995 resultados para Detecção e diagnóstico de avarias
Resumo:
A Leptospirose um problema emergente na Sade Pblica, devido s suas propores epidemiolgicas e pelo aumento da incidncia da doena em pases industrializados e em desenvolvimento (Meites et al., 2004). A doena tem uma ampla distribuio geogrfica e ocorre com maior frequncia nas zonas tropicais, subtropicais e temperadas (Vijayachari et al., 2008). Contudo, em algumas regies desconhece-se a verdadeira prevalncia, sendo reportada atravs de surtos espordicos (Pappas et al., 2007). As manifestaes clnicas inespecficas da infeco podem ser subdiagnosticadas nas regies tropicais, onde as doenas febris so comuns e onde podem ser confundidas com doenas mais conhecidas como a Malria, Hepatite Viral, Dengue e outras. Em Angola, o diagnóstico realizado apenas atravs da histria do paciente e suspeita clnica, dando origem a diagnósticos pouco precisos. Deste modo, importante o uso de mtodos laboratoriais, especialmente testes serolgicos especficos, para a confirmao do diagnóstico clnico (Levett, 2001). O objectivo principal deste estudo foi investigar a ocorrncia de Leptospirose humana em Lobito (Provncia de Benguela) e identificar os serovares circulantes de Leptospira interrogans sensu lato (s.l.), utilizando tcnicas serolgicas e moleculares. Entre Abril e Junho de 2011, aps o necessrio consentimento informado, fez-se um inqurito clnico-epidemiolgico a 141 pacientes (64 homens e 77 mulheres) assistidos no Hospital Geral do Lobito, por cefaleias e febre com diagnóstico desconhecido, dos quais se colheram 141 amostras sricas e 36 amostras de urina. A avaliao serolgica foi inicialmente feita no laboratrio local atravs da Tcnica de Aglutinao Macroscpica sobre Lmina (MACROLepto) teste de rastreio - e, posteriormente confirmada pela Tcnica de Aglutinao Microscpica (TAM) - teste de referncia - realizado no Laboratrio de Leptospirose (IHMT, em Lisboa). Para a detecção de DNA de Leptospira utilizou-se a Reaco da Polimerase em Cadeia (PCR) com primers baseados no gene hap 1. Procedeu-se ainda sequenciao dos produtos da PCR. As principais manifestaes clnicas foram: cefaleias (73,8%), febre (65,2%), mialgias (41,1%) e nuseas (33,3%). Dos dados epidemiolgicos observou-se que 131 dos pacientes tiveram contacto com os principais reservatrios de leptospiras, os roedores, e 76 ingeriram gua no potvel. Os resultados serolgicos revelaram no teste MACROLepto: 14 (10%) amostras positivas e 18 (13%) no-conclusivas, sendo os serogrupos Icterohaemorrhagiae (Copenhageni), Australis (Bratislava) e Sejroe os mais comuns. Destas amostras, cinco, foram confirmadas pela TAM (presena de aglutininas anti L. interrogans s.l.). Paralelamente, o DNA de Leptospira foi detectado em 13+/81 (16%) das amostras sricas e numa amostra de urina. A sequenciao identificou os serovares Copenhageni e Lai, ambos pertencentes ao serogrupo Icterohaemorrhagiae da espcie genmica L. interrogans. Os resultados obtidos mostraram que a maioria dos pacientes, mesmo aqueles que praticavam actividades de menor risco epidemiolgico, tiveram contacto com roedores e com guas no potveis. O estudo tambm provou que a Leptospirose afectou sobretudo as mulheres adultas, admitindo-se que este achado possa ser comum noutras regies do Pas. Por ltimo, ficou demonstrada a existncia de Leptospirose na regio, o que poder contribuir para a incluso da doena na lista de doenas febris em Angola e noutros pases tropicais.
