Expressão gênica e viabilidade de folículos pré-antrais inclusos em fragmentos de córtex ovarianos cultivados in vitro de macaco-prego (Sapajus apella)

O objetivo desse trabalho foi analisar a ativação e o crescimento de folículos préantrais de Sapajus apella, submetidos a um sistema de cultivo in vitro em curto-prazo. Nesse sentido, dois experimentos foram realizados neste trabalho. Experimento I: exposição à fresco e à crioprotetores de biopsias de fragmentos do córtex ovariano. Ambos os fragmentos ovarianos foram submetidos à extração total de RNA e síntese de cDNA. Após a amplificação do cDNA por PCR em tempo-real (RT-PCR), os software GeNorm, bestkeeper e Normfinder foram usados para avaliar a estabilidade dos genes GAPDH (glyceraldehyde-2-phosphate dehydrogenase), HPRT1 (hypoxanthine phosphoribosyltransferase 1) e TBP (TATA-binding protein). Experimento II: o tecido do córtex ovariano de quatro fêmeas foi oletado e dividido em nove pedaços de 1 mm³. Um fragmento ovariano (grupo controle) foi imediatamente dividido em dois pedaços, os quais foram destinados para análise da viabilidade ou por RT-PCR. Os 8 fragmentos restantes foram individualmente cultivados in vitro em um meio constituído de TCM suplementado com 100 ng/mL EGF (T1), com adição de 10 μM de BME (T2), 100 ng/mL de BMP4 (T3), 25 IU de PMSG (T4), 10 μM de BME e 100 ng/mL de BMP4 (T5), 10 μM de BME, 25 IU de PMSG (T6), 100 ng/mL de BMP4, 25 IU de PMSG (T7) ou 10 μM de BME, 100 ng/mL de BMP4, 25 IU de PMSG (T8). Os resultados demonstraram que no tecido do córtex ovariano de S. apella, os genes HPRT1 e TBP foram os mais apropriados como genes de referência, podendo ser usados como parâmetro para normalizar dados em estudos futuros. Ao contrário, o GAPDH se apresentou como menos estável dos genes de referencia testados. Após o cultivo in vitro, todos os tratamentos alcançaram percentuais similares da viabilidade de folículos pré-antrais. O tecido ovariano cultivado na presença de GF+BME/BMP4/PMSG resultou no aumento da taxa de ativação e crescimento folicular, assim como no aumento da expressão de AMH, BMP15 e GDF9, genes conhecidos como indicadores específicos de desenvolvimento folicular. Dessa forma, o HPRT1 e TBP são os genes de referência mais estáveis, na exposição à crioprotetores, a fresco e no o cultivo de tecidos de córtex ovariano de S. apella. Os folículos pré-antrais são capazes de desenvolverem-se in vitro quando cultivados em meio suplementado com PMSG, BME e BMP4. A viabilidade folicular, entretanto, permaneceu independentemente do meio de cultivo in vitro e o uso de fatores de crescimento, como marcadores de desenvolvimento folicular, foi crucial para identificar o melhor meio de cultivo in vitro.

Expressão gênica e viabilidade de folículos ovarianos pré-antrais de Sapajus apella congelados e cultivados in vitro

O objetivo do presente estudo foi desenvolver um protocolo de congelação para a preservação de folículos pré-antrais de Sapajus apella (macaco-prego). Para este fim, fragmentos ovarianos foram expostos à diferentes soluções crioprotetoras, adicionadas ou não por antioxidantes (selênio e trolox), congelados e cultivados in vitro por 24/horas. Análises morfológicas, ultraestruturais, de viabilidade e estresse oxidativo foram desenvolvidas. A coleta do material foi realizada no Centro Nacional de primatas (CENP) e nove macacos-prego maduras e saudáveis foram usadas. Biopsias ovarianas de 1 mm³ foram coletadas por laparoscopia exploratória. Os folículos coletados foram classificados de acordo com sua fase de desenvolvimento em primordial, primário ou secundário. A viabilidade folicular foi observada através da utilização de marcadores fluorescentes (Iodeto de propídeo e Hoechst) qRT-PCR foi usado para avaliar a expressão de hormônios e fatores de crescimento. O TEAC foi usado para mensurar o estresse oxidativo no tecido. Os resultados mostraram que a solução congelação contendo trolox não afetou a morfologia folicular e expressão gênica. A criopreservação resultou em elevadas taxas de viabilidade folicular quando o trolox estava presente na solução, porém a expressão de genes codificando BMP4 e KL foi negativamente afetada. Nossos achados mostraram um efeito favorável da adição do trolox à solução de congelação. Entretanto, a viabilidade folicular e expressão gênica foram afetados após cultivo in vitro.

