Restricted expression of homeobox genes distinguishes fetal from adult human smooth muscle cells.

Smooth muscle cell plasticity is considered a prerequisite for atherosclerosis and restenosis following angioplasty and bypass surgery. Identification of transcription factors that specify one smooth muscle cell phenotype over another therefore may be of major importance in understanding the molecular basis of these vascular disorders. Homeobox genes exemplify one class of transcription factors that could govern smooth muscle cell phenotypic diversity. Accordingly, we screened adult and fetal human smooth muscle cell cDNA libraries with a degenerate oligonucleotide corresponding to a highly conserved region of the homeodomain with the idea that homeobox genes, if present, would display a smooth muscle cell phenotype-dependent pattern of expression. No homeobox genes were detected in the adult human smooth muscle cell library; however, five nonparalogous homeobox genes were uncovered from the fetal library (HoxA5, HoxA11, HoxB1, HoxB7, and HoxC9). Northern blotting of adult and fetal tissues revealed low and restricted expression of all five homeobox genes. No significant differences in transcripts of HoxA5, HoxA11, and HoxB1 were detected between adult or fetal human smooth muscle cells in culture. HoxB7 and HoxC9, however, showed preferential mRNA expression in fetal human smooth muscle cells that appeared to correlate with the age of the donor. This phenotype-dependent expression of homeobox genes was also noted in rat pup versus adult smooth muscle cells. While similar differences in gene expression have been reported between subsets of smooth muscle cells from rat vessels of different-aged animals or clones of rat smooth muscle, our findings represent a demonstration of a transcription factor distinguishing two human smooth muscle cell phenotypes.

The angiotensin II type 2 (AT2) receptor antagonizes the growth effects of the AT1 receptor: gain-of-function study using gene transfer.

The type 1 angiotensin II (AT1) receptor is well characterized but the type 2 (AT2) receptor remains an enigma. We tested the hypothesis that the AT2 receptor can modulate the growth of vascular smooth muscle cells by transfecting an AT2 receptor expression vector into the balloon-injured rat carotid artery and observed that overexpression of the AT2 receptor attenuated neointimal formation. In cultured smooth muscle cells, AT2 receptor transfection reduced proliferation and inhibited mitogen-activated protein kinase activity. Furthermore, we demonstrated that the AT2 receptor mediated the developmentally regulated decrease in aortic DNA synthesis at the latter stages of gestation. These results suggest that the AT2 receptor exerts an antiproliferative effect, counteracting the growth action of AT1 receptor.

Tissue engineered perivascular endothelial cell implants regulate vascular injury.

Molecular biomaterial engineering permits in vivo transplantation of cells and tissues, offering the promise of restoration of physiologic control rather than pharmacologic dosing with isolated compounds. We engrafted endothelial cells on Gelfoam biopolymeric matrices with retention of viability, normal growth kinetics, immunoreactivity, and biochemical activity. The production of heparan sulfate proteoglycan and inhibition of basic fibroblast growth factor binding and activity by engrafted cells were indistinguishable from endothelial cells grown in culture. Perivascular implantation of Gelfoam-endothelial cell scaffolds around balloon-denuded rat carotid arteries reduced intimal hyperplasia 88.1%, far better than the isolated administration of heparin, the most effective endothelial mimic compound. In concert with a reduction in intimal area, cell proliferation was reduced by > 90%. To our knowledge, there have been no previous reports of extravascular cell implants controlling vasculoproliferative disease. Tissue engineered cells offer the potential for potent methods of vascular growth regulation and insight into the complex autocrine-paracrine control mechanisms within the blood vessel wall.

The antiproliferative activity of c-myb and c-myc antisense oligonucleotides in smooth muscle cells is caused by a nonantisense mechanism.

Smooth muscle cell (SMC) proliferation is thought to play a major role in vascular restenosis after angioplasty and is a serious complication of the procedure. Developing antisense (AS) oligonucleotides as therapeutics is attractive because of the potentially high specificity of binding to their targets, and several investigators have reported inhibition of SMC proliferation in vitro and in vivo by using AS strategies. We report here the results of our experiments on vascular SMCs using AS oligonucleotides directed toward c-myb and c-myc. We found that significant inhibition of SMC proliferation occurred with these specific AS sequences but that this inhibition was clearly not via a hybridization-dependent AS mechanism. Rather, inhibition was due to the presence of four contiguous guanosine residues in the oligonucleotide sequence. This was demonstrated in vitro in primary cultures of SMCs and in arteries ex vivo. The ex vivo model developed here provides a rapid and effective system in which to screen potential oligonucleotide drugs for restenosis. We have further explored the sequence requirements of this non-AS effect and determined that phosphorothioate oligonucleotides containing at least two sets of three or four consecutive guanosine residues inhibit SMC proliferation in vitro and ex vivo. These results suggest that previous AS data obtained using these and similar, contiguous guanosine-containing AS sequences be reevaluated and that there may be an additional class of nucleic acid compounds that have potential as antirestenosis therapeutics.

