadas, esses microrganismos se tornaram importantes agentes etiológicos de infecções hospitalares. Uma característica marcante desses microrganismos é a resistência intrínseca a vários antimicrobianos utilizados habitualmente no tratamento de infecções, além de alguns fatores que tem sido relacionado à virulência de enterococos. Este estudo investigou a presença de enterococos em amostras de infecção e colonização de pacientes hospitalizados, profissionais de saúde, dietas hospitalares e manipuladores de alimentos. Foram analisadas 276 amostras de colonização, de quadros de infecção, dietas orais e manipuladores de alimento. Não foram recuperadas amostras dos profissionais de saúde. Todas as amostras foram submetidas a testes convencionais de caracterização do gênero e espécies. Testes de susceptibilidade aos antimicrobianos foram empregados pelo método de disco difusão, além da CIM para vancomicina e teicoplanina. A produção de biofilme e a expressão da gelatinase também foram avaliadas. Os genes de resistência a gentamicina, estreptomicina e vancomicina e os genes de virulência cylA, esp e fsr foram pesquisados pela técnica de PCR. O polimorfismo genético foi determinado por PFGE. A espécie E. faecalis foi a prevalente nas amostras isoladas de colonização e infecção (42,2% e 81,9%, respectivamente). E. casseliflavus (58,9%) foi a mais freqüente dentre as amostras das dietas hospitalares e E. faecium (46,7%) de manipuladores. Dentre as amostras de colonização as maiores taxas de resistência foram observadas para eritromicina (76,3%) e ciprofloxacina (53,9%). Dentre as amostras de infecção, >70% foram resistentes a eritromicina, ciprofloxacina e tetraciclina. Resistência a níveis elevados de gentamcina (HLR-GE) e estreptomicina (HLR-ST) foi detectada em 24,6% e 20,4% das amostras, respectivamente, e todas foram portadoras dos respectivos genes. A maioria das amostras de colonização (52,6%) e infecção (55,7%) foram multirresistentes. A taxa para resistência a níveis elevados de vancomicina foi de 5,2% e todas eram portadoras do gene vanA. Em relação a formação de biofilme, 70,2% foram produtoras, com uma maior freqüência dentre as de infecção. A expressão de gelatinase foi detectada em 28,9% e 44,3% das amostras de colonização e infecção, respectivamente. Nenhuma das amostras isoladas das dietas hospitalares e de manipuladores expressou gelatinase. Nas amostras pertencentes as espécies E. faecalis e E. faecium (n=109) 16,5%, 51,4% e 48,6% apresentaram produtos de amplificação referentes aos genes cylA, esp e fsr, respectivamente. A análise do polimorfismo genético revelou uma extensa diversidade dentre as amostras pertencentes as espécies E. faecalis e E. faecium, não acarretando um perfil eletroforético prevalente. Entretanto, foi observado um perfil único dentre as amostras de E. gallinarum resistentes a vancomicina (vanA). Este estudo mostrou que amostras de enterococos isoladas de diferentes fontes, não só de quadros infecciosos, podem representar um risco para a população, apontando para uma maior reflexão quanto ao papel desses microrganismos nas infecções humanas, particularmente no ambiente hospitalar.

Estudo da resistência aos antimicrobianos em enterobactérias isoladas de mãos de manipuladores de alimentos em cantinas permissionárias de uma universidade no Município do Rio de Janeiro

