Transmission properties of Iranian wheat stripe virus

Transmission properties of Iranian wheat stripe virus (IWSV), a tentative member of the genus Tenuivirus, were studied. Results showed that similar to other tenuiviruses, IWSV multiplies in its vector, Unkanodes tanasijevici. In bioassay experiments, IWSV transmission rate by individual U. tanasijevici showed an increase with time after acquisition. IWSV was transovarially transmitted to 88-100% of progeny. The nymphs continued to be infective in the adult stage but with decreased efficiency. Males and females transmitted the virus with equal efficiency. Transmission properties of IWSV confirm the position of the virus in the genus Tenuivirus.

Transmission of cocoa swollen shoot virus by seeds

A study was undertaken to determine whether cocoa swollen shoot virus is transmitted by seeds, to improve the robustness of quarantine procedures for international exchange and long term conservation of cocoa germplasm. PCR/capillary electrophoresis, using cocoa swollen shoot virus primers designed from the most conserved regions of the six published cocoa genome sequences, allowed the detection of cocoa swollen shoot virus in all the component parts of cocoa seeds from cocoa swollen shoot virus-infected trees. PCR/capillary electrophoresis revealed the presence of cocoa swollen shoot virus in seedlings raised from seeds obtained from cocoa swollen shoot virus-infected trees. The high frequency with which the virus was transmitted through the seedlings suggested that cocoa swollen shoot virus is transmitted by seeds. This has serious implications for cocoa germplasm conservation and distribution. (C) 2008 Elsevier B.V. All rights reserved.

The effectiveness of somatic embryogenesis in eliminating the cocoa swollen shoot virus from infected cocoa trees

Investigations were undertaken on the use of somatic embryogenesis to generate cocoa swollen shoot virus (CSSV) disease free clonal propagules, from infected trees. Polymerase chain reaction (PCR) capillary electrophoresis revealed the presence of CSSV in all the callus tissues induced from the CSSV-infected Amelonado cocoa trees (T1, T2 and T4). The virus was transmitted to primary somatic embryos induced from the infected callus tissues at the rate of 10 (19%), 18 (14%) and 16 (15%) for T1, T2 and T4, respectively. Virus free primary somatic embryos from the infected callus tissues converted into plantlets tested CSSV negative by PCR/capillary electrophoresis 2 years after weaning. Secondary somatic embryos induced from the CSSV-infected primary somatic embryos revealed the presence of viral fragments at the rate of 4 (4%) and 9 (9%) for T2 and T4, respectively. Real-time PCR revealed 23 of the 24 secondary somatic embryos contained no detectable virus. Based on these findings, it is proposed that progressive elimination of the CSSV in infected cocoa trees occurred from primary embryogenesis to secondary embryogenesis. (C) 2008 Elsevier B.V. All rights reserved.

Transmission properties of Iranian wheat stripe virus

Transmission properties of Iranian wheat stripe virus (IWSV), a tentative member of the genus Tenuivirus, were studied. Results showed that similar to other tenuiviruses, IWSV multiplies in its vector, Unkanodes tanasijevici. In bioassay experiments, IWSV transmission rate by individual U. tanasijevici showed an increase with time after acquisition. IWSV was transovarially transmitted to 88-100% of progeny. The nymphs continued to be infective in the adult stage but with decreased efficiency. Males and females transmitted the virus with equal efficiency. Transmission properties of IWSV confirm the position of the virus in the genus Tenuivirus.

High-resolution melt and morphological analyses of mealybugs (Hemiptera: Pseudococcidae) from cacao: tools for the control of Cacao Swollen Shoot Virus spread

BACKGROUND: Mealybugs (Hemiptera: Coccoidea: Pseudococcidae) are key vectors of badnaviruses, including Cacao Swollen Shoot Virus (CSSV) the most damaging virus affecting cacao (Theobroma cacao L.). The effectiveness of mealybugs as virus vectors is species dependent and it is therefore vital that CSSV resistance breeding programmes in cacao incorporate accurate mealybug identification. In this work the efficacy of a CO1-based DNA barcoding approach to species identification was evaluated by screening a range of mealybugs collected from cacao in seven countries. RESULTS: Morphologically similar adult females were characterised by scanning electron microscopy and then, following DNA extraction, were screened with CO1 barcoding markers. A high degree of CO1 sequence homology was observed for all 11 individual haplotypes including those accessions from distinct geographical regions. This has allowed for the design of a High Resolution Melt (HRM) assay capable of rapid identification of the commonly encountered mealybug pests of cacao. CONCLUSIONS: HRM Analysis (HRMA) readily differentiated between mealybug pests of cacao that can not necessarily be identified by conventional morphological analysis. This new approach, therefore, has potential to facilitate breeding for resistance to CSSV and other mealybug transmitted diseases.

