三种红藻活性物质的发现及松节藻醇提物抗糖尿病药理研究

海藻是海洋生物中的一大类群，由于其特殊的生活环境，能够代谢产生大量结构独特多变和活性特殊多样的代谢产物，是化学和生物活性多样性研究的重要对象之一。我国海域辽阔，海藻资源丰富，为寻找结构新颖、生理活性独特的先导化合物，加强对海藻资源的开发利用，本论文对中国沿海的三种海洋红藻进行了化学成分和生物活性研究，同时对山东青岛海域生物量丰富的一种海洋红藻松节藻进行了动物体内抗糖尿病活性研究。 利用正相硅胶柱色谱、Sephadex LH-20柱色谱以及反相HPLC和重结晶等现代分离手段，对山东青岛沿海的红藻扇形叉枝藻（Gymnogongrus flabelliformis）进行了系统的化学成分研究，从中得到单体化合物26个，通过波谱学方法（IR、MS、NMR等）鉴定了他们的结构，分别为(3R,6R,7E)-(+)-3-O-phenylacetyl- 4,7-megastigmadiene-9-one（1），(3R,7E)-(-)-3-O-phenylacetyl-5,7-megastigmadiene -9-one（2），(3S,6R,7E)-(+)-3-hydroxyl-4,7-megastigmadien-9-one（3），(3S,5R,6S,7E)- (-)-3-hydroxy-5,6-epoxy-7-megastigmene-9-one（4），(3S,5S,6R,7E)-(+)-3-hydroxy- 5,6-epoxy-7-megastigmene-9-one（5），Dehydrovomifoliol（6），(3R)-(-)-4-[(2R,4S)-4- acetoxy-2-hydroxy-2,6,6-trimethylcyclohexylidene]-3-buten-2-one（7），2,3,3′-三溴-4,4′,5,5′-四羟基-1′-乙氧甲基双苯基甲烷（8），2,2′,3,3′-四溴-4,4′,5,5′-四羟基双苯基甲烷（9），3-溴-4,5-二羟基苯甲醛（10），2,3-二溴-4,5-二羟基苯甲基甲醚（11），2,3-二溴-4,5-二羟基苯甲醇（12），N, N-二甲基酪胺（13），4-羟基苯甲酸乙酯（14），4-羟基苯甲基乙醚（15），4-羟基苯乙基乙酯（16），4-羟基苯乙酸甲酯（17），4-羟基苯甲醛（18），豆甾-4-烯-3-酮（19），胆甾-4-烯-3-酮（20），胆甾醇（21），尿嘧啶（22），尿嘧啶核苷（23），腺嘌呤核苷（24），丁二酸（25），5-羟基-4-甲基-5-戊基-2,5-二氢呋喃-2-酮（26）。其中化合物1、2为新化合物，化合物3为新天然产物，所有化合物均为首次从该属海藻中分离得到。通过 MTT 法对部分单体化合物进行了肿瘤细胞毒活性筛选, 结果表明，化合物8、9、10、12对筛选的所有细胞株均有较强细胞毒活性，化合物11对人肺癌细胞株（A549）、人肝癌细胞株（Bel 7402）、人结肠癌细胞株（HCT-8）有一定细胞毒活性。通过研究单体化合物对小鼠腹腔巨噬细胞TNF-分泌的影响，对其进行抗炎活性筛选，结果表明，化合物8、9、11、13、17、23、24、25对小鼠腹腔巨噬细胞TNF-分泌表现出明显的抑制作用。 从采自山东荣成镆铘岛的红藻小珊瑚藻（Corallina pilulifera）的乙酸乙酯萃取物中分离得到16个单体化合物，通过波谱学方法鉴定化合物结构14个（另外2个正在鉴定中），分别为2α-乙氧酰基-2β-羟基-A-降胆甾-5-烯-4-酮（27），胆甾-4-烯-3-酮（28），胆甾醇（29），3β-羟基-胆甾-5,24(28)-二烯-7-酮（30），2α-羟基-胆甾-4-烯-3-酮（31），6α-羟基-胆甾-4-烯-3-酮（32），3β-羟基-胆甾-5-烯-7-酮（33），(E)-phytol epoxide（34），Phytenal（35），3,7,11,15- tetramethyl-hexadec-2-en-1-oll（Phytol）（36），Loloilide（37），(3S,5R,6S,7E)-(-)-3-hydroxy-5,6-epoxy-7- megastigmene-9-one（38），Dehydrovomifoliol（39），4-羟基苯甲醛（40）。其中，化合物 31为新天然产物，化合物27为首次从植物中分离得到，所有化合物均为首次从该种海藻中分离得到。通过 MTT 法对分离得到的单体化合物进行了肿瘤细胞毒活性筛选,化合物27和化合物32对筛选的所有肿瘤细胞株均有细胞毒活性，且化合物27对人胃癌细胞株（BGC-823）、人结肠癌细胞株（HCT-8）和人卵巢癌细胞株（A2780）具有中等强度抑制活性。化合物28、化合物31和化合物33对人肝癌细胞株（Bel 7402）、人结肠癌细胞株（HCT-8）和人卵巢癌细胞株（A2780）有一定细胞毒活性。 从采自广西北海涠洲岛的多管藻Polysiphonia sp.的乙酸乙酯萃取物中分离得到6个单体化合物，通过波谱学方法鉴定化合物结构5个（另外1个仍在鉴定），分别为胆甾醇（41），3,7,11,15-tetramethyl-hexadec-2-en-1-ol（Phytol）（42），3-吲哚甲醛（43），4-羟基苯甲醛（44），4-羟基苯甲酸（45）。 对山东青岛沿海的松节藻 (Rhodomela confervoides) 乙醇提取物进行了初步的体内抗糖尿病活性研究，采用链脲佐菌素诱导的2型糖尿病（STZ-DM）大鼠模型对其进行体内降糖实验，结果发现，松节藻乙醇提取物在糖尿病大鼠体内不仅具有显著的降血糖作用，且呈现良好的量–效关系，而且能够纠正糖尿病引发的物质代谢紊乱，增加体重，提高试验动物的成活率，因此具有良好的应用开发前景。