A contaminação dos alimentos e transmissão de patógenos via manipuladores pode ocorrer se as condições de higiene, armazenamento e preparo não estiverem satisfatórios. Procedimentos inadequados de manipulação oferecem um perigo potencial à saúde pública devido ao alto risco de ocorrência de doenças de origem alimentar por microrganismos resistentes aos antimicrobianos. Neste estudo foram coletados swabs das mãos de 49 manipuladores de alimentos, isoladas e identificadas por metodologia convencional 244 enterobactérias de 7 cantinas permissionárias em uma Universidade do Município do Rio de Janeiro. Foram utilizados discos contendo os seguintes antimicrobianos: aztreonam, tobramicina, ceftazidima, cloranfenicol, tetraciclina, sulfa, amicacina, ampicilina e sulbactam, ciprofloxacina, gentamicina, cefalotina, cefepime, cefoxitina, imipenem, ampicilina, cefotaxima. A pesquisa de genes que codificam β-lactamases foi realizada pela Reação em Cadeia da Polimerase para os genes blaTEM, blaSHV, blaCTX, blaOXA-1 e blaCMY-2. As espécies mais prevalentes identificadas foram: Enterobacter cloacae (21,3%), Citrobacter braakii (15,2%), Escherichia coli (12,7%), Klebsiella pneumoniae subesp. Pneumoniae (12,2%). O perfil de resistência aos antimicrobianos revelou que 94 (38,5%) cepas identificadas apresentaram resistência a pelo menos dois antibióticos, 55 cepas (22,5%) a pelo menos um antibiótico, 34 cepas (13,9%) a três antibióticos, 14 cepas (5,7%) mostraram-se resistentes a quatro antibióticos. Uma cepa de E. cloacae mostrou resistência múltipla a dez antibióticos e 140 cepas (57,3%) foram resistentes simultaneamente a cefalotina e cefoxitina. Nenhuma cepa foi resistente ao aztreonam e a sulfa e apenas 01 foi resistente ao ciprofloxacina, 01 ao imipenem e 02 a cefotaxima. Foi identificado a presença do gene blaSHV em uma cepa de K. pneumoniae subsp. pneumoniae. Este dado aponta para uma mudança no perfil dessas bactérias isoladas da comunidade que passam a ter características semelhantes com as de origem hospitalar. Os resultados alertam para um perigo à saúde dos consumidores e conseqüentemente à saúde pública, devido a presença de enterobactérias resistentes aos antimicrobianos nas mãos de manipuladores de alimentos.

Enterococcus faecium: caracterização molecular de amostras isoladas no período anterior e posterior a emergência da resistência à vancomicina no Estado do Rio de Janeiro

Nas últimas décadas, Enterococcus resistentes à vancomicina tem se destacado no cenário hospitalar em todo mundo. A emergência da resistência à vancomicina no Estado do Rio de Janeiro foi registrada em 2000, na espécie Enterococcus faecalis. Em seguida, Enterococcus faecium passou a ser prevalente. O objetivo deste estudo foi avaliar a diversidade genética das amostras de E. faecium sensíveis (VSEfm) e resistentes (VREfm) à vancomicina, isoladas em diferentes instituições de saúde do Estado do Rio de Janeiro no período de 1993 a 2008. As amostras bacterianas foram avaliadas por metodologia de eletroforese em campo pulsado (PFGE), após restrição com Smal, análise do polimorfismo numérico de segmentos repetitivos (MLVA) e tipagem por sequenciamento de múltiplos loci (MLST); além da detecção de marcadores fenotípicos, como a resistência à ampicilina e à ciprofloxacina, e genotípicos, como determinantes genéticos de virulência, que estão vinculados a um complexo clonal globalmente disperso (CC17). A diversidade de Tn1546 (que alberga o conjunto gênico vanA) foi determinada por amplificação e restrição com ClaI. Um grupo clonal prevalente foi observado pela metodologia de PFGE e agrupou amostras isoladas, principalmente, no período de 2004 a 2006, estando disseminado por diversas instituições de saúde do Estado, indicando transmissão inter- e intra-hospitalar. A avaliação por MLVA identificou dois MTs prevalentes dentre as amostras VREfm: MT12 relacionado à maioria das amostras dos principais grupos clonais identificados por PFGE e, o MT159 que apresentou frequência aumentada no ano de 2008. A análise por MLST destacou o ST78 associado aos principais grupos clonais definidos por PFGE, bem como, ao MT12. Também foi observada correlação entre o ST412 associado ao grupo clonal formado por apenas amostras de 2008 e o MT159. Foi notório por MLST que as amostras VREfm do Estado do Rio de Janeiro, no período do estudo, estiveram relacionadas CC17, juntamente com algumas amostras VSEfm. Entretanto, os principais marcadores de resistência e de virulência, característicos de CC17, estiveram mais relacionados as amostras VREfm do que as VSEfm, como resistência à ampicilina e à ciprofloxacina; e a presença do gene esp e do alelo purK1. A identificação de VSEfm pertencentes ao CC17 sugerem que amostras já adaptadas ao ambiente hospitalar, podem ter adquirdo o determinante de resistência vanA, facilitando a emergência de amostras de VREfm. Adicionalmente, nossos dados sugerem uma modificação no cenário de amostras VREfm no Rio de Janeiro. Pois a dominância de um grupo clonal prevalente (PFGE- X; MT12; ST78) pode estar sendo substituída pela possível emergência de um novo grupo clonal, que foi característico de amostras mais recentes (PFGE-XV; MT159; ST412), apontando assim, para um novo curso na epidemiologia dos E. faecium no Estado. Um perfil de restrição prevalente de Tn1546 idêntico ao protótipo foi observado, apontando que a disseminação da resistência à vancomicina ocorreu por também por transferência horizontal. Entretanto, alterações do tipo deleção e presença de elementos de inserção com aproximadamente 2 kb foram observadas em um número reduzido das amostras. A incongruência no genótipo vanA, em relação ao fenótipo, foi observado para uma amostra. Considera-se fundamental o acompanhamento da disseminação de VREfm, particularmente diante da elevada frequência de amostras pertencentes a um complexo clonal que conjuga multirresistência com virulência, com elevado potencial de adaptabilidade e disseminação.