Dimensionamento de amostras para monitoramento do ácaro da leprose Brevipalpus phoenicis (Geijskes, 1939) em citros

O controle do ácaro Brevipalpus phoenicis (Geijskes, 1939), transmissor do vírus da leprose, deve ser realizado quando sua população atinge o nível de ação, obtido pelo monitoramento de sua população, por meio de amostragens. Objetivou-se determinar o tamanho da amostra aceitável para estimar a população do ácaro, para posterior tomada de decisão. O experimento foi realizado na Fazenda Cambuhy, Matão - SP, no ano agrícola 2003-2004. Escolheu-se ao acaso um talhão da variedade Valência, com oito anos de idade, plantada no espaçamento 7x3,5m, com 2.480 plantas. Nesse talhão, foram inspecionados 1; 2; 3; 5; 10 e 100% das plantas, o que corresponde a 25; 50; 74; 124; 248 e 2.480 plantas, respectivamente, em caminhamento no sentido das linhas de plantio. Foram amostrados 3 frutos ou, na ausência destes, eram analisados ramos. de acordo com os resultados obtidos, observa-se que a porcentagem de erro na estimativa da média para a porcentagem de frutos com presença de ácaros, quando se amostra apenas 1% das plantas (25 plantas), é de 50%, ou seja, para uma infestação de 10%, a variação da porcentagem de frutos infestados estaria entre 5 e 15%, levando o produtor a subestimar ou a superestimar o nível de infestação, aumentando os gastos com pulverizações desnecessárias ou um controle ineficiente do ácaro. Para que o erro na amostragem fique dentro da situação aceitável, de 20 a 30% (em média 25%) de erro, deveriam ser amostradas 105 plantas. Na porcentagem de frutos com mais de 10 ácaros, verifica-se que, para a situação aceitável (20 a 30%), devem ser inspecionadas 540 plantas.

Eficiência de diferentes ramais de pulverização e volumes de calda no controle de Brevipalpus phoenicis na cultura do café

Efficiency of different spraying lances and spraying volumes on the control of Brevipalpus phoenicis in coffee crops. The mite Brevipalpus phoenicis is found on coffee plantations in Brazil since the 1950's. Responsible for indirect losses due to its role as vector of a virus disease, this mite species often requires control measures, the most common based on mitecide spraying. It was evaluated the mortality of B. phoenicis due the coverage of spraying liquid applied on coffee plants, with two types of lances used in air assisted sprayers and four spraying. volumes. Treatments were applied with mitecide abamectin (Vertimec 18 CE (R) at 0.4 L per hectare), in volumes of 250, 400, 550 and 700 L per hectare, with two types of lances for the nozzles. The control efficiency against B. phoenicis, deposition and coverage by spray liquid on coffee plants was evaluated. Experimental delineation was in randomized blocks, with eight treatments plus a check plot in four replications. The statistical analysis was carried in a factorial scheme 2x4+1. No significant differences in the number of mites were found between treatments. As regards spraying liquid deposition, it was observed an increment with increasing spraying volumes, with the plant tops showing the best deposition of spraying liquid. The duplication of the lances (nozzle branches) resulted in a significant increase in control efficiency for B. phoenicis compared with conventional branch and with check plot, without dependence of spraying volume.

Aspectos biológicos do ácaro Brevipalpus phoenicis vetor da leprose dos citros em plantas de buva (Conyza canadensis)

