Leveduras isoladas de produtos frutícolas: Capacidade fermentativa e estudos sobre a H+-ATPase da membrana plasmática

Dissertação apresentada para obtenção do Grau de Doutor em Biologia(especialidade Microbiologia), pela Universidade Nova de Lisboa,Faculdade de Ciências e Tecnologia

Yeasts isolated from a fungus-growing ant nest, including the description of Trichosporon chiarellii sp nov., an anamorphic basidiomycetous yeast

Conselho Nacional de Desenvolvimento Científico e Tecnológico (CNPq)

Isolation and molecular identification of wine yeasts from a Brazilian vineyard

Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado de São Paulo (FAPESP)

Yeast diversity isolated from grape musts during spontaneous fermentation from a brazilian winery

Saccharomyces and non-Saccharomyces yeast species from a winery located in Brazil were identified by ribosomal gene-sequencing analysis. A total of 130 yeast strains were isolated from grape surfaces and musts during alcoholic fermentation from Isabel, Bordeaux, and Cabernet Sauvignon varieties. Samples were submitted to PCR-RFLP analysis and genomic sequencing. Thirteen species were identified: Candida quercitrusa, Candida stellata, Cryptococcus flavescens, Cryptococcus laurentii, Hanseniaspora uvarum, Issatchenkia occidentalis, Issatchenkia orientalis, Issatchenkia terricola, Pichia kluyveri, Pichia guilliermondii, Pichia sp., Saccharomyces cerevisiae, and Sporidiobolus pararoseus. A sequential substitution of species during the different stages of fermentation, with a dominance of non-Saccharomyces yeasts at the beginning, and a successive replacement of species by S. cerevisiae strains at the final steps were observed. This is the first report about the yeast distribution present throughout the alcoholic fermentation in a Brazilian winery, providing supportive information for future studies on their contribution to wine quality. © 2013 Springer Science+Business Media New York.

Seleção de leveduras isoladas de uvas e mostos com atividade enzimáticas para melhoramento de vinhos

Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado de São Paulo (FAPESP)

Ocorrência de leveduras em espécies vegetais nativas da mata atlântica, Parque Estadual da Serra do Mar - Núcleo Picinguaba, São Paulo

Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior (CAPES)

Studio del Terroir di Modigliana, frontiera tra Romagna e Toscana

Il Lavoro di Tesi è stato condotto a Modigliana, comprensorio viticolo di frontiera ai confini tra Romagna e Toscana caratterizzato da elevata biodiversità, suddiviso in tre vallate (Ibola, Acerreta e Tramazzo). Sono stati presi in esame tre vigneti di Sangiovese uno per ogni valle, considerando anche specie arboree e arbustive presenti nelle aree contigue. Il Sangiovese, interagendo con i vari elementi del Terroir si è adattato a diversi ambienti donando uve con qualità diverse. Le uve dei tre vigneti erano contraddistinte da una minore concentrazione di monoterpeni e C13-norisoprenoidi ed un più alto livello di acidi grassi ed esteri rispetto ai dati riportati in altre ricerche. Nella classe degli alcoli alifatici, l’1-esanolo e il 2-esen-1-olo, rappresentano i composti preponderanti nelle uve dei vigneti delle valli di Modigliana. In particolare, nelle uve del vigneto della valle Ibola, essi superano nettamente le concentrazioni riportate in altri studi. L’1-esanolo e il 2-esen-1-olo sono responsabili degli aromi erbacei nelle uve e nel vino. Questa caratteristica delle uve trova corrispondenza con la descrizione dei vini di Sangiovese di Modigliana, caratterizzato da note verdi, definite “nobili” poiché evolvono nel tempo regalando complessità. I rilievi sulla microflora delle uve hanno evidenziato la presenza di diverse specie di lieviti non-Saccharomyces, che ricoprono importanti ruoli in vinificazione. Dal vigneto della valle Tramazzo sono stati isolati ceppi H. uvarum, I. occidentalis, M. pulcherrima e Pichia spp. Dal vigneto della valle Ibola sono stati isolati ceppi appartenenti solo alla specie Hanseniaspora uvarum. Dal vigneto della valle Acerreta sono stati identificati ceppi di H. uvarum, I. occidentalis, I. terricola, Pichia spp. e Aureobasidium spp. Nel proseguo dello studio sarà importante valutare la ripetibilità dei risultati nel tempo, monitorando anche le cinetiche di fermentazione, includendo la caratterizzazione e l’evoluzione dei vini.

In vitro application of biocontrol agents to improve the safety and quality of grapevine products

