Hepatic expression of mature transforming growth factor beta 1 in transgenic mice results in multiple tissue lesions.

Aberrant expression of transforming growth factor beta 1 (TGF-beta 1) has been implicated in a number of disease processes, particularly those involving fibrotic and inflammatory lesions. To determine the in vivo effects of overexpression of TGF-beta 1 on the function and structure of hepatic as well as extrahepatic tissues, transgenic mice were generated containing a fusion gene (Alb/TGF-beta 1) consisting of modified porcine TGF-beta 1 cDNA under the control of the regulatory elements of the mouse albumin gene. Five transgenic lines were developed, all of which expressed the Alb/TGF-beta 1 transgene selectively in hepatocytes. The transgenic line 25 expressing the highest level of the transgene in the liver also had high (> 10-fold over control) plasma levels of TGF-beta 1. Hepatic fibrosis and apoptotic death of hepatocytes developed in all the transgenic lines but was more pronounced in line 25. The fibrotic process was characterized by deposition of collagen around individual hepatocytes and within the space of Disse in a radiating linear pattern. Several extrahepatic lesions developed in line 25, including glomerulonephritis and renal failure, arteritis and myocarditis, as well as atrophic changes in pancreas and testis. The results from this transgenic model strongly support the proposed etiological role for TGF-beta 1 in a variety of fibrotic and inflammatory disorders. The transgenic model may also provide an appropriate paradigm for testing therapeutic interventions aimed at neutralizing the detrimental effects of this important cytokine.

Identificazione di miRNA correlati ad EGFR: nuovi potenziali biomarcatori di risposta alla terapia di 2a-3a linea in pazienti con NSCLC metastatico

La diagnosi di neoplasia epiteliale maligna polmonare è legata tradizionalmente alla distinzione tra carcinoma a piccole cellule (small-cell lung cancer, SCLC) e carcinoma non-a piccole cellule del polmone (non-small-cell lung cancer, NSCLC). Nell’ambito del NSCLC attualmente è importante di-stinguere l’esatto istotipo (adenocarcinoma, carcinoma squamocellulare e carcinoma neuroendocrino) perchè l’approccio terapeutico cambia a seconda dell’istotipo del tumore e la chemioterapia si dimostra molto spesso inefficace. Attualmente alcuni nuovi farmaci a bersaglio molecolare per il gene EGFR, come Erlotinib e Gefitinib, sono utilizzati per i pazienti refrattari al trattamento chemioterapico tradizionale, che non hanno risposto a uno o più cicli di chemioterapia o che siano progrediti dopo questa. I test per la rilevazione di specifiche mutazioni nel gene EGFR permettono di utilizzare al meglio questi nuovi farmaci, applicandoli anche nella prima linea di trattamento sui pazienti che hanno una maggiore probabilità di risposta alla terapia. Sfortunatamente, non tutti i pazienti rispondono allo stesso modo quando trattati con farmaci anti-EGFR. Di conseguenza, l'individuazione di biomarcatori predittivi di risposta alla terapia sarebbe di notevole importanza per aumentare l'efficacia dei questi farmaci a target molecolare e trattare con farmaci diversi i pazienti che con elevata probabilità non risponderebbero ad essi. I miRNAs sono piccole molecole di RNA endogene, a singolo filamento di 20-22 nucleotidi che svolgono diverse funzioni, una delle più importanti è la regolazione dell’espressione genica. I miRNAs possono determinare una repressione dell'espressione genica in due modi: 1-legandosi a sequenze target di mRNA, causando così un silenziamento del gene (mancata traduzione in proteina), 2- causando la degradazione dello specifico mRNA. Lo scopo della ricerca era di individuare biomarcatori capaci di identificare precocemente i soggetti in grado di rispondere alla terapia con Erlotinib, aumentando così l'efficacia del farmaco ed evitan-do/riducendo possibili fenomeni di tossicità e il trattamento di pazienti che probabilmente non ri-sponderebbero alla terapia offrendo loro altre opzioni prima possibile. In particolare, il lavoro si è fo-calizzato sul determinare se esistesse una correlazione tra la risposta all'Erlotinib ed i livelli di espressione di miRNAs coinvolti nella via di segnalazione di EGFR in campioni di NSCLC prima dell’inizio della terapia. Sono stati identificati 7 microRNA coinvolti nel pathway di EGFR: miR-7, -21, 128b, 133a, -133b, 146a, 146b. Sono stati analizzati i livelli di espressione dei miRNA mediante Real-Time q-PCR in campioni di NSCLC in una coorte di pazienti con NSCLC metastatico trattati con Erlotinib dal 1° gennaio 2009 al 31 dicembre 2014 in 2°-3° linea dopo fallimento di almeno un ciclo di chemioterapia. I pazienti sottoposti a trattamento con erlotinib per almeno 6 mesi senza presentare progressione alla malattia sono stati definiti “responders” (n=8), gli altri “non-responders” (n=25). I risultati hanno mostrato che miR-7, -133b e -146a potrebbero essere coinvolti nella risposta al trat-tamento con Erlotinib. Le indagini funzionali sono state quindi concentrate su miR-133b, che ha mo-strato la maggiore espressione differenziale tra i due gruppi di pazienti. E 'stata quindi studiata la capacità di miR-133b di regolare l'espressione di EGFR in due linee di cellule del cancro del polmone (A549 e H1299). Sono stati determinati gli effetti di miR-133b sulla crescita cellulare. E’ stato anche analizzato il rapporto tra miR-133b e sensibilità a Erlotinib nelle cellule NSCLC. L'aumento di espressione di miR-133b ha portato ad una down-regolazione del recettore di EGF e del pathway di EGFR relativo alla linea cellulare A549. La linea cellulare H1299 era meno sensibili al miR-133b up-regulation, probabilmente a causa dell'esistenza di possibili meccanismi di resistenza e/o di com-pensazione. La combinazione di miR-133b ed Erlotinib ha aumentato l'efficacia del trattamento solo nella linea cellulare A549. Nel complesso, questi risultati indicano che miR-133b potrebbe aumentare / ripristinare la sensibilità di Erlotinib in una frazione di pazienti.