O ácaro Brevipalpus phoenicis, vetor da leprose dos citros, é uma espécie polífaga que tem ampla gama de hospedeiros alternativos nos pomares cítricos, nos quais se pode manter e/ou incrementar suas populações. O objetivo deste trabalho foi estudar a sobrevivência, a oviposição e o modo de alimentação do ácaro B. phoenicis em plantas de buva (Conyza canadensis) com diferentes tamanhos. Para avaliação da sobrevivência e oviposição do ácaro B. phoenicis, foi utilizado o delineamento estatístico inteiramente casualizado, com cinco tratamentos e doze repetições. Os tratamentos estudados foram: (1) secções de caules de plantas menores que 20 cm, (2) entre 21 e 50 cm, (3) entre 51 e 100 cm e (4) maiores que 101 cm de altura; e (5) secções de ramos de laranja. Dez fêmeas adultas de B. phoenicis, procedentes de uma criação-estoque, foram transferidas para cada secção de caule de buva e ramos de citros como testemunha. Avaliou-se a sobrevivência e a oviposição dos ácaros até 120 horas após a transferência. Alguns aspectos comportamentais do ácaro B. phoenicis foram fotomicrografados, utilizando-se microscópico eletrônico de varredura. Verificou-se que as plantas de maior altura de buva foram mais favoráveis à sobrevivência do ácaro B. phoenicis do que as de menor tamanho. Contudo, a quantidade de ovos postos pelo ácaro não diferiu em relação à altura das plantas de buva. Com base nas fotomicrografias, constatou-se a preferência do ácaro B. phoenicis por se alimentar na base dos tricomas presentes na superfície do caule da planta de buva, justificado, possivelmente, pela maior turgescência das células encontradas nessa região da planta. Esses resultados reforçam a importância do manejo de buva nos pomares cítricos, pois a sua presença no campo pode favorecer a sobrevivência e o desenvolvimento do ácaro B. phoenicis, servindo, portanto, como hospedeira alternativa, o que pode contribuir para a disseminação do ácaro e, consequentemente, da leprose nos pomares cítricos.

Toxicidade diferencial de produtos à base de abamectina ao ácaro Brevipalpus phoenicis (Geijskes, 1939) (Acari: Tenuipalpidae) em citros

O ácaro Brevipalpus phoenicis é uma das principais pragas dos citros por ser vetor do Citrus Leprosis Virus (CiLV), agente causal da leprose, uma das mais graves doenças da citricultura. Objetivou-se avaliar o efeito tóxico de produtos à base de abamectina sobre o ácaro B. phoenicis. Foram realizados um experimento de ação direta e três de ação residual no Laboratório de Acarologia do Departamento de Proteção de Plantas (Fitossanidade) da FCAV - UNESP, Jaboticabal-SP. O delineamento adotado nos bioensaios foi o inteiramente casualizado, onde 10 tratamentos foram repetidos 7 vezes, sendo cada repetição composta por um fruto de laranja. Os tratamentos estudados (mL p.c./100 L de água) foram: Acaramik a 20; 30; 40 e 50 mL; Vertimec a 30 e 40 mL; Abamectin Nortox a 30 e 40 mL; Tricofol a 77 mL e uma testemunha sem aplicação. Utilizaram-se frutos com presença de verrugose, que foram lavados e parcialmente parafinados, deixando-se uma área sem parafina, que foi circundada com cola entomológica para contenção dos ácaros. Transferiram-se 20 ácaros adultos B. phoenicis para cada fruto. No bioensaio de ação direta, a transferência foi realizada antes das aplicações e, nos bioensaios de ação residual, aos 5; 10 e 15 dias após a aplicação dos produtos. A aplicação dos produtos sobre os frutos foi realizada em Torre de Potter. Os resultados obtidos nos bioensaios evidenciaram que os melhores tratamentos foram: Tricofol a 77 mL, Acaramik a 40 e 50 mL e Vertimec a 40 mL. de forma geral, os produtos testados podem ser utilizados no controle do ácaro B. phoenicis.

Toxicidade diferencial de agrotóxicos utilizados em citros para Neoseiulus californicus, Euseius concordis e Brevipalpus phoenicis

Conselho Nacional de Desenvolvimento Científico e Tecnológico (CNPq)

PREVALENCE of SALMONELLA SPP. ANTIBODIES TO TOXOPLASMA GONDII, and NEWCASTLE DISEASE VIRUS IN FERAL PIGEONS (COLUMBA LIVIA) IN THE CITY of JABOTICABAL, BRAZIL

The rock pigeon (Columba livia) may serve as a reservoir for several pathogenic agents that can be transmitted to poultry, wildlife, domesticated pets, and/or humans via excreta, secretions, or dust from feathers. In addition, ingestion of infected pigeons by wild and domestic animals can also transmit these pathogenic agents. The health status of 126 free-living pigeons in an urban area was evaluated by microbiologic culture for Salmonella and serologic testing for the presence of antibodies for Toxoplasma gondii and for Newcastle disease virus (NDV) from 120 and 109 pigeons, respectively. After drawing blood, the birds were euthanized, and fragments of the liver, spleen, lungs, and gonads, and feces were cultured for Salmonella spp. Salmonella spp. was isolated from 10 birds (7.94%), of which 8 were Salmonella typhimurium, one was Salmonella enterica subsp. enterica serotype 4,12 and one was Salmonella enterica subsp. enterica serotype 4,12,i. Six of 109 pigeons (5.50%) were positive for NDV antibodies when using the hemagglutination inhibition test. Toxoplasma gondii antibodies were detected by immunofluorescence in one of 120 sera tested (0.83%). The results indicate that feral rock pigeons were exposed to NDV and T gondii, although the exposure was low. In addition, these birds had Salmonella spp. and could disseminate this pathogen in the environment.

