Characterization of the role of Rho activating signalling complexes in G protein-coupled receptor induced cardiac fibrosis

Dans certaines conditions pathologiques, telles que l'hypertension artérielle ou l'infarctus du myocarde, le coeur répond à une augmentation de la post-charge par des processus de remodelage aboutissant à une hypertrophie du ventricule gauche. L'hypertrophie cardiaque est caractérisée par une croissance hypertrophique des cardiomyocytes, ainsi que par une différenciation des fibroblastes en un phenotype présentant une capacité accrue de synthèse protéiques, nommés myofibroblastes. Ceci résulte en une accumulation excessive des constituants de la matrice extracellulaire, ou autrement dit fibrose. En raison de son effet délétère sur la contractilité du coeur, menant sur le long terme à une insuffisance cardiaque, de nombreux efforts ont été déployés, afin de définir les mécanismes moléculaires impliqués dans la réponse profibrotique. A ce jour, de nombreuses études indiquent que la petite GTPase RhoA pourrait être un médiateur important de la réponse profibrotique du myocarde. Cependant, les facteurs d'échanges impliqués dans la transduction de signaux profibrotiques, via la régulation de son activité au niveau des fibroblastes cardiaques, n'ont pas encore été identifiés. De précédentes études menées dans le laboratoire, ont identifiées une nouvelle protein d'ancrage de la PKA, exprimée majoritairement dans le coeur, nommée AKAP-Lbc. Il a été montré que cette protéine, en plus de sa fonction de protein d'ancrage, possédait une activité de facteur d'échange de nucléotide guanine (GEF) pour la petite GTPase RhoA. Au niveau des cardiomyocytes, il a été montré que l'AKAP-Lbc participe à une voie de signalisation pro-hypertrophique, incluant la sous-unité alpha de la protéine G hétérotrimerique G12 et RhoA. Chose intéressante, des observations antérieures à cette étude, indiquent que dans le coeur, l'AKAP-Lbc est également exprimée dans les fibroblastes. Cependant aucunes études n'a encore reporté de fonction pour ce facteur d'échange dans les fibroblastes cardiaques. Dans ce travail, les résultats obtenus indiquent que dans les fibroblastes cardiaques, I'activation de RhoA par l'AKAP-Lbc est impliquée dans la transmission de signaux profibrotiques, en aval des récépteurs à l'angiotensine II. En particulier, nous avons observé que la suppression de l'expression de l'AKAP-Lbc dans les fibroblastes ventriculaires de rat adultes, réduisait fortement Γ activation de Rho induite par l'angiotensine II, la déposition de collagène, la capacité migratoire des fibroblastes ainsi que leur différenciation en myofibroblastes. A notre connaissance, l'AKAP-Lbc est le premier RhoGEF identifié comme médiateur de la réponse profibrotique dans les fibroblastes cardiaques. - In pathological conditions such as chronic hypertension or myocardial infarction, the myocardium is subjected to various biomechanical and biochemical stresses, and undergoes an adverse ventricular remodelling process associated with cardiomyocytes hypertrophy and excess deposition of extracellular matrix proteins resulting in fibrosis. During the fibrotic response, cardiac fibroblasts differentiate into a more mobile and contractile phenotype termed myofibroblasts. These cells, possess a greater synthetic ability to produce ECM proteins and have been implicated in diseases with increased ECM deposition including cardiac fibrosis. Because fibrosis impairs myocardial contractility and is associated with the progression to heart failure, a major cause of lethality worldwide, many efforts have been made to define the molecular players involved in this process. During these last years, increasing evidence suggests a role for the small GTPase RhoA in mediating the fibrotic response in CFbs. However the identity of the exchange factors that modulate its activity and transduce fibrotic signals in CFbs is still unknown. Earlier work in our laboratory identified a novel PKA anchoring protein expressed in the heart termed AKAP-Lbc that has been shown to function as anchoring protein as well as a guanine nucleotide exchange factor (GEF) for the small GTPase RhoA. In response to several hypertrophic stimuli we have shown that RhoGEF activity of AKAP-Lbc mediated by Gan promotes the activation of a signaling pathway including RhoA, leading to cardiomyocytes hypertrophy. Within the heart, previous observations made in the laboratory indicated that AKAP-Lbc was also expressed in fibroblasts. However its role in cardiac fibroblasts remained to be determined. In the present study, we show that AKAP-Lbc is critical for activating RhoA and transducing profibrotic signals downstream of angiotensin II receptors in cardiac fibroblasts. In particular, our results indicate that suppression of AKAP-Lbc expression by infecting adult rat ventricular fibroblasts with lentiviruses encoding AKAP-Lbc specific short hairpin RNAs strongly reduces angiotensin II-induced RhoA activation, collagen deposition as well as cell migration and differentiation. These findings identify AKAP-Lbc as the first Rho-guanine nucleotide exchange factor involved in a profibrotic signalling pathway at the level of cardiac fibroblasts.

