In vitro organogenesis of Citrus volkameriana and Citrus aurantium

In vitro organogenesis of Citrus volkameriana and C. aurantium was studied considering three explant types: epicotyl segment, internodal segment, and hypocotyl segment with attached cotyledon fragment. The explants were cultured in medium according to Grosser and Gmitter (EME) supplemented with 0, 0.5, 1.0, 1.5, and 2.0 mg dm(- 3) 6-benzyl-aminopurine (BAP), incubated firstly in darkness for 4 weeks, and then transferred to 16-h photoperiod for 2 weeks. Comparing epicotyl and internodal segments, a higher percentage of responsive explants and a higher number of shoots per explant were obtained with epicotyl segments, regardless of the BAP concentration. For C. volkameriana the highest percentage of responsive epicotyl segments (42 %) was obtained in EME with 1.0 mg dm(-3) BAP, while for C. aurantium (59 %) in EME with 0.5 mg dm(-3) BAP. The organogenesis efficiency was the best with the use of the hypocotyl segment with attached cotyledon fragment (77 % for C. volkameriana and to 75 % for C. aurantium). With this explant the morphogenesis occurred only in the hypocotyl region. The in vitro organogenesis was characterized by histological analyses showing that the morphogenic process started in the cambium region near the explant cut end.

Evaluation of citrus somatic hybrids for tolerance to Phytophthora nicotianae and citrus tristeza virus

Somatic hybridization is a biotechnology tool that can be used in citrus breeding programs to produce somatic hybrids with the complete genetic combination of both parents. The goal of this work was to test the reaction of citrus somatic hybrids that may be useful as rootstocks to trunk and root infections caused by Phytophthora nicotianae van Breda de Haan (P parasitica Dastur) and to citrus tristeza virus (CTV). The somatic hybrids evaluated were `Caipira` sweet orange (Citrus sinensis L. Osbeck) + `Rangpur` lime (C. limonia Osbeck), `Caipira` sweet orange + `Cleopatra` mandarin (C. reshni hort. ex Tanaka), `Caipira` sweet orange + `Volkamer` lemon (C. volkameriana V Ten. & Pasq.), `Caipira` sweet orange + rough lemon (C. jambhiri Lush.), `Cleopatra` mandarin + `Volkamer` lemon, `Cleopatra` mandarin + sour orange (C. aurantium L.), `Rangpur` lime + `Sunki` mandarin (C. sunki (Hayata) hort. ex Tanaka), `Ruby Blood` sweet orange (C. sinensis L. Osbeck) + `Volkamer` lemon, `Rohde Red` sweet orange (C. sinensis L. Osbeck) + `Volkamer` lemon, and `Valencia` sweet orange + Fortunella obovata hort. ex Tanaka. For P. nicotianae trunk and root infection assays, plants of the somatic hybrids, obtained from 9-month semi-hardwood cuttings, were evaluated and compared with diploid citrus rootstock cultivars after mycelia inoculation in the trunk or spore infestation in the substrate, respectively. `Cleopatra` mandarin + sour orange, `Rangpur` lime + `Sunki` mandarin, `Cleopatra` mandarin + `Volkamer` lemon, `Ruby Blood` sweet orange + `Volkamer` lemon, `Rohde Red` sweet orange + `Volkamer` lemon, and `Caipira` sweet orange + `Volkamer` lemon had less trunk rot occurrence, whereas the somatic hybrids `Cleopatra` mandarin + `Volkamer` lemon, `Cleopatra` mandarin + sour orange, `Caipira` sweet orange + `Volkamer` lemon, and `Caipira` sweet orange + `Rangpur` lime were tolerant to root rot. For CTV assays, plants of the somatic hybrids along with tolerant and intolerant rootstocks were budded with a mild strain CTV-infected or healthy `Valencia` sweet orange budwood. Differences in average scion shoot length indicated that the hybrids `Cleopatra` mandarin + sour orange and `Valencia` sweet orange + Fortunella obovata were intolerant to CTV (c) 2007 Elsevier B.V. All rights reserved.