Resumo:
Foram examinadas prospectivamente189 amostras cervicais de mulheres sintomticas e assintomticas. Foram colhidas 2 amostras do canal endocervical, das quais uma foi examinada pela reao de imunofluorescncia direta (IFD) com anticorpo monoclonal (MicroTrak), para verificao da adequao das amostras. A segunda amostra foi inoculada em cultura de clulas McCoy. Uma terceira amostra foi coletada para pesquisa de anticorpos das classes IgG e IgA. A Chlamydia trachomatis foi isolada de 14/166 (8,4%) das mulheres com sintomas e de 3/23 (13%) daquelas sem sintomas. Observamos que as 152 mulheres do grupo sintomtico, com cultura negativa, possuiam sintomas equivalentes. Em relao ao nmero de clulas epiteliais, verificou-se que 13 das 17 (76,5%) amostras endocervicais positivas pela cultura e pela IFD, todas apresentavam mais de 5 clulas. Tomando-se como critrio de positividade ttulos <FONT FACE="Symbol">³</FONT> 1:8, foram detectados anticorpos das classes IgG e/ou IgA especficos para C. trachomatis em 11/189 (64,7%) das 17 mulheres com cultura positiva. Concluses: a) no existe sintoma que seja especfico de infeco por clamdia (p > 0,05); b) a quantidade de clulas epiteliais representariam fator de interferncia na positividade da cultura, sendo, portanto, variveis dependentes (p < 0,001); c) a pesquisa de anticorpos na crvice no poderia ser utilizada como diagnóstico alternativo, pois a sua detecção depende da fase evolutiva da infeco e da resposta imunitria individual.
Resumo:
Relatamos a comparao de quatro metodologias para o diagnóstico da Giardia lamblia em material fecal de crianas, Belm/PA. A Hematoxilina Frrica e o mtodo direto apresentaram menor positividade, enquanto que o Mtodo de Faust continua uma boa escolha para o diagnóstico e o Ensaio imunoenzimtico melhora a qualidade da detecção deste parasito.
Resumo:
De junho a dezembro de 1999, foram coletadas 785 amostras de soro de pacientes com suspeita clnica de dengue e/ou febre amarela. Os pacientes foram atendidos nas unidades de sade distribudas pelas seis mesorregies do Estado do Par, Brasil. As amostras de soro foram testadas pelo mtodo de inibio da hemaglutinao para detecção de anticorpos para Flavivirus e pelo ensaio imunoenzimtico para detecção de imunoglobulina M para dengue e febre amarela. Das amostras coletadas, 563 (71,7%) foram positivas pelo IH, e dentre estas 150 (26,6%) foram positivas pelo ELISA-IgM. O vrus dengue foi responsvel pela maioria das infeces recentes em todas as mesorregies e os casos de febre amarela detectados neste estudo foram restritos s mesorregies Maraj e Sudeste.
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O objectivo deste projeto consiste na elaborao de uma estratgia de comercializao para uma tira de teste electroqumica para detecção quantitativa da concentrao de glucose no sangue, visando o diagnóstico e a monitorizao da diabetes mellitus. O dispositivo baseia-se na tecnologia da microfludica em papel e encontra-se em fase de desenvolvimento laboratorial no Centro de Investigao de Materiais da Universidade Nova de Lisboa (CENIMAT). A estratgia elaborada foi desenvolvida para o mercado mexicano, aps ter sido realizada uma anlise comparativa entre os seis pases do mundo com maior nmero de casos de pessoas portadoras de diabetes mellitus (a China, a ndia, os Estados Unidos da Amrica, o Brasil, a Rssia e o Mxico). A comercializao das tiras de teste neste mercado iniciar em 2016 e depender da criao de uma start-up, a Diagnostic Medical Solutions (DMS), que ser responsvel pelo desenvolvimento das operaes relacionadas com a produo, marketing, atividade jurdica e financeira. Numa primeira fase, a executar em 2015, a DMS estabelecer uma parceria com o centro de investigao CENIMAT com o objectivo de desenvolver a investigao das tiras de teste at garantir o nvel de qualidade necessria para a introduo no mercado. No decorrer deste trabalho realizou-se uma estimativa para o custo de produo das tiras de teste em substrato de papel e props-se um preo de comercializao entre 3 a 5 vezes mais barato que o praticado entre os principais competidores diretos existentes no mercado mexicano. Foi ainda definida uma estratgia de entrada no mercado e, por forma a sustentar todas as operaes comerciais adoptadas, foi elaborado um plano financeiro que reflete o modelo de negcio desenvolvido. O projeto requer um investimento inicial de 400 000, com um perodo de reembolso de, aproximadamente 2 ano e um retorno esperado, aps 6 anos de atividade, 11 vezes superior ao investimento inicial.