Papel do ecocardiograma transesofágico tridimensional na ótima seleção do dispositivo para o tratamento percutâneo da comunicação interatrial tipo ostium secundum

INTRODUCAO: A comunicação interatrial tipo \"ostium secundum\" é um defeito cardíaco congênito caracterizado pela deficiência parcial ou total da lâmina da fossa oval, também chamada de septo primo. Corresponde a 10 a 12% do total de cardiopatias congênitas, sendo a mais frequente na idade adulta. Atualmente a oclusão percutânea é o método terapêutico de escolha em defeitos com características anatômicas favoráveis para o implante de próteses na maioria dos grandes centros mundiais. A ecocardiografia transesofágica bidimensional com mapeamento de fluxo em cores é considerada a ferramenta padrão-ouro para a avaliação anatômica e monitoração durante do procedimento, sendo crucial para a ótima seleção do dispositivo. Neste sentido, um balão medidor é introduzido e insuflado através do defeito de forma a ocluí-lo temporariamente. A medida da cintura que se visualiza no balão (diâmetro estirado) é utilizada como referência para a escolha do tamanho da prótese. Recentemente a ecocardiografia tridimensional transesofágica em tempo real tem sido utilizada neste tipo de intervenção percutânea. Neste estudo avaliamos o papel da mesma na ótima seleção do dispositivo levando-se em consideração as dimensões e a geometria do defeito e a espessura das bordas do septo interatrial. METODO: Estudo observacional, prospectivo, não randomizado, de único braço, de uma coorte de 33 pacientes adultos portadores de comunicação interatrial submetidos a fechamento percutâneo utilizando dispositivo de nitinol autocentrável (Cera ®, Lifetech Scientific, Shenzhen, China). Foram analisadas as medidas do maior e menor diâmetro do defeito, sua área e as medidas do diâmetro estirado com balão medidor obtidas por meio das duas modalidades ecocardiográficas. Os defeitos foram considerados como elípticos ou circulares segundo a sua geometria; as bordas ao redor da comunicação foram consideradas espessas (>2 mm) ou finas. O dispositivo selecionado foi igual ou ate 2 mm maior que o diâmetro estirado na ecocardiografia transesofágica bidimensional (padrão-ouro). Na tentativa de identificar uma variável que pudesse substituir o diâmetro estirado do balão para a ótima escolha do dispositivo uma série de correlações lineares foram realizadas. RESULTADOS: A idade e peso médio foram de 42,1 ± 14,9 anos e 66,0 ± 9,4kg, respectivamente; sendo 22 de sexo feminino. Não houve diferenças estatísticas entre os diâmetros maior e menor ou no diâmetro estirado dos defeitos determinados por ambas as modalidades ecocardiográficas. A correlação entre as medidas obtidas com ambos os métodos foi ótima (r > 0,90). O maior diâmetro do defeito, obtido à ecoardiografia transesofágica tridimensional, foi a variável com melhor correlação com o tamanho do dispositivo selecionado no grupo como um todo (r= 0,89) e, especialmente, nos subgrupos com geometria elíptica (r= 0,96) e com bordas espessas ao redor do defeito (r= 0,96). CONCLUSÃO: Neste estudo em adultos com comunicações interatriais tipo ostium secundum submetidos à oclusão percutânea com a prótese Cera ®, a ótima seleção do dispositivo pôde ser realizada utilizando-se apenas a maior medida do defeito obtida na ecocardiografia transesofágica tridimensional em tempo real, especialmente nos pacientes com defeitos elípticos e com bordas espessas.

Comparação entre a técnica femoral com dispositivo de hemostasia e a técnica radial em pacientes submetidos à estratégia invasiva precoce

