Identification of GPx8 as a novel cellular substrate of the hepatitis C virus NS3-4A protease

Background: The hepatitis C virus (HCV) NS3-4A protease is not only an essential component of the viral replication complex and a prime target for a ntiviral intervention but also a key player i n the persistence and pathogenesis of HCV. It cleaves and thereby inactivates two crucial adaptor proteins in viral RNA sensing and innate immunity (MAVS and TRIF) as well as a phosphatase involved in growth factor signaling (TCPTP). T he aim of this study was to identify novel cellular substrates o f the N S3-4A protease and to investigate their role in the replication and pathogenesis of HCV. Methods: Cell lines inducibly expressing t he NS3-4A protease were analyzed in basal as well as interferon-α-stimulated states by stable isotopic l abeling using amino acids in cell culture (SILAC) coupled with protein separation and mass spectrometry. Candidates fulfilling stringent criteria for potential substrates or products of the NS3-4A protease were further i nvestigated in different experimental systems as well a s in liver biopsies from patients with chronic hepatitis C. Results: SILAC coupled with protein separation and mass spectrometry yielded > 5000 proteins of which 18 candidates were selected for further analyses. These allowed us to identify GPx8, a membrane-associated peroxidase involved in disulfide bond formation in the endoplasmic reticulum, as a n ovel cellular substrate of the H CV NS3-4A protease. Cleavage occurs at cysteine in position 11, removing the cytosolic tip of GPx8, and was observed in different experimental systems as well as in liver biopsies from patients with chronic hepatitis C. Further functional studies, involving overexpression and RNA silencing, revealed that GPx8 is a p roviral factor involved in viral particle production but not in HCV entry or HCV RNA replication. Conclusions: GPx8 is a proviral host factor cleaved by the HCV NS3-4A protease. Studies investigating the consequences of GPx8 cleavage for protein function are underway. The identification of novel cellular substrates o f the HCV N S3-4A protease should yield new insights i nto the HCV life cycle and the pathogenesis of hepatitis C and may reveal novel targets for antiviral intervention.

Audit report on America’s Agricultural Industrial Heritage Landscape, Inc., d/b/a Silos and Smokestacks National Heritage Area and Silos and Smokestacks Natural Heritage Area Foundation in Waterloo, Iowa for the years ended December 31, 2012 and 2011

Audit report on America’s Agricultural Industrial Heritage Landscape, Inc., d/b/a Silos and Smokestacks National Heritage Area and Silos and Smokestacks Natural Heritage Area Foundation in Waterloo, Iowa for the years ended December 31, 2012 and 2011

Demanda de informação pelo setor industrial: dois estudos no intervalo de 25 anos

Os estudos sobre a demanda de informação dos usuários do setor produtivo industrial tornam-se cada vez mais necessários, à medida que a informação se estabelece como fator/insumo de produção. Neste trabalho, são analisados, comparativamente, dois estudos em nível nacional, separados por um intervalo de tempo de 25 anos. Neles, pode-se observar semelhanças e diferenças, sendo possível distinguir quais os tipos de informação mais relevantes para o setor industrial, nas respectivas etapas históricas. Ambos os estudos foram promovidos mediante cooperação entre o setor público e o setor privado, por suas entidades representativas.

Metal concentrations in soils around the copper smelter and surrounding industrial complex of Port Kembla, NSW, Australia

Anthropogenic emissions of metals from sources such as smelters are an international problem, but there is limited published information on emissions from Australian smelters. The objective of this study was to investigate the regional distribution of heavy metals in soils in the vicinity of the industrial complex of Port Kembla, NSW, Australia, which comprises a copper smelter, steelworks and associated industries. Soil samples (n=25) were collected at the depths of 0-5 and 5-20 cm, air dried and sieved to < 2 mm. Aqua regia extractable amounts of As, Cr, Cu, Ph and Zn were analysed by inductively coupled plasma mass spectrometry (lCP-MS) and inductively coupled plasma atomic emission spectrometry (ICP-AES). Outliers were identified from background levels by statistical methods. Mean background levels at a depth of 0-5 cm were estimated at 3.2 mg/kg As, 12 mg/kg Cr, 49 mg/kg Cu, 20 mg/kg Ph and 42 mg/kg Zn. Outliers for elevated As and Cu values were mainly present within 4 km from the Port Kembla industrial complex, but high Ph at two sites and high Zn concentrations were found at six sites up to 23 km from Port Kembla. Chromium concentrations were not anomalous close to the industrial complex. There was no significant difference of metal concentrations at depths of 0-5 and 5-20 cm, except for Ph and Zn. Copper and As concentrations in the soils are probably related to the concentrations in the parent rock. From this investigation, the extent of the contamination emanating from the Port Kembla industrial complex is limited to 1-13 km, but most likely <4 km, depending on the element; the contamination at the greater distance may not originate from the industrial complex. (C) 2003 Elsevier B.V. All rights reserved.