Influências do PIBID na representação social de licenciandos em química sobre ser \"professor de química\"

Esta Tese apresenta um estudo sobre a formação inicial de professores de Química em 10 diferentes universidades públicas brasileiras, estabelecidas em 7 diferentes estados e abrange 217 estudantes de licenciatura. Analisou-se a influência do \"Programa Institucional de Bolsas de Iniciação à Docência\" - PIBID - na composição do Núcleo Central (NC) da Representação Social (RS; (MOSCOVICI, 1978) desses Licenciandos sobre o ser \"professor de Química\". Para alocar um termo na zona de centralidade de uma RS é necessário identificar o valor simbólico do termo, refletido em sua saliência, a qual é indicada pela relação entre freqüência e Ordem Média de Evocação e, pelo poder associativo, refletido na conexidade e na categorização temática dos termos. Para a coleta de informações, empregou-se um questionário, com 20 questões, das quais apenas 5 fazem referência específica à tarefa de livre associação de palavras a partir do termo indutor \"professor de Química\", enquanto as demais se referem à caracterização do grupo social. As conclusões deste estudo emergiram da comparação entre o NC da RS de alunos participantes do PIBID (118) com aquele de licenciandos que jamais participaram do Programa (99). Para os alunos participantes dos sub-projetos PIBID-QUÍMICA, os termos do NC da RS investigada são: dedicado, experimentação, responsabilidade. Para o sub-grupo não/PIBID, os termos salientes e com conexidade suficiente para expressar sua centralidade na RS são: dedicado, experimentação, inteligente. Portanto, a zona de centralidade da RS dos dois sub-grupos é diferente, devido a dois termos: responsabilidade e inteligente. O primeiro termo destacado é exclusivo do NC do sub-grupo PIBID, enquanto o último ocorre apenas no NC do sub-grupo não/PIBID. Vale salientar que para o sub-grupo PIBID o termo experimentação apresenta saliência e conexidade expressivos e, para o outro sub-grupo, o termo mais saliente e conexo é dedicado, o que reflete uma diferença qualitativa na organização interna da estrutura das RS, resultado que os caracteriza como diferentes grupos sociais, cada um com uma RS para o ser \"professor de Química\". A presença de termos diferentes na zona de centralidade das RS indica que o processo de formação desenvolvido no âmbito do PIBID expressa a importância da vivência das diferentes práticas pedagógicas junto à Escola Básica durante a formação inicial para a docência em Química, o que não ocorre para o sub-grupo não/PIBID até o momento dos estágios docentes, que demoram muito para acontecer nas Licenciaturas convencionais. No caso do sub-grupo não/PIBID, é forte a presença de termos ligados à idéia de \"vocação\" na docência, expressando aspectos históricos resistentes à mudança no processo de formação de professores.

