Closed and open grade I and II tibial shaft fractures treated by reamed intramedullary nailing

RESUME Objectif : Le but de cette étude est d'évaluer les résultats du traitement par enclouage centre-médullaire alésé des fractures diaphysaires du tibia aussi bien fermées que pour les fractures ouvertes de stade I et II selon Gustillo. Méthodes: Entre 1997 et 2000, 119 patients présentant une fracture diaphysaire du tibia ont été traités dans notre service par un enclouage centre-médullaire alésé. En postopératoire, 96 patients, soit 70 fractures fermées et 26 fractures ouvertes I et II selon Gustillo, ont été suivis cliniquement et radiologiquement pour une période de plus d'une année et demi. L'introduction du clou centro-médullaire a été faite selon la technique habituelle, soit transtendineuse ou paratendineusé rotulienne. Tous les clous ont été alésés jusqu'à 1,5 mm au-dessus du diamètre du clou. Les patients ayant une fracture isolée du tibia ont été immédiatement mobilisés en charge partielle pour une période de 6 semaines. Ceux qui avaient des lésions associées, notamment au niveau de la cheville épsilatérale, ont nécessité la mise en place d'un plâtre de Type Sarmiento. Résultats : Six patients (6,3%) ont développé un syndrome des loges après chirurgie. Quarante-huit cas (50%) ont nécessité une dynamisation du clou après une période moyenne de 12 semaines en raison d'un retard de consolidation. En général, 90,6% des fractures ont consolidé après 24 semaines postopératoires en moyenne, sans aucune différence significative entre les fractures fermées et les fractures ouvertes. Deux patients (2,1 %) présentant une fracture ouverte degré II ont développé une infection profonde ayant nécessité un traitement. Nous avons également observé 9,4% de cals vicieux minimes et sans conséquence clinique. Huit patients (8,3%) ont eu une brisure des vis de .verrouillage mais également sans conséquence clinique. Au dernier contrôle, 52% des patients, dont ('introduction du clou s'est faite en transtendineux ont des douleurs antérieures du genou contre 14% parmi ceux où l'introduction était paratendineuse. Conclusion : L'enclouage centre-médullaire reste le traitement de choix pour les fractures diaphysaires du tibia, qu'elles soient fermées ou ouvertes degré I ou II selon Gustillo.

Resistance to nucleoside analog reverse transcriptase inhibitors mediated by human immunodeficiency virus type 1 p6 protein.

Resistance of human immunodeficiency virus type 1 (HIV-1) to antiretroviral agents results from target gene mutation within the pol gene, which encodes the viral protease, reverse transcriptase (RT), and integrase. We speculated that mutations in genes other that the drug target could lead to drug resistance. For this purpose, the p1-p6(gag)-p6(pol) region of HIV-1, placed immediately upstream of pol, was analyzed. This region has the potential to alter Pol through frameshift regulation (p1), through improved packaging of viral enzymes (p6(Gag)), or by changes in activation of the viral protease (p6(Pol)). Duplication of the proline-rich p6(Gag) PTAP motif, necessary for late viral cycle activities, was identified in plasma virus from 47 of 222 (21.2%) patients treated with nucleoside analog RT inhibitor (NRTI) antiretroviral therapy but was identified very rarely from drug-naïve individuals. Molecular clones carrying a 3-amino-acid duplication, APPAPP (transframe duplication SPTSPT in p6(Pol)), displayed a delay in protein maturation; however, they packaged a 34% excess of RT and exhibited a marked competitive growth advantage in the presence of NRTIs. This phenotype is reminiscent of the inoculum effect described in bacteriology, where a larger input, or a greater infectivity of an organism with a wild-type antimicrobial target, leads to escape from drug pressure and a higher MIC in vitro. Though the mechanism by which the PTAP region participates in viral maturation is not known, duplication of this proline-rich motif could improve assembly and packaging at membrane locations, resulting in the observed phenotype of increased infectivity and drug resistance.