A fluorescent peptide substrate for the surface metalloprotease of Leishmania.

A fluorescent oligopeptide substrate for the promastigote surface protease (PSP) of Leishmania was designed using the data reported for the substrate specificity of the enzyme (Bouvier, J., Schneider, P., Etges, R. J., and Bordier, C. 1990. Biochemistry 29, 10113-10119). The indole fluorescence of the tryptophan residue was efficiently quenched through resonance energy transfer by an N-terminal dansyl group located five amino acid residues away. The heptapeptide, dansyl-A-Y-L-K-K-W-V-NH2, was cleaved by PSP between the tyrosine and leucine residues with a kcat/Km ratio of 8.8 x 10(6) M-1sec-1. Hydrolysis by the enzyme results in a time-dependent increase of fluorescence intensity of 3.7-fold. Assays can be designed based on the tryptophan fluorescence at 360 nm or by individual product analyses using thin-layer chromatography. The synthetic substrate is readily cleaved by the metalloprotease at the surface of fixed promastigotes. The specificity and sensitivity of such internally quenched fluorescent peptide substrate will facilitate the identification of novel inhibitors for the enzyme and aid in detailed studies on its enzymology.

Consideraciones sobre las formas de producción industrial en Cataluña 1936-1938

La gran cantidad de libros y papeles escritos alrededor de la guerra civil aspañola 1936-1939 han prestado relativamente poca atención al examen de la evolución económica de esapaña durante aquellos años y, más en particular, al desarrollo de la actividad económica y de los modos de producción industrial en Cataluña durante el mismo período, que, así pues, por un conjunto de circunstancias han quedado, en algunos aspectos, marginados de dichos estudios. [. . .]

A classificação industrial e sua importância na análise setorial

O presente artigo tem como objetivo apresentar conceitos acerca das classificações industriais, mostrando-se a importância dos sistemas de classificações e a necessidade de correlação entre as classificações dos diferentes países. As classificações internacionais são baseadas na "Família Internacional de Classificações Econômicas e Sociais", que englobam atividades econômicas, produtos, consumo, educação, emprego, entre outras. Sua abrangência em relação às classificações de atividades e de produtos envolve as "classificações de referência (como a ISIC e a CPC), as classificações derivadas (como a NACE e a CPA) e as classificações relacionadas (como a ANZIC e a NAICS), cuja harmonização é realizada por gestores de classificação, como o INDEC, da Argentina, o INE, de Portugal, e o IBGE, do Brasil. As classificações de atividades e de produtos na economia constituem instrumento básico para obtenção de informações e análise dos dados estatísticos.

A regional Industrial Symbiosis methodology and its implementation in Geneva, Switzerland

The Agenda 21 for the Geneva region is the results from a broad consultation process including all local actors. The article 12 stipulates that « the State facilitates possible synergies between economic activities in order to minimize their environmental impacts » thus opening the way for Industrial Ecology (IE) and Industrial Symbiosis (IS). An Advisory Board for Industrial Ecology and Industrial Symbiosis implementation was established in 2002 involving relevant government agencies. Regulatory and technical conditions for IS are studied in the Swiss context. Results reveal that the Swiss law on waste does not hinder by-product exchanges. Methodology and technical factors including geographic, qualitative, quantitative and economical aspects are detailed. The competition with waste operators in a highly developed recycling system is also tackled.The IS project develops an empirical and systematic method for detecting and implementing by-products synergies between industrial actors disseminated throughout the Geneva region. Database management tool for the treatment of input-output analysis data and GIS tools for detecting potentials industrial partners are constantly improved. Potential symbioses for 17 flows (including energy, water and material flows) are currently studied for implementation.