Frequência de Lettuce big-vein associated virus e Mirafiori lettuce big-vein virus em Plantas de alface no Estado de São Paulo e transmissão através de extrato vegetal e solo

Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado de São Paulo (FAPESP)

Prevalence of Lettuce mosaic virus - common strain on three lettuce producing areas from São Paulo State

O LMV ocorre em todo o mundo e é considerado um dos patógenos mais importantes para a cultura da alface. de acordo com a habilidade em contornar os genes de resistência mo1¹ e mo1² encontrados em alface, os isolados de LMV podem ser dividos em dois sub-grupos: LMV-Most, capazes de contornar a resistência propiciada por estes genes e de serem transmitidos pela semente nestas cutivares, e LMV-Common, que não são capazes de causar sintomas nestes cultivares, além de serem transmitidos pela semente somente em cultivares suscetíveis. Para avaliar a ocorrência destes dois tipos de isolados de LMV foram coletadas, durante 2002-2005, amostras de alface com sintomas de mosaico em áreas de produção de alface comercial das regiões de Campinas, Mogi das Cruzes e Bauru no estado de São Paulo. O RNA total foi utilizado para detecção por RT-PCR utilizando-se oligonucleotídeos universais para LMV que amplificam a porção N-terminal variável da capa protéica, localizada no terminal 3´do genoma. As amostras positivas foram analisadas por um segundo primer que amplifica um fragmento da região central (CI-VPg) do genoma viral. Um total de 1362 amostras foram avaliadas, tendo sido detectado o LMV em 504 amostras (37,29%). O LMV-Common prevaleceu em variedades suscetíveis (77,3%). O LMV-Most foi encontrado frequentemente associado a variedades portadoras do gene de tolerância mo1¹. Apesar da existência dos LMV-Most capazes de contornar a resistência em alface, estes não predominam em nossa condições.

Transmissão do Cowpea mild mottle virus pela mosca branca Bemisia tabaci biótipo B para plantas de feijão e soja

A necrose da haste da soja é causada por um vírus do gênero Carlavirus transmitido pela mosca branca Bemisia tabaci, também infectante de feijão e identificado como Cowpea mild mottle virus (CpMMV). Neste trabalho foram realizados testes para determinação do número de moscas-brancas B. tabaci biótipo B necessários para transmissão do vírus em feijoeiro e soja. Na sequência foram realizados dois outros testes, com 10 insetos por planta. Avaliaram-se períodos de acesso à aquisição (PAA) de 'Jalo' para 'Jalo', e o efeito de períodos de acesso à inoculação (PAI). Foram visualmente constatados sintomas típicos do carlavírus como mosaico, clareamento de nervuras, necrose sistêmica e redução de crescimento. Houve transmissão do vírus para 'BT-2' de feijão e 'BRS-132' de soja com apenas um inseto por planta, sendo mais eficaz nesta última espécie. A taxa de transmissão do vírus foi maior com o aumento do número de insetos por planta. E o PAA foi determinado após 15' de tempo para aquisição, e o PAI com 5 min e aumentando os períodos de acesso a aquisição e inoculação aumentou-se a taxa de transmissão.

Molecular and biological characterization of Lettuce mosaic virus (LMV) isolates reveals a distinct and widespread type of resistance-breaking isolate: LMV-Most

Lettuce mosaic virus (LMV) causes an economically important seedborne and aphid-transmitted disease of lettuce and ornamental crops worldwide. The genetic diversity among 73 LMV isolates was examined based on a 216-nucleotide sequence at the variable region encoding the NIb-coat protein junction, Three clusters of LMV isolates were distinguished: LMV-Yar, LMV-Greck, and LMV-RoW. In the latter cluster, two subgroups of isolates, LMV-Common and LMV-Most, accounted for a large proportion of the LMV isolates analyzed. These two subgroups included the seedborne isolates, consistent with this property contributing a selective advantage and resulting in widespread distribution. In addition to being seedborne, LMV-Most isolates overcome the two resistance genes commonly used in lettuce, mol(1) and mol(2), and thus represent a potential threat to lettuce cultivation. The complete sequence of an LMV-Most isolate (LMV-AF199) was determined, allowing a better definition of the genetic relationships among LMV-Most, LMV-Common, and an additional isolate of the LMV-RoW cluster.