Lack of Galectin-3 Disturbs Mesenteric Lymph Node Homeostasis and B Cell Niches in the Course of Schistosoma mansoni Infection

Galectin-3 is a beta-galactoside-binding protein that has been shown to regulate pathophysiological processes, including cellular activation, differentiation and apoptosis. Recently, we showed that galectin-3 acts as a potent inhibitor of B cell differentiation into plasma cells. Here, we have investigated whether galectin-3 interferes with the lymphoid organization of B cell compartments in mesenteric lymph nodes (MLNs) during chronic schistosomiasis, using WT and galectin-3(-/-) mice. Schistosoma mansoni synthesizes GalNAc beta 1-4(Fuc alpha 1-3) GlcNAc(Lac-DiNAc) structures (N-acetylgalactosamine beta 1-4 N-acetylglucosamine), which are known to interact with galectin-3 and elicit an intense humoral response. Antigens derived from the eggs and adult worms are continuously drained to MLNs and induce a polyclonal B cell activation. In the present work, we observed that chronically-infected galectin-3(-/-) mice exhibited a significant reduced amount of macrophages and B lymphocytes followed by drastic histological changes in B lymphocyte and plasma cell niches in the MLNs. The lack of galectin-3 favored an increase in the lymphoid follicle number, but made follicular cells more susceptible to apoptotic stimuli. There were an excessive quantity of apoptotic bodies, higher number of annexin V(+)/PI(-) cells, and reduced clearance of follicular apoptotic cells in the course of schistosomiasis. Here, we observed that galectin-3 was expressed in nonlymphoid follicular cells and its absence was associated with severe damage to tissue architecture. Thus, we convey new information on the role of galectin-3 in regulation of histological events associated with B lymphocyte and plasma cell niches, apoptosis, phagocytosis and cell cycle properties in the MLNs of mice challenged with S. mansoni.

HLA-G 14-bp Insertion/Deletion Polymorphism Is a Risk Factor for HTLV-1 Infection

About 95% of HTLV-1 infected patients remain asymptomatic throughout life, and the risk factors associated with the development of related diseases, such as HAM/TSP and ATL, are not fully understood. The human leukocyte antigen-G molecule (HLA-G), a nonclassical HLA class I molecule encoded by MHC, is expressed in several pathological conditions, including viral infection, and is related to immunosuppressive effects that allow the virus-infected cells to escape the antiviral defense of the host. The 14-bp insertion/deletion polymorphism of exon 8 HLA-G gene influences the stability of the transcripts and could be related to HTLV-1-infected cell protection and to the increase of proviral load. The present study analyzed by conventional PCR the 14-bp insertion/deletion polymorphism of exon 8 HLA-G gene in 150 unrelated healthy subjects, 82 HTLV-1 infected patients with symptoms (33 ATL and 49 HAM), and 56 asymptomatic HTLV-1 infected patients (HAC). In addition, the proviral load was determined by quantitative real-time PCR in all infected groups and correlated with 14-bp insertion/deletion genotypes. The heterozygote genotype frequencies were significantly higher in HAM, in the symptomatic group, and in infected patients compared to control (p < 0.05). The proviral load was higher in the symptomatic group than the HAC group (p < 0.0005). The comparison of proviral load and genotypes showed that -14-bp/-14-bp genotype had a higher proviral load than +14-bp/-14-bp and +14-bp/+14-bp genotypes. Although HLA-G 14-bp polymorphism does not appear to be associated

Inhibition of Expression of HTLV-1 Structural Genes Mediated by Short Hairpin RNA In Vitro

Background: Human T-lymphotropic virus 1 (HTLV-1) is associated with the T-cell malignancy known as adult T-cell leukemia! lymphoma (ATLL) and with a disorder called HTLV-1-associated myelopathy/tropical spastic paraparesis (HAM/TSP). Currently, the treatment of these diseases is based on symptom relief. RNA interference (RNAi) technology has been described as an efficient mechanism for development of new therapeutic methods. Thus, the aim of this study was to evaluate the inhibition of HTLV-1 structural proteins using short hairpin RNAs (shRNAs) expressed by non-viral vectors. Materials and Methods: Reporter plasmids that express enhanced green fluorescent protein-Gag (EGFP-Gag) and EGFP-Env fusion proteins and vectors that express shRNAs corresponding to the HTLV-1 gag and env genes were constructed. shRNA vectors and reporter plasmids were simultaneously transfected into HEK 293 cells. Results: Fluorescence microscopy, flow cytometry and real-time PCR showed that shRNAs were effective in inhibiting the fusion proteins. Conclusion: These shRNAs are effective against the expression of structural genes and may provide an approach to the development of new therapeutic agents.