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Apesar de sua fundamentao clnico-epidemiolgica, numerosos casos suspeitos de peste nos focos brasileiros tm sido descartados por serem negativos pelo teste de hemaglutinao para detecção de anticorpos contra o antgeno F1 da Yersinia pestis. A transcendncia da peste justifica estudar se tais resultados decorrem da falta de resposta ao F1, e se outras protenas da Yersinia pestis poderiam ser reconhecidas nos soros suspeitos, sendo desta forma candidatas como alvo diagnóstico alternativo ao F1. Assim sendo, cepas de Yersinia pestis e de Yersinia pseudotuberculosis, uma protena YopH recombinante e a F1 foram utilizadas para analisar soros de pacientes e soros imunes de coelhos. A F1 e a YopH no foram reconhecidas pelos soros humanos HA- e nenhuma protena majoritria, comum a todos os soros humanos e coelhos, foi identificada, o que permite concluir que os casos suspeitos devem ser submetidos a uma avaliao clnico-laboratorial mais rigorosa, aprofundando a investigao epidemiolgica em busca de outras etiologias.
Resumo:
Este trabalho teve como objetivo detectar os casos novos de hansenase do perodo de 1998 a 2005 no municpio de Prudentpolis, PR. Assim como, verificar a faixa etria e a forma clnica predominante entre os casos de hansenase. Os dados foram obtidos atravs das fichas clnico-epidemiolgicas de casos com diagnóstico definitivo de hansenase notificado no Sistema de Informao sobre Agravos de Notificao, de 1998 a 2005. Neste perodo, foram relatados 222 casos de hansenase, dos quais 63% apresentavam a forma multibacilar, com predominncia da forma clnica virchowiana, indicando um processo de intensa transmisso da doena. Dos casos de hansenase, 35% dos pacientes se encontravam na faixa economicamente ativa, 31 a 45 anos. Esses indicadores apontam para uma elevada circulao do bacilo na comunidade, j que um fator de risco para infeco pelo bacilo Mycobacterium Leprae o contato com pacientes com a forma multibacilar, sem tratamento, embora nas duas ltimas dcadas, tenha havido reduo drstica da prevalncia da hansenase pela implementao da poliquimioterapia e outras medidas preventivas.
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Este trabalho foi realizado no mbito do projecto Lab on Paper, desenvolvido no Centro de Investigao de Materiais (CENIMAT) da Faculdade de Cincias e Tecnologia da Universidade Nova de Lisboa (FCT - UNL)
Resumo:
Sendo a malria uma doena infecciosa que pe em risco uma elevada percentagem da populao mundial, a presente dissertao apresenta o desenvolvimento de um teste de diagnóstico rpido (RDT) para a detecção da infeco. Para a detecção dos antignios de Plasmodium falciparum (Pf), parasita da malria, foram estudadas nanopartculas de ouro (AuNPs) com dois dimetros mdios diferentes, 17nm e 48nm, funcionalizadas e conjugadas com anticorpos especficos, formando os bionanoconjugados. Este trabalho abrange dois focos de investigao, interligados, de forma a atingir-se o objectivo prosposto: i) Caracterizao fsico-quimica das AuNPs e dos bionanoconjugados em soluo, usando a espectrocopia de UV-Visvel, variando a fora inica e o pH do meio. A compreenso do comportamento e estabilidade das partculas consoante o seu dimetro e revestimento tem em vista o melhoramento do RDT, tanto em sensibilidade como em custo; ii) Desenvolvimento do RDT usando um mtodo que envolve uma ligao competitiva entre o antignio e o anticorpo especfico imobilizado superfcie das AuNPs. Os antignios correspondem a biomarcadores da presena de Pf: Heat Shock Protein 70 (PfHsp70) e Histidine Rich Protein II (PfHRPII). Como superfcies para o desenvolvimento do RDT foram