小型桡足类种群动力学研究

小型桡足类在生态系统中的重要作用近年来得到了广泛的关注，在近岸生态系统中，小型桡足类起着相当重要的作用。但关于小型桡足类种群动力学的研究在国内还处于起步阶段，因此我们选取了国内沿岸海域常见优势种小拟哲水蚤、双刺纺锤水蚤、太平洋纺锤水蚤及强额拟哲水蚤等四种小型桡足类为研究对象，探讨其种群动力学相关方面的变动机制。本文在2005年10月－2006年9月选取胶州湾为主要的研究海域，进行了一周年的小型桡足类的采样和培养实验研究。在胶州湾，小拟哲水蚤（Paracalanus parvus）全年出现，其种群数量变动呈现双峰型，在夏季（6月和8月）达数量高值，在冬季（1月）有一个小的高峰。种群数量在4月达全年最低值，在7月份数量也有一个明显的数量降低。从空间分布上来讲，该水蚤在冬季主要以CV期桡足幼体存在于湾南和湾外区域，湾北数量很少；从春末开始，各期幼体开始在各海区广泛分布。小拟哲水蚤在胶州湾几乎全年产卵（2月份除外），但较高的产卵率主要集中在春末到秋初，最大产卵率出现在5月，达27.9 eggs female-1d-1。总体来讲，在胶州湾小拟哲水蚤的产卵率与温度、叶绿素及体长均呈显著正相关，但与盐度呈负相关关系。从不同的区域来看，胶州湾湾北区域小拟哲水蚤产卵率较高，最高值出现在湾北6月份，产卵率达到了60.8 eggs female-1d-1。大于10 eggs female-1d-1的产卵率在湾北持续了6个月（4－9月），在湾口持续了5个月（4－8月），而在湾外只持续了3个月（5－7月）。小拟哲水蚤生物量在6月份达到最高值（6.15 mg C m-3），在4月达到全年最低值（0.028 mg C m-3）。次级生产的变动从4月到9月与生物量的变动趋势完全相似，但冬季生物量的高峰并没有伴随次级生产的高峰值，分析其原因是由于冬季低的生长率所致。小拟哲水蚤在整个胶州湾平均的年次级生产为158.41 mg C.m-3yr -1。强额拟哲水蚤（Paracalanus crassirostris）在胶州湾只在夏末到秋季出现，最大数量出现在8月份。从强额拟哲水蚤的分布区域来看，从湾内到湾外有递减趋势。在2006年9月份，只有湾北有部分种群，其他区域几乎没有该种出现。该种最大产卵率出现在8月，达11.2 eggs female-1d-1。强额拟哲水蚤生物量的变动与次级生产的变动趋势相似，最大值也都出现在8月份。该水蚤在胶州湾平均年次级生产仅为2.12 mg C m-3yr-1。双刺纺锤水蚤(Acartia bifilosa)在胶州湾是全年出现，其种群数量在5－6月份突发性增加达全年最高值（>8000 ind. m-3），之后又急剧下降。从该种的区域分布来看，5－6月份数量的高峰主要出现在湾北区域，7月份虽然各区域数量均下降，但大部分种群集中在湾外区域。双刺纺锤水蚤在胶州湾几乎全年产卵（1－2月除外），产卵率的最高值出现在4月，达16.5 eggs female-1d-1。4月份雌体高的产卵率为5月份种群数量的大量增加提供了补充。双刺纺锤水蚤生物量与次级生产的变动趋势一致，在5－6月份达到高值，在秋冬季次级生产较低。双刺纺锤水蚤在整个胶州湾平均的年次级生产为114.61 mg C m-3yr-1。太平洋纺锤水蚤（Acartia pacifica）在胶州湾季节性出现，在冬春季节消失，从夏季开始出现。该种在5月零星出现，种群数量在6月份开始增多，到7月份达到最高值2356 ind. m-3，之后在8月数量锐减至196 ind. m-3。从区域分布来看，该水蚤在胶州湾只出现在湾北和湾南区域，湾外区域几乎没有，而且呈现湾北到湾南递减的趋势。6月份数量大部分出现在湾北区域，到7月份才有一部份在湾南出现。太平洋纺锤水蚤在其出现季节均产卵，最大产卵率出现在6月份，达37.17 eggs female-1 d-1，部分补充了7月份太平洋纺锤水蚤种群数量的大量增加。太平洋纺锤水蚤生物量与次级生产的变动趋势相似，在7月份达到了最高值，在11月达到最低值。太平洋纺锤水蚤在胶州湾平均的年次级生产为45.63 mg C m-3yr-1。胶州湾四种小型桡足类总的年次级生产为~320 mg C m-3 yr-1。

凡纳滨对虾分子标记筛选、连锁图谱构建和QTL定位

利用AFLP和微卫星标记，以凡纳滨对虾F1全同胞家系为作图群体，构建了凡纳滨对虾的雌性和雄性遗传连锁图谱并对生长相关性状体长和体重进行了QTL分析。利用经过筛选的108对AFLP引物组合，对亲本和94个子代个体进行了分离分析。共得到2041个多态AFLP标记（1:1分离）。平均每个引物组合产生20个多态片段。有826个AFLP标记偏离孟德尔遗传（40.5%, P<0.05）。所筛选的100个微卫星标记中有30个在家系中有作图信息，分别有24个和20个位点可以用于母本和父本的作图。对父母本β-1，3-葡聚糖结合蛋白(BGBP)，脂多糖和葡聚糖结合蛋白(LGBP)和蜕皮抑制激素（MIH）等基因片段进行序列分析得到一些可用于构建连锁图谱的SNP标记。 对所有的分离标记进行了连锁分析，分别绘制了凡纳滨对虾的雌性和雄性连锁图谱。雌性连锁图谱的框架图有319个遗传标记组成，分布于45个连锁群，其中AFLP标记300个，微卫星位点18个，性别标记一个，连锁群长度从29.5cM到260.0cM, 每个连锁群含4－16个标记。图谱长度为4134.4 cM, 各连锁群平均图距在7.6到25.9 cM之间，总平均图距为15.1 cM。有267个标记（含14个微卫星）整合到雄性框架图上。 雄性框架图也含45个连锁群，长度从14.2cM到161.1cM, 图谱长度为3220.9 cM, 各连锁群平均图距在4.1到25.5 cM之间，总平均图距为14.5 cM。 作图群体所有个体的性别均作为标记整合到雌雄分离信息中，在94个F1个体中，54个为雌虾，40个是雄虾。在雌性图谱第29连连锁群上，性别与三个微卫星标记紧密连锁（v1f148, v145f120, v95f166）, 图距分别为6.6, 8.6 和8.6cM, 相应LOD值分别为17.8 14.3 和 16.4。 与雌性图相对应的是，雄性图谱未发现任何与性别连锁的标记。推测凡纳滨对虾的性别决定机制可能是ZW型，其中雌性为异配性别。 体长和体重均显示出连续变异的特点，显示这些与生长相关的性状都是典型的数量性状或多基因遗传。体重和体长符合正态分布且两性状之间存在着显著的相关性（P<0.001），Pearson 相关系数为0.95。在凡纳滨对虾雌性图谱和雄性图谱上，共定位了6个与体长和体重等生长性状相关的QTL，可解释的表型变异从15.1％到21.3％。共检测到3个与体长相关的QTL，包括两个正向效应的QTL和一个负向的QTL，分别定位到雌性的第6连锁群和雄性的第4和11 连锁群上。体重也检测到3个QTL，其中一个QTL加性效应是正向的，分别位于雌性的第6和7连锁群及雄性的第11连锁群上。QTL主要集中在雌性图谱的Fc6和Fc7及雄性图的Mc4和Mc11上。体长和体重的QTL定位结果中各有两个是十分相似的，其相邻的标记位点完全一样，只是相应的LOD值略有差异，还各存在两性状特异的一个QTL。大多QTL与相邻标记之间的距离只有0.1cM(仅Wfc7的距离较大)，为进一步的精细定位奠定了基础。 分子标记筛选、遗传图谱的构建及生长相关性状的QTL定位为我们下一步从事分子标记辅助选择育种,QTL精细定位和比较基因作图打下基础，并最终推动凡纳滨对虾的遗传改良。