Tributirina apresenta atividade quimiopreventiva quando administrada isoladamente, mas não em associação com a vitamina A, em ratos submetidos a modelo de carcinogênese de cólon

Avaliou-se a atividade quimiopreventiva da tributirina (TB), e da vitamina A (VA) administradas em associação ou não, antes, durante e após a iniciação em ratos submetidos a modelo de carcinogênese de cólon. Ratos Wistar receberam VA [1 mg/100 g de p.c (grupo VA)], tributirina [200 mg/100 g de p.c (grupo TB)] ou associação de VA com TB (grupo VA+TB). Ratos tratados com óleo de milho e maltodextrina serviram como controle (GC). Avaliou-se a presença de focos de criptas aberrantes (FCA) e sua localização nos cólons, além de danos e do padrão de metilação global do DNA na mucosa colônica. No cólon total, distal e proximal, o grupo TB apresentou menor (p<0,05) número de FCA com 4 ou mais criptas/cm2, considerados mais agressivos, em relação ao GC. Quanto aos danos no DNA, os grupos VA, TB e VA+TB apresentaram cometas de comprimentos menores (p<0,05) em comparação ao GC. Não houve diferenças estatisticamente significantes quanto ao padrão de metilação global do DNA. Assim, TB consiste em agente quimiopreventivo promissor da carcinogênese de cólon quando administrada isoladamente, mas não em associação com a VA. 15

Fatores de risco para a progressão da gamapatia monoclonal de significado indeterminado para mieloma múltiplo

Trabalho Final do Curso de Mestrado Integrado em Medicina, Faculdade de Medicina, Universidade de Lisboa, 2014

Investigation du rôle de Myo9b dans la migration des interneurones GABAergiques corticaux

Les encéphalopathies épileptogènes sont des maladies graves de l’enfance associant une épilepsie, souvent réfractaire, et un retard de développement. Les mécanismes sous-tendant ces maladies sont peu connus. Cependant, nous postulons que ces épilepsies puissent être causées par une dysfonction du réseau inhibiteur. En effet, des défauts de migration ou de maturation des interneurones GABAergiques (INs) corticaux induisent l’épilepsie, tant chez l’humain que chez la souris. Dans le but d’étudier les causes génétiques des encéphalopathies épileptogènes sporadiques inexpliquées, le laboratoire de la Dre Rossignol a procédé au séquençage d’exome entier d’une cohorte d’enfants atteints. Cela a permis d’identifier, chez un patient, une nouvelle mutation de novo, possiblement pathogène, dans le gène MYO9b. MYO9b est impliqué dans la migration de cellules immunitaires et cancéreuses et est exprimée durant le développement cérébral. Nous émettons l’hypothèse voulant que MYO9b puisse être importante pour la migration des INs corticaux. Les résultats présentés dans ce mémoire démontrent que Myo9b est exprimé dès le stade embryonnaire par les progéniteurs des INs corticaux et que son expression se restreint aux INs dans le cortex mature. De plus, nous démontrons que la répression ex vivo de Myo9b sélectivement dans les INs au sein de tranches corticales organotypiques embryonnaires mène à des défauts morphologiques majeurs de ces cellules en migration. En effet, ces cellules présentent une morphologie multipolaire et des neurites rostraux plus longs et plus complexes. Ces changements morphologiques pourraient avoir un impact majeur sur la migration des INs et ainsi perturber le développement des réseaux inhibiteurs.

The EU and ASEAN – In Search of a New Regional Paradigm? EU Centre Singapore Working Paper No. 15, August 2013

The European Union (EU) has been hailed as the most successful model of regional integration thus far, while the Association of Southeast Asian Nations (ASEAN), despite its fair share of critics and doomsayers, has been seen as a relatively successful regional organisation in the developing world. However, both seemed to have arrived at a critical juncture in their respective regional projects. Challenged by recent events, internal and external, and faced with increasing uncertainties and complexities, the EU and ASEAN are forced to re-examine the journey they have taken so far and ponder the road ahead. This paper seeks first to provide an overview of the two parallel processes of regionalism in Europe and Southeast Asia by focusing on the developments of the EU and ASEAN, and dissecting both the external forces and internal dynamics that shape the respective regional processes. It then sketches out some of the global trends likely to impact regional developments in Europe and Asia, and questions if the EU and ASEAN would need a new regional approach or paradigm if they are to maintain their salience and relevance as regional actors.