The wound watch: an objective staging system for wounds in the diabetic (db/db) mouse model.

As in cancer biology, in wound healing there is a need for objective staging systems to decide for the best treatment and predictors of outcome. We developed in the diabetic (db/db) wound healing model, a staging system, the "wound watch," based on the quantification of angiogenesis and cell proliferation in open wounds. In chronic wounds, there is often a lack of cellular proliferation and angiogenesis that leads to impaired healing. The wound watch addresses this by quantifying the proliferative phase of wound healing in two dimensions (cellular division and angiogenesis). The results are plotted in a two-dimensional graph to monitor the course of healing and compare the response to different treatments.

[Illustrations de Discours sur les monuments publics] / J. Molinos, J.G. Legrand, dess. ; Poulleau, grav. ; Armand-Guy-Simon de Coetnempren, Comte de Kersaint, aut. du texte

Comprend : [ Planche 1 ] Pritanée de la 1ère classe. [ Monument public républicain. XVIIIè siècle.] Dessinée par J. Molinos et Le Grand. Gravée par Poulleau. 1791. [ Cote : BNF C 103551. ] ; [ Planche 2. ] Pritanée de 2ème classe. [ Monument public républicain. XVIIIè siècle.] Dessinée par J. Molinos et Le Grand, gravée par Poulleau, 1791. [ Cote : BNF C 103552. ] ; [ Planche 3. ] Printanée de la 3ème classe. [ Monument public républicain. XVIIIè siècle.] Dessinée par J. Molinos et Le Grand, 1791. Gravée par Poulleau. [ Cote : BNF C 103553. ] ; [ Planche 4. ] Projet de pritanée à élever sur les ruines de la Bastille. [ Monument public républicain. XVIIIè siècle.] Dessinée par J. Molinos et Le Grand, 1791. Gravée par Poulleau. [ Cote : BNF C 103554. ] ; [ Planche 5. ] Projet d'une salle pour l'Assemblée Nationale dans les nouvelles constructions destinées à la Madeleine de la Ville l'Evêque. [ Monument public républicain. XVIIIè siècle.] Dessinée par J. Molinos et Le Grand, 1791. [ Cote ; [ Planche 6. ] Elévation du Palais National. [ Monument public républicain. XVIIIè siècle.] Dessinée par Le Grand et J.Molinos, 1791. Gravée par Poulleau. [ Cote : BNF C 103556. ] ; [ Planche 7. ] Plan général du Palais National. [ Monument public républicain. XVIIIè siècle.] Dessinée par Molinos et Le GRand, 1791. Gravée par Poulleau. [ Cote : BNF C 103557. ] ; [ Planche 8. ] Coupe de la longueur du Palais National. [ Monument public républicain. XVIIIè siècle.] Dessinée par Molinos et Le Grand. Gravée par Poulleau. [ Cote : BNF C 103558. ] ; [ Planche 9. ] Projet du Cirque National. [ Monument public républicain. XVIIIè siècle.] Dessinée par Molinos et Le Grand, 1791. Gravée par Poulleau. [ Cote : BNF C 103559. ] ; [ Planche 10. ] Projet du Museum, [ ancien Palais du Louvre. Monument public républicain. XVIIIè siècle.] Dessinée par Molinos et Le Grand, 1791. Gravée par Poulleau. [ Cote : BNF C 103560. ] ; [ Planche 11. ] Distribution du Louvre pour l'Institut National. [ Monument public républicain. XVIIIè siècle.] Dessinée par Molinos et Le Grand, 1791. Gravée par Poulleau. [ Cote : BNF C 103561. ] ; [ Planche 12. ] Plan général du Louvre et des Tuileries [ vers 1791. ] Dessinée par Molinos et Le Grand, 1791. [ Cote : BNF C 103562. ]

Synchronizability of EEG-Based Functional Networks in Early Alzheimer's Disease.

Recently graph theory and complex networks have been widely used as a mean to model functionality of the brain. Among different neuroimaging techniques available for constructing the brain functional networks, electroencephalography (EEG) with its high temporal resolution is a useful instrument of the analysis of functional interdependencies between different brain regions. Alzheimer's disease (AD) is a neurodegenerative disease, which leads to substantial cognitive decline, and eventually, dementia in aged people. To achieve a deeper insight into the behavior of functional cerebral networks in AD, here we study their synchronizability in 17 newly diagnosed AD patients compared to 17 healthy control subjects at no-task, eyes-closed condition. The cross-correlation of artifact-free EEGs was used to construct brain functional networks. The extracted networks were then tested for their synchronization properties by calculating the eigenratio of the Laplacian matrix of the connection graph, i.e., the largest eigenvalue divided by the second smallest one. In AD patients, we found an increase in the eigenratio, i.e., a decrease in the synchronizability of brain networks across delta, alpha, beta, and gamma EEG frequencies within the wide range of network costs. The finding indicates the destruction of functional brain networks in early AD.