两种海藻提取物的化学成分和生物活性的研究及其应用

本论文的研究工作由两部分组成，第一部分研究了海带（Laminaria japonica）水提取物中的活性物质，并研究了提取物对蔬菜促生长的影响及其作用机制。第二部分对三列凹顶藻(Laurencia tristicha)乙醇提取物的乙酸乙酯相进行了活性筛选和化学成分研究，并对其中分离得到的单体化合物进行了生物活性筛选。 第一部分主要以中国人工养殖的海带为原料，使用与海藻多糖生产相结合的提取技术并浓缩其中的有效成分。对浓缩提取物进行了蔬菜的农田效果实验，并对作物抗旱性能的增加、作物硝酸盐积累的减少、作物品质的改善、以及作物抵抗病毒病的能力等影响进行了作用机制方面的研究。海藻浓缩提取物进行的农田效果实验表明：作物抗旱型相对含水量RWC值在92%~94%之间；病毒病的防治效果最高可达到91%；作物的品质有明显的改善，最重要的是首次发现海藻提取物有降低蔬菜中硝酸盐的含量（硝酸盐的含量是与有机蔬菜区别的重要指标之一）的作用。该部分研究工作的创新性主要体现在：（1）首次在国内外提出和采用与海藻多糖生产相结合的提取技术。该技术的应用不但减少了提取成本，使工业化生产成为可能,更重要的是使我国的海藻工业生产可能实现高值化和开辟综合利用的新途径。（2）首次发现海藻中的小分子海藻多糖具有和细胞激动素、甜菜碱、植物生长素等活性物质同样的生物活性。 第二部分的研究是在查阅了大量的近20年来国内外有关红藻凹顶藻中化学成分研究的相关文献的基础上，对凹顶藻中的次生代谢产物进行了综述。该论文主要是通过对红藻三列凹顶藻的95%乙醇提取物的乙酸乙酯相进行化学成分分析和生物活性筛选以期能够发现具有药用前景的活性先导化合物。 为了寻找具有生物活性的化合物，我们对采自我国南海硇洲岛海域的红藻三列凹顶藻的95%乙醇提取物的乙酸乙酯相进行了活性筛选。采用MTT法对其在KB细胞株、Bel-7402细胞株、PC-3M细胞株、MCF-7细胞株、Ketr-3细胞株模型上进行了细胞毒活性测试；采用酶模型对其进行了Na+,K+-ATPase的抑制活性测试；采用MTT法对其在犬主动脉血管模型上进行了血管平滑肌细胞增殖抑制活性测试；结果表明，三列凹顶藻的95%乙醇提取物的乙酸乙酯相对Na+,K+-ATPase和犬血管平滑肌细胞增殖具有一定的抑制活性。 利用正相和反相色谱、Sephadex LH-20色谱以及反相HPLC等手段进行分离纯化，从我国南海海域的红藻三列凹顶藻中分离得到33种化学成分，通过波谱学方法（IR、MS、NMR）以及X-ray单晶衍射试验对其化学结构进行了确证，其中化合物L1~L8为新结构化合物，化合物L5为具有新骨架的全新结构化合物，化合物L9~L13为新天然产物，化合物L18和L22系首次从海洋生物中获得，所有化合物均为首次从该属海藻中得到。新化合物L1~L8均为倍半萜类化合物，命名分别为：(1R,3R)-(-)-3-(3-hydroxy-4-methylphenyl)- 1,3-dimethyl–2-methylidene cyclopentanol (L1), (1R,3R)-(-)-3-(4-methylphenyl)-1,3-dimethyl-2-methylidenecyclopentanol (L2)， (1R, 3R)-(-)-3-(2-hydroxy-4-methylphenyl)-1,3-dimethyl–2–methylidenecyclopentanol (L3)，(+)-(1S,2R)–2-(3–hydroxy–4–methylphenyl)-1,2-[3.1.0]bicy-clohexane (L4)，()-(1S,2R) -5-hydroxy–6–methyl-spiro-dihydrobenzofuran-2(3H),2-{1-methyl-[3.1.0]bicyclohexane} (L5), (+)-6-methyl-2-(p-tolyl)hept-4-en-2,6-diol (L6)，(3R,3aS,8bS)-(-)-2,3,3a,8b–tetrahydro–7-bromo – 3 a– hydroxymethyl - 3, 6, 8b - trimethyl-1H- cyclopenta[b] benzofuran (L7 )，(3R, 3aS, 8bS) - (-) - 2,3,3a,8b–tetrahydro–3 a–hydroxymethyl-3,6,8b -trimethyl -1H – cyclopenta [b] benzofuran (L8)。25个已知结构化合物确定为：(+)-(1R,2R)-4-bromo-1,5, 9–trimethyl–12– methylidene–8–oxa-tricyclo[7.2.1.02]dodeca-2,4,6-triene (L9)，(3S,3aR,8bS)-(-)-2,3,3a, 8b– tetra -hydro–7-bromo–3–hydroxy-3,3a,6,8b-tetramethyl-1H-cyclopenta[b]benzofu- ran (L10 )，(3R, 3aR, 8bS) - (-) - 2, 3, 3a, 8b – tetrahydro – 7 - bromo – 3 – hydroxy - 3,3a,6,8b - tetramethyl - 1H - cyclopenta [b] benzofuran (L11 )，(3S,3aR,8bS) - (-) - 2, 3, 3a, 8b – tetrahydro –3–hydroxy -3, 3a, 6, 8b - tetramethyl-1H-cyclopenta[b]benzofuran (L12 )， ( 3aR, 8bS) - (-) - 3a,8b –dihydro–7 - bromo – 3, 3a, 6, 8b - tetramethyl - 1H - cyclopenta[b]benzofuran (L13 )，aplysinol (L14 ) ，aplysin (L15)，laurebiphenyl (L16)，johnstonol (L17)，gossonorol (L18)，7,10-epoxy-ar- bisabol-11-ol (L19)，10-epi-7,10-epoxyarbisabol-11-ol (L20) 3β-hydroxy- 5α, 6α-epoxy- β- ionone (L21 )，3β-hydroxy-5β,6β-epoxy-β-ionone (L22 )，胆甾醇 (L23 )，胆甾-5-烯-3β,7α二醇胆甾-5-烯-3β,7α二醇 (L24)，β-谷甾醇 (L25)，叶绿醇 (L26 )，玉米黄素 (L27 )，对羟基苯甲醛 (L28 )，3-吲哚甲醛 (L29 )，1-O-十六烷酰基-3-O-β-D-吡喃半乳糖基-丙三醇(L30 )，1-O-十八烷酰基-3-O-β-D-吡喃半乳糖基-丙三醇 (L31 )，丙三醇-1-软脂酸单酯 (L32 )，正十六碳酸 (L33 )。 采用MTT法对其中23个单体化合物在Bel-7402细胞株、BGC-823细胞株、A549细胞株、A2780细胞株、HCT-8细胞株和HELL细胞株模型上进行了细胞毒活性测试；采用MTT法对其中13个单体化合物在犬主动脉血管模型上进行了血管平滑肌细胞增殖抑制活性测试；结果表明，部分单体化合物显示出一定的生物活性。