Silencing of HTLV-1 gag and env genes by small interfering RNAs in HEK 293 cells

Since the discovery of RNAi technology, several functional genomic and disease therapy studies have been conducted using this technique in the field of oncology and virology. RNAi-based antiviral therapies are being studied for the treatment of retroviruses such as HIV-1. These studies include the silencing of regulatory, infectivity and structural genes. The HTLV-1 structural genes are responsible for the synthesis of proteins involved in the entry, assembly and release of particles during viral infection. To examine the possibility of silencing HTLV-1 genes gag and env by RNA interference technology, these genes were cloned into reporter plasmids. These vectors expressed the target mRNAs fused to EGFP reporter genes. Three small interference RNAs (siRNAs) corresponding to gag and three corresponding to env were designed to analyze the effect of silencing by RNAi technology. The plasmids and siRNAs were co-transfected into HEK 293 cells. The results demonstrated that the expression of the HTLV-1 gag and env genes decreased significantly in vitro. Thus, siRNAs can be used to inhibit HTLV-1 structural genes in transformed cells, which could provide a tool for clarifying the roles of HTLV-1 structural genes, as well as a therapy for this infection. (C) 2011 Elsevier B.V. All rights reserved.

Galectin-3 regulates peritoneal B1-cell differentiation into plasma cells

Extracellular galectin-3 participates in the control of B2 lymphocyte migration and adhesion and of their differentiation into plasma cells. Here, we analyzed the role of galectin-3 in B1-cell physiology and the balance between B1a and B1b lymphocytes in the peritoneal cavity. In galectin-3(-/-) mice, the total number of B1a lymphocytes was lower, while B1b lymphocyte number was higher as compared to wild-type mice. The differentiation of B1a cells into plasma cells was associated with their abnormal adhesion and location on the mesentery. The B220 and CD43, constitutively expressed by B1 lymphocytes, were respectively up- and downregulated in galectin-3(-/-) mice. Mononuclear cells were strongly adhered to the mesenteric membranes of both CD43(-/-) and galectin-3(-/-) mice, but in contrast to CD43(-/-) mice, the accumulation of B1 cells in peritoneal membranes in galectin-3(-/-) mice was accompanied by their functional differentiation into plasma cells. We have shown that in the absence of galectin-3, B1-cell differentiation into plasma cells is favored and the dynamic equilibrium of B1-cell populations in the peritoneum is maintained through a compensatory increase in B1b lymphocytes.

Consultas m??dicas: oferta, demanda, mudan??a cultural e o fim das filas

Este projeto refere-se ?? implementa????o de uma sistem??tica de marca????o de consultas desenvolvida pela Se????o de Arquivo M??dico e Estat??stica do Centro T??cnico Aeroespacial de S??o Jos?? dos Campos. Ap??s um levantamento te??rico e a an??lise dos dados estat??sticos sobre o problema da fila, foi deduzida uma f??mula matem??tica que regula a oferta de consultas. O agendamento de consultas por telefone e um software, foram os instrumentos utilizados para a nova sistem??tica, que veio acompanhada de uma ampla campanha junto aos usu??rios para estimular o novo procedimento. A postura de dar transpar??ncia ao processo fez com que o usu??rio adquirisse confian??a para marcar sua consulta pelo telefone, sem o risco de se sentir preterido por n??o estar presente no hospital. O projeto eliminou as filas sem o aumento do n??mero de m??dicos ou do n??mero de consultas por m??dico

F??runs de gest??o participativa

Os F??runs de Gest??o se constituem de um mecanismo de reuni??es quinzenais para discuss??o, por todos os funcion??rios, de assuntos relevantes, cujo teor ?? registrado em atas que ficam disponibilizadas na rede interna de computadores (intranet). Objetivam disseminar a nova postura de gest??o participativa, ensejar a participa????o de todos os funcion??rios no processo de gest??o, com vistas a obter o seu comprometimento na identifica????o e solu????o de problemas, promover a integra????o das diversas inst??ncias administrativas e servir de f??rum para divulga????o e discuss??o de assuntos relevantes de interesse da Empresa. Todas as atas s??o examinadas por uma ??rea da Dire????o Geral, de cujo exame s??o extra??dos dois subprodutos: as Sinaliza????es e os Destaques. As Sinaliza????es s??o quaisquer d??vidas, questionamentos, dificuldades, sugest??es que s??o encaminhados para as ??reas respons??veis, por meio eletr??nico, para que recebam o tratamento adequado com resposta, por telefone, em 48 horas, ?? unidade que demandou o assunto. Os Destaques s??o temas importantes, como id??ias, boas pr??ticas de gest??o e iniciativas bem sucedidas implementadas pelas unidades, que constam das respectivas atas das reuni??es para conhecimento, discuss??o, dissemina????o e, sobretudo, benchmarking para todas as unidades

