Anatomical development of the pericarp and seed of Oncidium flexuosum Sims (ORCHIDACEAE)

Interpretation of the anatomical structure of the ovary and fruit of the Orchidaceae family is still controversial, which makes it difficult to understand the development and dehiscence of the fruit. The genus Oncidium is polyphyletic and is currently the subject of taxonomic studies. In this study, we have investigated the anatomical development of the pericarp and seed of Oncidium flexuosum Sims to determine important diagnostic characters that, along with molecular data, can assist in defining this group. We have found a new anatomical characteristic of the family: the presence of precursor cells for fruit dehiscence, which were visible from the beginning of development and located on the outer walls of the sterile valves. In contrast with what has been observed by different authors with other species, in the mature fruit of O. flexuosum, only the endocarp of the fertile valves and a few cells near the exocarp and the vascular bundle in the sterile valves show parietal thickening, while the rest remains parenchymatous. During the development of the ovule and embryo, we have shown that the embryonic sac of this species has eight nuclei and that the embryo has a long and elaborate suspensor. (C) 2011 Elsevier GmbH. All rights reserved.

Direct regeneration of protocorm-like bodies (PLBs) from leaf apices of Oncidium flexuosum Sims (Orchidaceae)

The present study describes the direct regeneration of protocorm-like bodies (PLBs) in leaf explants of the tropical species Oncidium flexuosum. The explants were inoculated in a solid, modified Murashige and Skoog (MS) medium with different concentrations of the growth regulator thidiazuron (TDZ) and with or without 2,4-dichlorophenoxyacetic acid (2,4-D) and naphthalene acetic acid (NAA), and kept away from light or in a 16-h photoperiod. The presence of auxins, 2,4-D, and NAA inhibited the formation of PLBs. The highest frequency of explants that regenerated PLBs (80%) was obtained when they were maintained in a culture medium containing 1.5 mu M TDZ under dark conditions. In the same culture medium but under a 16-h photoperiod, 95% of the leaf explants presented necrosis. Therefore, darkness was crucial for the regeneration of PLBs in O. flexuosum leaf explants, which is in disagreement with the literature. PLBs developed from the division of epidermal and subepidermal cells mainly on the adaxial side of the apex region of the explant. Plants with well-developed leaves and roots grew after the PLBs were transferred to growth regulator-free medium under a 16-h photoperiod.

Cryopreservation, early seedling development, and genetic stability of Oncidium flexuosum Sims

An efficient cryopreservation protocol was developed for mature seeds of Oncidium flexuosum Sims. Seed morphology, protocorm formation, and early seedling development were also assessed. The effects of phloroglucinol and Supercool X-1000® as cryoprotectant additives in the vitrification solution were investigated. Dehydration using the plant vitrification solution 2 (PVS2) for 60 and 120 min prior to immersion in liquid nitrogen promoted the highest frequency of in vitro seed germination 6 weeks following culture on half-strength Murashige and Skoog (1/2 MS) medium. Mature seeds submitted to vitrification for 120 min in PVS2 and 1 % phloroglucinol at 0 °C enhanced germination by 68 %, whereas in PVS2 and 1 % Supercool X-1000® germination was just moderately enhanced (26 %). In vitro-germinating seedlings developed healthy shoots and roots without the use of plant growth regulators. After 6 months of growth, there were no differences between in vitro- and ex vitro-grown seedlings for various phenotypic characteristics, including shoot length, number of leaves, number and length of roots, and fresh and dry weight. Seedlings were transferred to greenhouse conditions and successfully acclimatized, further developing into normal plants with over 90 % survival. Comparative analysis of seedlings from control and vitrified seeds using flow cytometry indicated that no change in ploidy levels occurred as a result of cryopreservation, therefore maintaining seedlings genetic stability. In this study, vitrification with PVS2 for 120 min with the addition of 1 % phloroglucinol offers a simple, safe, and feasible protocol for cryopreservation of O. flexuosum mature seeds. © 2013 Springer Science+Business Media Dordrecht.