Performance of 'Oneco' mandarin on six rootstocks in South Brazil

The objective of this work was to assess the effect of six rootstocks on yield, fruit quality, and growth of 'Oneco' mandarin during the first seven harvesting seasons, in Butiá, Rio Grande do Sul State, Brazil. The rootstocks evaluated were: 'Swingle' citrumelo (Citrus paradisi × Poncirus trifoliata), 'Caipira' orange (C. sinensis), 'Troyer' citrange (C. sinensis × P. trifoliata), 'Rangpur' lime (C. limonia), 'Volkamer' lemon (C. volkameriana), and 'Flying Dragon' trifoliata orange (P. trifoliata var. monstrosa). Plants budded onto 'Flying Dragon' had the lowest vegetative development, which indicates the dwarfing characteristics of this rootstock, and had the highest mean production efficiency, despite low yield. Plants grafted on 'Volkamer' lemon and 'Rangpur' lime had the highest alternate bearing. Under the experimental conditions evaluated, the most adequate rootstocks for mandarin 'Oneco' are 'Swingle' citrumelo and 'Troyer' citrange, regarding fruit yield and quality.

Comportamento da laranjeira 'Pêra' sobre cinco porta-enxertos em ecossistema de tabuleiros costeiros, Umbaúba-SE

Em experimento instalado em 1984 no Campo Experimental de Umbaúba-SE, com delineamento em blocos casualizados, avaliou-se a potencialidade da laranjeira 'Pêra' [Citrus sinensis (L.) Osb.], clone D6, enxertada sobre cinco porta-enxertos. A análise estatística das médias dos dados do 9° ao 13° ano do plantio permite concluir que as seleções do limoeiro 'Volkameriano' (C. volkameriana Ten. & Pasq.), 'Catânia 2' e 'Palermo', os limoeiros 'Cravo' (C. limonia Osb.) e 'Rugoso da Flórida' (C. jambhiri Lush.) e a tangerineira 'Cleópatra' (C. reshni Hort. ex Tan.) apresentaram comportamentos semelhantes quanto à produtividade, percentagem de suco e teor de sólidos solúveis totais, evidenciando que o 'Catânia 2', 'Palermo' e 'Cleópatra' tiveram eficiência similar ao 'Cravo' e 'Rugoso', porta-enxertos estes mais utilizados nas regiões citrícolas de Sergipe e litoral norte da Bahia.

Comportamento de catorze porta-enxertos para o limão eureka km 47 na região de Araraquara-SP

Foi avaliado o comportamento de 14 porta-enxertos para o limão 'Eureka km 47' [Citrus limon (L.) Burm. f.], clone nucelar, em experimento instalado em 1991, na Fazenda Fittipaldi, Araraquara-SP. Os porta-enxertos foram: tangelos 'Orlando' e 'Seminole' (C. reticulata Blanco x C. paradisi Macfad.), tangerinas 'Cleópatra' (C. reshni hort. ex Tanaka) e 'Sunki' [C. sunki (Hayata) hort. ex Tanaka], limões 'Cravo' (C. limonia Osbeck), 'Rugoso da África' (C. jambhiri Lush.) e 'Volkameriano Catania 2' (C. volkameriana V. Ten. & Pasq.), laranja 'Caipira DAC' [C. sinensis (L.) Osbeck], laranja 'Azeda Doble C��lice' (C. aurantium L.), trifoliatas 'EEL'e 'Kryder 8-5' [Poncirus trifoliata (L.) Raf.], citrange 'Morton' [P. trifoliata (L.) Raf. x C. sinensis (L.) Osbeck], C. karna Raf. e C. pennivesiculata (Lush.) Tanaka. As produções foram avaliadas no período de 1998 a 2002. As maiores produções médias em peso de frutos estiveram relacionadas aos porta-enxertos C. pennivesiculata e tangerina 'Cleópatra' (>220 kg/planta). Entre os porta-enxertos que induziram as mais baixas produções, estão C. karna, os dois tangelos, os dois trifoliatas e a 'Caipira DAC' (<180 kg/planta). As características de qualidade apresentadas pelos frutos e referentes ao ano de 2002 indicaram não haver diferenças expressivas devido à influência dos tratamentos. São também apresentados dados relativos à suscetibilidade das plantas à gomose de Phytophthora, no período estudado.