喷涂锌铝覆盖层在海洋环境中的腐蚀行为及失效机理

虽然采用喷涂锌铝覆盖层技术对陆上钢铁构件进行长效防护在国内外已普遍应用，但由于海洋环境的复杂和苟刻使这项技术在海上的应用受到了很大的限制。目前对于喷涂锌铝覆盖层防腐规律和机理的研究仅是从腐蚀挂片试验数据的对比，或从电位-时间图、电化学理论角度进行分析。对喷涂锌铝再涂装有机涂层的复合覆盖层的防腐规律和机理的研究则是少见报导，本论文的工作将初步揭示在该领域金属及有机复合覆盖层在海洋环境中的腐蚀过程及失效机理，为该技术在我国的发展提供理论基础。本文首先采用热喷涂工艺制备了锌、铝及其锌铝复合涂层，并对部分试样涂刷氯化橡胶面漆进行封闭处理。然后通用外海现场挂片、室内盐雾加速实验等经典腐蚀试验方法测定了不同涂层体系在不同腐蚀环境下的电位、厚度、复量随暴露时间的变化：并观察了其腐蚀失效过程中的形貌变化。通过电化学交流阻抗谱（EIS）的测试对涂层的电化学特性及腐蚀失效机理进行了分析。利用扫描电镜（SEM）、透射电镜（SEM）、电子探针（EMPA）、X-射线衍射仪（XRD）、光学金相等分析了原始状态和不同腐蚀条件下涂层表面和截面的特征、成分分布及组织结构。综合上述几种实验手段所得结果得到了以下主要结论：1. 海洋环境下，锌铝复合涂层既利用了锌涂层与钢铁基体结合好和电化学活性高的优点，又利用了铝涂层耐蚀性好和阻隔能力的长处，是一种优秀的防腐涂层方案。2. 对于封闭涂层体系，金属涂层与有机涂层的相容性十分重要，有机层的种类不同，与金属涂层复合后表现出的耐蚀能力也不一样。对于相容涂层的组合，其防护寿将大于两种涂层单独使用时防护寿命代数和，符合Ing. J. F. H的试验公式；对于非相容涂层组合，其防护寿命大大降低。3. 铝涂层的腐蚀主要是缝隙性腐蚀，锌涂层的腐蚀主要是溶脱性腐蚀。4. 锌铝复合涂层体系中作为外涂层的铝涂层应厚于内层的锌涂层的锌涂层，这样才能发挥铝涂层的“自堵塞效应”提高整个涂层体系的综合寿命。5. 由于喷涂工艺本身的特点决定了涂层具有多孔性和渗透性。金属涂层与有机层复合后极化程度增大，腐蚀速度降低。6. 金属与有机复合层的腐蚀破坏主要是由有机层与金属涂层的局部腐蚀引起的。海水从表面有机层的针孔和裂缝进入，到达金属涂层与有机层的交界处，与金属涂层发生腐蚀反应，腐蚀产物增加到一定数量后，形成鼓泡。鼓泡的出现会加速其下面金属涂层腐蚀。

胶州湾悬浮颗粒物中脂肪酸的时空分布及其在初级生产者到初级消费者食物传递中的作用

研究初级食物供给与初级消费之间数量与质量的关系在海洋浮游生态系统食物网研究中占有基础地位。悬浮颗粒物及浮游动物中脂肪酸的组成和含量可以很好地为食物关系研究提供信息。当悬浮颗粒物在时空上存在数量和质量差异时，这种差异就可能在浮游动物中体现出来，而且通过脂肪酸的信息可以追踪到这种差异。本研究旨在阐明脂肪酸在悬浮颗粒物组成中的生物标记作用和在悬浮颗粒物到浮游动物食物传递过程中的营养指示作用，同时应用这一标记物研究胶州湾海域悬浮颗粒物的大体分布及其与浮游动物间的食物关系。 文章首先依据2005年3月－2006年2月胶州湾颗粒有机碳及叶绿素a的数据估测碳生物量的转化系数，发现该系数受时空环境差异的影响，平均为56，从而推导出胶州湾浮游植物有机碳浓度，进而探讨浮游植物对颗粒有机碳的贡献。对各参数分析结果显示胶州湾颗粒有机碳、叶绿素a和浮游植物有机碳年平均浓度分别为为0.47 mg.L-1、4.16 μg.L-1及0.23 mg.L-1，三者表现出相似的时空变化动态，即湾内沿岸水域较高，湾外较低，夏季较高秋冬季较低。浮游植物对颗粒有机碳的贡献较高，年平均接近37%。 对悬浮颗粒物的脂肪酸组成分析后发现饱和脂肪酸（SSFA）16:0，14:0，18:0及单不饱和脂肪酸（MUFA）Σ16:1(ω7+ω5+ω9)所占比例较高，多不饱和脂肪酸（PUFA）中EPA和DHA也相对较高。总脂肪酸在水体中的绝对浓度及在颗粒有机碳中的相对含量均存在着时空变异，二者的平均变动范围分别在4.7－60.2 μg . L-1及20.1－86.7 μg . mg-1之间，夏季高于秋冬季，空间分布上二者均在湾东部相对较高，而在湾外较低。不同脂肪酸组合的时空变化可以反映出悬浮颗粒物组成的时空动态，其中16:1ω7/18:1ω9、Σ16:1/18:1ω9、Σ16:1/Σ18:1、Σ16/Σ18、Σ16/ΣFA及20:5ω3/22:6ω3等脂肪酸组合在研究海域可以较好的指示硅藻组成，而Σ18/ΣFA 及22:6ω3/ΣFA可以指示甲藻组成，BSFA/ΣFA、Σ(Br+St)/ΣFA 、Br/St (15:0)及 Br/St (15:0+17:0)可以较好的指示细菌，SSFA/ΣFA及(24:0+26:0)/ΣFA可以示踪碎屑组分及其中的陆源成份。ω3系列脂肪酸在有机碳中的含量及在总脂肪酸中的比例以及不饱和指数可以表征悬浮颗粒物的食物质量。通过标志脂肪酸对悬浮颗粒物组成的指示发现冬季2月悬浮颗粒物组成中硅藻所占比例较高，多数月份湾内近岸水域尤其是湾东部细菌组成相对较高，而湾口至湾外水域碎屑含量相对较高。 浮游动物总平均干重生物量为72.6 mg.m-3，平面分布表现为湾内北部及中心区域生物量普遍较高，湾东部水域较低，季节变化表现为总生物量在春季4月及冬季12月形成峰值，总体上在春季5月、夏季7月及秋冬大部分月份相对较低，但不同粒径组成其动态不尽相同。浮游动物的脂肪酸组成与悬浮颗粒物存在一定差别，表现为MUFA比例下降，PUFA比例升高；SSFA中14:0的比例下降，18:0及20:0比例提高，MUFA中20:1ω9比例升高，PUFA中，EPA及DHA所占比例也相对较高。8月份总脂肪酸含量较高，9月与10月相对较小，各粒级内差别不大。 利用主成份分析发现悬浮颗粒物的组分在浮游动物中能够用相应脂肪酸指标进行示踪，当食物数量充分满足需求时，浮游动物脂肪酸特征与悬浮颗粒物组成一致性较高，同时通过脂肪酸示踪发现当潜在食物数量较丰富时，浮游动物的摄食存在选择性，这种选择可能受食物质量的调控，而当食物数量较低时，其选择性也降低。 悬浮颗粒物中EPA含量及不饱和指数是相对重要的食物质量指示物，通过对其指示特征的分析发现胶州湾总体上浮游动物的摄食会影响其食物质量组成；但在8月，浮游动物的生物量受悬浮颗粒物质量的调控，而浮游动物生物量对食物数量的摄食压力较小，认为该时期是食物质量限制对浮游动物生物量影响相对重要的时期，可以用特征脂肪酸进行清晰的分析。

