Caractérisation moléculaire du rôle de facteurs accessoires ArgR et PepA au niveau de la recombinaison spécifique sur le site cer

Mon projet de recherche avait pour but de caractériser le rôle de deux protéines, ArgR et PepA, qui agissent en tant que facteurs accessoires de la recombinaison au niveau de deux sites cer du plasmide ColE1 présent dans la bactérie Escherichia coli. Ces deux protéines, couplées aux deux recombinases à tyrosine XerC et XerD, permettent la catalyse de la recombinaison site spécifique au niveau de la séquence cer, convertissant les multimères instables de ColE1 en monomères stables. Cette étude a principalement porté sur la région C-terminale de la protéine ArgR. Cette région de la protéine ArgR possède une séquence en acides-aminés et une structure similaire à celle de la protéine AhrC de Bacillus subtilis. De plus, AhrC, le répresseur de l’arginine de cette bactérie, est capable de complémenter des Escherichia coli mutantes déficientes en ArgR. Les régions C-terminales de ces protéines, montrent une forte similarité. De précédents travaux dans notre laboratoire ont démontré que des mutants d’ArgR comprenant des mutations dans cette région, en particulier les mutants ArgR149, une version tronquée d’ArgR de 149 acides-aminés, et ArgR5aa, une version comprenant une insertion de cinq acides-aminés dans la partie C-terminale, perdaient la capacité de permettre la recombinaison au niveau de deux sites cer présents dans le plasmide pCS210. Malgré cette incapacité à promouvoir la réaction de recombinaison en cer, ces deux mutants étaient toujours capables de se lier spécifiquement à l’ADN et de réprimer une fusion argA :: lacZ. Dans ce travail, les versions mutantes et sauvages d’ArgR furent surexprimées en tant que protéines de fusion 6-histidine. Des analyses crosslinking ont montré que la version sauvage et ArgR5aa pouvaient former des hexamères in-vitro de manière efficace, alors qu’ArgR149 formait des multimères de plus faible poids moléculaire. Des formes tronquées d’ArgR qui comportaient 150 acides-aminés ou plus, étaient encore capables de permettre la recombinaison en cer. Les mutants par substitution ArgRL149A et ArgRL151A ont tous montré que les substitutions d’un seul acide-aminé au sein de cette région avaient peu d’effets sur la recombinaison en cer. Les expériences de crosslinking protéine-à-protéine ont montré que le type sauvage et les formes mutantes d’ArgR étaient capables d’interagir avec la protéine accessoire PepA, également impliquée dans la recombinaison en cer. Les expériences de recombinaison in-vitro utilisant la forme sauvage et les formes mutantes d’ArgR combinées avec les protéines PepA, XerC et XerD purifiées, ont montré que le mutant ArgR149 ne soutenait pas la recombinaison, mais que le mutant ArgR5aa permettait la formation d’une jonction d’Holliday. Des expériences de topologie ont montré que PepA était capable de protéger l’ADN de la topoisomérase 1, et d’empêcher ArgRWt de se lier à l’ADN. Les deux mutants ArgR149 et ArgR5aa protègent aussi l’ADN avec plus de surenroulements. Quand on ajoute PepA, les profils de migration montrent un problème de liaison des deux mutants avec PepA. D’autres expériences impliquant le triplet LEL (leucine-acide glutamique-leucine) et les acides-aminés alentour devraient être réalisés dans le but de connaitre l’existence d’un site de liaison potentiel pour PepA.

Elaboraci??n de : el vino, la sidra, el pan, la matanza, el cesto, la cer??mica

Los autores consideran oportuno y conveniente elaborar temas monogr??ficos para acercar a los ni??os de zonas urbanas al tipo de trabajos objeto del estudio, y a las zonas rurales para que los valoren adecuadamente. Creen que con este trabajo pueden fomentar el inter??s por lo aut??ctono, las tradiciones... El libro adem??s de ser informativo es activo, al final de cada historia tiene un cuestionario para los alumnos y dibujos que se pueden colorear sobre el tema tratado en el cap??tulo. La forma de utilizar este material debe ser globalizada. Los autores son profesoras de Ciclo Inicial del C.P. 'Maestro Casanova' de Cangas del Narcea. Se estudia: la elaboraci??n de la sidra, la del vino, de los cestos, c??mo es la tradici??n de la matanza, la elaboraci??n de la cer??mica negra t??pica de Llamas de Mouro, la producci??n de la leche y la elaboraci??n del pan, todo ello en forma de historia o cuento, se explica la elaboraci??n de productos a partir de materias primas, c??mo, con qu?? y en qu?? consiste la matanza, qu?? productos se elaboran, qu?? utensilios se elaboran..., c??mo se orde??a, qu?? se hace en las centrales lecheras, etc.