Organogênese in vitro a partir de diferentes regiões do epic��tilo de Citrus sp

O estabelecimento de protocolos para regeneração de plantas in vitro é essencial para o uso de técnicas de transformação genética no melhoramento de citros. Visando à obtenção de um protocolo eficiente de regeneração in vitro para laranja-azeda (Citrus aurantium), laranjas 'Natal' e 'Pêra' (C. sinensis), limão 'Volkameriano' (C. volkameriana) e citrange 'Carrizo' (Poncirus trifoliata x C. sinensis), avaliou-se a resposta morfogênica de diferentes regiões do epic��tilo (basal, mediana e apical) em relação a distância do nó cotiledonar, na presença (1,0 mg/L-1) ou ausência de 6-BAP, em meio de cultura MT. Após 60 dias, avaliaram-se a porcentagem de explantes responsivos e o número de gemas adventícias por explante. A resposta morfogênica em função da região do epic��tilo e da presença ou ausência da citocinina (6-BAP) foi influenciada pelo genótipo. A presença de 6-BAP no meio de cultura promoveu aumento na porcentagem de explantes responsivos para citrange 'Carrizo'. A suplementação do meio de cultura com a citocinina 6-BAP proporcionou aumento no número de brotos por explante para citrange 'Carrizo', laranja 'Natal' e limão 'Volkameriano'.

Enraizamento de estacas do híbrido somático laranja 'caipira' + limão 'Volkameriano' e de seus genitores

Objetivou-se neste trabalho comparar o enraizamento de estacas do híbrido somático laranja 'Caipira' (C. sinensis L. Osbeck) + limão 'Volkameriano' (C. volkameriana V. Tennore et Pasquale) com aquelas dos seus genitores tratadas com ácido indolbutírico (AIB) (0; 500; 1.000 e 2.000 mg L-1). As estacas de laranja 'Caipira' e limão 'Volkameriano' foram retiradas de plantas obtidas a partir de sementes, e as do híbrido somático, de plantas enxertadas rec��m-podadas. O delineamento experimental utilizado foi um fatorial 3 x 4 (genótipos x concentrações de AIB) inteiramente casualizado, com quatro repetições de 10 estacas por repetição, totalizando 480 estacas. As estacas foram cultivadas em bandejas de poliestireno expandido, contendo substrato comercial, em estufa com sistema de nebulização intermitente, por 90 dias. A produção de plantas enraizadas foi altamente eficiente para os três genótipos avaliados, considerando-se a maioria das variáveis relacionadas ao enraizamento e vigor das estacas, independentemente do uso de AIB. Estacas de limão 'Volkameriano' apresentaram médias de comprimento e massa seca das raízes superiores às dos demais genótipos. Para todos os genótipos, as porcentagens de estacas vivas e enraizadas foram elevadas (acima de 90%), indicando o alto potencial deste germoplasma para ser utilizado na produção de mudas e porta-enxertos por estaquia.

In vitro organogenesis in some citrus species

In vitro organogenesis of Citrus was studied for the genotypes Citrus sinensis cv. 'Natal', C. limonia, C. volkameriana, and C. aurantium, with the use of epicotyl segments-derived explants, cultured in MT salts and vitamins medium supplemented with different concentrations of 6-benzylaminopurine (BAP - 0.0; 0.5; 1.0; 1.5 or 2.0 mg L-1). For the recalcitrant genotypes C. limonia and C. aurantium the in vitro organogenesis was also studied with internodal segments-derived explants, cultured in MT salts and vitamins medium supplemented with 0; 0.5; 1.0; 2.0, or 4.0 mg L-1 of BAP. The efficiency of culture medium supplementation with the combination of BAP (0.0; 1.0, or 2.0 mg L-1) and NAA (1-naphthaleneacetic acid - 0.0; 0.3, or 0.5 mg L-1) in the development of adventitious shoots was evaluated for C. aurantium. Culture medium supplementation with BAP is not essential for the adventitious shoots development in the four genotypes studied when epicotyl segments-derived explants are used. In general, culture media supplementation with BAP decreased the percentage of responsive explants excepted for C. sinensis cv. 'Natal' and C. limonia when the concentrations of 1.5 and 2.0 mg/L were used. The presence of cytokinin, in concentrations up to 2 mg/L, stimulated the in vitro organogenesis when internodal segments-derived explants were used for C. limonia and C. aurantium. For C. aurantium no adventitious shoots developed in explants (internodal segments) cultured in basal culture medium, without BAP supplementation. Although no statistic differences could be detected, culture media supplementation with the combination of BAP and NAA favored the development of adventitious shoots in C. aurantium. The best concentration of NAA varied according to BAP concentration. The results presented herein, show that Citrus in vitro organogenesis depends on the interaction of culture medium composition, explant differentiation level, and genotype.