虾夷扇贝Patinopecten yessoensis (Jay)和仿刺参Apostichopus japonicus (Seienka)多倍体诱导研究

本文采用化学方法诱导了虾夷扇贝Patinopecten yessoensis (Jay)和仿刺参Apostichopus japonicus (Selenka)的多倍体。采用6－二甲基氨基嘌呤（6－dimethylaminopurine）抑制虾夷扇贝极体释放，研究了诱导三倍体的实验条件、技术工艺以及三倍体虾夷扇贝幼虫的生长和培育方法。结果表明，使用6－二甲基氨基嘌呤（6－DMAP）可诱导17.3%-100.0%的三倍体虾夷扇贝面盘幼虫。筛选并优化了生产中操作简便、高效、成活率高的诱导条件，并研究出在扇贝三倍体诱导中批量获得受精卵、处理及培育的技术工艺，对扇贝三倍体的规模化诱导及培育等生产性应用具有较高的参考价值。报道了采用细胞松弛素B（cytochalasin B）、秋水仙素（colchicine）、6－DMAP以及咖啡因（coffeine）等药物抑制虾夷扇贝第一极体（PB_1）释放、PB_1和第二极体（PB_2）释放以及抑制第一次卵裂等方法诱导四倍体的结果。结果表明，CB、6－DMAP和秋水仙素抑制扇贝第一次有丝分裂诱发四倍体的比例低于25%，而采用CB抑制PB_1可有效地诱导产生四倍体，从授精后42min提前到15-22min开始处理，抑制PB_1的放出有助于提高四倍体的比例，在12 ℃，处理开始和终上时间分别在授精后20－22min和60－62min时，面盘幼虫四倍体率最高，为56.5%。对CB处理抑制受精卵PB_1释放的处理组胚胎的染色体分离状况进行了观察研究。对照组受精卵具有19条四分体染色体，经过减数分裂I期（meiosis I）和减数分裂II期（meiosis II），放出PB_1和PB_2，受精卵的发育具有不同步性。处理组受精卵在第二次减数分裂中出现了“三级分离“、“联合二级分离“和“独立二级分离“等特殊的分离类型，初步分析了CB抑制第一极体放出的机理。对三倍体虾夷扇贝的繁殖潜力和卵子的大小进行了观察研究，三倍体扇贝具一定的繁殖能力，三倍体雌贝平均产卵3.26 * 10~6个，而相同壳长二倍体贝为1.45 * 10~7，三倍体产卵量仅为二倍体产卵量的22.5%。三倍体卵子产出后，形状不规则，卵子平均直径为87.25μm，比二倍体大11.7%，卵子体积比二倍体大39.4%。利用CB抑制第一极体释放诱导了虾夷扇贝的四倍体，诱导率为41.5%。首次报道了仿刺参Apostichopus japanicus (Selenka)多倍体诱导的结果。采用紫外线照射的海水成功地使海参分别单独产卵、排精，从而准确地控制了海参的人工授精后处理的时间。采用0.2、0.4mg/L CB 抑制受精卵第一极体释放以及10、20、30和40mg/L 的6－DMAP 分别抑制PB_1、PB_2放出的方法诱导了仿刺参的多倍体。研究了诱导的药物浓度、处理时间以及处理开始时间等，同时对幼体的成活率等进行了探讨。结果表明，2种药物均可诱导仿刺参产生三倍体和四倍体，从效果上看，采用CB抑制PB_1诱导，到达小耳幼体时，可产生9.7%-21.3%的四倍体。6－DMAP抑制PB_2放出诱导三倍体，三倍体诱导率介于7.5%-25.8%之间。

小庙洪牡蛎礁巨蛎属牡蛎间生殖隔离研究

中国牡蛎种类丰富，但是由于贝壳可塑性强，表型变化大，分类学及系统发生学研究进展缓慢，存在诸多争议。本文在全国部分海区采集牡蛎样品，并通过表型和分子生物学方法进行鉴定，重点调查潮下带牡蛎的分布情况。选取江苏南通小庙洪牡蛎礁作为典型海域，研究亲缘关系接近的巨蛎属牡蛎之间在繁殖上如何维持相互之间的关系。本研究的目的在于摸索牡蛎物种鉴定的实用方法，并阐明熊本牡蛎和近江牡蛎生殖隔离是如何维持的。研究结果对牡蛎等海洋贝类的分类及系统发生学研究具有一定的借鉴作用，为牡蛎礁的生态保护提供生物学参考依据。 在辽宁营口、海洋岛，河北秦皇岛，山东西霞口、潍坊、青岛，江苏南通，浙江舟山、奉化，福建莆田，广东汕头等地区采集牡蛎样品，重点采集潮下带的牡蛎，通过地理分布、表型、DNA含量测定和COI种特异性探针鉴定对各地区的牡蛎物种组成进行分析。选取了南通小庙洪牡蛎礁作为研究牡蛎物种间相互关系的最佳地点。该地区牡蛎由主要分布在潮间带的熊本牡蛎和主要分布在潮下带的近江牡蛎组成。 对南通小庙洪牡蛎礁上两种巨蛎属牡蛎在空间上的分布进行调查；定期取样，制作性腺切片，观察两种牡蛎的性腺发育情况；同时，定期在海区挂板，采用半人工采苗的方式采集海区牡蛎幼体，通过ITS1基因鉴定采集的稚贝所属物种。通过调查发现二者的分布存在重叠区域；两种牡蛎在2007年6月中旬至9月中旬存在两个明显的繁殖高峰期，在每个繁殖期内两种牡蛎同时发生大量繁殖行为的可能性极高。结果表明，两种牡蛎不存在明显的生态隔离和季节隔离等交配前生殖隔离机制。 在室内对两种牡蛎进行2×2完全双列杂交，并通过ITS1基因的克隆测序验证杂种后代。双列杂交受精实验采用多亲本混合交配的方式（即每个物种的卵子或精子均来自多个个体），共进行7次重复。结果表明，熊本牡蛎的卵子能够被近江牡蛎的精子以较低的受精率（24.6%）受精，且形成的后代确实为两个物种杂交产生，而反方向不能受精。 幼虫和稚贝生长存活的双列杂交实验共进行3次重复。估测受精率、受精卵的孵化率，第1至29日每两天测量一次D形幼虫的壳高和密度。结果表明杂交幼虫（熊本牡蛎♀与近江牡蛎♂的杂交，SA）的受精率（12.5%）显著低于（P < 0.05）熊本牡蛎（75.4%）和近江牡蛎（84.5%）纯种对照组；而孵化率与对照组无显著差异（P > 0.05）；自受精至29日龄，杂交幼虫壳高的生长速度明显低于纯种对照组（P < 0.05）；但是存活率与熊本牡蛎无显著差异（P > 0.05）。杂交幼虫附着变态期间死亡率高；93日龄，熊本牡蛎有10.08%的匍匐期面盘幼虫存活至稚贝，显著大于（P < 0.05）近江牡蛎（2.18%）和杂交幼虫（0.76%）；杂交稚贝壳高显著小于（P < 0.05）纯种对照组。稚贝在海区挂养3个月。与挂养前相比，杂交稚贝在潮下带的存活率为19.2%，125个稚贝仅存24个，壳高平均增加2.15 mm。熊本牡蛎在潮间带的存活率达到65%，壳高平均增加3.99 mm。近江牡蛎在潮下带的存活率达到85.7%，壳高平均增加5.22 mm，在潮间带的存活率仅10.9%，壳高平均增加3.28 mm。受精6个月后，所有杂交稚贝仅剩3枚，运回实验室暂养一段时间后全部死亡。 设置20、25、30、35共4个盐度梯度，估算双列杂交组合在不同盐度下的受精率、孵化率、7日内的存活率和壳高生长，实验共进行3个重复。结果表明，杂交组合在4个盐度下的受精率（平均为11.2%）均显著低于（P < 0.05）熊本牡蛎（75.0%）和近江牡蛎（77.5%）纯种对照组；而孵化率与对照组无显著差异（P > 0.05）；杂交组合在盐度35时的孵化率（85.0%）显著大于20（49.6%）、25（51.3%）和30（55.4%）三个盐度梯度。7日龄杂交幼虫（10.5%）和近江牡蛎（11.4%）的存活率显著小于（P < 0.05）熊本牡蛎（30.3%）；杂交幼虫的壳高（75.7 μm）显著小于（P < 0.05）熊本牡蛎（81.5 μm）和近江牡蛎（85.6 μm）对照组。两因素方差分析表明，杂交组合方式对受精率、孵化率、7日龄存活率和7日龄壳高均有显著影响，盐度对7日龄壳高的影响显著。 实验结果表明，江苏小庙洪牡蛎礁上的熊本牡蛎和近江牡蛎之间在分布空间上存在重叠区域，繁殖时间也存在重叠，并未产生明显的生态隔离和季节隔离。二者之间存在不对称性杂交，熊本牡蛎的卵子能够与近江牡蛎的精子以较低的受精率受精，而反方向完全不亲和。杂交幼虫在受精率上存在显著劣势；但是受精卵的孵化率与纯种受精卵无显著差异；杂交幼虫在生长上也存在显著劣势；而存活率与熊本牡蛎无显著差异；杂交幼虫附着变态期间大量死亡，存活下来的稚贝生长缓慢，死亡率高。表明熊本牡蛎和近江牡蛎之间即存在交配前的配子不亲和性隔离，又存在交配后隔离，主要表现为杂种不活。