Pathogenic fungi are responsible for vine diseases affecting the grapevine yield and the organoleptic quality of the final wine products. Using of biocontrol agents can represent a sustainable alternative to the use of synthetic fungicides whose intense use can have negative effects on the ecosystem and cause increase resistant pathogen population to synthetic agents. The principal aim of my PhD thesis was the isolation and characterization of new yeast strains and Bacillus subtilis SV108 as biocontrol agent and the comprehension of the mechanism of their antimicrobial action. Accordingly, twenty wild yeast and one selected bacterium isolated among 62 samples, isolated from different Italian and Malaysian regions and molecularly identified, were evaluated in a preliminary screening test on agar. Results showed the highest effects on inhibiting mycelial growth by Starmerella bacillaris FE08.05, Metschnikowia pulcherrima GP8 and Hanseniaspora uvarum GM19. On the other side, Bacillus subtilis SV108 showed the ability of inhibit the mycelial growth of selected fungi by producing antimicrobial compounds on Malt Extract Broth medium recovered by sodium dodecyl sulphate polyacrylamide gel electrophoresis (SDS-PAGE) and identified by electrospray ionization (ESI) tandem mass spectrometer Triple TOF 5600. Moreover, in order to analyze the volatile fraction of compounds, the quantitative analysis of the VOCs profiles was performed by GC/MS/SPME. The analysis highlighted the presence of isoamyl and phenylethyl alcohols and an overall higher presence of low-chain fatty acids and volatile ethyl esters. All the data collected suggest that the tested yeasts, found among the epiphytic microbiota associated with grape berries, can be potentially effective for the biological control of pathogenic moulds. On the other hand, the proteomic study conducted on B. subtilis SV108 revealed that there are two cyclic antifungal peptides which can explain the antimicrobial effect of Bacillus subtilis SV108 acting as biocontrol agent against fungal pathogens in grapevine.

Impiego di fermentati vegetali per migliorare il profilo aromatico del pane

ABSTRACT Il lavoro svolto in questa tesi è stato quello di produrre dei pani andando a sostituire nella formulazione l’acqua con delle puree vegetali di mirtilli o peperoni, utilizzate fresche o fermentate. La fermentazione è stata condotta tramite due ceppi di batteri lattici (Leuconostoc mesenteroides L223 e Lactiplantibacillus plantarum L88) e due di lieviti (Saccharomyces cerevisiae Y267 e Hanseniaspora uvarum Y309), che erano stati precedentemente isolati dalle puree di mirtilli e peperoni fermentate spontaneamente, e che presentavano le migliori performances. Gli obiettivi di questa tesi erano di arricchire il profilo sensoriale e il contenuto in sostanze funzionali (ad esempio polifenoli e vitamine, di cui le matrici utilizzate sono particolarmente ricche) del pane. I prodotti ottenuti sono stati analizzati per monitorare gli aspetti chimico-fisici (pH, lievitazione dell’impasto) e il profilo aromatico. Sui diversi pani ottenuti è stato infine eseguito un test di assaggio per valutare l’accettabilità del prodotto ed una sua possibile introduzione nel mercato. I risultati delle analisi hanno mostrato un rilevante sviluppo di sostanze volatili nelle puree vegetali fermentate e queste molecole, in parte, sono state trasferite nel pane andando a modificare il suo profilo aromatico. L’aggiunta di puree fermentate ha quindi fortemente caratterizzato gli impasti e i pani ottenuti, che presentavano un profilo aromatico più complesso rispetto ai pani ottenuti con le sole puree vegetali non fermentate. Questo aspetto positivo è stato confermato dal test di assaggio, poiché i pani addizionati di puree fermentate (soprattutto mirtillo) hanno ottenuti punteggi positivi in termini di dolcezza, acidità e fruttato. Questo conferma le grandi potenzialità di questi pani, che oltre a differenziare i prodotti presenti sul mercato, possono andare a valorizzare matrici vegetali sovra-mature, e destinate ad essere scartate, o parti di vegetali non utilizzate nelle produzioni.

Acção antimicrobiana de sobrenadantes mistos S. cereviisiiae /H.. guilliermondii em leveduras não-Saccharomyces

Dissertação apresentada à Faculdade de Ciências e Tecnologia da Universidade Nova de Lisboa para obtenção do grau de Mestre em Biotecnologia

Ensamblaje del genoma de una levadura cervecera tipo lager (Saccharmoyces cerevisiae var. uvarum).

Tesis (Maestría en Ciencias con Acentuación en Microbiología) UANL, 2014.

Effect of lecithin and soy oil on the fermentative performance of Saccharomyces uvarum I Z 1904

The proposal of this work was to study the effects of lecithin and soy oil on the fermentative performance of Saccharomyces uvarum I Z 1904, a yeast used in the industrial production of ethanol. High Test Molasses (HTM) was chosen as the fermentation media because it is a substratum that is poor in nutrients, and because it permits one to distinguish the action of lipids from other nutritional factors. The study of the optimization of the concentration of lipids by surface response analysis showed that the lipids favor the performance of the yeast principally when applied separately. Maximum concentrations of the two sources of lipids in the media stimulated the budding rate but did not constitute a protection against cell death. Considering the action of lipids on the cellular parameters studied, the supplementation of the media with 3.0 g/l of soy oil permitted the obtention of maximum responses of cellular viability, budding rate and viability of the buds after 6 successive cycles. In relation to the fermentative parameters, the use of 1.5 g/l of soy oil provided high yields and an equilibrium between the mass of ethanol produced (EM) and the alcoholic yield (Y p/s) , whereas the cellular viability after 6 cycles did not differ statistically from that observed with 3g/l of oil.

Hanseniaspora nectarophila sp nov., a yeast species isolated from ephemeral flowers

Conselho Nacional de Desenvolvimento Científico e Tecnológico (CNPq)

Natural populations of saccharomyces kudriavzevii in Portugal are associated with oak bark and are sympatric with s. cerevisiae and s. paradoxus

Applied Environmental Microbiology, Vol. 74, nº7

Estudos moleculares e enológicos da biota de leveduras de uvas da casta Touriga Nacional

Dissertação para obtenção do Grau de Mestre em Biotecnologia