Avaliação genética de seleções e híbridos de limões cravo, volkameriano e rugoso como porta-enxertos para laranjeiras Valência na presença da morte súbita dos citros

Este estudo teve como objetivo realizar a avaliação genética da produção de frutos, eficiência produtiva e altura de laranjeiras Valência (Citrus sinensis) enxertadas em seleções e híbridos dos limões Cravo (C. limonia), Volkameriano (C. volkameriana) e Rugoso (C. jambhiri), em área endêmica para morte súbita dos citros (MSC). Foram avaliados 36 genótipos desses porta-enxertos, representados por cinco plantas cada, avaliados em cinco safras, do terceiro ao sétimo ano após o plantio. Sete dos genótipos avaliados apresentaram plantas com sintomas de MSC até o sétimo ano: Rangpur Otaheite orange 12901 (859), Rangpur Red Lime D.33.30 (866), Limão-Cravo EEL (871), Rangpur Borneo red (874), Citrus kokhai (1649), Limão-Rugoso 58329 (1655) e Limão- Cravo x Swingle B (1695). Para os genótipos que não manifestaram sintomas da doença, foram estimados parâmetros genéticos e fenotípicos e realizada a predição de valores genéticos dos indivíduos, visando à seleção e ao melhoramento genético para as características citadas, empregando-se o método REML/BLUP (máxima verossimilhança restrita/melhor predição linear não viciada). A análise de produção de frutos de cinco safras mostrou acurácia seletiva de 84,59%, tornando-se desnecessária a avaliação de maior número de safras. A seleção dos sete melhores genótipos proporcionou ganhos genéticos de 11,5% na produção de frutos, enquanto a do melhor genótipo conferiu ganho genético de 16,3%. As maiores médias genéticas preditas (>70,0 kg.pl-1) para produção de frutos foram obtidas pelos genótipos Limão-Cravo- Ipanema (1522), Santa- Bárbara-Red- Lime (884), Limão- Cravo- Limeira (863), Limão- Cravo- Taquaritinga (869), Limão- Rugoso- do -Cabo (1643), Rangpur- Rose Lime (868) e Limão- Cravo- da- Califórnia (1467). Já a acurácia seletiva da eficiência produtiva, para quatro colheitas, foi 77,4%. Para este caráter, as maiores médias genéticas (>8,0 kg.m-3) foram dos genótipos Rangpur- Lime x Trifoliata 3810 (1648), Rangpur- Lime x Trifoliata 5320 (1644), Limão- Cravo x Citrange- Carrizo (1524), Citrus pennivesiculata (880), Limão- Cravo x Trifoliata- Swingle A (1707), Rangpur- Rose- Lemon 124684 (864), Rangpur- Red -Lime D33.47 (867) e Limão- Cravo -Ipanema (1522). Dentre os 10 melhores genótipos para produção de frutos e para eficiência produtiva, apenas três são coincidentes: Rangpur- Rose -Lime (868), Citrus pennivesiculata (880) e Limão- Cravo-Ipanema (1522).

