双峰驼线粒体DNA地高辛标记探针的制备及其应用

利用地高辛标记技术，对从双峰驼肝脏和肾脏提纯的线粒体ＤＮＡ进行了标记，制成探针，并用它检测了包含于白细胞总ＤＮＡ中的微量线粒体ＤＮＡ。结果表明这一技术完全可以成功地用于微量线粒体ＤＮＡＲＦＬＰ的分析。

四川省四大地方品种猪的随机扩增多态DNA分析

使用２１种随机引物，对四川省四个地方猪品种共１８个个体进行了随机扩增多态ＤＮＡ（ＲＡＰＤ）分析。结果表明：ＲＡＰＤ标记具有个体特异性，其多态总频率为７８．４％；品种内遗传变异的大小顺序依次为荣昌猪、内江猪、雅南猪和成华猪；内江猪、雅南猪和成华猪间的亲缘关系较近，而荣昌猪与这三个品种的亲缘关系却较远。研究结果与这四个品种的地理分布状况和品种形成历史间存在一致性

蜂猴(Nycticebus coucang)和树鼩(Tupaia belangeri chinensis)mt DNA 10种限制酶物理图谱

本研究用10种限制性内切酶对蜂猴和树鼩肝脏线粒体DNA进行了分析. 蜂猴线粒体DNA, BglⅠHind Ⅲ、PstⅠ、SalⅠ和XhoⅠ均各只1个切点、EcoRⅠ、BglⅡ和Pvu Ⅱ各有2切点, BamHⅠ和 EcoRⅤ 分别有3个切点. 对于树鼩线粒体 DNA, BglⅡ、Hind Ⅲ、PstⅠ、SalⅠ和 XhoⅠ均只1个切点, BamHⅠBglⅠ和 PvuⅡ 分别有2个切点, EcoRⅠ 有3个切点, EcoRⅤ有4个切点. 根据单酶和双酶解片段的数目和分子量, 建立了蜂猴和树鼩线粒体 DNA 的物理图谱。

大熊猫线粒体DNA的九种限制酶图谱

用9种限制性内切酶分析大熊猫的线粒体DNA(mtDNA)。构建其中5种酶(BamHI 、EcoRI、EcoR V、Ps+I、PvuⅡ)的mtDNA物理图谱。大熊猫mtDNA的分子大小约 为16.4kb, 酶切位点是随机 分布的。图3表2参15

动物线粒体DNA多态性的研究概况

概述了动物线粒体基因组的结构特点、mtDNA多态分析方法、mtDNA多态研究在进化生物学及分类学中的意义和动物mtDNA的多态。表1参41

猴脑线粒体DNA提取及限制性内切酶分析

用冷碱法从2只恒河猴和1只食蟹猴的脑组织中提取mtDNA, 最后的得率大约 为0.7μg mtDNA/g脑组织, 是肝脏组织得率的1/3左右。经16 种限制性内切酶分 析, 并与来自同一个体肝脏组织的mtDNA比较, 结果进一步证实, mtDNA无组织 特异性。对12岁以上老年猴脑mtDNA的分 析表明, 在衰老中, 动物mtDNA的序列 可能没有变化, 甲基化程度也无显著增高。图2参4

黑叶猴和灰叶猴的线粒体DNA限制性片段长度多态研究

以15种限制性内切酶分析黑叶猴和灰叶猴种内及种间m+DNA多态。从各个样品中分别检出了41—50个酶切位点。综合15种限制性内切酶的酶切类型, 在2只黑叶猴和2只灰叶猴中分别检出了两种限制性类型, 并与其4个地理来源相对应。结合恒河猴和红面猴的资料, 构建了4种猴科动物的分子系统树。结果表明, 黑叶猴和灰叶猴种的分歧分别始于30和35万年以前, 两种叶猴的分离始于190万年以前, 猴亚科和疣猴亚科的分离应早于1100万年。叶猴属在中国的 扩散不是很晚才发生的。图2表2参15

从DNA序列到物种树

DNA不仅是主要的遗传物质, 同时也是生物进化史的重要记录者。通过DNA序列分析研究生物的进化历程、确定物种间的进化关系至少有三大优越性。因此, DNA序列分析已成为生物系统与演化研究中最重要与最热门的工具之一, 并取得令人瞩目的结果。