Bacterial flora associated with diseased fish and their antibiogram

Bacterial flora associated with tail rot/fin rot of Carassius auratus, Xiphophorus helleri and hemorrhagic ulcers of Clarias spp were studied. Sensitivity pattern of 33 isolates comprising Aeromonas spp, Pseudomonas spp and Gram-positive rods from diseased C. auratus, X. helleri and Clarias spp were screened against six broad-spectrum antibiotics viz. ciprofloxacin, chloramphenicol, co-trimoxazole, gentamycin, nitro-furantoin and oxytetracycline. Ciprofloxacin was the most effective in inhibiting bacteria at 0.05-0.10 µg/ml level. About 44% of Pseudomonas spp. was resistant to nitrofurantoin. Resistance to oxytetracycline was seen in 27% of Aeromonas spp Gram-positive rods were comparatively more resistant to antibiotics. The multiple antibiotic resistances were seen in 21% of the bacterial isolates of diseased fish.

Cecum lymph node dendritic cells harbor slow-growing bacteria phenotypically tolerant to antibiotic treatment.

In vivo, antibiotics are often much less efficient than ex vivo and relapses can occur. The reasons for poor in vivo activity are still not completely understood. We have studied the fluoroquinolone antibiotic ciprofloxacin in an animal model for complicated Salmonellosis. High-dose ciprofloxacin treatment efficiently reduced pathogen loads in feces and most organs. However, the cecum draining lymph node (cLN), the gut tissue, and the spleen retained surviving bacteria. In cLN, approximately 10%-20% of the bacteria remained viable. These phenotypically tolerant bacteria lodged mostly within CD103⁺CX₃CR1⁻CD11c⁺ dendritic cells, remained genetically susceptible to ciprofloxacin, were sufficient to reinitiate infection after the end of the therapy, and displayed an extremely slow growth rate, as shown by mathematical analysis of infections with mixed inocula and segregative plasmid experiments. The slow growth was sufficient to explain recalcitrance to antibiotics treatment. Therefore, slow-growing antibiotic-tolerant bacteria lodged within dendritic cells can explain poor in vivo antibiotic activity and relapse. Administration of LPS or CpG, known elicitors of innate immune defense, reduced the loads of tolerant bacteria. Thus, manipulating innate immunity may augment the in vivo activity of antibiotics.

Medicated wound dressings based on poly(vinyl alcohol)/poly(N-vinyl pyrrolidone)/chitosan hydrogels

Poly(vinyl alcohol) /poly(N-vinyl pyrrolidone) (PVP)/chitosan hydrogels were prepared by a low-temperature treatment and subsequent Co-60 -gamma-ray irradiation and then were medicated with ciprofloxacin lactate (an antibiotic) and chitosan oligomer (molecular weight = 3000 g/mol). The gel content, swelling ratio, tensile strength, and crystallinity of the hydrogels were determined. The effects of the chitosan molecular weight, the low-temperature treatment procedure, and the radiation dosage on the hydrogel properties were examined. The molecular weight of chitosan was lowered by the irradiation, but its basic polysaccharide structure was not destroyed. Repeating the low-temperature treatment and gamma-ray irradiation caused effective physical crosslinking and chemical crosslinking, respectively, and contributed to the mechanical strength of the final hydrogels. The incorporation of PVP and chitosan resulted in a significant improvement in the equilibrium swelling ratio. and elongation ratio of the prepared hydrogels. The ciprofloxacin lactate and chitosan oligomer were soaked into the hydrogels. Their in vitro release behaviors were examined, and they were found to follow diffusion-controlled kinetics.