Citizenship Deprivation: A Normative Analysis. Liberty and Security in Europe No. 82, 19 March 2015

Most critical analyses assess citizenship-deprivation policies against international human rights and domestic rule of law standards, such as prevention of statelessness, non-arbitrariness with regard to justifications and judicial remedies, or non-discrimination between different categories of citizens. This report considers instead from a political theory perspective how deprivation policies reflect specific conceptions of political community. We distinguish four normative conceptions of the grounds of membership in a political community that apply to decisions on acquisition and loss of citizenship status: i) a ‘State discretion’ view, according to which governments should be as free as possible in pursuing State interests when determining citizenship status; ii) an ‘individual choice’ view, according to which individuals should be as free as possible in choosing their citizenship status; iii) an ‘ascriptive community’ view, according to which both State and individual choices should be minimised through automatic determination of membership based on objective criteria such as the circumstances of birth; and iv) a ‘genuine link’ view, according to which the ties of individuals to particular States determine their claims to inclusion and against deprivation while providing at the same time objections against including individuals without genuine links. We argue that most citizenship laws combine these four normative views in different ways, but that from a democratic perspective the ‘genuine link’ view is normatively preferable to the others. The report subsequently examines five general grounds for citizenship withdrawal – threats to public security, non-compliance with citizenship duties, flawed acquisition, derivative loss and loss of genuine links – and considers how the four normative views apply to withdrawal provision motivated by these concerns. The final section of the report examines whether EU citizenship provides additional reasons for protection against Member States’ powers of citizenship deprivation. We suggest that, in addition to fundamental rights protection through EU law and protection of free movement rights, three further arguments could be invoked: toleration of dual citizenship in a political union, prevention of unequal conditions for loss among EU citizens, and the salience of genuine links to the EU itself rather than merely to one of its Member States.

A potential case of attitude change: The Spanish spoken in the city of Malaga and used on social network sites

The Spanish spoken in the city of Malaga, as Andalusian Spanish in general, was in the past often times considered an incorrect, low prestige variety of Spanish which was strongly associated with the poor, rural, backward South of Spain. This southern Spanish variety is easily recognised because of its innovative phonetic features that diverge from the national standard, even though in the past years in the case of some features a convergence to the standard could be observed. Despite its low prestige the local variety of Spanish is quite often used on social network sites, where it is considered as urban, fashion and cool. Thus, this paper aims at analysing whether the Spanish used in the city of Malaga is undergoing an attitude change. The study draws on naturally occurring speech, data extracted from Facebook and a series of questionnaires about the salience, attitude and perception of the local variety of Spanish. The influence of the social factors age and gender is analysed, since they are both known to play a crucial role in many instances of language change. The first is of special interest, as during the Franco dictatorship dialect use was not accepted in schools and in the media. Results show that, on the one hand, people from Malaga hold a more positive attitude towards non-standard features used on social network sites than in spoken language. On the other hand, young female users employ most non-standard features online and unsurprisingly have an extremely positive attitude towards this use. However, in spoken Spanish the use and attitude of some features is led by men and speakers educated during the Franco dictatorship, while other features, such as elision of intervocalic /d/, elision of final /ɾ/, /l/ and /d/ and ceceo, are predominantly employed by and younger speakers and women. These features are considered as salient in the local variety and work as local identity markers.

Quantitative silicoflagellate data from the southern Indic Ocean from ODP Holes 188-1165B, 120-748B and 120-751A

In the modern marine environment the silicoflagellate genus Dictyocha is rare, or absent, south of the Antarctic polar front (APF); the genus Distephanus, in contrast, is dominant. In sediments recovered from ODP Site 1165, 1600 km south of the front, however, three intervals where Dictyocha is abundant are interpreted to represent Pliocene warm events. Comparison of our data with Ciesielski and Weaver's [1974] modern core top silicoflagellate relationship with sea surface temperature (SST) indicates that at Site 1165 mean annual SST was approximately 5°C at 3.7 Ma (event I), and approximately 4°C at 4.3-4.4 Ma (event II) and 4.55-4.8 Ma (event III). Event I represents a 5.5°C warming, and events II and III represents a 4.5°C warming relative to modern mean annual SST. Dictyocha is absent from other Site 1165 Pliocene intervals, which suggests that cooler SST (<2°C) prevailed. The warm events detected at Site 1165 may represent times when North Atlantic Deep Water production and ocean heat transport into the Southern Ocean exerted maximum influence.

The Relationship between Adolescent Social Network Structure and Perceptions of School Climate

Thesis (Ph.D.)--University of Washington, 2016-06

Function and Regulation of Cytochrome P450 4V2 and the Implications in Bietti’s Crystalline Dystrophy

Thesis (Ph.D.)--University of Washington, 2016-06

Presynaptic Anchoring of PKA by AKAP7 is Required for Pattern Separation by Dentate Gyrus

Thesis (Ph.D.)--University of Washington, 2016-06