Increased plasma levels of N-terminal brain natriuretic peptide (NT-proBNP) in type 2 diabetic patients with vascular complications

Résumé : Les concentrations plasmatiques du peptide natriurétique de type B sont augmentées chez les diabétiques de type 2 atteints de complications vasculaires. But : Les concentrations plasmatiques du peptide natriurétique de type B (NT-proBNP) sont augmentées chez les diabétiques de type 2 atteints de complications vasculaires. Les concentrations plasmatiques du peptide natriurétique de type B (BNP), ou de sa pro-hormone (NT-proBNP), sont reconnues depuis peu comme marqueur de choix de la dysfonction cardiaque. Les diabétiques de type 2 sont à haut risque de développer des complications cardiovasculaires. L'objectif de cette étude a été de déterminer si les concentrations plasmatiques de NT-proBNP étaient comparables chez des diabétiques de type 2 avec ou sans complications vasculaires. Méthodes : Nous avons mesuré le NT-proBNP plasmatique chez 54 diabétiques de type 2, 27 sans complications micro- ou macrovasculaires et 27 présentant des complications soit micro- soit macrovasculaires, soit les deux. Le même dosage a été effectué chez 38 témoins sains, appariés pour l'âge et le sexe avec les diabétiques. Résultat : Le NT-proBNP plasmatique était plus élevé chez les diabétiques avec complications (médiane 121 pg/ml, intervalle interquartile 50-240 pg/ml) que chez ceux sans complications (37 pg/ml, 21-54 pg/ml, P < 0,01). Comparés au groupe témoin (55 pg/ml, 40-79 pg/ml), seuls les diabétiques avec complications vasculaires avaient un NT-proBNP plasmatique significativement augmenté (P < 0,001). Chez les diabétiques la maladie coronarienne et la néphropathie (définie selon l'excrétion urinaire d'albumine) étaient chacune associée de façon indépendante avec une augmentation des concentrations plasmatiques de NT-proBNP. Conclusion : Chez les diabétiques de type 2 souffrant de complications micro- ou macrovasculaires, les concentrations plasmatiques de NT-proBNP sont augmentées par rapport à celles des malades indemnes de complications vasculaires. L'augmentation de sécrétion de ce peptide est associée de façon indépendante avec la maladie coronarienne et la néphropathie. La mesure du NT-proBNP plasmatique pourrait donc être utile pour dépister la présence de complications micro- ou macrovasculaires.

Implication of TNF family members in the immune response to the infection with the intracellular protozoan parasite "Leishmania major"