三种海洋红藻和两株放线菌次级代谢产物研究

海洋是一个巨大的天然产物宝库，约占地球表面积70%的海洋蕴藏着80%的生物资源。由于海洋生态环境的特殊性，导致海洋生物能够产生大量结构独特多变和活性特殊多样的代谢产物。我国海域辽阔，海洋资源丰富，为寻找结构新颖、生理活性独特的先导化合物，加强对海洋资源的开发利用，本论文对中国沿海的三种海洋红藻和两株放线菌次生代谢产物以及生物活性进行研究，为新药研究与开发提供模式结构和药物前体。 对红藻似瘤凹顶藻Laurencia similis乙酸乙酯萃取物进行分离纯化，从中得到单体化合物35个，通过波谱学方法（IR、MS、NMR等）鉴定了他们的结构。分别为：2, 2, 5, 5, 6, 6-sixibromo-3, 3-bi-1H-indole (1)，3,5-dibromo- 1-methyl-indole (2)，3',5',6,6'-tetrabromo-2,4-dimmethyldiphenyl ether (3)，1,2,5- tribromo-3-bromoamino-7-bromomethylnaphthalene (4)，2,5,8-tribromo-3-bromo- amino-7-bromomethylnaphthalene (5)，2,5,6-tribromo-3-bromoamino-7-bromo- methylnaphthalene (6), 2,5,6,5',6'-pentabromo-3,4,3',4'-tetramethoxybenzophenone (7), (4E)-1-bromo-5-[(1'S*,3'R*)-3'-bromo-2',2'-dimethyl-6'-methylenecyclohexyl] -3-methylpent-4-ene-2,3-diol (8)，4-hydroxy-Palisadin C (9)，Isopalisol (10)，Luzonensol (11)，Palisadin B (12)，Aplysistatin (13)，Palisadin A (14)，5-Acetoxypalisadin B (15)，Aristolan-1(10)- en-9-ol (16)，Aristol-8-en-1-one (17)，Aristolan-9-en-1-one (18)，Aristolan-1(10)-en- 9-one (19)，Aristofone (20)，Aristolan-1(10)-8-diene (21)，Aristolan-1,9-diene (22)，10-Hydroxyaristolan-9-one (23)，7,11,15-trimethyl-3-methylene-hexadecan-1,2-diol (24)，3β-Hydroxyergosta- 5,24(28)-dien-7-one (25)，Isofucosterol (26)，β-sitosterol (27)，豆甾-4-烯-3α,6β-二醇 (28)，Cholesta-5-en-3β-ol (29)，Stigmasterol (30)，2,3,5,6-四溴-吲哚 (31)，2,3,6-tribromo-1H-indole (32)，3,5,6-tribromo-1-methylindole (33)，3,5,6-tribromo -1H-indole (34)，2,3,5-tribromo-1-methylindole (35)，其中化合物1-9为新化合物，化合物10-15、20和化合物24-30均为首次从该种海藻中得到。对新化合物1-9进行PTP1B酶抑制剂活性筛选，新化合物1、3、7显示强的PTP1B酶抑制活性。 对红藻齐藤凹顶藻Laurencia saitoi乙酸乙酯萃取物进行分离纯化，从中得到单体化合物11个，通过波谱学方法（IR、MS、NMR等）鉴定了他们的结构，分别为：2-hydroxyl-Luzofuranone (1)，2-hydroxyl-Luzofuranone B (2)，4-hydroxyl-Palisudin C (3)，2-bromo-γ-ionone (4)，Aplysistatin (5)，5-Acetoxypalisadin B (6)，Palisadin B (7)，Palisadin A (8)，Pacifigorgiol (9)，豆甾-4-烯-3α,6β-二醇 (10)，2, 3, 5, 6-四溴-吲哚 (11)，其中化合物1-4为新化合物，所有化合物均为首次从该种海藻中得到。通过MTT法对分离得到的新化合物1-4进行肿瘤细胞毒活性筛选，结果显示4个新化合物对所测肿瘤细胞株均无明显的活性。 对红藻瘤状软骨凹顶藻Chondrophycus papillous乙酸乙酯萃取物进行分离纯化，从中得到单体化合物5个，通过波谱学方法（MS、NMR等）鉴定了他们的结构，分别为邻苯二甲酸二丁酯 (1)，邻苯二甲酸二异辛酯 (2)，胆甾醇 (3)，3,7,11,15-tetramethyl-hexadec-2-en-1-ol (4)，4-羟基苯甲醛 (5)，所有化合物均为首次从该种海藻中得到。 对海洋放线菌M159乙酸乙酯萃取物进行分离纯化，从中得到单体化合物13个，通过波谱学方法（MS、NMR等）鉴定了他们的结构，分别为：5-(4',6'-dihydroxy-6-methyloctyl)furan-2(5H)-one (A)，phenethyl alcohol (1)，4-羟基苯甲醛(2)，anthranilic acid (3)，4-Hydroxy-3-methoxy- phenyl-propionic acid (4)，5-(6,7-dihydroxy-6-methyloctyl)furan-2(5H)-one (5)，p-Hydroxyphenylethyl alcohol (6)，3-Indoleacrylic acid (7)，Indol-3-carboxylic acid (8)，Adenine cordyceposide (9)，腺嘌呤核苷(10)，尿嘧啶核苷(11)，Thymidine (12)，其中化合物A为新化合物。所有化合物均为首次从该株放线菌中得到。 对海洋放线菌L211乙酸乙酯萃取物进行分离纯化，从中得到单体化合物15个，通过波谱学方法（MS、NMR等）鉴定了7个结构，分别为：spatozoate (1)，anthranilic acid (2)，3-Indolylethanol (3)，1-Acetyl-β-carbolin (4)，p-Hydroxyphen- ylethyl alcohol (5)，Indole-3-acetic acid (6)，Indol-3-carboxylic acid (7)，所有化合物均为首次从该株放线菌中得到。

