节杆菌BT801乙内酰脲酶基因的克隆与表达

以粘粒pKC505为载体构建了节杆菌BT801的基因组文库。用功能筛选的方法从文库中筛选得到了具有乙内酞脉酶活性的阳性克隆，经过亚克隆获得了编码乙内酞脉消旋酶（HyuR）、乙内酞脉水解酶（HyuH）和N一氨甲酞氨基酸水解酶（HuC)）的新序列。将3个酶的结构基因串联置于表达质粒pQE70 T5启动子的下游实现了3个基因的活性共表达，其活性是出发菌株A. BT801的2倍。SDS－PAGE分析表明3个酶均出现蛋白表达带，其中HuR占全菌蛋白的30%以上，主要以可溶性形式存在，HuH和Huc表达量比较低。用pQE表达载体对3个基因进行了分别表达，目的蛋白均占全菌蛋白40%以上，其中HyuR和HyuC主要以可溶性形式存在，而HyuH主要以不可溶性形式存在。关键酶抑uC的比活比原始菌株提高了52倍。将乙内酞脉水解酶基因用融合表达载体pET32a进行了融合表达，硫氧还蛋白基因融合后，酶的表达量、比活和稳定性均明显提高。以乙内酞脉酶启动子为基础构建了新表达载体，将α－淀粉酶报告基因置于启动子的下游，获得了活性表达，研究发现大肠杆菌中不存在对乙内酞脉酶启动子进行调控的基因。上述工作为乙内酞脉酶在氨基酸生产中的应用、结构和功能的关系以及基因调控等研究奠定了基础。

~(189)Re的两个新能级

建议189W一个新的简单衰变纲图。指定189Re能量为470.4keV和489.8keV的2个新能级。改进了先前189Re的能级信息。

高能Xe离子辐照引起的注碳a:SiO_2中新结构的形成

先用120 keV的碳离子注入非晶二氧化硅a:SiO2薄膜,再用能量为1 754 MeV的Xe离子辐照。注碳量为5.0×1016—8.6×1017ion/cm2,Xe离子辐照剂量为1.0×1011和5.0×1011ion/cm2。辐照后的样品中形成的新结构用显微傅立叶变换红外光谱仪进行测试分析。结果表明,Xe离子辐照引起了注碳a:SiO2中Si—C,C—C,Si—O—C键以及CO和CO2分子的形成与演化。在注碳量较高时,Xe离子辐照在样品中产生了大量的Si—C键。与注入未辐照和辐照的低注碳量样品比较,增强的Si—C键的形成,预示着辐照可引起注碳a:SiO2样品中的SiC结构相变。

高温高压气固分离过滤器

一种高温高压气固分离过滤器，由一个圆筒形的过滤筒体６和一个与筒体６连接的接管８构成。制作过滤筒体的材料可以不锈钢细粉材料经模压烧结制成，也可以是网眼尺寸为４－４０μｍ的不锈钢纤维网多层卷制焊接而成。本实用新型可用于固体粒径１０μｍ以下的物料在压力为０－２５ＭＰａ，温度为７２３Ｋ以下的气固分离，固体颗粒穿透率在０．１％以下。

四硫代富瓦烯/四氰基对二次甲基苯醌单分子膜气-液界面性质及LB膜组装体的紫外可见光谱

几种电子给体(四硫代富瓦烯，TTF)、电子受体(长链四氰基对二次甲基苯醌；C18TCNQ)及它们相应的1:1摩尔比复合物的气－液界面分子行为表明：不带长链的TTC1-TTF、BEDT-TTF的成膜性在其与C18TCNQ形成复合物之后均得到显著改善。C16TTF、C18TCNQ及两者不同结构ＬＢ膜组装体的紫外可见光谱研究发现：C18TCNQ在其单独的Y-型 膜中摩尔吸光系数是7.5×103，而在交替组装体中其摩尔吸光系数是1.3×103，给受体之间 的相互作用导致跃迁偶极矩减小，从而引起吸光系数减小4倍多。

High level expression, purification, and characterization of the shrimp antimicrobial peptide, Ch-penaeidin, in Pichia pastoris