Suite à une infection avec le protozoaire Leishmania major (L. major), les souris sensibles de souche BALB/c développent des lésions progressives associées à une maturation des cellules CD4+ TH2 sécrétant de l'IL-4. A l'inverse, les souris résistantes de souche C57BL/6 guérissent à terme, sous l'influence de l'expansion des cellules CD4+ TH1 produisant de l'IFNy qui a un effet synergique avec le TNF ("tumor necrosis factor") sur l'activation des macrophages et leur fonction leishmanicide. Lors de notre étude nous avons montré que des souris C57BL/6 doublement déficientes en TNF et FasL ("Fas ligand") infectées par L. major ne guérissaient ni leur lésions ni ne contrôlaient la réplication de parasites malgré une réponse de type TH1. Bien que l'activité de synthétase inductible de l'oxyde nitrique ("iNOs") soit comparable chez les souris doublement ou simplement déficientes, seules celles déficientes en FasL ont démontré une incapacité à contrôler la réplication parasitaire. De surcroît il est apparu que le FasL a un effet synergique avec l'IFNy. L'adjonction de FasL à une culture cellulaire de macrophages stimulés par l'IFNy conduit à une activation de ces cellules. Celle-ci est démontrée par l'augmentation de la production de TNF et de NO par les macrophages ainsi que par l'élimination des parasites intracellulaires par ces mêmes cellules. Alors que le FasL et l'IFNy semblent essentiels au contrôle de la réplication des pathogènes intracellulaires, la contribution de TNF s'oriente davantage vers le contrôle de l'inflammation. L'activation macrophagique via Fas précède la mort cellulaire qui survient quelques jours plus tard. Cette mort cellulaire programmée était indépendante de la cascade enzymatique des caspases, au vu de l'absence d'effet de l'inhibiteur non-spécifique ZVAD-fmk des caspases. Ces résultats suggèrent que l'interaction Fas-FasL agit comme une costimulation nécessaire à une activation efficace des macrophages, la mort cellulaire survenant consécutivement à l'activation des macrophages.¦-¦Upon infection with the protozoan parasite Leishmania major (L. major), susceptible BALB/c mice develop non healing lesions associated with the maturation of CD4+ TH2 cells secreting IL-4. In contrast, resistant C57BL/6 mice are able to heal their lesions, because of CD4+ TH1 cell expansion and production of high levels of IFNy, which synergizes with tumour necrosis factor (TNF) in activating macrophages to their microbicidal state. In our study we showed that C57BL/6 mice lacking both TNF and Fas ligand (FasL) infected with L. major neither resolved their lesions nor controlled L. major replication despite a strong TH1 response. Although comparable inducible nitric oxide synthase (iNOs) was measured in single or double deficient mice, only mice deficient in FasL failed to control the parasite replication. Moreover FasL synergized with IFNy for the induction of leishmanicidal activity within macrophages infected with L. major in vitro. Addition of FasL to IFNy stimulated macrophages led to their activation, as reflected by the secretion of tumour necrosis factor and nitrite oxide, as well as the induction of their microbicidal activity, resulting in the killing of intracellular L. major. While FasL along with IFNy and iNOs appeared to be essential for the complete control of intracellular pathogen replication, the contribution of TNF appeared more important in controlling the inflammation on the site of infection. Macrophage activation via Fas pathway preceded cell death, which occurred a few days after Fas mediated activation. This program cell death was independent of caspase enzymatic activities as revealed by the lack of effect of ZVAD-fmk, a pan-caspase inhibitor. These results suggested that the Fas-FasL pathway, as part of the classical activation pathway of the macrophages, is essential in the stimulation of macrophage leading to a microbicidal state and to AICD, and may thus contribute to the pathogenesis of L. major infection.

Catalytic and anticancer activities of sawhorse-type diruthenium tetracarbonyl complexes derived from fluorinated fatty acids

The reaction of fluorinated fatty acids, perfluorobutyric acid (C3F7CO2H), and perfluorododecanoic acid (C11F23CO2H), with dodecacarbonyltriruthenium (Ru-3(CO)(12)) under reflux in tetrahydrofuran, followed by addition of two-electron donors (L) such as pyridine, 1,3,5-triaza-7-phosphatricyclo[3.3.1.1]decane, or triphenylphosphine, gives stable diruthenium complexes Ru-2(CO)(4)((2)-(2)-O2CC3F7)(2)(L)(2) (1a, L=C5H5N; 1b, L=PTA; 1c, L=PPh3) and Ru-2(CO)(4)((2)-(2)-O2CC11F23)(2)(L)(2) (2a, L=C5H5N; 2b, L=PTA; 2c, L=PPh3). The catalytic activity of the complexes for hydrogenation of styrene under supercritical carbon dioxide has been assessed and compared to the analogous triphenylphosphine complexes with non-fluorinated carboxylato groups Ru-2(CO)(4)((2)-(2)-O2CC3H7)(2)(PPh3)(2) (3) and Ru-2(CO)(4)((2)-(2)-O2CC11H23)(2)(PPh3)(2) (4). In addition, the cytotoxicities of the fluorinated complexes 1 were also evaluated on several human cancer cell lines (A2780, A549, Me300, HeLa). The complexes appear to be moderately cytotoxic, showing greater activity on the Me300 melanoma cells. Single-crystal X-ray structure analyses of 1a and 3 show the typical sawhorse-type arrangement of the diruthenium tetracarbonyl backbone with two bridging carboxylates and two terminal ligands occupying the axial positions.

A 338-bp proximal fragment of the glucose transporter type 2 (GLUT2) promoter drives reporter gene expression in the pancreatic islets of transgenic mice.