usados a nitrocelulose e o papel de filtro. Quanto maior o dimetro das AuNPs, maior a estabilidade apresentada em soluo quando aumentada a fora inica. Quando variado o valor de pH do meio, as partculas adoptam um comportamento dependente do seu revestimento, independente do dimetro. Os bionanoconjugados formados com AuNPs de ambos os dimetros revelaram-se muito estveis em soluo, numa gama de foras inicas de 0 a 0,5M de cloreto de sdio, e de pH de 2 a 7. Uma vez que a protena Hsp70 produzida constitutivamente em diversas clulas humanas, necessrio trabalhar com protenas especficas da infeco, que nesta dissertao foi a PfHRPII. Foram efectuados testes no suporte de nitrocelulose que provaram o reconhecimento da PfHRPII pelos bionanoconjugados AuNPs-MUA-anti-PfHRPII. Estes ensaios necessitam ainda de algumas optimizaes. Ensaios de Western-Blot permitiram a identificao da presena da PfHRPII em culturas infectadas, bem como a confirmao da sua ligao ao anticorpo especfico, anti-PfHRPII. Um novo mtodo de revelao introduzido nesta tcnica, efectuado atravs do uso dos bionanoconjugados. Este mtodo mostrou-se promissor na medida em que rpido, especfico e de baixo custo. O principal contributo do trabalho consistiu no desenvolvimento, com sucesso, de um RDT para diagnóstico de malria, usando o antignio PfHsp70, tendo como base a detecção colorimtrica com AuNPs de 17nm de dimetro. Usando uma tira de nitrocelulose foi estabelecido um limite de detecção correspondente a 1600parasitas/L, valor este considerado vlido pela OMS para um correcto diagnóstico de malria. O limite de detecção obtido para as AuNPs de 48nm foi superior, no tendo trazido melhorias para o teste desenvolvido com AuNPs de menor dimetro.
Resumo:
O exame de rotina para o diagnóstico da malria continua sendo a gota espessa, apesar da comprovada diminuio da sensibilidade e especificidade em situaes de densidade parasitria baixa e infeces mistas. A reao em cadeia da polimerase vem sendo cada vez mais utilizada para a detecção molecular e identificao das espcies de plasmdio, por apresentar maior sensibilidade e especificidade. Foi realizada a nested-PCR em amostras de sangue total de 344 pacientes com sndrome febril aguda que se apresentaram para o diagnóstico de malria, em uma unidade terciria de sade, em Manaus (Amazonas). Nenhum caso de malria por Plasmodium malariae foi diagnosticado gota espessa ou PCR. Observou-se co-positividade de 96,7%, co-negatividade de 62,2% e coeficiente kappa de 0,44 entre PCR e gota espessa para Plasmodium falciparum. Para Plasmodium vivax, co-positividade de 100%, co-negatividade de 78,1% e coeficiente kappa de 0,56. Na detecção da malria mista, co-positividade de 100%, co-negatividade de 84,9% e coeficiente kappa de 0,26. A reao em cadeia da polimerase detectou alto nmero de infeces mistas nas amostras analisadas, mas seu uso rotineiro no diagnóstico da malria merece ainda ampla discusso.
Resumo:
Avaliou-se um novo meio seletivo-indicador (gar UNISC) para o isolamento de enteropatgenos clssicos e Aeromonas e Plesiomonas shigelloides. A capacidade de fermentao da xilose indicada pela colorao amarela (fermentadores) ou azul (no fermentadores) que, aliada prova da oxidase, constitui-se em indicador para a detecção de Aeromonas spp e Plesiomonas shigelloides. A produtividade e seletividade, avaliadas pelos ndice de contagem absoluta e ndice de contagem relativa indicam-no como uma alternativa aos coprocultivos clssicos porque permite, num s meio, o isolamento de Escherichia coli, Shigella spp, Salmonella spp, bem como, Aeromonas spp e Plesiomonas shigelloides, favorecendo o diagnóstico laboratorial das gastroenterites.