Monitoring the viability of citrus rootstocks seeds stored under refrigeration

The citrus nursery tree is produced through the bud grafting process, in which rootstock is usually grown from seed germination. The objective of this research was to evaluate, in two dissimilar environmental conditions, the viability and polyembryony expression of five citrus rootstocks seeds stored in different periods under refrigeration. The rootstock varieties evaluated were: Rangpur lime (Citrus limonia Osb. cv. Limeira), Trifoliate orange (Poncirus trifoliata Raf. cv. Limeira), Citrumelo (P. trifoliata x C. paradisi Macf. cv. Swingle), Sunki mandarin (C. sunki Hort. ex Tanaka) and Volkamer lemon (C. volkameriana Ten. & Pasq. cv. Catania 2). The experimental design was the randomized blocks in a 11 x 5 x 2 factorial scheme, evaluating from time zero to the tenth month of storage, the five varieties of rootstock in two environments: germination and growth B.O.D type chamber (Biological Oxygen Demand - Eletrolab Brand Model FC 122) at 25 °C; and greenhouse seedbed with partial temperature control (22 °C to 36 °C) and humidity control (75-85%). The plot had 24 seeds in four replicates, using trays with substrate in greenhouse and Petri dishes with filter paper in B.O.D. chamber. The seed germination rate and polyembryony expression were evaluated monthly. It was concluded that Trifoliate and Citrumelo Swingle seeds can be stored for up to seven months, while Volkamer lemon, Rangpur lime and Sunki seeds can be stored for up to ten months. The polyembryony expression rate was slightly higher when measured in greenhouse than in B.O.D. chamber and remained stable in both environments until the seventh month, from which dropped sharply. Citrumelo Swingle seeds expressed the highest polyembryony rate (18.8%), followed by Rangpur lime and Volkamer lemon (average value of 13.7%), Sunki (9.4%) and Trifoliate (3.2%). Despite some differences among varieties, the viability of rootstock stored seeds can be monitored either in the greenhouse or in B.O.D. germination chamber, the latter being the faster and more suitable method.

Desempenho da tangerineira 'Span Americana' em diferentes porta-enxertos

Este trabalho objetivou avaliar o crescimento vegetativo, a produção e a qualidade de frutos da tangerina 'Span Americana' em diferentes porta-enxertos, nas condições edafoclimáticas de Bebedouro-SP. O plantio foi realizado em junho de 2003, em espaçamento de 6,0 m x 3,0 m, sendo utilizada irrigação por gotejamento a partir de 2006. Os porta-enxertos avaliados foram: citranges [Citrus sinensis (L.) Osbeck × Poncirus trifoliata L. Raf] 'Carrizo' e 'Troyer', tetraploides; trifoliatas (P. trifoliata) 'Davis A' e 'Flying Dragon'; limão Volkameriano Catania 2 (C. volkameriana Tenn. et Pasq.), HRS 849 [(C. aurantium L. cv. 'Smooth Flat Seville' x P. trifoliata cv. 'Argentina')], tangelo 'Orlando' (C. reticulata Blanco × C. paradisi Macf.) e limão 'Cravo' (C. limonia Osbeck). Foram avaliadas a produção acumulada, a eficiência produtiva e a precocidade de entrada em produção, no período de 2007 a 2009. Avaliaram-se, também, as dimensões das plantas e a taxa média de crescimento das plantas no período de 2005 a 2008, além da qualidade dos frutos em 2006 e 2007. Em pomares irrigados de tangerineira 'Span Americana', os porta-enxertos trifoliata 'Davis A' e HRS 849 apresentam desempenho horticultural satisfatório. Para plantio em alta densidade, a melhor performance da tangerineira 'Span Americana' é obtida com a utilização dos porta-enxertos trifoliata 'Flying Dragon' e citranges 'Troyer' e 'Carrizo'.

Tolerância de híbridos e de clones de porta-enxertos de citros à infec��ão de raízes por Phytophthora nicotianae

Estudaram-se clones de porta-enxertos de citros (Citrus spp.), híbridos e genitores quanto à tolerância das raízes a Phytophthora nicotianae através de inoculações em substrato de argila expandida. Investigaram-se progênies nucelares dos clones Poncirus trifoliata 'Rich 16-6', citrumelo 'Swingle' (C. paradisi x P. trifoliolata ), tangerinas 'Cleópatra' (Citrus reshni) e 'Suen Kat' (C. sunki), limão'Volkameriano' (C. volkameriana), dos genitores tangerina 'Sunki' (C. sunki) (S), limão 'Cravo' (C. limonia) (C), laranja 'Azeda' (C. aurantium) ((A), Poncirus trifoliata 'Davis A' (T), e progênies nucelares de híbridos entre eles, totalizando 2303 plântulas. Avaliou-se a taxa de sobrevivência, redução de raízes e partes aéreas, peso de raízes e de partes aéreas, diâmetro do caule e altura, comparando-se plântulas inoculadas e não inoculadas. Atribuíram-se também notas subjetivas para volume de raízes, enfolhamento, coloração das folhas e altura. Desenvolveu-se um índice total de redução (ITR) baseado na taxa de sobrevivência e nos parâmetros mencionados. Mostraram-se altamente tolerantes os trifoliatas 'Davis A' e 'Rich 16-6', o citrumelo 'Swingle', três híbridos TxS, dois SxT e dois SxA, com ITR < 20%. Laranja 'Azeda', tangerina 'Suen Kat', limões 'Cravo' e 'Volkameriano', oito híbridos TxS, quatro SxT, dois TxA e um SxA mostraram-se tolerantes, com ITR entre 20 e 40%. Três híbridos SxA mostraram-se moderadamente tolerantes, com ITR entre 40 e 60%. Tangerinas 'Sunki' e 'Cleópatra', dois híbridos SxA, um TxA e dois SxC mostraram-se intolerantes, com ITR entre 60 e 80%. Cinco híbridos SxC mostraram-se altamente intolerantes, com ITR > 80%. A metodologia de inoculação e avaliação discriminou com precisão progênies nucelares dos clones e dos híbridos, evidenciando o potencial de seleção principalmente dos híbridos SxT e rec��procos.