Indução in vitro da germinação de sementes de Oncidium flexuosum (Orchidaceae) por fungos micorrízicos rizoctonióides

A germinação de sementes e o desenvolvimento de protocórmios de Oncidium flexuosum (Orchidaceae) induzidos simbioticamente são descritos pela primeira vez. As sementes de O. flexuosum foram inoculadas com dez fungos micorrízicos rizoctonióides, previamente isolados de micorrizas de dez espécies de orquídeas neotropicais do Brasil, incluindo O. flexuosum. Foram utilizados um isolado pertencente à espécie Epulorhiza repens, dois pertencentes à Epulorhiza epiphytica, seis de Ceratorhiza spp. e um de Rhizoctonia sp. Sementes inoculadas com o isolado M2 de Ceratorhiza sp., originalmente isolado do sistema radicular de O. flexuosum em habitat natural, promoveu a germinação das sementes em sete dias e em, aproximadamente, 30 % das plântulas, houve formação de folhas após 50 dias de incubação, apresentando pelotons em algumas células do protocórmio e das radicelas. Os demais isolados promoveram a germinação das sementes; entretanto, não promoveram um desenvolvimento ótimo dos protocórmios. Sementes incubadas na ausência de fungos micorrízicos não germinaram. A especificidade e a alta dependência de O. flexuosum pela associação micorrízica ficaram claras. Aspectos relativos à especificidade, anatomia da interação fungo-planta e a importância da seleção de estirpes fúngicas, previamente ao uso de fungos micorrízicos para o cultivo simbiótico a partir de sementes de O. flexuosum são discutidos.

Colleters in monocots: New record for Orchidaceae

Colleters are widely occurring in eudicots showing relevant taxonomic importance in several families. Nevertheless, there are few records in monocots, restricted to only one description of these glands in Orchidaceae. The genus Oncidium is polyphyletic, currently the subject of taxonomic studies. In this context, the secretory structures can be an important diagnostic character that may help in the delineation of this group. O. flexuosum Sims presents colleters in vegetative - leaf primordium of protocorms, apical and axillary buds in the mature rhizomes - and reproductive organs - at the base of bracts, bracteoles and sepals. All the colleters observed are finger-like trichomes, composed of two uniseriated cells, where the apical one is elongated and possesses dense cytoplasm. The exsudate accumulates in a subcuticular space. causing displacement of the cuticle. Histochemical tests indicate the presence of mucilage in association with lipophilic and proteinic compounds inside the secretory cell. Secretion is abundant, hyaline and slightly viscous. The localization of the trichomes and their exsudate indicate the involvement of these colleters with the protection of meristematic regions in vegetative and reproductive organs. These results can be useful in the taxonomy of the genus Oncidium and for future studies about colleters in monocots. (C) 2010 Elsevier GmbH. All rights reserved.

Criopreservação, indução de poliploidia e avaliação da estabilidade genética de orquídeas

Pós-graduação em Agronomia (Genética e Melhoramento de Plantas) - FCAV

Armazenamento de sementes de orquídeas

Sementes de dezesseis espécies de orquídeas foram armazenadas a 5ºC por até 42 meses, sendo verificada a viabilidade pelo teste de tetrazólio e de germinação. Houve perda da viabilidade conforme incremento no período de armazenamento. Por doze meses, a maioria das espécies estocadas a 5ºC, em dessecador com umidade relativa de ± 6% de conteúdo de água, conservou a viabilidade próxima aos 100%, com exceção da Cattleya labiata que apresentou queda de cerca de 50% da viabilidade inicial. Cattleya intermedia, Encyclia pygmaea, E. odorantissima, Grobya sp., Oncidium flexuosum, Oncidium pumilum e um híbrido natural, Laeliocattleya conservaram, em geladeira, a viabilidade das sementes acima de 90%, por até 24 meses. Para Cattleya intermédia, realizou-se armazenamento de sementes em tubos de polipropileno a 5, -18 e a 25ºC, em dessecador ou condições ambientais sem controle de umidade. Em condições de laboratório houve perda quase total da viabilidade das sementes. A estocagem em geladeira a 5ºC ou em "freezer" a - 18ºC fornece condições adequadas para conservar a viabilidade de sementes de orquídeas. Com essa mesma espécie, as sementes foram armazenadas a -18ºC durante 24 semanas, sendo testada semanalmente sua viabilidade. Para tais avaliações, as sementes eram transferidas diretamente de -18ºC para temperatura ambiente de laboratório (25ºC) ou indiretamente, por uma hora a 5ºC, depois para temperatura ambiente por uma hora. A transferência indireta foi mais eficiente na conservação da viabilidade.