Penaeidins, members of a new family of antimicrobial peptides constitutively produced and stored in the haemocytes of penaeid shrimp, display antimicrobial activity against bacteria, and fungi. Here, a DNA sequence encoding the mature Ch-penaeidin peptide was cloned into the pPIC9K vector and transformed into Pichia pastoris. The transformed cells were screened for multi-copy plasmids using increasing concentrations of G418. Positive colonies carrying chromosomal integrations of the Chp gene were identified by phenotype and PCR. When transformed cells were induced with methanol, SDS-PAGE and Western blotting revealed the production of a similar to6100 Da recombinant CHP (rCHP) expression product. Large scale expression revealed that rCHP was produced at 108 mg/L under optimal conditions in the highest Chp-producing P. pastoris clone. The antimicrobial activities of rCHP were studied by liquid phase analysis, which revealed that rCHP exhibited activities against some Gram-negative and Gram-positive bacteria, but had a relatively low activity against some fungi. Purification of rCHP by cation exchange chromatography and subsequent automated amino acid sequencing revealed the presence of four additional amino acids (YVEF) at the N-terminus that belonged to the cleaved fusion signal peptide; these residues may account for the observed decrease in antifungal activity. Together, these observations indicate that rCHP is an effective antimicrobial peptide that can be successfully produced at high levels in the yeast, and therefore may be a potential antimicrobial candidate for practical use. (C) 2004 Elsevier Inc. All rights reserved.

Transient expression of lacZ in bombarded unicellular green alga Haematococcus pluvialis

This paper reports for the first time the transient expression of a reporter gene, LacZ, in the unicellular green alga Haematococcus pluvialis. By employing the micro-particle bombardment method, motile cells in the exponential phase showed transient expression of lacZ. This was detected in bombarded motile cells under the rupture-disc pressures of 3103 KPa and 4137 KPa. Transient expression of LacZ gene could not be observed in non-motile cells of this alga under the same transformation condition. No LacZ background was found in either the motile cells or the non-motile cells. The study suggests a promising potential of the SV40 promoter and the lacZ reporter gene in genetic engineering of unicellular green algae.

黄海纤毛虫的丰度和生物量

海洋浮游纤毛虫是在海洋中浮游生活的一类单细胞原生动物，主要是指寡毛类纤毛虫(Oligotrich ciliates)，隶属原生动物界(Protozoa)、纤毛门(Ciliophora)、寡毛纲(Oligotrichea)，分属于Oligotrichina 和Tintinnina两个亚纲。它们个体微小，粒径在5-200 µm之间，是微型浮游动物和海洋微食物环(Marine Microbial Food Web)的重要组成部分。 2006年4月至2007年12月，在黄海(包括胶州湾)采样分析海洋浮游纤毛虫的种类组成(砂壳纤毛虫)、丰度和生物量，分析纤毛虫在这一海区的季节变化和空间变化。 纤毛虫丰度和生物量的研究方法为：Rosette采水器(胶州湾用Niskin采水器)采集水样，取1 L水样，加Lugol’s试剂固定(终浓度1%)，Utermöhl方法100倍镜检。测量虫体的体长、体宽，按最接近的几何形状(圆柱体、球体和圆锥体)计算体积。生物量由体积乘转换系数(0.19 pgC/µm3)得到，砂壳纤毛虫的肉体体积按照壳体积的1/3近似。 本文的结果表明，胶州湾各站纤毛虫平均丰度于6月达到全年最高值6065 ind./L，12月为全年丰度最低值843 ind./L。平均生物量8月达全年最高值(18.5 µg C/L)，6月为全年最低值(0.6 µg C/L)。砂壳纤毛虫种丰富度于8月达到最高值，共发现25种砂壳纤毛虫，1月种类最少(6种)。湾内站位的纤毛虫平均丰度比湾外的高(6月和8月除外)。砂壳纤毛虫在纤毛虫总丰度中的比例较小，平均为25%，范围为8-57%，分别于1月和8月达到最低和最高值。 两次冷水团大面调查结果表明，4月表层纤毛虫平均丰度(1490 ind./L)要高于10月(972 ind./L)。10月表层纤毛虫生物量0.14-5.33 µg C/L，14194站、15694站和15894站生物量较高，为4.08-5.33 µg C/L。无壳纤毛虫优势种Laboea strobila在两个航次中均呈现斑块分布，4月航次丰度0-10000 ind./L，10月航次丰度11-350 ind./L；砂壳纤毛虫优势种Ptychocylis obtusa仅在4月航次发现，最大丰度2895 ind./L，10月航次未发现。4月航次砂壳纤毛虫有百乐拟铃虫(Tintinnopsis beroidea)，丰度为0-1920 ind./L；卡拉直克拟铃虫(Tintinnopsis karajacensis)，丰度很小(10-93 ind./L)。10月航次砂壳纤毛虫优势种Tintinnidium primitivum，丰度为35-700 ind./L；也出现了尖底类瓮虫(Amphorellopsis acuta)和网纹虫(Favella spp.)，但丰度不大(0-210 ind./L)；运动类铃虫(Codonellopsis mobilis)、筒状拟铃虫(Tintinnopsis tubulosoides)和Eutintinnus sp.丰度也较低(35-105 ind./L)；Craterella torulata丰度为0-120 ind./L，主要分布于15694站。10月航次已经出现了温跃层，位于30 m左右水层，纤毛虫主要分布于温跃层之上。 六次黄海断面航次表明：温跃层在5月已经出现，到12月消失。在有温跃层的5月、6月、8月、9月，纤毛虫主要分布于温跃层(30 m左右)之上。其中8月份航次纤毛虫丰度最高，表层平均丰度3103 ind./L。12月份纤毛虫丰度最低，表层平均丰度406 ind./L。纤毛虫生物量春夏季为0.02-5.5 µg C/L，冬季为0.04-1.99 µg C/L。小型无壳纤毛虫占优势，砂壳纤毛虫东方拟铃虫(Tintinnopsis orientalis)、筒状拟铃虫、运动类铃虫、Craterella torulata和Tintinnidium primitivum几乎在各个航次均有分布。