中国对虾、墨吉对虾和长毛对虾幼体及仔虾发育的比较研究

中国对虾，墨吉对虾和长毛对虾是我国近海渔业捕捞和养殖业中最重要的经济种。由于它们早期生活史阶段形态的极大相似性，尤其在三种对虾都有分布的南方海区，其幼体和仔虾的鉴别非常困难，因而影响到对虾早期生活史阶段生态补充和资源管理等的研究。本文报道了中国对虾，墨吉对虾和长毛对虾幼体及仔虾发育的形态变化及其比较研究结果，为有关研究提供了准确的种类鉴别依据，以便我国对虾资源补充研究及其合理的开发利用建立在更加科学的基础上，使捕捞产量保持持续增长。本文所依据的材料均为作者分别在厦门、湛江和青岛等地对虾育苗实验中亲自培育所获，通过对大量标本的观察、测量和比较研究，纠正了以往报道中的错误。中国对虾自第2期 状幼体开始就可以与其他2种相区别。其第2期 状幼体眼上刺不分叉，第3期 状幼体第1，2腹节背中刺较小，糠虾幼体5对步足外肢具较多的刚毛数（9根）；不同于墨吉对虾和长毛对虾（眼上刺双叉型，第1，2腹节背中刺较大，糠虾体阶段5对步足外肢8根刚毛）。墨吉对虾第1期 状幼体的L1/L2（图13，B）值较大（1.7-2.0），不同于中国对虾和长毛对虾者（L1/L2<1.7）。第1-5期仔虾时，中国对虾第3颚足和5对步足外肢刚毛数较多（第5期除外），头胸甲的触角刺一直存在；不同于墨吉对虾和长毛对虾。第6或7期仔虾开始3种对虾可以完全分开，其主要鉴别依据是中国对虾第1触角外鞭与内鞭的比值远大于墨吉对虾和长毛对虾，墨吉对虾额角与头胸甲长度的比值明显大于中国对虾和长毛对虾。从幼体和仔虾发育阶段的形态变化，清楚地表明墨吉对虾和长毛对虾有较近的亲缘关系，它们与中国对虾的亲缘关系较远。本文还比较了以上三种对虾与日本对虾及斑节对虾仔虾的不同描述了其幼体和仔虾色素细胞的发育。

黄海中华哲水蚤繁殖、种群补充与生活史研究

中华哲水蚤是黄、东海浮游动物关键种，连接初级生产与较高营养级，在海洋生态系统中占据核心地位。在以往研究基础上，依据2006年3月至2007年8月黄海9个航次、胶州湾11个航次现场调查数据以及大量室内实验数据，本文研究了中华哲水蚤的繁殖、种群补充以及油脂积累的季节变化，期望初步阐明中华哲水蚤在黄海的种群动态及驱动因素、并构建其生活史概念模型。 3、4月份，黄海与胶州湾中华哲水蚤的生殖腺普遍发育成熟、产卵率较高，中华哲水蚤种群进入繁殖、种群补充的活跃期，恰好可以利用此时较好的食物条件。5、6月份，中华哲水蚤在黄海近岸海区仍表现出较高的产卵率，而陆架海区的中华哲水蚤生殖腺成熟度、产卵率逐渐降低，种群逐渐表现出度夏特征—C5占优势、积累大量脂类。整个夏季，中华哲水蚤的繁殖率、种群补充率在整个黄海都较低，尤其在黄海冷水团区：中华哲水蚤生殖腺停滞于未成熟的GS1－GS2期，产卵率为零。10月，中华哲水蚤在冷水团边缘潮汐锋区的繁殖、种群补充活跃，或许可以解释秋、冬季近岸种群的恢复。11月之后，随着垂直混合的加强，黄海冷水团逐渐消失，此时陆架区的中华哲水蚤种群结束度夏过程，并以较低的繁殖率进行种群补充，直到次年3、4月份食物环境转好，中华哲水蚤种群出现新一轮繁殖、补充高峰。本文依据中华哲水蚤雌体密度、产卵率、孵化率等计算了中华哲水蚤的种群潜在补充率，我们发现，陆架区种群仅在3、4月份出现较强补充以及冬季的微弱补充，而近岸海区除夏季外，于各个季节均可进行比较活跃的种群补充，其中春季种群补充规模、强度最大；整体来看，春季是黄海中华哲水蚤种群补充的最重要时期。 本文详细研究了中华哲水蚤的繁殖与各种环境、雌体自身因素之间的关系：1、统计结果表明，中华哲水蚤的产卵率与海区食物条件（浮游植物生物量、纤毛虫丰度）之间具有紧密联系，而与油囊体积无关；在饥饿培养条件下，中华哲水蚤只能维持3－6天的产卵，而添加食物2－7天内，即可逐渐恢复产卵；体内积累油脂在饥饿过程中有所消耗，不过仍然不能阻止产卵率的下降；这些结果表明中华哲水蚤繁殖的能量所需主要来自于近期摄食，而体内储存脂类可能主要用于代谢所需，是应对不利条件的一种能量缓冲。2、统计分析表明：产卵率与雌体前体长间具有一定的正相关性，这可能由于体长较长的雌体往往具有较高的怀卵量；产卵率与温度之间没有显著的统计关系，温度可能通过调节中华哲水蚤的代谢率、体长等间接影响到产卵率。3、值得一提的是，本文发现中华哲水蚤的产卵率与其生殖腺成熟度之间具有非常紧密的统计关系，这为通过保存样品估算产卵率以及长期历史样品、数据间的比较提供了可能。 春季硅藻水华是黄海及其邻近海域的重要季节性特征。本文针对硅藻水华与中华哲水蚤繁殖的关系进行了多次现场研究，我们发现，硅藻水华因其发生海区、硅藻优势种类不同而对中华哲水蚤繁殖具有复杂多样的影响。2006年3月，胶州湾东部海区发生中肋骨条藻（Skeletonema costatum）水华，中华哲水蚤的产卵率显著增高，但其孵化率相对较低（50%左右）；2007年2月，胶州湾东部发生环纹劳德藻（Landeria annulata）水华，中华哲水蚤卵的孵化率在各种处理下均接近100%；2006年4月，黄海东北部发生太平洋海链藻（Thalassiosira pacifica）水华，产卵率与孵化率均处于调查海区的中等水平；2007年4月，黄海中部海区发生中肋骨条藻水华，中华哲水蚤在此次调查海区平均产卵率高达27.8 卵/雌体/天，远远高于以往同时期的调查结果，孵化率、幼体存活率也普遍较高；此次硅藻水华对于黄海陆架区中华哲水蚤的种群补充具有积极的促进作用。综上，硅藻水华对中华哲水蚤繁殖的影响表现出种类、海区特异性，其具体机理仍需进一步研究。 本文研究了黄海中华哲水蚤C5期油脂积累的区域、季节变化，并探讨了油脂积累对中华哲水蚤的生理、生活史的可能作用。黄海近岸区的C5期油囊体积常年较小，而陆架区则表现出明显的季节差异。在陆架区，C5期是中华哲水蚤度夏种群的主要组成部分，其油囊体积与度夏过程有密切联系：最大油囊体积（可占前体部体积的30%以上）出现于度夏准备期（5、6月），随着度夏过程的进行，油囊体积因代谢而不断消耗，至12月时，油囊体积降低到与近岸种群无异。次年4月以后，油脂积累可能随食物条件转好而再次开始积累。我们认为黄海中华哲水蚤所积累油脂除了可以为休眠提供能量以克服较长时期食物缺乏之外，还可能是休眠的诱导因素，对其生活史具有重要意义。 黄海近岸海区与陆架海区在水团特征、中华哲水蚤种群丰度与结构、繁殖特征、种群补充、油脂储存策略等方面具有显著差异，因此，本文分别讨论了这两个区域中华哲水蚤的生活史。黄海陆架海区中华哲水蚤在全年共有4－5个世代：11月末，中华哲水蚤结束度夏过程，种群中占优势的C5期个体开始蜕皮为成体、逐渐成熟、繁殖，由此产下的子代可称之为G0，此世代在食物条件较差的冬季发育成熟后可以产下G1；G1于3月初发育成熟，恰逢春季较好的食物条件，于是在3月初－5月中旬很可能发育G2、G3两个世代；假若陆架区食物环境适宜，5月中旬后很可能产生新的世代—G4；G3与G4两个世代的混合种群共同进入度夏过程，期间，一小部分C5蜕皮为成体，大部分C5保持滞育状态；至12月冷水团消退后，G3、G4世代C5蜕皮、成熟，开始新的生活周期。中华哲水蚤生殖腺成熟度、油囊体积的季节变化与上述概念模型具有较好的对应关系，另外，这两个参数简单易用、对环境变化敏感，可以尝试应用于气候变化与桡足类关系等长期研究中。 以往的研究更多的关注于黄海陆架区的中华哲水蚤种群，对近岸种群的关注较少，本文初步探讨了近岸种群的种群补充、世代情况。相对于陆架区，黄海近岸区中华哲水蚤的生活史更为复杂，区域差异较大。近岸海区中华哲水蚤产卵率、种群周转率较高；同时，近岸海区是多种鱼类的产卵场、索饵场，该区域的各营养级间的能量流动对黄海海洋生态系统的结构功能至关重要。因此，在将来的研究中，近岸海区中华哲水蚤种群的生态学、生活史应该受到同样的重视。