Resumo:
A dactilografia profissional causa problemas a nvel das articulaes dos dedos, mos, pulsos, braos e at mesmo ombros, a quem a exerce. Um deles, o Sndrome do Tnel Crpico, considera-se ser a maior doena ocupacional nos Estados Unidos, responsvel por avultados gastos mdicos ano aps ano. At data, o estudo de causas e consequncias apresentou-se difcil, no havendo uma forma prtica e fivel de registar os movimentos do(a) dactilgrafo(a). O presente trabalho pretendeu desenvolver uma soluo para a detecção e clculo de estatsticas referentes s taxas de utilizao de dedos em dactilografia profissional, com vista a estudos de terapias adequadas. Optou-se pela captao de imagens atravs de uma cmara USB, usando iluminao dedicada para garantir uma intensidade de luz constante e uniforme. Usando esta configurao, so capturadas imagens do teclado no instante em que uma tecla premida. Aps a captura, efectua-se o processamento da imagem para detecção dos dedos. Nos dedos do(a) dactilgrafo(a) colocaram-se autocolantes de vrias cores para identificao. Para a identificao do dedo usou-se um algoritmo de lgica difusa para, atravs dos canais R, G e B da imagem, avaliar qual a cor observada na zona de interesse (tecla premida). Conseguiu-se assim uma eficcia de 91% em modo automtico, podendo este valor chegar aos 100% no modo avanado, que permite a confirmao do utilizador. Existe ainda margem para evoluo com a introduo de uma segunda cmara com um diferente posicionamento para obter outra perspectiva da zona de interesse, aumentando assim as hipteses de correcta identificao.
Resumo:
O diagnóstico da hansenase se baseia em manifestaes clnicas e no existe teste laboratorial para diagnosticar casos assintomticos ou para prever progresso da doena entre indivduos expostos. Novas anlises genmicas comparativas in silico e ferramentas de biologia molecular tm sido empregadas para revelar protenas exclusivas do Mycobacterium leprae que apresentem potencial aplicao diagnstica. A hansenase tuberculide paucibacilar (PB) apresenta baixo nvel de anticorpos e forte resposta imune celular (RIC) tipo Th1/interferon gamma (IFN-γ). A doena lepromatosa multibacilar (MB) apresenta sorologia positiva e fraca RIC. Portanto, testes laboratoriais para diagnosticar hansenase PB e MB devem contemplar testes de RIC e sorologia. Protenas recombinantes do Mycobacterium leprae sorologicamente reativas podem ser incorporadas ao antgeno PGLI para melhorar o diagnóstico sorolgico de pacientes MB. Protenas recombinantes e peptdeos sintticos do Mycobacterium leprae tm sido testados em ensaios de RIC/IFN-γ para diagnosticar casos PB. Sorologia anti-PGLI modificada incorporando novos antgenos do Mycobacterium leprae e ensaios baseados na RIC/produo de IFN-γ devem permitir a detecção precoce de casos MB e PB em pases endmicos.
Resumo:
Mycobacterium tuberculosis o agente etiolgico da tuberculose em humanos e segundo as estimativas da Organizao Mundial da Sade, um tero da populao mundial est infectada com esta bactria, calculando-se que no ano de 2008 aproximadamente 9,4 milhes de pessoas contraram tuberculose activa. Associada a esta tendncia, encontra-se o aumento alarmante da incidncia de tuberculose resistente aos antibiticos, mais propriamente da tuberculose multirresistente e extensivamente resistente. Nesta Dissertao estudaram-se trs sistemas de detecção molecular (INNO-LiPA Rif. TB, Innogenetics, Ghent, Blgica, MTBDRplus e MTBDRsl, GenoType, GmbH, Nehren, Alemanha), que permitem detectar o complexo M. tuberculosis e as mutaes mais comuns associadas resistncia aos antibiticos de primeira e segunda linha. Para o efeito, na primeira parte do trabalho os trs sistemas em estudo foram testados em 21 isolados clnicos pertencentes coleco do Laboratrio de Micobactrias do Instituto de Higiene e Medicina Tropical (IHMT, UNL), com o propsito de avaliar a sua capacidade para identificar o complexo M. tuberculosis e detectar mutaes