Morfologia radicular da dentição permanente de Sapajus apella: morfometria, anatomia macroscópica, ultraestrutura e propriedades físicas

O objetivo desse trabalho foi contribuir com o estudo anatômico, morfométrico, ultraestrutural e propriedades físicas dos dentes permanentes do primata Sapajus apella. Para tal, foram utilizados 10 animais adultos e machos. Os dentes foram avaliados quanto ao seu comprimento e quanto à anatomia radicular externa e interna considerando número de raízes e canais, forma e direção radicular e forma do canal, assim como análise da densidade e diâmetro tubular do canal radicular, composição e microdureza dentinária. A anatomia radicular desse primata apresentou especificidades, como o número de raízes do segundo pré-molar superior e a presença do terceiro pré-molar. Quanto à densidade e o diâmetro dos túbulos dentinários, observou-se uma diminuição do número e diâmetro de túbulos ao longo do canal radicular, havendo diferença estatisticamente significante ao se comparar o terço apical com as regiões cervical e média, padrão de densidade e tamanho semelhantes a dentes humanos. Semelhanças também foram encontradas com dentes humanos quando comparados os valores de microdureza e proporção de elementos químicos encontrados na dentina radicular.

Dopplerfluxometria renal em macao-prego (Sapajus apella) de cativeiro

Pós-graduação em Medicina Veterinária - FMVZ

Efferent projections of the suprachiasmatic nucleus based on the distribution of vasoactive intestinal peptide (VIP) and arginine vasopressin (AVP) immunoreactive fibers in the hypothalamus of Sapajus apella

Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado de São Paulo (FAPESP)

Temporal changes in calcium-binding proteins in the medial geniculate nucleus of the monkey Sapajus apella

The subdivisions of the medial geniculate complex can be distinguished based on the immunostaining of calcium-binding proteins and by the properties of the neurons within each subdivision. The possibility of changes in neurochemistry in this and other central auditory areas are important aspects to understand the basis that contributing to functional variations determined by environmental cycles or the animal's cycles of activity and rest. This study investigated, for the first time, day/night differences in the amounts of parvalbumin-, calretinin- and calbindin-containing neurons in the thalamic auditory center of a non-human primate, Sapajus apella. The immunoreactivity of the PV-IR, CB-IR and CR-IR neurons demonstrated different distribution patterns among the subdivisions of the medial geniculate. Moreover, a high number of CB- and CR-IR neurons were found during day, whereas PV-IR was predominant at night. We conclude that in addition to the chemical heterogeneity of the medial geniculate nucleus with respect to the expression of calcium-binding proteins, expression also varied relative to periods of light and darkness, which may be important for a possible functional adaptation of central auditory areas to environmental changes and thus ensure the survival and development of several related functions.

Comportamento e dieta de Chiropotes albinasus (I. Geoffroy & Deville, 1848) - cuxiú-de-nariz-vermelho

Os cuxiús-de-nariz-vermelho são primatas neotropicais pouco conhecidos e encontramse na Lista de Espécies Ameaçadas da IUCN na categoria “Ameaçada de Extinção”. Este estudo foi desenvolvido com um grupo desta espécie de primatas na RPPN Cristalino, MT. Foi estudado o orçamento de atividades, uso de espaço e a ecologia alimentar do grupo, através do método de “Varredura Instantânea”. O grupo foi acompanhado durante 6 meses, incluindo 2 meses na estação chuvosa e 4 meses na estação seca. As categorias comportamentais Deslocamento, Alimentação e Parado foram responsáveis por 81,17% dos registros gerais de atividades. Os animais utilizaram com maior intensidade o estrato intermediário da floresta (entre 16 e 20 metros). A dieta do grupo foi preferencialmente frugívora (82,52%), mas também se alimentaram de invertebrados. Cerca de 18 famílias botânicas foram consumidas. Sendo os taxons Arrabidaea sp. e Brosimum latescens os mais comuns. Nos meses de seca houve um maior acréscimo de outros itens alimentares, como flores e invertebrados na dieta dos cuxiús. O tamanho do grupo variou entre 1 e 19 indivíduos ao longo do estudo, assim como a estrutura sexual que também variou bastante. Foi observado o cuidado parental por parte dos machos, além de interações agonísticas interespecíficas entre Ateles marginatus e Sapajus apella.