Residues of enrofloxacin, furazolidone and their metabolites in Nile tilapia (Oreochromis niloticus)

The residues of enrofloxacin and its metabolite in Nile tilapia (Oreochromis niloticus) were studied after oral dose of 50 mg/kg for 7 days. To find the differences between Nile tilapia and Chinese shrimp (Penaeus chinensis), the residues of enrofloxacin in P chinensis were also studied under the same conditions. The results showed that enrofloxacin metabolized into ciprofloxacin in both Nile tilapia and P chinensis, the maximal concentration of enrofloxacin in muscle, liver and plasma of Nile tilapia were 3.61 mu g/g, 5.96 mu g/g, 1.25 mu g/ml respectively, and ciprofloxacin in muscle was 0.22 mu g/g. The maximal concentration of enrofloxacin and ciprofloxacin in P chinensis were 1.68 mu g/g and 0.07 mu g/g respectively. The predicted withdrawal time for Nile tilapia was 22 days, and P. chinensis was 12 days under our experiment conditions. The residues of fitrazolidone [3-(5-nitrofurfurylidenamino)-2-oxazolidinone] and its main metabolite 3-amina-2-oxazolidinone (AOZ) in Nile tilapia were first determined by HPLC/MS. Results showed that after oral dose of 30 mg/kg for 7 days, the maximum concentration of farazolidone in Nile tilapia was 413 mu g/kg after 6 h, whereas AOZ residue reached its maximum (31 mu g/kg) right after stopping treatment. In contrast to the high metabolic rate of furazolidone, AOZ was very difficult to eliminate in vivo, thus the withdrawal time of furazolidone in Nile tilapia was 22 days at least. (c) 2005 Elsevier B.V. All rights reserved.

Application of flow cytometry for the determination of minimal inhibitory concentration of several antibacterial agents on Mycoplasma hyopneumoniae

P. Assun??o, N.T. Antunes, R.S. Rosales, C. Poveda, C. de la Fe, J.B. Poveda and H.M. Davey (2007). Application of flow cytometry for the determination of minimal inhibitory concentration of several antibacterial agents on Mycoplasma hyopneumoniae. Journal of Applied Microbiology, 102(4), 1132-1137. Sponsorship: Gobierno de Canarias (IDT-LP-04/016) RAE2008

Investigating the removal of some pharmaceutical compounds in hospital wastewater treatment plants operating in Saudi Arabia

The concentrations of 12 pharmaceutical compounds (atenolol, erythromycin, cyclophosphamide, paracetamol, bezafibrate, carbamazepine, ciprofloxacin, caffeine, clarithromycin, lidocaine, sulfamethoxazole and Nacetylsulfamethoxazol (NACS)) were investigated in the influents and effluents of two hospital wastewater treatment plants (HWWTPs) in Saudi Arabia. The majority of the target analytes were detected in the influent samples apart from bezafibrate, cyclophosphamide, and erythromycin. Caffeine and paracetamol were detected in the influent at particularly high concentrations up to 75 and 12 ug/L, respectively. High removal efficiencies of the pharmaceutical compounds were observed in both HWWTPs, with greater than 90 % removal on average. Paracetamol, sulfamethoxazole, NACS, ciprofloxacin, and caffeine were eliminated by between >95 and >99 % on average. Atenolol, carbamazepine, and clarithromycin were eliminated by >86 % on average. Of particular interest were the high removal efficiencies of carbamazepine and antibiotics that were achieved by the HWWTPs; these compounds have been reported to be relatively recalcitrant to biological treatment and are generally only partially removed. Elevated temperatures and high levels of sunlight were considered to be the main factors that enhanced the removal of these compounds.