Elaboraci??n de: el vino, la sidra, el pan, la matanza, el cesto, la cer??mica. La elaboraci??n de diversas producciones

El objetivo del proyecto es la elaboraci??n de un material de apoyo curricular para los alumnos de Ciclo Inicial, trata de acercar a los ni??os de zonas urbanas a los trabajos de que trata el libro y que desconocen en mayor medida que los de zonas rurales, aunque estos, por tenerlo cercano a ellos, no lo valoran. Tratan de fomentar el inter??s por lo aut??ctono, las tradiciones... La memoria presentada recoge todo el material elaborado junto con actividades para cada uno de los cap??tulos. Se public?? con la intenci??n de ser un material de consulta no suficiente pero si provechoso y pr??ctico y que debe utilizarse de modo globalizado. Los alumnos, dicen los autores, con este trabajo est??n muy motivados, no lo consideran aburrido, unos por ser cosas pr??ximas a ellos y otros por ser un material nuevo.

La cer??mica negra de Llamas del Mouro. Elaboraci??n material curricular ' Llamas Mouro'

Se intenta difundir en todos los Centros del CEP un diaporama con sonido y una colecci??n de diapositivas sobre la cer??mica negra de Llamas de Mouro, por ser una de las principales muestras artesanles de la cultura asturiana, con el fin de permitir al alumno una mayor y mejor conocimiento de su realidad inmediata. No se cumplieron todos los objetivos por escaso presupuesto pues no se pudo difundir todo lo que se quer??a. Seg??n los autores, el texto es ajustado y claro y las cuarenta diapositivas conforme al mismo, el texto est?? registrado en el casete con fondo musical. La evaluaci??n es positiva y como conclusi??n lamentan que otros trabajos como este es vean afectados por la falta de presupuesto.

La cer??mica prehisp??nica. El dibujo en la interpretaci??n objetiva de la forma

Este material ha sido desarrollado con grupos de alumnos de Secundaria en el Instituto de Bachillerato P??rez Gald??s de Las Palmas de Gran Canaria. Tomando como centro de inter??s la cer??mica prehisp??nica canaria se trabaja una serie de contenidos correspondientes al ??rea de Expresi??n Pl??stica y se establece una relaci??n con otras ??reas en cuanto a sus contenidos conceptuales (el mundo aborigen) y procedimentales (el desarrollo de la observaci??n como procedimiento b??sico) y con los objetivos generales de la etapa. Constituye pues esta propuesta una ejemplificaci??n que puede resultar de gran ayuda para orientar el trabajo de programaci??n en torno a un centro de inter??s, que tiene mayor valor en la medida que el t??pico elegido se relaciona con un elemento espec??fico de la cultura propia de su habitat. Es un claro ejemplo de c??mo incorporar el entorno como elemento did??ctico..

Taller de cer??mica para ACNEES

A trav??s de este proyecto, dirigido a alumnos con necesidades educativas especiales, se pretende facilitar a los participantes una v??a de acceso a la integraci??n social y a la comunicaci??n a trav??s de otras formas de expresi??n no estrictamente ling????sticas. El taller de cer??mica permite el desarrollo integral de los alumnos a trav??s de las t??cnicas b??sicas de modelado y estimula la creatividad y la expresi??n de emociones, ideas y sentimientos haciendo uso de un lenguaje pl??stico no verbal. El sistema de trabajo llevado a cabo ha sido a trav??s del amasado y centrado de la arcilla, su manipulaci??n, procesos para la realizaci??n de piezas, t??cnicas para modelar y vaciar, uso de los engobes coloreados y formas de barnizado. Los resultados obtenidos, entre otros, el desarrollo de la imaginaci??n y la creatividad y la percepci??n, as?? como la estimulaci??n de los sistemas psicomotrices. El proyecto incluye fotograf??as de objetos de cer??mica hechos en el taller de cer??mica durante el curso 2001-2002.