Efeitos do tipo de floresta e da estrutura de habitat em assembléias de primatas no sudoeste da Amazônia

A heterogeneidade ambiental expressa diferenças naturais entre áreas e é um fator determinante para a riqueza e abundância local de primatas. Neste estudo nós investigamos a composição e estrutura de assembléias de primatas em quatro tipos de floresta: floresta de terra firme, florestas de igapó sazonalmente inundáveis por rios de águas claras (aberta e densa) e cerradão na Reserva Biológica do Guaporé, sudoeste da Amazônia Brasileira. Além disso, avaliamos a associação entre a ocorrência e abundância dos primatas com diferenças estruturais das florestas. Realizamos 617,8 km de censos pelo método de transecção linear (~154 km por tipo de floresta) e avaliamos a estrutura da vegetação em 108 parcelas de 200 m² (0,54 ha por tipo de floresta). Dez espécies de primatas foram registradas durante os 11 meses deste estudo. A floresta de terra firme apresentou o maior número de espécies e a maior densidade de primatas, principalmente devido à presença exclusiva de Callicebus moloch e a maior abundância de Sapajus apella. A elevada densidade de Ateles chamek na floresta aberta inundável foi preponderante para a maior biomassa de primatas neste tipo de floresta. Nas florestas inundáveis e na terra firme, Ateles chamek e Sapajus apella responderam juntas por mais de 70% da biomassa de primatas, e no cerradão apenas Sapajus apella foi responsável por 68% da biomassa. Diferenças entre tipos de floresta na composição específica e abundância relativa de primatas foram associadas com o regime de inundação e com algumas variáveis de estrutura de habitat (densidade de árvores no sub-bosque e no dossel, abertura do dossel, altura total do dossel e densidade de palmeiras e lianas). Nossos resultados reforçam a importância de paisagens heterogêneas na Amazônia, pois estas áreas tendem a contribuir para uma maior diversidade de espécies em uma escala de paisagem.

Goniometric evaluation of both forelimbs and hind limbs in two species of Neotropical monkeys

Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado de São Paulo (FAPESP)

Pesquisa de genomas virais em primatas não humanos do novo mundo por metagenômica

Pós-graduação em Medicina Veterinária - FMVZ

The primate seahorse rhythm

Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado de São Paulo (FAPESP)

The interface between morphology and action planning: a comparison of two species of New World monkeys

Recent research with several species of nonhuman primates suggests sophisticated motor-planning abilities observed in human adults may be ubiquitous among primates. However, there is considerable variability in the extent to which these abilities are expressed across primate species. In the present experiment, we explore whether the variability in the expression of anticipatory motor-planning abilities may be attributed to cognitive differences (such as tool use abilities) or whether they may be due to the consequences of morphological differences (such as being able to deploy a precision grasp). We compared two species of New World monkeys that differ in their tool use abilities and manual dexterity: squirrel monkeys, Saimiri sciureus (less dexterous with little evidence for tool use) and tufted capuchins, Sapajus apella (more dexterous and known tool users). The monkeys were presented with baited cups in an untrained food extraction task. Consistent with the morphological constraint hypothesis, squirrel monkeys frequently showed second-order motor planning by inverting their grasp when picking up an inverted cup, while capuchins frequently deployed canonical upright grasping postures. Findings suggest that the lack of ability for precision grasping may elicit more consistent second-order motor planning, as the squirrel monkeys (and other species that have shown a high rate of second-order planning) have fewer means of compensating for inefficient initial postures. Thus, the interface between morphology and motor planning likely represents an important factor for understanding both the ontogenetic and phylogenetic origins of sophisticated motor-planning abilities.