Controlo e aquisição de dados no aparelho Posch ToF-SIMS

Dissertação apresentada na Faculdade de Ciências e Tecnologia da Universidade Nova de Lisboa para obtenção do grau de Mestre em Engenharia Física

Amiral Sims : [photographie de presse] / [Agence Rol]

Référence bibliographique : Rol, 57728

Controlo e Aquisição de Dados no aparelho Posch ToF-SIMS

A espectrometria de massa de iões secundários por tempo-de-voo, ToF-SIMS, é umas das mais importantes e versáteis técnicas de análise de superfícies. As suas características únicas tais como excelente resolução em massa, alta sensibilidade, elevada resolução lateral e em profundidade e ausência de limite da massa superior, justificam a sua adopção como técnica favorita em campos tão diversos como a análise de metais, semicondutores, isoladores e compostos orgânicos. A técnica SIMS com feixe primário duplo (dual beam SIMS) é uma técnica extremamente poderosa para uma variedade de aplicações de análise em profundidade. A utilização de feixes de iões separados para a erosão e análise de uma amostra permite a variação independente de diferentes parâmetros experimentais. Desenvolveram-se duas aplicações em LabVIEWTM que permitem efectuar análises de superfícies com as técnicas SIMS estático, SIMS Imagem e dual beam SIMS. As aplicações desenvolvidas permitiram optimizar o controlo do espectrómetro de massa do tipo ToF-SIMS do laboratório de ciências de superfície do Grupo de Ciências de Superfície e Tecnologia de Vácuo do CEFITEC, a conversão e aquisição de dados e a sua representação e armazenamento. O trabalho efectuado constitui uma grande inovação no sistema de aquisição de dados e no controlo do espectrómetro de ToF-SIMS. As versões actuais das aplicações desenvolvidas estão aptas a responder, com fiabilidade, às necessidades do utilizador.

Secondary Ion Mass Spectrometry (SIMS): principles and applications

This article outlines the basis of the technique and shows some examples of applications in order to exhibit the expectations of this technique invaried scientific fields.

INFLUÊNCIA DE DIVERSOS SUBSTRATOS NO DESENVOLVIMENTO DE MUDAS DE MARACUJAZEIRO AZEDO (Passiflora edulis Sims f. flavicarpa DEG)

Objetivando avaliar a influência de diversos substratos no desenvolvimento de mudas de maracujazeiro-azedo, conduziu-se um experimento em casa de vegetação da Emprapa Cerrados. Utilizou-se o delineamento experimental de blocos casualizados, em esquema fatorial 2 x 4 x 3 x 2, totalizando 48 tratamentos, 18 plantas úteis por parcela e 4 repetições. Os tratamentos constituíram-se das combinações de: dois substratos comerciais (PlantmaxR -- à base de vermiculita mais casca de Pinus sp e VermiculitaR); três fontes orgânicas (f.o.) (húmus, esterco de curral e NutriplantaR (produto à base de bactérias) e ausência de f.o., na proporção de 3:1 do substrato básico para a f.o.); duas formulações de adubo [OsmocoteR na fórmula 14-14-14 (produto de lenta liberação de nutrientes) e 4-14-8 (de liberação normal)], além da ausência de adubo; e Glomus etunicatum, ausência e presença. O substrato comercial PlantmaxR foi superior à VermiculitaR em todas as características analisadas. Dentre as f.o., o NutriplantaR junto com o esterco proporcionaram o melhor desempenho. O OsmocoteR promoveu o maior desenvolvimento das mudas, seguido pelo 4-14-8. A presença ou ausência de f.o. combinada com PlantmaxR praticamente não influenciou nas características analisadas. Não se deve utilizar o Glomus etunicatum associado a PlantmaxR, devido ao alto teor de fósforo presente neste substrato.