A via de acesso arterial é um importante sítio de complicações após a realização de procedimentos coronários invasivos. Dentre as estratégias para a redução de complicações vasculares, encontra-se estabelecida a eficácia da técnica radial. Os dispositivos de oclusão vascular propiciam maior conforto ao paciente, reduzindo o tempo de hemostasia e repouso no leito. Entretanto, a inconsistência de dados comprovando sua segurança limita sua adoção rotineira como estratégia para redução de complicações vasculares, requerendo evidências de estudos randomizados com metodologia adequada. O objetivo deste estudo foi comparar a incidência de complicações no sítio de punção arterial entre a técnica radial e a técnica femoral com utilização de Angio-Seal em pacientes com síndrome coronariana aguda sem supradesnível do segmento ST submetidos à estratégia invasiva precoce. Trata-se de um ensaio clínico unicêntrico, de não inferioridade, no qual duzentos e quarenta pacientes foram randomizados para a técnica radial ou técnica femoral com utilização de Angio-Seal. O objetivo primário foi a ocorrência de complicações no sítio de punção arterial até 30 dias após o procedimento, incluindo sangramento grave, hematoma >= 5 cm, hematoma retroperitoneal, síndrome compartimental, pseudoaneurisma, fístula arteriovenosa, infecção, isquemia de membro, oclusão arterial, lesão de nervo adjacente ou necessidade de reparo vascular cirúrgico. Em relação às características demográficas e clínicas, houve diferença apenas quanto ao gênero, com presença maior de pacientes do sexo feminino no grupo radial (33,3% versus 20,0%, p=0,020). Não se observaram diferenças entre os grupos quanto ao diagnóstico de admissão, alterações isquêmicas presentes no eletrocardiograma, elevação de marcadores de necrose miocárdica ou escores de risco, bem como quanto à farmacoterapia antitrombótica adjunta e características da intervenção coronária percutânea. A hemostasia foi obtida na totalidade dos procedimentos do grupo radial com a utilização da pulseira compressora seletiva TR Band e em 95% dos procedimentos realizados pela técnica femoral com o Angio-Seal (p=0,029). Exceto pela maior incidência de oclusão arterial no grupo radial comparado ao femoral, não houve diferenças entre os demais desfechos analisados. Segundo o teste de não inferioridade para complicações na via de acesso arterial aos 30 dias, verificou-se que a utilização do Angio-Seal não produziu resultados inferiores ao acesso radial, considerando-se a margem de 15% (12,5% versus 13,3%, diferença -0,83%, IC 95% -9,31 - 7,65, p para não inferioridade <0,001). Os resultados principais deste estudo demonstram que, em uma população de pacientes com diagnóstico de síndrome coronariana aguda sem supradesnível do segmento ST, submetida à estratificação de risco invasiva, a utilização do dispositivo de oclusão vascular Angio-Seal confere ao procedimento efetivado pelo acesso femoral inferioridade na incidência de complicações no sítio de punção arterial aos 30 dias quando comparado ao acesso radial.

Injetor intravascular de CO2: estudo in vivo de viabilidade inicial do dispositivo e de qualidade de imagem

INTRODUÇÃO: Durante procedimentos endovasculares, estão presentes os riscos relacionados ao uso dos contrastes iodados, tais como a nefropatia por contraste, uma vez que é fundamental o emprego de um meio de contraste para a obtenção das imagens radiológicas vasculares. A injeção intravascular de gás CO2 purificado é reconhecidamente uma alternativa relativamente mais segura ao contraste iodado, contudo, seu manuseio artesanal pode também trazer dificuldades técnicas e riscos aos pacientes. Para contemplar estas questões, foi desenvolvido o protótipo de um injetor intravascular de CO2 medicinal, microprocessado, dedicado à obtenção de imagens angiográficas. OBJETIVOS: Realizar os testes de viabilidade técnica inicial do protótipo em modelo in vivo. MÉTODOS: Realizar a angioplastia da artéria renal esquerda de 10 porcos, divididos em 2 grupos: Grupo 1 (n=5) injeção de contraste iodado, Grupo 2 (n=5) injeção de CO2 através do protótipo. Monitorização clínica e laboratorial dos animais no pré, intra e pós-operatório, com exames de função renal na véspera e 48h após os procedimentos e 3 gasometrias arteriais seriadas no intra-operatório. Observação clínica foi mantida por 48h no pós- operatório. RESULTADOS: Os procedimentos de angioplastia com CO2 foram realizados com sucesso técnico de 100%, sem necessidade de complementação com injeção de contraste iodado no Grupo 2. Não foram identificadas falhas no protótipo em funcionamento. Não foram identificadas alterações clínicas ou radiológicas sugestivas de contaminação por ar ambiente do sistema de CO2 e nem alterações laboratoriais nos animais. As imagens angiográficas obtidas no Grupo 2 foram consideradas, numa avaliação subjetiva, relativamente inferiores às imagens obtidas no Grupo 1. DISCUSSÃO: A qualidade inferior de imagem no Grupo 2 pode ser atribuída ao equipamento de fluoroscopia utilizado, com software desatualizado em relação aos equipamentos atuais, que incluem pré-configurações para angiografia com CO2; no entanto, ainda assim todos os procedimentos propostos no Grupo 2 foram realizados com sucesso técnico, o que nos leva a classificar as imagens deste grupo 2 como satisfatórias. O manuseio do aparelho mostrou-se ágil e eficiente, com a programação dos parâmetros sendo realizada com facilidade através do visor \"touch screen\", comparativamente superior ao método artesanal de injeção de CO2 com seringas em selo d\'água. CONCLUSÕES: O protótipo do aparelho injetor intravascular de CO2 funcionou de forma adequada durante os testes e as imagens obtidas permitiram a compleição com sucesso dos procedimentos. Portanto, os resultados positivos obtidos sugerem que o equipamento é tecnicamente viável

