Sensitivity of a Vacuum Aspiratory Culture Technique for Diagnosis of Localized Cutaneous Leishmaniasis in an Endemic Area of Leishmania (Viannia) braziliensis Transmission

Sixty eight patients with localized cutaneous leishmaniasis from an area with Leishmania (Viannia) braziliensis transmission had cultures performed with a modified Marzochi´s vacuum aspiratory puncture technique to establish sensitivity and contamination rate with this new method. Overall sensitivity of three aspirates was 47.1%; (CI95% 39.4; 59.4) significantly greater than the sensitivity of a single one aspirate. Fungal contamination was observed in 6/204 (2.9%) inoculated culture tubes. We recommend that this useful technique should be adopted as routine for primary isolation of L. (V.) braziliensis from localized cutaneous ulcers.

The expression and impact of antifungal grooming in ants.

Parasites can cause extensive damage to animal societies in which many related individuals frequently interact. In response, social animals have evolved diverse individual and collective defences. Here, we measured the expression and efficiency of self-grooming and allo-grooming when workers of the ant Formica selysi were contaminated with spores of the fungal entomopathogen Metarhizium anisopliae. The amount of self-grooming increased in the presence of fungal spores, which shows that the ants are able to detect the risk of infection. In contrast, the amount of allo-grooming did not depend on fungal contamination. Workers groomed all nestmate workers that were re-introduced into their groups. The amount of allo-grooming towards noncontaminated individuals was higher when the group had been previously exposed to the pathogen. Allo-grooming decreased the number of fungal spores on the surface of contaminated workers, but did not prevent infection in the conditions tested (high dose of spores and late allo-grooming). The rate of disease transmission to groomers and other nestmates was extremely low. The systematic allo-grooming of all individuals returning to the colony, be they contaminated or not, is probably a simple but robust prophylactic defence preventing the spread of fungal diseases in insect societies.

Mycoflora and aflatoxigenic species in derivatives of milled rice

Thirty samples of rough rice stored for 6, 12 and 24 months in government authorized warehouses of the state of Rio Grande do Sul, Brazil, were simultaneously collected. After milling of the product, 90 samples (30 of polished rice, 30 of rice bran and 30 of rice hull) were evaluated for their mycoflora, aflatoxigenic species and aflatoxin contamination. The following fungi, listed in decreasing order of frequency, were isolated on Potato-Dextrose Agar: Aspergillus spp., Nigrospora spp., Penicillium spp.; Fusarium spp.; Mucor spp.; Cladosporium spp.; Trichosporon spp. and non-sporulated fungi. The degree of fungal contamination (colony forming units per gram of product) was lowest in polished rice, increasing progressively in samples of rice bran and rice hull. Among the Aspergillus species, A. flavus and A. candidus were isolated most frequently. Of the A. flavus isolates, 52.6% strains were found to be toxigenic and produced only Group B aflatoxins. Analysis of the 90 samples did not reveal the presence of aflatoxins in the rice derivatives.

Monitoreo microbiológico de aire, superficies y manos del personal asistencial en entidades de salud : Departamento del Meta 2007

OBJETIVO: Cuantificar Bacterias gram positivas, Bacterias gram negativas y Hongos mediante monitoreo microbiológico de aire, superficies y manos del personal asistencial en cinco entidades de salud del departamento del Meta en el año 2007. MÉTODOS: Estudio ejecutado en cinco entidades, donde se realizó el diagnostico microbiológico del entorno hospitalario, tomando muestras en cada área asistencial de: superficies horizontales antes y después de aplicar el protocolo de limpieza y desinfección de cada institución, manos de personal asistencial antes y después del lavado rutinario de manos y del aire de áreas críticas y no críticas. RESULTADOS: La IPS 3 presentó el Aire de Zona crítica con mayor contaminación bacteriana y la IPS 4 mayor contaminación fúngica. Hospitalización, Urgencias y Apoyo diagnostico evidenciaron las mayores concentraciones microbianas. Se encontraron diferencias estadísticamente significativas entre la carga microbiana antes respecto a después del lavado de manos (p<0,05) y antes y después de la aplicación del protocolo de limpieza y desinfección de superficies. CONCLUSIONES: Con el presente estudio fue posible demostrar que la capacitación, supervisión y monitorización de los procesos de lavado de manos y limpieza y desinfección de superficies pueden llegar a garantizar la reducción de la biomasa bacteriana y fúngica presente en las entidades de la salud.