Níveis de resíduo industrial de fécula da mandioca na alimentação de suínos em crescimento e terminação

Foram conduzidos dois experimentos para avaliação da inclusão do resíduo industrial de fecularia da mandioca (RIFM) em dietas para suínos em crescimento e terminação. No experimento 1, foram avaliados quatro níveis de RIFM (0; 6,67; 13,33 e 20,00%) na dieta de suínos em crescimento. A inclusão do RIFM na dieta provocou efeito cúbico sobre o ganho de peso médio diário (GPMD, P<0,01, R² =0,80, y=804-54,06x+6,03x²-0,19x³), peso médio ao final do crescimento (PMFC, P<0,01, R² =0,79, y=60,47-2,87x+0,33x²-0,01x³) e efeito linear sobre o consumo diário de ração (CRD, P<0,04, R² = 0,74, y=2090-136x). O peso médio ao abate (PMA) foi afetado de forma quadrática (P<0,05, R² = 0,69, y=98,88-1,28x+0,05x²). No experimento 2, o RIFM foi avaliado em quatro níveis (0, 10, 20 e 30%) de inclusão na dieta de suínos em terminação. Nenhum desses níveis de RIFM afetou (P>0,10) o desempenho dos suínos. Concluiu-se que a inclusão do RIFM na dieta de suínos em crescimento, à partir de 6,67%, provoca redução do desempenho. Na fase de terminação, o desempenho não é afetado pela inclusão do RIFM até o nível de 30% da dieta.

Avaliação da capacidade de regeneração in vitro em tomateiro industrial

Este trabalho teve por objetivo avaliar a capacidade de regeneração das cultivares de tomateiro industrial (Lycopersicon esculentum Mill) IPA-5 e IPA-6, utilizando quatro composições de meio de cultura descritos na literatura e cinco variações de inoculação. Foi testada uma nova variação de inoculação, denominada cotilédone fendido. A maior freqüência de formação de gemas vegetativas foi 100% no caso de IPA-5, e 65% no caso de IPA-6. Para induzir o alongamento de brotos, foram necessários três subcultivos dos explantes apresentando gemas. No caso de IPA-5, o número de brotos obtidos foi maior quando a indução de gemas foi realizada em meio contendo BAP (2,5 mg L-1) e AIA (0,2 mg L-1) seguido de três subcultivos, em meio como zeatina (0,5 mg L-1). Usando esse protocolo, a cultivar IPA-5 produziu uma média de 5,45 brotos alongados a partir do cotilédone fendido. Essa capacidade excedeu significativamente o cotilédone aparado, que produziu 4,4 brotos alongados por explante. No caso de IPA-6, a melhor combinação de meios e método de inoculação produziu 0,87 broto alongado por explante. Os brotos alongados foram enraizados e transferidos para casa de vegetação.

La rehabilitación y el uso del patrimonio histórico industrial

La reutilización de edificios industriales es un aspecto del proceso de reconversión de suelo industrial en otros usos, el cual se ha acentuado con la reestructuración industrial ligada a la aparición de lo que se denomina ciudad postindustrial. Dicho proceso ha llevado con frecuencia al abandono y a la degradación de los viejos edificios industriales, que muchas veces son derribados y sustituidos por otros nuevos dedicados a viviendas o a usos terciarios. En los dos últimos decenios, sin embargo, la conservación y la reutilización del patrimonio histórico industrial ha adquirido una gran importancia. Los viejos edificios industriales funcionalmente obsoletos poseen, en efecto, valores arquitectónicos y técnicos que hacen a veces necesaria y posible su conservación y reutilización adaptativa. Pero eso exige definir claramente criterios de selección, tras un proceso de inventario y catalogación, en el que deben tenerse en cuenta los criterios generales de catalogación del patrimonio histórico monumental. El artículo discute la conveniencia de conservar edificios funcionalmente obsoletos y aborda la cuestión de las estrategias de defensa, haciendo alusión al papel de los técnicos y a la necesidad del compromiso local.