一种新的多智能体强化学习算法及其在多机器人协作任务中的应用

在多机器人系统中 ,评价一个机器人行为的好坏常常依赖于其它机器人的行为 ,此时必须采用组合动作以实现多机器人的协作 ,但采用组合动作的强化学习算法由于学习空间异常庞大而收敛得极慢 .本文提出的新方法通过预测各机器人执行动作的概率来降低学习空间的维数 ,并应用于多机器人协作任务之中 .实验结果表明 ,基于预测的加速强化学习算法可以比原始算法更快地获得多机器人的协作策略 .

Experiencias asociativas de tipo cooperativo como estrategia de inserción de la pequeña y mediana producción citrícola familiar en el mercado internacional de frutas frescas

En los últimos años asistimos a un proceso de transformación constante de la estructura agrícola, en el cual la naturaleza de los sistemas productivos y la producción de alimentos han pasado de un modelo tradicional basado en la producción para mercados locales y nacionales, a la internacionalización de los complejos agroalimentarios. Dicho proceso plantea situaciones de naturaleza compleja para la pequeña y mediana producción agrícola familiar y a la vez genera interrogantes respecto a sus posibilidades de persistencia como productores, especialmente en los circuitos de exportación. Teniendo en cuenta lo arriba expuesto y poniendo especial atención a la asociatividad como estrategia de articulación/integración de este tipo de productores a los mercados globales, en esta tesis se partió de un análisis general que puso énfasis en el complejo citrícola agroexportador de Monte Caseros (Corrientes), y en la situación de pequeña y mediana producción citrícola familiar en él inserta (incluyendo sus estrategias productivas y de inserción en los mercados), para luego, a través del estudio de caso de una cooperativa exportadora citrícola, profundizar en los factores determinantes para la conformación de este tipo de emprendimientos, las estrategias implementadas en las fases de producción agrícola, agroindustrial y comercial, así como la incidencia de dichas estrategias en el carácter del vínculo establecido con los asociados, y sobre sus unidades productivas. Para tal fin se aplicaron técnicas de análisis de tipo cualitativo a entrevistas semiestructuradas y en profundidad realizadas a informantes calificados seleccionados en función del papel desempeñado dentro del complejo, productores citrícolas de la zona bajo estudio, directivos y asociados de la cooperativa seleccionada. Al tiempo se recopiló y analizó información secundaria proveniente de artículos científicos, libros, revistas, páginas web de organismos públicos y privados, estadísticas sectoriales, entre otros. Las conclusiones más relevantes se focalizan en la importancia de la estrategia asociativa a través de cooperativas para el acceso de la pequeña y mediana producción citrícola en los mercados externos, no obstante parece existir una tendencia hacía la homogeneización del perfil de los productores asociados, prevaleciendo aspectos como el nivel económico-productivo, un adecuado conocimiento de los mercados y un mayor grado de compromiso con la organización. Lo cual lleva a plantear que la membrecía estaría permitiendo a aquellos productores de perfil familiar-empresarial y empresarial, que han implementado los cambios necesarios y que cumplen con los requisitos públicos y privados en términos de sanidad y calidad, la colocación de su fruta en el mercado internacional. En contraste, no estaría asegurando la inserción exportadora para aquellos productores familiares puros con capacidades limitadas en cuanto al acceso a capital e información tecnológica y de mercados, dada su mayor dificultad para realizar las inversiones necesarias y afrontar los costos inherentes.