Haem peroxidase activity in Daphnia magna: A biomarker for sub-lethal toxicity assessments of kerosene-contaminated groundwater

A novel biomarker was developed in Daphnia magna to detect organic pollution in groundwater. The haem peroxidase assay, which is an indirect means of measuring oxidase activity, was particularly sensitive to kerosene contamination. Exposure to sub-lethal concentrations of kerosene-contaminated groundwater resulted in a haem peroxidase activity increase by dose with a two-fold activity peak at 25%. Reproduction in D. magna remained unimpaired when exposed to concentrations below 25% for 21 days, and a decline in fecundity was only observed at concentrations above the peak in enzyme activity. The measurement of haem peroxidase activity in D. magna detected sublethal effects of kerosene in just 24 h, whilst offering information on the health status of the organisms. The biomarker may be useful in determining concentrations above which detrimental effects would occur from long-term exposure for fuel hydrocarbons. Moreover, this novel assay detects exposure to chemicals in samples that would normally be classified as non-toxic by acute toxicity tests.

Uso de antibióticos para o controle de bactérias endógenas visando à micropropagação da figueira

A descontaminação dos explantes é um dos princípios básicos para o sucesso da cultura de tecidos. Um dos problemas diagnosticados na propagação in vitro da figueira, através de gemas apicais, é a contaminação endógena dos explantes por bactérias. Este trabalho teve como objetivo avaliar a eficiência de alguns antibióticos em meio de cultura para o controle de bactérias endógenas em gemas apicais de figueira. Foram avaliados os seguintes tratamentos: T1(sem adição de antibiótico); T2 (30 mg L-1 de cloranfenicol); T3 (250 mg L-1 de ampicilina sódica); T4 (500 mg L-1 de ácido nalidícico); T5 (150 mg L-1 de cefalotina sódica); T6 (500 mg L-1 de tetraciclina), e T7 (400 mg L-1 de norfloxacina). Após coletados em campo, os segmentos de ramos contendo as gemas foram colocados em recipiente com água corrente. Posteriormente, as gemas apicais foram imersas em álcool etílico a 70% e hipoclorito de sódio a 2,5%. Todo procedimento de desinfestação externa dos explantes foi realizado em câmara de fluxo laminar. Os explantes foram inoculados em tubos de ensaio contendo 15 mL de meio básico MS suplementado, após a autoclavagem, com as doses de antibióticos de acordo com os tratamentos estabelecidos. Após a inoculação, os explantes foram mantidos em sala de crescimento por quatro dias no escuro e, em seguida, sob fotoperíodo de 16 horas de luz branca fria e irradiância de 25 µmol m s-1, na temperatura de 22 ± 3ºC. A assepsia realizada externamente nos explantes foi suficiente para o controle de contaminação fúngica, e a adição de antibióticos ao meio, após autoclavagem, foi eficiente para o controle de bactérias endógenas, cujo antibiótico ampicilina sódica proporcionou mais de 90% de explantes sobreviventes.

Efeito do tratamento químico na sanidade de sementes de espécies florestais

This study evaluated the effect of different fungicide and sodium hypochlorite treatments in reducing the incidence of fungi on seeds of native species of the Atlantic rainforest. The experiment was done using the completely randomized design in a 5×5 factorial with five levels of factor A (forest species) and five levels of factor B (chemical treatment and surface disinfection with sodium hypochlorite) with four replications. The fungal genera Fusarium, Alternaria, Aspergillus and Penicillium were identified. The species 'Jacarandáda- Bahia' and 'Ipê-roxo' had lower fungal incidence, 1.0% and 1.3%, respectively. Except for 'Angico Vermelho', the fungicide pencycurom and sodium hypochlorite were not significantly different from the control in the species evaluated. Seed treatment with fungicides 'Captan' and 'Tiram' yielded satisfactory results in reducing the incidence of fungal contamination in forest species seeds.