La biblioteca escolar en el CER Valle Aridane : una apuesta por la calidad educativa y el desarrollo lector.

Expone cómo se puso en marcha una 'biblioteca escolar itinerante' para atender al CER (Colectivo de Escuelas Rurales) del Valle de Aridane en la Isla de la Palma (Canarias). Explica como está organizada, en qué consisten sus fondos y los recursos humanos de que dispone.

La cer??mica elimina barreras

Ayudas a la Innovaci??n Educativa, 1997. Anexo Memoria en C-Innov. 75

Determinação do incremento na taxa interna de retorno resultante dos certificados de redução de emissão (CER) para projetos de cogeração de energia: o caso da Cia Açúcareira Vale do Rosário

Com uma análise dos benefícios financeiros decorrentes da comercialização de certificados de redução de emissão (CER) de gases de efeito estufa, esta dissertação determina o incremento na taxa interna de retorno para o projeto de expansão de cogeração de energia elétrica com biomassa - bagaço de cana-de-açúcar - para a Cia Açucareira Vale do Rosário. Os objetivos da pesquisa são quantificar o volume de CER que poderiam ser comercializados, bem como analisar o emergente mercado de CER para determinação do valor a ser comercializado os certificados. Em ambos objetivos foram considerados a Convenção Quadro sobre Mudança Global do Clima e o Protocolo de Kyoto, incluso nesta, como estrutura para mensurar o volume de CER e regulamentar o mercado.

Chicken embryo related (CER) cell line for quantification of rabies neutralizing antibody by fluorescent focus inhibition test

Levels of rabies virus neutralization antibody in sera from vaccinated dogs and cattle were either measured by mouse neutralization test (MNT) or by rapid fluorescent focus inhibition test (RFFIT), performed on CER monolayers. The two tests were compared for their ability to detect the 0.5 International Units/ml (I.U.) recommended by the World Health Organization (WHO) as the minimum response for proof of rabies immunization. A significant correlation was found between the two tests (n = 211; r = 0.9949 in dogs and 0.9307 in cows, p < 0.001), good sensitivity (87.5%), specificity (94.7%) and agreement (96.6%) as well. RFFIT method standardized on CER cell system for neutralizing antibodies detection turns the diagnosis easier and less expensive, specially when a great number of samples must be tested from endemic areas as commonly found in Brazil. (c) 2005 the International Association for Biologicals. Published by Elsevier Ltd. All rights reserved.

Evaluation of the Tissue Reaction to Fast Endodontic Cement (CER) and Angelus MTA

Introduction: A new cement (CER; Cimento Endodontico Rapido or fast endodontic cement) has been developed to improve handling properties. It is a formulation that has Portland cement in gel. However, there had not yet been any study evaluating its biologic properties. The purpose of this study was to evaluate the rat subcutaneous tissue response to CER and Angelus MTA. Methods: The materials were placed in polyethylene tubes and implanted into dorsal connective tissue of Wistar rats for 7, 30, and 60 days. The specimens were prepared to be stained with hematoxylin-eosin or von Kossa or not stained for polarized light. The presence of inflammation, predominant cell type, calcification, and thickness of fibrous connective tissue were recorded. Scores were defined as follows: 0, none or few inflammatory cells, no reaction; 1, <25 cells, mild reaction; 2, 25-125 cells, moderate reaction; 3, >125 cells, severe reaction. Fibrous capsule was categorized as thin when thickness was <150 mu m and thick at >150 mu m. Necrosis and formation of calcification were both recorded. Results: Both materials Angelus MTA and CER caused moderate reactions at 7 days, which decreased with time. The response was similar to the control at 30 and 60 days with Angelus MTA and CER, characterized by organized connective tissue and presence of some chronic inflammatory cells. Mineralization and granulations birefringent to polarized light were observed with both materials. Conclusions: It was possible to conclude that CER was biocompatible and stimulated mineralization. (J Endod 2009,35:1377-1380)

Influência do tamanho de partículas nas propriedades físico-químicas do cimento endodôntico CER

Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior (CAPES)

Substituição do uso de soro fetal bovino na manutenção do cultivo de células CER infectadas pelo vírus da doença infecciosa da bursa de Fabrícius

Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado de São Paulo (FAPESP)