Contenidos de materia orgánica y condición física de un Kandiudult de Misiones bajo diferentes sistemas de preparación del terreno forestal y bosque nativo

Las propiedades físicas de los suelos de ambientes subtropicales húmedos fueron tradicionalmente menos estudiadas que los de zonas templadas. Una característica de los primeros es su menor resiliencia frente a un disturbio. Un aspecto poco explorado es qué sucede con los suelos cuando la selva nativa es reemplazada por una plantación forestal o un ciclo forestal por otro. La forestación es una de las principales actividades económicas de la provincia de Misiones, y la preparación de terreno uno de los momentos de mayor impacto al suelo. En esta tesis se evaluaron sobre un suelo Kandiudult tratamientos que incluyeron: a) conservación de residuos (CRes), b) subsolado (Sub), c) con quema de residuos en escollera (Qsub), d) uso de rastra (Rast), e) con quema de residuos en escollera (Qrast), y f) conservación de residuos sin plantación (Reg Nat). Todos estos contrastados con el bosque nativo (NcP). Se halló que al cuarto año de la plantación, el contenido de materia orgánica (MO) fue significativamente mayor donde se conservaron los residuos, con mayor stock de C (55 Mg.ha-1). Sin embargo este aumento de MO no logró equiparar al suelo bajo BNcP. El contenido hídrico retenido en capacidad de campo varió en similar dirección que la MO. La densidad aparente fue una las propiedades físicas más sensibles a los tratamientos, con valores significativamente más bajos hasta 30 cm de profundidad en suelo bajo Sub (1,36 Mg.m-3). El tratamiento bajo Rast presentó los mayores valores de densidad aparente (1,50 Mg.m-3). Los tratamientos afectados por quema tuvieron valores de densidad aparente más bajos que otros tratamientos (1,42 Mg.m-3). De cualquier manera, puede afirmarse que el manejo forestal causó la densificación de la superficie del suelo, comparando con los menores valores de densidad del suelo bajo BNcP (1,17 Mg.m-3). Los valores de compactación relativa calculados en base a la densidad máxima en ensayos Proctor fueron cercanos al 90 por ciento, lo cual indica la alta compactación de los suelos. La inestabilidad estructural del suelo, medida por el cambio de diámetro medio ponderado de agregados (CDMP), no se vio afectada por el reemplazo de la selva por la plantación forestal, ni por el método de preparación del terreno. La tasa de infiltración no mostró diferencias entre tratamientos, pero si reducciones importantes respecto del bosque nativo (1638 cm.h-1). Como conclusión, y dada la falta de impactos físicos severos sobre los suelos bajo plantación forestal, puede recomendarse la conservación de los residuos sobre la superficie como método de preparación, pues es el único que permite realizar secuestro efectivo de CO en los suelos.

Análisis del mercado de cosechadoras de origen nacional 1990-2010

La industria de Maquinaria Agrícola de origen Nacional ha acompañado a lo largo de la historia el desarrollo económico y social de la Argentina. Desde fábricas de características artesanales ubicadas en la región Pampeana, nuestro país ha sabido durante los años 1950 a 1980 ser un precursor en materia de cosechadoras que ofrecían respuestas a quienes comenzaban a mecanizar todas las actividades agrícolas. Sin embargo, durante las décadas siguientes, diferentes inconvenientes macroeconómicos y propios de la globalización han cambiado el panorama de la fabricación de cosechadoras. En este contexto, el objetivo del presente trabajo es evaluar dicho mercado en el período 1990-2010. La estrategia metodológica se basó en el análisis de mercado con información secundaria proveniente de organismos oficiales. Entre los principales resultados se pueden citar la estructura de la oferta, de la demanda, del producto y la comercialización.