Contaminação por fungos antes e após limpeza e desinfecção de colchões hospitalares

OBJECTIVE: To verify the existence of fungal contamination prior to and following the cleaning and disinfection process of hospital mattresses used by patients with Candidemia. METHODS: Cross-sectional study analyzing 25 mattresses used by patients with Candidemia confirmed by blood culture from different hospital wards. The study made use of convenience samples. After growing the samples in an Agar Sabouraud Dextrose environment, isolated yeasts were identified by macroscopic, microscopic and physiologic characteristics. RESULTS: Analyses showed 15 (60%) mattresses contaminated by Candida spp. From these, 10 (66.7%) and five (33.3%) mattresses corresponded respectively to the collection prior to and following disinfection, with Candida parapsilosis being the isolated species with the highest frequency. CONCLUSION: Considering that half of the mattresses remained contaminated after cleaning and disinfection, there is a risk that these mattresses may act as potential secondary reservoirs in the infection chain.

Aplicação de biofungicidas no controle do fungo Aspergillus flavus L. em amendoim (Arachis hypogaea)

Pós-graduação em Engenharia e Ciência de Alimentos - IBILCE

Comparison of Brucella agar, CITA and Farrel media for selective isolation of Brucella abortus from semen of bovine bulls

Brucellosis remains as a public health concern worldwide. In domestic animals, the disease is characterized by reproductive disorders in male and female. Besides extensive use of serological tests and recent development of molecular biology techniques, microbiological culture of Brucella species is yet considered a “gold standard” method for diagnosis. Here, semen of 335 bovine bulls was subjected simultaneously to microbiological culture in Brucella agar, Farrell media, and CITA media to evaluate comparatively the best selective media for isolation of Brucella sp. Among all 335 samples, B. abortus B19 strain was isolated from semen of five (1.49%) bulls using the three selective media. However, Farrell media was considered the best selective media for microbiological diagnosis, because of allowed isolation of B. abortus B19 strain from bull semen without bacterial commensal or fungal contamination of plates.

Mycoflora and mycotoxins in field samples of Brazil nuts

Fungal and mycotoxin contamination was investigated in field samples of nuts, shells and pods of the Brazil nut collected during different periods in Itacoatiara, State of Amazonas, Brazil: day 0, samples still on the tree: days 5, 10 and 15, samples in contact with soil for 5, 10 and 15 days, respectively. The most prevalent fungi were Aspergillus flavus in fruit pods and nuts and Fusarium spp. in shells. Penicillium spp. and A. flavus were isolated from soil, and Fusarium spp. and Penicillium spp. from air. Aflatoxins and cyclopiazonic acid were not detected in any of the samples analyzed. The high frequency of isolation of aflatoxigenic A. flavus strains from soil and Brazil nuts increases the chance of aflatoxin production in these substrates. These findings suggest a possible contamination before drying and indicate soil as the main source of fungal contamination of Brazil nuts. (c) 2012 Elsevier Ltd. All rights reserved.