Tiflocolitis syndrome acute for "Klebsiella" sp. in a spanish pure breed horse. A case report

Were study a horse (Equus caballus), Purebred Spanish Horse, 6 years old, intact male sex, weight about 550kg, from equestrian center in Fregenal Sierra-Extremadura, Spain. History of acute diarrhea, are apply conventional treatment (hydration, anti-inflammatory and antibiotic). Physical examination showed severe profuse, fetid diarrhea deep red, tachypnea. The physiological parameters were: heart rate 60 bpm, respiratory rate 39 rpm and mucous cyanotic. Temperature: 40°C. Hematological examination showed severe leucopenia, decreased total serum protein, albumin and globulin also diminished. Serum chemistry evidenced severe hyponatremia and hypokalemia, with high levels of chlorine indicating metabolic acidosis. A stool analysis, which was negative and showed no eggs or larvae in the samples studied was performed. The microbial culture allowed the isolation of Klebsiella sp. and susceptibility testing showed sensitivity to ampicillin, Cetafzidine, Ciprofloxacin, Cefepine, gentamicin, imipenem, meropenem, Piperaciclina, piperacillin / tazobactam and trimethoprim sulfa resistance. The horse presented systemic complications associated with endotoxemia and death 36 hours after the onset of diarrhea. At necropsy, severe bleeding was observed enterotiflocolitis. The histological sections showed proliferative enteritis characterized by lymphocyte and mononuclear inflammatory infiltrate plasmocytorious mucosa and submucosa, coagulation necrosis, bacteria and short rod type morphology with no specific grouping. In conclusion a case of acute syndrome enterotiflocolitis reported Klebsiella sp. on a horse Purebred Spanish.

Impact of antibiotics on conjugational resistance gene transfer in Staphylococcus aureus in sewage.

Ohlsen K, Ternes T, Werner G, Wallner U, Löffler D, Ziebuhr W, Witte W, Hacker J. Institute for Molecular Biology of Infectious Diseases, The University of Würzburg, Röntgenring 11, D-97070 Würzburg, Germany. knut.ohlsen@mail.uni-wuerzburg.de The growing rate of microbial pathogens becoming resistant to standard antibiotics is an important threat to public health. In order to assess the role of antibiotics in the environment on the spread of resistance factors, the impact of subinhibitory concentrations of antibiotics in sewage on gene transfer was investigated using conjugative gentamicin resistance (aacA-aphD) plasmids of Staphylococcus aureus. Furthermore, the concentration of antibiotics in hospital sewage was measured by high-performance liquid chromatography (HPLC)-electrospray tandem mass spectrometry. Several antibiotics were found to be present in sewage, e.g. ciprofloxacin up to 0.051 mgl(-1) and erythromycin up to 0.027 mgl(-1). Resistance plasmid transfer occurred both on solidified (dewatered) sewage and in liquid sewage in a bioreactor with a frequency of 1.1x10(-5)-5.0x10(-8). However, low-level concentrations of antibiotics measured in sewage are below concentrations that can increase plasmid transfer frequencies of gentamicin resistance plasmids of staphylococci.

Population structure and characterization of viridans group streptococci (VGS) including Streptococcus pneumoniae isolated from adult patients with cystic fibrosis (CF)