The Interface Between Morphology and Action Planning: a Comparison of Two Species of New World Monkeys

Recent research with several species of nonhuman primates suggests sophisticated motor-planning abilities observed in human adults may be ubiquitous among primates. However, there is considerable variability in the extent to which these abilities are expressed across primate species. In the present experiment, we explore whether the variability in the expression of anticipatory motor-planning abilities may be attributed to cognitive differences (such as tool use abilities) or whether they may be due to the consequences of morphological differences (such as being able to deploy a precision grasp). We compared two species of New World monkeys that differ in their tool use abilities and manual dexterity: squirrel monkeys, Saimiri sciureus (less dexterous with little evidence for tool use) and tufted capuchins, Sapajus apella (more dexterous and known tool users). The monkeys were presented with baited cups in an untrained food extraction task. Consistent with the morphological constraint hypothesis, squirrel monkeys frequently showed second-order motor planning by inverting their grasp when picking up an inverted cup, while capuchins frequently deployed canonical upright grasping postures. Findings suggest that the lack of ability for precision grasping may elicit more consistent second-order motor planning, as the squirrel monkeys (and other species that have shown a high rate of second-order planning) have fewer means of compensating for inefficient initial postures. Thus, the interface between morphology and motor planning likely represents an important factor for understanding both the ontogenetic and phylogenetic origins of sophisticated motor-planning abilities. (C) 2013 The Association for the Study of Animal Behaviour. Published by Elsevier Ltd. All rights reserved.

Anointing variation across wild capuchin populations: a review of material preferences, bout frequency and anointing sociality in Cebus and Sapajus

The frequency of anointing bouts and the materials used for self- and social anointing vary across capuchin species in captivity, but there is little published data on capuchin anointing in the wild. Here we present previously unpublished data on anointing behaviors from capuchin monkey populations at ten different field sites and incorporate these data into a review of the anointing literature for captive and wild capuchins. Using a comparative phylogenetic framework, we test four hypotheses derived primarily from captive literature for variation in anointing between wild untufted capuchins (Cebus) and tufted capuchins (Sapajus), including that (1) the frequency of anointing is higher in Cebus, (2) Cebus uses a higher proportion of plant species to insect species for anointing compared with Sapajus, (3) anointing material diversity is higher in Cebus, and (4) social indices of anointing are higher in Cebus. We found that wild Cebus anoints more with plant parts, including fruits, whereas wild Sapajus anoints more with ants and other arthropods. Cebus capucinus in particular uses more plant species per site for anointing compared with other capuchins and may specialize in anointing as an activity independent from foraging, whereas most other capuchin species tend to eat the substances they use for anointing. In agreement with captive studies, we found evidence that wild Cebus anoints at a significantly higher frequency than Sapajus. However, contrary to the captive literature, we found no difference in the range of sociality for anointing between Cebus and Sapajus in the wild. We review anointing in the context of other Neotropical primate rubbing behaviors and consider the evidence for anointing as self-medication; as a mechanism for enhanced sociality; and as a behavioral response to chemical stimuli. Am. J. Primatol. 74:299314, 2012. (c) 2011 Wiley Periodicals, Inc.

Flexible and conservative features of social systems in tufted capuchin monkeys: comparing the socioecology of Sapajus libidinosus and Sapajus nigritus

Socioecological models assume that primates adapt their social behavior to ecological conditions, and predict that food availability and distribution, predation risk and risk of infanticide by males affect patterns of social organization, social structure and mating system of primates. However, adaptability and variation of social behavior may be constrained by conservative adaptations and by phylogenetic inertia. The comparative study of closely related species can help to identify the relative contribution of ecological and of genetic determinants to primate social systems. We compared ecological features and social behavior of two species of the genus Sapajus, S. nigritus in Carlos Botelho State Park, an area of Atlantic Forest in Sao Paulo state, and S. libidinosus in Fazenda Boa Vista, a semi-arid habitat in Piaui state, Brazil. S. libidinosus perceived higher predation risk and fed on clumped, high quality, and usurpable resources (fruits) all year round, whereas S. nigritus perceived lower predation risk and relied on evenly distributed, low-quality food sources (leaves) during periods of fruit shortage. As predicted by socioecology models, S. libidinosus females were philopatric and established linear and stable dominance hierarchies, coalitions, and grooming relationships. S. nigritus females competed less often, and could transfer between groups, which might explain the lack of coalitions and grooming bonds among them. Both populations presented similar group size and composition and the same polygynous mating system. The species differed from each other in accordance with differences in the characteristics of their main food sources, as predicted by socioecological models, suggesting that phylogenetic inertia does not constrain social relationships established among female Sapajus. The similarity in mating systems indicates that this element of the social system is not affected by ecological variables and thus, is a more conservative behavioral feature of the genus Sapajus. Am. J. Primatol. 74:315331, 2012. (c) 2011 Wiley Periodicals, Inc.