(Table 1) Polychlorinated biphenyl (PCB) and PCB metabolite concentrations in ringed seals (Phoca hispida) from Svalbard and the Baltic Sea

Polychlorinated biphenyls (PCBs) may induce activity of hepatic enzymes, mainly Phase I monooxygenases and conjugating Phase II enzymes, that catalyze the metabolism of PCBs leading to formation of metabolites and to potential adverse health effects. The present study investigates the concentration and pattern of PCBs, the induction of hepatic phase I and II enzymes, and the formation of hydroxy (OH) and methylsulfonyl (CH3SO2=MeSO2) PCB metabolites in two ringed seal (Phoca hispida) populations, which are contrasted by the degree of contamination exposure, that is, highly contaminated Baltic Sea (n = 31) and less contaminated Svalbard (n = 21). Phase I enzymes were measured as ethoxyresorufin-O-deethylation (EROD), benzyloxyresorufin-O-dealkylation (BROD), methoxyresorufin-O-demethylation (MROD), and pentoxyresorufin-O-dealkylation (PROD) activities, and phase II enzymes were measured as uridine diphosphophate glucuronosyl transferase (UDPGT) and glutathione-S-transferase (GST). Geographical comparison, multivariate, and correlation analysis indicated that sum-PCB had a positive impact on Phase I enzyme and GST activities leading to biotransformation of group III (vicinal ortho-meta-H atoms and <=1 ortho-chlorine (Cl)) and IV PCBs (vicinal meta-para-H atoms and <=2 ortho-Cl). The potential precursors for the main OH-PCBs detected in plasma in the Baltic seals were group III PCBs. MeSO2-PCBs detected in liver were mainly products of group IV PCB metabolism. Both CYP1A- and CYP2B-like enzymes are suggested to be involved in the PCB biotransformation in ringed seals.

Toxigenic fungi in coffee samples: a menace to public health

Introduction - Mycotoxin contamination was reported to occur in some food and commodities, such as coffee, particularly due to the presence of toxigenic fungi such as Aspergillus, Penicillium and Fusarium spp. Aspergilli are known to produce high levels of mycotoxins, such as ochratoxin and aflatoxin. Aspergillus ochraceus has been proposed as the major cause of ochratoxin A contamination in coffee beans. Aim of the study - The aim of this work was to evaluate the prevalence of Aspergillus sections Circumdati, Flavi and Fumigati in 28 green coffee samples to be used by Portuguese coffee industry, from Coffea arabica (Arabica coffee) and Coffea canephora (Robusta coffee) species from different origins.

Feijões: características químicas e ocorrência de aflatoxinas

As leguminosas, como o feijão, são consideradas importantes fontes de nutrientes para humanos e a contaminação por fungos e consequente produção de micotoxinas pode estar diretamente influenciada pela sua composição química. Alguns compostos estão associados aos mecanismos de defesa das leguminosas atuando como inibidores de enzimas digestivas ou barreiras físicas à patógenos. É o caso dos compostos fenólicos (CF) e algumas estruturas de caráter proteico. O objetivo deste estudo foi verificar a susceptibilidade de feijões à contaminação por aflatoxinas (AFLAs), através da avaliação da presença de compostos inibidores de enzimas fúngicas. Foi realizada a validação de um método para determinação de AFLAs em feijão. Os CF livres (solúveis em metanol), conjugados (solúveis em etanol) e ligados, bem como as diferentes frações proteicas (albumina, globulina, glutelina e prolamina) foram determinadas em 10 amostras de feijão pertencentes às espécies Phaseolus vulgaris, Vigna unguiculata e Vigna angularis. O seu potencial como inibidor de α-amilase foi testado nos extratos fenólicos e protéicos. Os feijões vermelho e carioca apresentaram os maiores teores de CF totais (1766 µg.g -1 e 1190 µg.g -1 , respectivamente) e os feijões fradinho e branco os menores teores (183 µg.g -1 e 192 µg.g -1 ). Os extratos de CF conjugados apresentaram os teores mais elevados de AF, onde os feijões amendoim se destacou pela maior concentração (68 µg.g -1 ) e o feijão azuki pelo menor (28 µg.g -1 ). Nos extratos de CF livres e conjugados, o ácido clorogênico foi o majoritário em 60% dos feijões analisados e nos extratos de CF ligados, o ácido ferúlico foi o majoritário em 90% dos feijões analisados. Com relação às frações proteicas solúveis, o feijão carioca apresentou o maior teor de albumina (559 mg.g -1 ), globulina (164 mg.g -1 ) e glutelina (325 mg.g -1 ). Com relação à fração prolamina, o feijão preto (brasileiro e chinês) apresentou o maior teor (64 e 65 mg.g -1 , respectivamente), seguido pelo feijão carioca (54 mg.g -1 ). Os limites de detecção (LDm) obtidos para o método de determinação de AFLAs foram de 2,4 µg.kg-1 ; 0,036 µg.kg-1 e 0,06 µg.kg-1 para as AFLAs B1, B2 e G2 e os limites de quantificação (LQm) foram de 4,8 µg.kg-1 (AFLAB1); 0,12 µg.kg- 1 (AFLA B2 e G2). Não foram detectadas AFLAs B1, B2, G1 e G2 nos feijões analisados. Os CF dos extratos etanólicos dos feijões amendoim e azuki e os extratos contendo as proteínas solúveis em etanol dos feijões carioca e fradinho foram testados quanto ao seu potencial para inibição da α-amilase de Aspergillus oryzae (atividade de 4,8 mg amido hidrolisado.mg proteína-1 .mL-1 ). O extrato proteico do feijão fradinho se destacou, pois atingiu um percentual de inibição específica de aproximadamente 56%. Os CF apresentaram uma tendência à inibição incompetitiva e os extratos proteicos não apresentaram um comportamento de inibição que permitisse definir o mecanismo de inibição. Os extratos protéicos e fenólicos dos feijões mostraram ser capazes de inibir a amilase fúngica sugerindo que este fato pode estar associado a ausência da presença de AFLAs nas amostras analisadas.