A study was undertaken to examine the population structure of viridans group streptococci (VGS) in the sputum of adult patients with cystic fibrosis (CF). Freshly expectorated sputa (n=58) from 45 adult CF patients were examined by selective conventional culture on Mitis-Salivarius agar and yielded 190 isolates of VGS. Sequence analyses of the rpnB and 16-23S rRNA ITS genes identified these isolates to belong to 12 species of VGS and included S. anginosus, S. australis, S. cristatus, S. gordonii, S. infantis, S. mitis, S. mutans, S. oralis, S. parasanguinis, S. pneumoniae, S. salivarius and S. sanguinis. The most frequently VGS organism isolated was S. salivarius (47/190; 24.7%), followed by S. mitts (36/190; 19%), S. sanguinis (25/190; 13.2%), S. oralis (20/190; 11.0%), S. pneumoniae (19/190; 10.0%), S. parasanguinis (16/190; 8.4%), S. infantis (11/190; 5.8%), S. gordonii (7/190; 3.7%), S. anginosus (4/190; 2.1%), S. cristatus (2/190; 1.1%), S. australis (1/190; 0.5%), S. mutans (1/190; 0.5%) and S. agalactiae (1/190; 0.5%). All, but four, patients harboured at least one VGS species, which ranged from one to five streptococcal species, with a mean of 2.85 species per patient. There was no clonality at the subspecies level employing ERIC RAPD PCR. Antibiotic susceptibility was determined by Minimum Inhibitory Concentration (MIC) testing against penicillin, erythromycin and ciprofloxacin. Overall, resistance to penicillin with all VGS was 73/190 (38.4%) and 167/190 (87.9%) for erythromycin. With regard to ciprofloxacin, 27/190 (14.2%) were fully resistant, whilst a further 21/190 (11.1%) showed intermediate resistance, which equated to approximately three quarters (74.7%) of isolates being fully sensitive to this agent. In addition, as a comparator control population, we examined antibiotic susceptibility, as above, in a non-CF population comprising 12 individuals (50 VGS isolates), who were not receiving chronic antibiotics. In comparison, 8% and 38% of VGS isolates from non-CF individuals were resistant by disk susceptibility testing to penicillin and erythromycin, respectively. None of the non-CF VGS organisms were resistant to ciprofloxacin, but 42% showed intermediate resistance. (C) 2010 European Cystic Fibrosis Society. Published by Elsevier B.V. All rights reserved.

Use of adhesion counts to help predict symptomatic infection and the ability of fluoroquinolones to penetrate bacterial biofilms on the bladder cells of spinal cord injured patients

There were three objectives to the present study: (1) compare the bladder infection rate and extent of biofilm formation for seven untreated spinal cord injured (SCI) patients and seven given prophylactic co-trimoxazole, (2) identify a level of bacterial adhesion to bladder cells which could be used to help predict symptomatic infection, and (3) determine from in vivo and in vitro studies whether fluoroquinolones were effective at penetrating bacterial biofilms. The results showed that the infection rate had not changed with the introduction of prophylaxis. However, the uropathogenic population had altered subsequent to the introduction of prophylaxis with E. coli being replaced by E. faecalis as the most common cause of infection. In 63% of the specimens from asymptomatic patients, the bacterial counts per cell were <20, while 81% of specimens from patients with at least one sign and one symptom of urinary tract infection (UTI) had > 20 adherent bacteria per bladder cell. Therefore, it is proposed that counts of > 20 bacteria adherent to sediment transitional epithelial bladder cells may be predictive of symptomatic UTI. Clinical data showed that fluoroquinolone therapy reduced the adhesion counts to <20 per cell in 63% of cases, while trimethoprim-sulfamethoxazole only did so in 44%. Further in vitro testing showed that ciprofloxacin (0.1, 0.5 and 1.0 micrograms/ml) partially or completely eradicated adherent biofilms from 92% of spinal cord injured patients' bladder cells, while ofloxacin did so in 71% cases and norfloxacin in 56%. These findings have important implications for the detection and treatment of bacteriuria in spinal cord injured patients.

Moxifloxacin sensitivity of respiratory pathogens in the United Kingdom

The in vitro activity of moxifloxacin and comparator agents against respiratory isolates from a range of geographically distinct centres around the United Kingdom was investigated in the following study. Clinical isolates of Streptococcus pneumoniae (n = 257), Haemophilus influenzae (n = 399) and Moraxella catarrhalis (n = 253) were obtained between March 1998 and April 1999 from nine centres in the United Kingdom. Sensitivity was determined by testing each isolate for its minimum inhibitory concentration (MIC) by agar dilution. Against Streptococcus pneumoniae moxifloxacin and grepafloxacin were the most active (MIC90 = 0.25 mg/l). Trovafloxacin and sparfloxacin were the next most active (MIC90 = 0.5 mg/l) followed by levofloxacin and ciprofloxacin. MIC90 values of the six fluoroquinolones versus H. influenzae ranged from ciprofloxacin > levofloxacin. Against M. catarrhalis the lowest MIC90 was that of grepafloxacin at 0.0625 mg/l followed by moxifloxacin, sparfloxacin, levofloxacin and ciprofloxacin. Trovafloxacin demonstrated the highest MIC90 at 0.5 mg/l. These results demonstrate that moxifloxacin has superior in vitro activity against respiratory tract pathogens than any other comparator quinolones available for clinical use.