The high Km glucose transporter GLUT2 is a membrane protein expressed in tissues involved in maintaining glucose homeostasis, and in cells where glucose-sensing is necessary. In many experimental models of diabetes, GLUT2 gene expression is decreased in pancreatic beta-cells, which could lead to a loss of glucose-induced insulin secretion. In order to identify factors involved in pancreatic beta-cell specific expression of GLUT2, we have recently cloned the murine GLUT2 promoter and identified cis-elements within the 338-bp of the proximal promoter capable of binding islet-specific trans-acting factors. Furthermore, in transient transfection studies, this 338-bp fragment could efficiently drive the expression of the chloramphenicol acetyl transferase (CAT) gene in cell lines derived from the endocrine pancreas, but displayed no promoter activity in non-pancreatic cells. In this report, we tested the cell-specific expression of a CAT reporter gene driven by a short (338 bp) and a larger (1311 bp) fragment of the GLUT2 promoter in transgenic mice. We generated ten transgenic lines that integrated one of the constructs. CAT mRNA expression in transgenic tissues was assessed using the RNAse protection assay and the quantitative reverse transcribed polymerase chain reaction (RT-PCR). Overall CAT mRNA expression for both constructs was low compared to endogenous GLUT2 mRNA levels but the reporter transcript could be detected in all animals in the pancreatic islets and the liver, and in a few transgenic lines in the kidney and the small intestine. The CAT protein was also present in Langerhans islets and in the liver for both constructs by immunocytochemistry. These findings suggest that the proximal 338 bp of the murine GLUT2 promoter contain cis-elements required for the islet-specific expression of GLUT2.

New genetic loci implicated in fasting glucose homeostasis and their impact on type 2 diabetes risk.

Levels of circulating glucose are tightly regulated. To identify new loci influencing glycemic traits, we performed meta-analyses of 21 genome-wide association studies informative for fasting glucose, fasting insulin and indices of beta-cell function (HOMA-B) and insulin resistance (HOMA-IR) in up to 46,186 nondiabetic participants. Follow-up of 25 loci in up to 76,558 additional subjects identified 16 loci associated with fasting glucose and HOMA-B and two loci associated with fasting insulin and HOMA-IR. These include nine loci newly associated with fasting glucose (in or near ADCY5, MADD, ADRA2A, CRY2, FADS1, GLIS3, SLC2A2, PROX1 and C2CD4B) and one influencing fasting insulin and HOMA-IR (near IGF1). We also demonstrated association of ADCY5, PROX1, GCK, GCKR and DGKB-TMEM195 with type 2 diabetes. Within these loci, likely biological candidate genes influence signal transduction, cell proliferation, development, glucose-sensing and circadian regulation. Our results demonstrate that genetic studies of glycemic traits can identify type 2 diabetes risk loci, as well as loci containing gene variants that are associated with a modest elevation in glucose levels but are not associated with overt diabetes.

A mutation causing pseudohypoaldosteronism type 1 identifies a conserved glycine that is involved in the gating of the epithelial sodium channel.

Pseudohypoaldosteronism type 1 (PHA-1) is an inherited disease characterized by severe neonatal salt-wasting and caused by mutations in subunits of the amiloride-sensitive epithelial sodium channel (ENaC). A missense mutation (G37S) of the human ENaC beta subunit that causes loss of ENaC function and PHA-1 replaces a glycine that is conserved in the N-terminus of all members of the ENaC gene family. We now report an investigation of the mechanism of channel inactivation by this mutation. Homologous mutations, introduced into alpha, beta or gamma subunits, all significantly reduce macroscopic sodium channel currents recorded in Xenopus laevis oocytes. Quantitative determination of the number of channel molecules present at the cell surface showed no significant differences in surface expression of mutant compared with wild-type channels. Single channel conductances and ion selectivities of the mutant channels were identical to that of wild-type. These results suggest that the decrease in macroscopic Na currents is due to a decrease in channel open probability (P(o)), suggesting that mutations of a conserved glycine in the N-terminus of ENaC subunits change ENaC channel gating, which would explain the disease pathophysiology. Single channel recordings of channels containing the mutant alpha subunit (alphaG95S) directly demonstrate a striking reduction in P(o). We propose that this mutation favors a gating mode characterized by short-open and long-closed times. We suggest that determination of the gating mode of ENaC is a key regulator of channel activity.