Potencial antifúngico, antioxidante e inibidor da produção de aflatoxina por extratos fenólicos de Chlorella sp. e Spirulina platensis

A contaminação fúngica acarreta alterações na qualidade nutricional e no valor econômico de produtos alimentícios podendo causar danos patológicos em plantas, animais e humanos. A identificação da atividade antioxidante, antifúngica e antimicotoxinas, em extratos de microalgas com propriedade de inibir a multiplicação de fungos e subseqüente produção de micotoxinas abre a perspectiva de empregar substâncias mais eficientes e com maior ação específica contra estes microorganismos. Entre os compostos com propriedades inibidoras de radicais livres, de crescimento fúngico e produção de micotoxinas, destacam-se os compostos fenólicos, que podem inibir a atividade metabólica microbiana, dificultando a atividade de enzimas. Neste estudo foram avaliados o poder de inibição de multiplicação fúngica de Rhizopus oryzae e Aspergillus flavus pelos extratos fenólicos de Chlorella sp. e Spirulina platensis, bem como sua atividade antioxidante, e a atividade antimicotoxinas da última microalga contra Aspergillus flavus. O conteúdo de fenóis totais foi em média 1000 µgfenóis/g Spirulina platensis e 600 µgfenóis/g Chlorella sp., sendo que o acido gálico e o cafeíco foram identificados como compostos majoritários na Spirulina platensis. As determinações de glicosamina (parede celular) e ergosterol (membrana celular) mostraram-se bons indicativos do desenvolvimento microbiano permitindo uma boa estimativa da inibição dele. O extrato fenólico de Spirulina platensis apresentou capacidade de inibir cerca de 50% a formação da parede e da membrana celular para ambos os fungos estudados e de 100% a produção de aflatoxina B1 até o 10º dia de cultivo do Aspergillus flavus. Além disso, o extrato metanólico de Spirulina platensis inativou 53,5% o DPPH reativo, limitou o escurecimento enzimático ocasionado pela peroxidase em 55% e inibiu a peroxidação lipídica em 46% após 14 dias de armazenamento sob luz. Estes resultados mostram que a ação antifúngica, antimicotoxinas e antioxidante está naturalmente presente em alguns tecidos microbianos e que encontrar a forma de extraí-los e aplicá-los como conservantes alimentícios é muito promissor para substituição aos antifúngicos e outros conservantes químicos.