马来熊的 DNA 序列分析与遗传多样性研究

马来熊在 IUCN 红皮书中被列为受胁动物, 其保护受到广泛的关注. 该文研究４只马来熊的线粒体 DNA 序列, 其中１只来自云南, 其余３只产地不详, 但来自不同的搜集渠道. 对于每个个体, 作者测定了 397bp 的细胞色素ｂ基因、346bp 的12S rRNA基因、98bp 的 tRNA 基因和333bp 的Ｄ环区序列, 共计1174bp. 经与黑犀牛序列比较, 发现 RNA 基因的空间结构对基因的进化有显著影响, 环区的进化明显快于茎区的. 对于细胞色素ｂ基因、12S rRNA基因和 tRNA 基因, 在马来熊个体间未发现序列变异. 这一结果提示, 马来熊群体的遗传变异程度低. 在D环区, 有13和1个位点分别出现转换和颠换. 根据D环区序列, 作者采用简约法确定了马来熊群体间的进化关系. 作者的结果表明, 线粒体 DNA 的D环区是研究马来熊群体遗传结构十分有效的遗传结构十分有效的遗传标记。

金丝猴属的DNA序列变异及进化与保护遗传学研究

测定了2只川金丝猴、8只滇金丝猴、1只越南金丝猴和1只灰叶猴的253bp的线粒体细胞色素b基因的序列。其中47个位点(19%)检出变异。建立了一系列的分子系统树,得到相同的拓扑结构,从而可能在分子水平澄清了金丝猴属的系统发育。结果表明,云南金丝猴与越南金丝猴间的关系较与川金丝猴的为近。金丝猴的分化大约发生在2-6百万年以前。这3种金丝猴均是独立的种,且都应归入金丝猴属。对8只来自野外的滇金丝猴(其中包括了昆明动物研究所圈养群体的所有6只创立者)的非损性遗传分析提示,编号为YK2的母猴是维持该圈养群体遗传多样性的关键猴。建立的这种非损伤性遗传分析方法广泛适用于珍稀濒危动物的遗传多样性及遗传管理研究。

人胎盘线粒体DNA提取方法的探讨

介绍一种人胎盘DNA的碱变性提取法。并对提取过程中应注意的问题和解决方法进行了分析和讨论。

长臂猿的DNA序列进化及其系统发育研究

测定了来自白眉长臂猿、黑冠长臂猿、白手长臂猿合趾长臂猿352-399bp的线粒体细胞色素b基因的序列。发现自然选择对该基因ＤＮＡ序列水平的进化具有显著的影响。结合前人的序列,构建了系统的长臂猿分子系统树。结果表明,长臂猿属可分为4组:(1)白眉长臂猿组,仅一个种;(2)合趾猿组,仅合趾猿一个种;(3)白手长臂猿组,包括白手长臂猿、敏长臂猿、穆氏长臂猿、黑帽长臂猿和克氏长臂猿;(4)黑冠长臂猿组,包括黑冠长臂猿。对应于形态学上的4个亚属。黑冠长臂猿亚种间的遗传分化程度显著高于白手长臂猿亚属种间的分化程度。结果提示,黑冠长臂猿可能至少应分为4个种,它们在保护上具有同等重要的地位,应分别加以保护。

山羊品种间线粒体DNA限制性片段长度多态性研究

该试验利用 Apal，BamHI，BclI，BglI，BglⅡ，DraI，EcoRI，EcoRV，HaeⅡ，HindⅢ, KpnI，PstI，PvuⅡ，SacI，SalI，SmaI 和 X hoI 计18种限制性内切酶, 研究了来自欧洲、非洲及国内的5个山羊品种共计33只个体的 mtDNA, 共检测出27种限制性态型，可归结为8种单倍型. 结果表明, 国内2个山羊品种的基本单倍型为 BamHl-A, Bcl, I-B, ClaI-A, EcoRI-A, EcoRV- A, HaeIIA, HindIII-C和PvuⅡ-A, 以及为 BamHl-A,BcII-A,ClaI-A, EcoRI-A, EcoRV-A, HaeⅡ-A, HindIII-C和PvuⅡ-A.II一A, 而欧洲及非洲3个山羊品种基本的单倍型为BamHl-B, BcII-A, ClaI-A, EcoRI-A, EcoRV-A, HaeⅡ-A, HindIII-B和PvuⅡ-A，这一结果提示本研究几个受试山羊品种可能有两种不同的母系来源; 同时, 各品种的分子聚类图也表明国内2个山羊品种间具有较近的亲缘关系, 而欧洲品种和非洲3个品种间的亲缘关系较近, 这一结果也支持上述几个受试山羊品种可能有不同野生祖先的结论, 同时也验证了欧洲品种萨能羊曾引入过奴比羊的事实。

大熊猫DNA序列变异及其遗传多样性研究

测定了来自马边、美姑、越西、宝兴、平武、青川、南坪和白水江等地４０只大熊猫３３６－４４４ｂｐ的线粒体ｔＲＮＡ基因和Ｄ环区序列，在２１外创立者中共检出９种线粒体ＤＮＡ单倍型，发现大熊猫的遗传分化程度很低，地理群体间无显著的遗传隔离，大熊猫现生群体可能源于晚更新世，并受瓶颈效应的影响，在此之后，其遗传多样性得到了一定程度的恢复。