Efeito dos substratos artificiais no enraizamento e no desenvolvimento de estacas de maracujazeiro-azedo (Passiflora edulis Sims f. flavicarpa Deg)

Os ensaios foram instalados em casa de vegetação na Embrapa Cerrados, Planaltina-DF, em agosto de 1999. Nos primeiros 30 dias, estacas da cultivar MSC (Marília Seleção Cerrados) foram mantidas sob nebulização com duas regas diárias. Avaliaram-se os seguintes parâmetros: percentagens de estacas brotadas, enraizadas, com fungos, peso de matéria fresca e seca da parte aérea e das raízes, aos 90 dias após o plantio. O estudo foi composto de dois experimentos. No primeiro, utilizaram-se estacas coletadas em agosto de 1999, e oito tipos de substratos. O Plantmax Florestal EstacaÒ proporcionou maior brotação e enraizamento, e ainda menorincidência de estacas contaminadas por Colletotrichum gloeosporioides, comparativamente ao substrato à base de Plantmax Hortaliças.Ò O aditivo NutriplantaÒ quando combinado com o fertilizante OsmocoteÒ, no substrato à base de Plantmax Florestal EstacaÒ, proporcionou maior brotação e enraizamento e também menor incidência de estacas contaminadas com C. gloeosporioides. No segundo ensaio, utilizaram-se estacas do híbrido RC1 ((F1: Marília x Roxo Australiano) x Marília), coletadas em agosto de 2000, tratadas com 2.000 ppm de AIB, plantadas em bandejas de poliestireno expandido com doze tipos de substratos. Para enraizamento das estacas do Híbrido RC1, não houve diferença entre os substratos testados. A adição de um g de Osmocote® por estaca, aos 30 dias após o plantio no substrato Plantmax Florestal Estaca® , proporcionou o melhor desenvolvimento da parte aérea das estacas do Híbrido RC1.

Enxertia de mesa de Passiflora edulis Sims f. flavicarpa Deg. sobre Passiflora alata Curtis, em ambiente de nebulização intermitente

O maracujazeiro é uma cultura típica de países tropicais, sendo estes responsáveis por cerca de 90% da produção mundial. A propagação vegetativa do maracujazeiro permite a obtenção de pomares uniformes, bem como de porta-enxertos altamente produtivos ou resistentes a doenças. O experimento teve como objetivo verificar a viabilidade da enxertia de mesa do maracujazeiro-amarelo (Passiflora edulis Sims f. flavicarpa Deg.) sobre o maracujazeiro-doce (Passiflora alata Curtis), conduzido em telado com 50% de sombreamento, dotado de sistema de nebulização intermitente. Foi conduzido de agosto de 2001 a maio de 2002, na Fazenda de Ensino e Pesquisa da UNESP - Câmpus de Ilha Solteira, localizada no município de Selvíria - MS. O delineamento experimental utilizado foi blocos ao acaso, esquema de parcelas subdivididas no tempo, totalizando quatro tratamentos (T1 - enxertia tipo fenda cheia, com o garfo do ponteiro dos ramos; T2 - enxertia tipo inglês simples, com o garfo do ponteiro dos ramos; T3 - enxertia tipo fenda cheia, com o garfo da parte mediana dos ramos; T4 - enxertia tipo inglês simples, com o garfo da parte mediana dos ramos), cinco repetições e 25 estacas enxertadas por parcela. Foram avaliados: a) porcentagem de sobrevivência das estacas enxertadas; b) porcentagem de estacas enxertadas enraizadas; c) número de brotos emitidos por estaca enxertada; d) número de folhas emitidas por estaca enxertada; e) massa da matéria seca da raiz, caule, folha e planta. Com base nos resultados, pode-se concluir que: a técnica de enxertia de mesa, quando aplicada ao maracujazeiro, mostrou-se viável, com excelente porcentagem de sobrevivência e enraizamento.