ligadas resistncia aos frmacos de primeira e segunda linha. Na segunda parte do trabalho, os sistemas INNO-LiPA Rif. TB e MTBDRplus foram testados em 33 amostras respiratrias com baciloscopia positiva, com o propsito de aferir a performance destes sistemas para a detecção directa de tuberculose multirresistente em amostras respiratrias. Na primeira parte do trabalho os trs sistemas em estudo apresentaram elevada sensibilidade na identificao do complexo M. tuberculosis em culturas, bem como na detecção de mutaes ligadas resistncia aos antibiticos de primeira linha, com excepo do etambutol. No que diz respeito detecção da resistncia aos antibiticos de segunda linha, no foi possvel calcular os valores de sensibilidade e especificidade. Na segunda parte do trabalho, o INNO-LiPA Rif. TB demonstrou ser o sistema mais robusto para a anlise directa de amostras respiratrias com baciloscopia positiva, para um diagnóstico precoce de tuberculose e detecção de resistncia rifampicina. O MTBDRplus no se mostrou uma alternativa vivel ao INNO-LiPA Rif. TB, pois apresentou baixa sensibilidade para a identificao do complexo M. tuberculosis e vrios problemas no passo de amplificao. O MTBDRsl no foi testado, por no ter sido detectada nenhuma amostra multirresistente.
Resumo:
Entamoeba histolytica e Giardia lamblia so protozorios com distribuio mundial que frequentemente infectam o Homem, sendo causadores de elevada morbilidade associada com quadros de diarreia. Este estudo consistiu na utilizao de mtodos moleculares na detecção e identificao destes parasitas em amostras de fezes recebidas no Laboratrio de Patologia Tropical do Instituto de Higiene e Medicina Tropical (Lisboa, Portugal), no perodo decorrente entre Setembro de 2007 e Agosto de 2009. . Foi igualmente avaliada a eficcia e custo-benefcio de um mtodo alternativo de conservao para material biolgico fecal o papel de filtro, para subsequente extraco de DNA. Foram analisadas microscopicamente 80 amostras, 23,8 % (19/80) das quais positivas para Giardia e 27,5% (22/80) positivas para Entamoeba spp.. Atravs do mtodo molecular da PCR, amplificou-se com sucesso DNA de Giardia para o gene ssurRNA em 94,7% (18/19) das amostras microscopicamente positivas. No que se refere s amostras positivas por exame microscpico para Entamoeba spp foi detectada E. dispar em 50,0% (11/22) das amostras aps amplificao de parte do gene 16S rRNA. Adicionalmente foi tambm detectado DNA de E. histolytica em 20,0% (4/20) das amostras analisadas, microscopicamente negativas para Entamoeba spp.. Neste estudo realizou-se a genotipagem de G. lamblia utilizando parte dos genes bg (beta-giardina), tpi (triose-fosfato isomerase) e gdh (glutamato desidrogenase), que revelou haver 61,5% (8/13) dos isolados pertencentes ao gentipo B e 38,5% (5/13) do gentipo A. A determinao de subgentipos atravs da anlise de SNPs para os 3 genes s foi possvel para o gene bg do gentipo A, revelando 3 amostras correspondentes ao subgentipo A2 e uma para o subgentipo A3. Para os restantes genes no foi possvel a determinao de subgentipos devido presena de polimorfismos genticos para ambos os gentipos A e B. Realizou-se tambm a anlise filogentica concatenada que apenas permitiu a integrao de trs amostras identificadas com o gentipo A no subgentipo AII. Os resultados obtidos neste trabalho demonstram que a microscopia associada s tcnicas moleculares possibilita a diferenciao das espcies do complexo Entamoeba favorecendo o correcto diagnóstico desta patologia e consequente tratamento. Para alm disso, o uso dos mtodos moleculares contribuiu para o esclarecimento e compreenso dos gentipos de Giardia em humanos. Neste estudo a utilizao do mtodo de conservao, papel de filtro apresentou um menor custo e elevada eficcia em relao aos mtodos normalmente utilizados, conservao a -20C. Sugerindo a sua utilizao com sucesso em estudos epidemiolgicos em especial em zonas endmicas de condies precrias.