Feeding, morphological changes and allometric growth during starvation in miiuy croaker larvae

We investigated the effects of the timing of first feeding (larvae in F0, F1, F2, F3 and S were first fed on day 3, 4, 5, 6 days after hatching (DAH) and unfed, respectively) on feeding, morphological changes, survival and growth in miiuy croaker larvae at 24A degrees C. The fed larvae initiated feeding on 3 DAH and reached point of no return (PNR) on 6 DAH. Larvae in F0 and F1 groups survived apparently better than F2 group at the end of the experiment on 36 DAH. High larval mortality occurred from 3 to 7 DAH in all feeding groups, accounting for 40% (F0, F1 and F2 groups) to 90% (F3 and S groups) of the total mortality. Larvae in F0 and F1 groups grew better than F2 group throughout the experiment. Eye diameter, body height, head height and mouth gape of the first feeding larvae were more sensitive to starvation than other morphometrics and could be used as indicators for evaluating their nutritional status. Results indicated that delayed first feeding over 1 day after yolk exhaustion could lead to poor larval survival and growth. To avoid starvation and obtain good growth in culturing, larvae feeding should be initiated within 1 day after yolk exhaustion at 24A degrees C.

Main geochemical characteristics and key biogeochemical carbon processes in the East China Sea

Research related to carbon geochemistry and biogeochemistry in the East China Sea is reviewed in this paper. The East China Sea is an annual net sink for atmospheric CO, and a large net source of dissolved inorganic carbon to the ocean. The sea absorbs CO, from the atmosphere in spring and summer and releases it in autumn and winter. The East China Sea is a CO, sink in summer because Changjiang River freshwater flows into it. The net average sea-air interface carbon flux of the East China Sea is estimated to be about 4.3 X 10(6) t/y. Vertical carbon transport is mainly in the form of particulate organic carbon in spring; more than 98% of total carbon is transported in this form in surface water, and the number exceeds 68% in water near the bottom. In the southern East China Sea, the average particulate organic carbon inventory was about one-tenth that of the dissolved organic carbon. Research indicates that the southern Okinawa Trough is an important site for particulate organic carbon export from the shelf. The annual cross-shelf exports are estimated to be 414 and 106 Gmol/y for dissolved organic carbon and particulate organic carbon, respectively. Near-bottom transport could be the key process for shelf-to-deep sea export of biogenic and lithogenic particles.

Crystallographic and NMR studies on sterols from green alga Chaetomorpha basiretorsa Setchell

Chemical investigation of the ethanol extract of the marine green alga Chaetomorpha basiretorsa Setchell led to the isolation of a new sterol stigmast-4,28-dien-3 alpha 6 beta-diol 1 in addition to the five known sterols of beta-lawsaritol 2, saringosterol 3, 24-hydroperoxy-24-vinyl - cholesterol 4, beta-stigmasterol 5, 29-hydroxystigmasta-5, 24(28) -dien-3 beta-ol 6. Compounds were isolated by normal phase silica gel and Sephadex LH - 20 gel colum chromatography, reverse phase HPLC and recrystalization. Their structures were elucidated by spectroscopic methods including MS, IR 1D/2D NMR and X-ray analysis. Cytotoxicity of compounds was screened by using the standard WIT method. All these compounds were isolated from the green alga Chaetomorpha basiretorsa Setchell for the first time and they were inactive (50% inhibitory concentration was greater than 10 mu g /cm(3)) against KB, Bel -7402, PC - 3M, Ketr 3 and MCF - 7 cell lines.

Steroids from green alga Chaetomorpha basiretorsa Setchell

Six steroids have been isolated from ethanolic extract of green alga Chaetomorpha basiretorsa Setchell by a combination of repeated normal phase silica gel and Sephadex LH-20 gel column chromatography as well as recrystallization. Using spectroscopic methods including MS and NMR, their structures were determined as beta-lawsaritol (1), saringosterol (2), 24-hydroperoxy-24-vinyl-cholesterol (3), beta-stigmasterol (4), stigmast-4-en-3 alpha, 6 beta-diol (5), 29-hydroxystigmasta-5, 24 (28)-dien-3 beta-ol (6). All these compounds were obtained from this genus for the first time and they were inactive (IC50 > 10 mu g /ml) against KB, Bel-7402, PC-3M, Ketr 3 and MCF-7 cell lines.