Frequency Of The Allelic Variant C.1150t > C In Exon 10 Of The Fibroblast Growth Factor Receptor 3 (fgfr3) Gene Is Not Increased In Patients With Pathogenic Mutations And Related Chondrodysplasia Phenotypes.

Mutations in the FGFR3 gene cause the phenotypic spectrum of FGFR3 chondrodysplasias ranging from lethal forms to the milder phenotype seen in hypochondroplasia (Hch). The p.N540K mutation in the FGFR3 gene occurs in ∼70% of individuals with Hch, and nearly 30% of individuals with the Hch phenotype have no mutations in the FGFR3, which suggests genetic heterogeneity. The identification of a severe case of Hch associated with the typical mutation c.1620C > A and the occurrence of a c.1150T > C change that resulted in a p.F384L in exon 10, together with the suspicion that this second change could be a modulator of the phenotype, prompted us to investigate this hypothesis in a cohort of patients. An analysis of 48 patients with FGFR3 chondrodysplasia phenotypes and 330 healthy (control) individuals revealed no significant difference in the frequency of the C allele at the c.1150 position (p = 0.34). One patient carrying the combination `pathogenic mutation plus the allelic variant c.1150T > C' had a typical achondroplasia (Ach) phenotype. In addition, three other patients with atypical phenotypes showed no association with the allelic variant. Together, these results do not support the hypothesis of a modulatory role for the c.1150T > C change in the FGFR3 gene.

The C-terminal Region Of The Human P23 Chaperone Modulates Its Structure And Function.

The p23 protein is a chaperone widely involved in protein homeostasis, well known as an Hsp90 co-chaperone since it also controls the Hsp90 chaperone cycle. Human p23 includes a β-sheet domain, responsible for interacting with Hsp90; and a charged C-terminal region whose function is not clear, but seems to be natively unfolded. p23 can undergo caspase-dependent proteolytic cleavage to form p19 (p231-142), which is involved in apoptosis, while p23 has anti-apoptotic activity. To better elucidate the function of the human p23 C-terminal region, we studied comparatively the full-length human p23 and three C-terminal truncation mutants: p23₁₋₁₁₇; p23₁₋₁₃₁ and p23₁₋₁₄₂. Our data indicate that p23 and p19 have distinct characteristics, whereas the other two truncations behave similarly, with some differences to p23 and p19. We found that part of the C-terminal region can fold in an α-helix conformation and slightly contributes to p23 thermal-stability, suggesting that the C-terminal interacts with the β-sheet domain. As a whole, our results suggest that the C-terminal region of p23 is critical for its structure-function relationship. A mechanism where the human p23 C-terminal region behaves as an activation/inhibition module for different p23 activities is proposed.

Avaliação do teor e da estabilidade de vitaminas do complexo B e vitamina C em bebidas isotônicas e energéticas

Vitamin C stability and concentration was evaluated in isotonic beverages and B group vitamins (B1, B2, B3, B5 and B6) in power beverages. The amount of vitamins was found to be above of that declared on the labels, even after the shelf life had been exceeded. A small decrease in the amount of B group vitamins was observed during the shelf life of the products. In the case of vitamin C this decrease was slightly higher. The present research shows the need of increased quality control and inspection.