Small Pocks, 1775-1779 (inclusive)

Ledger containing accounts of smallpox inoculation by Dr. John Jeffries (1745-1819) at Rainsford Island Hospital in Boston, Massachusetts, from June to July 1775; at a West Boston smallpox hospital in July 1775; and in Halifax, Nova Scotia, between 1776 and 1779. The accounts include dates, names, ages and physical condition of patients, and details regarding the method of delivery. Among the patients he inoculated was his son, John, at Rainsford Island Hospital on 14 June 1775.

Kine Pox, 1775-1802 (inclusive)

Ledger containing lists and charts of smallpox inoculation cases and patient case histories of Boston physician John Jeffries (1745-1819), recorded from November 1775 to June 1802. Descriptions include patients’ names, ages, and physical condition, method of inoculation and symptoms. The entries dated 1800-1802 are not in chronological order.

Terapêutica na insuficiência cardíaca aguda

Trabalho Final do Curso de Mestrado Integrado em Medicina, Faculdade de Medicina, Universidade de Lisboa, 2014

Long-Term Clinical and Imaging Follow-Up After Reinforced Pulmonary Autograft Ross Procedure.

The Ross operation remains a controversially discussed procedure when performed in the full root technique because concern exists regarding late dilatation of the pulmonary autograft and regurgitation of the neo-aortic valve. In 2008, we published our short-term experience when using external reinforcement of the autograft, which was inserted into a prosthetic Dacron graft. This detail was thought to prevent neoaortic root dilatation. Since 2006, 22 adult patients have undergone a Ross procedure using this technique. Indications were aortic regurgitation (n = 2), aortic stenosis (n = 15), and combined aortic stenosis and insufficiency (n = 5). A bicuspid aortic valve was present in 10 patients. Prior balloon valvuloplasty had been performed in seven patients. No early or late deaths occurred in this small series. One patient required aortic valve replacement early postoperatively, but freedom from late reoperation is 100% in the 21 remaining patients. Echocardiography confirmed the absence of more than trivial aortic insufficiency in 15 patients after a mean of 70 months (range, 14 to 108 months). No autograft dilatation was observed during follow-up and all patients are in New York Heart Association Class I. Autograft reinforcement is a simple and reproducible technical adjunct that may be especially useful in situations known for late autograft dilatation, namely, bicuspid aortic valve, predominant aortic insufficiency, and ascending aortic enlargement. The mid- to long-term results are encouraging because no late aortic root enlargement has been observed and the autograft valve is well functioning in all cases.

Epicardial phrenic nerve displacement during catheter ablation of atrial and ventricular arrhythmias: procedural experience and outcomes.

BACKGROUND Arrhythmia origin in close proximity to the phrenic nerve (PN) can hinder successful catheter ablation. We describe our approach with epicardial PN displacement in such instances. METHODS AND RESULTS PN displacement via percutaneous pericardial access was attempted in 13 patients (age 49±16 years, 9 females) with either atrial tachycardia (6 patients) or atrial fibrillation triggered from a superior vena cava focus (1 patient) adjacent to the right PN or epicardial ventricular tachycardia origin adjacent to the left PN (6 patients). An epicardially placed steerable sheath/4 mm-catheter combination (5 patients) or a vascular or an esophageal balloon (8 patients) was ultimately successful. Balloon placement was often difficult requiring manipulation via a steerable sheath. In 2 ventricular tachycardia cases, absence of PN capture was achieved only once the balloon was directly over the ablation catheter. In 3 atrial tachycardia patients, PN displacement was not possible with a balloon; however, a steerable sheath/catheter combination was ultimately successful. PN displacement allowed acute abolishment of all targeted arrhythmias. No PN injury occurred acutely or in follow up. Two patients developed acute complications (pleuro-pericardial fistula 1 and pericardial bleeding 1). Survival free of target arrhythmia was achieved in all atrial tachycardia patients; however, a nontargeted ventricular tachycardia recurred in 1 patient at a median of 13 months' follow up. CONCLUSIONS Arrhythmias originating in close proximity to the PN can be targeted successfully with PN displacement with an epicardially placed steerable sheath/catheter combination, or balloon, but this strategy can be difficult to implement. Better tools for phrenic nerve protection are desirable.