Melhoria do atendimento do INSS: Proplan

Em novembro de 1995, o Escrit??rio Estadual da Dataprev no Par?? constatou um atendimento deficiente a seu cliente local: o INSS-PA. Diante deste fato, atrav??s de um processo de planejamento estrat??gico estabeleceu um programa de a????o com 31 projetos e atividades, que tinham como objetivo a melhoria do atendimento ao Cliente. Dentre os projetos destaca-se o Modelo de Atendimento, o qual definiu como filosofias: atendimento feito por t??cnicos generalistas e compromisso com os resultados do cliente. Em janeiro de 1996, o Escrit??rio Estadual do Par?? iniciou um processo de realoca????o de pessoal e um intenso programa de capacita????o para forma????o generalista. Come??ou ainda o atendimento preventivo, realizado atrav??s de visitas peri??dicas. Em seguida, implantou uma Central de Atendimento T??cnico, visando sempre que poss??vel solu????o imediata e conclusiva, atrav??s de atendimento a dist??ncia, via telefone e via telecomunica????o. Como resultados da implanta????o do Modelo de Atendimento, destacam-se: melhoria da satisfa????o do cliente; redu????o em 41% de despesas de viagens para atendimento; redu????o do tempo m??dio de atendimento e aumento de produtividade

Escrit??rio virtual

Este projeto refere-se ?? implementa????o de um modelo de gest??o que reduz os custos com as ??reas-meio, e volta o seu potencial para o provimento de solu????es das necessidades do cliente. ?? uma nova forma de conceber o tempo, o espa??o e os relacionamentos, mediante a cria????o de um escrit??rio virtual que visa aproximar os t??cnicos aos seus clientes. O funcion??rio carrega consigo o notebook e o aparelho celular podendo trabalhar em qualquer lugar e a qualquer hora, com o objetivo de atender as demandas dos clientes com prontid??o e agilidade no momento da solicita????o. Os resultados deste modelo podem ser percebidos tanto na satisfa????o dos clientes como dos funcion??rios envolvidos

Ag??ncia itinerante

Trata-se de um instrumento de expans??o das a????es de atendimento do Banco do Nordeste, que permite ultrapassar os limites f??sicos das ag??ncias, de forma m??vel e flex??vel, visando o atendimento facilitado e in-loco de necessidades dos clientes-alvo, prestar orienta????o e operacionalizar neg??cios j?? demandados. Ocorre pelo deslocamento de funcion??rios das Ag??ncias, por um dia, para um dos munic??pios sob sua jurisdi????o. As visitas obedecem a um sistema de rod??zio, sempre priorizando as comunidades com maiores demandas. A Ag??ncia Itinerante ?? realizada em forte parceria com a Prefeitura do munic??pio, que cede um ponto de apoio, onde fica afixada a marca do Banco e o telefone do Cliente Consulta, facilitando o contato entre o Banco e seus clientes-alvo: os agentes produtivos. Iniciada em julho/97, j?? com 3.435 ocorr??ncias at?? 11.Set.98 e mais 491 previstas ainda para este ano, essa iniciativa contribui para ampliar a efetiva atua????o do Banco, pois ocorre em todo o Nordeste e norte de Minas Gerais, proporcionando maior visibilidade ?? empresa no cumprimento de sua miss??o

Acessibilidade e longitudinalidade no pré-natal : análise de um grupo de puérperas atendidas no Hospital Universitário Cassiano Antônio de Moraes

A atenção primária visa garantir cobertura e acesso a cuidados de saúde abrangentes e aceitáveis pela população enfatizando a prevenção e a educação (STARFIELD, 2004). No Brasil a Estratégia Saúde da Família (ESF) é o modelo implantado pelo Ministério da Saúde (MS) com a finalidade de reestruturação da atenção primária e já abrange cerca de 50% da população. Segundo Starfield (2004) a atenção primária pode ser avaliada através de seus atributos essenciais: atenção de primeiro contato (utilização e acessibilidade), longitudinalidade, integralidade e coordenação de cuidados. No contexto da atenção à saúde brasileira, a mortalidade infantil é fato preocupante, principalmente a mortalidade que ocorre nos primeiros dias de vida. Este componente da mortalidade é intimamente relacionado à qualidade da atenção recebida no período gestacional. A atenção pré-natal deve incluir ações organizadas, amplas, integradas e com cobertura abrangente de promoção e prevenção da saúde, além de diagnóstico e tratamento adequado dos problemas que possam vir a ocorrer nesse período. O objetivo do presente estudo foi analisar o pré-natal de um grupo de puérperas quanto aos atributos da atenção primária acessibilidade e longitudinalidade. Para alcançar este objetivo foram realizadas 80 entrevistas com mulheres que realizaram pré-natal na atenção primária e 19 mulheres que realizaram pré-natal no Hospital Universitário Cassiano Antônio de Moraes (HUCAM). Utilizou-se parcialmente o questionário de avaliação da atenção primária PCATool. As puérperas também foram questionadas quanto à percepção da adequação do pré-natal realizado. A acessibilidade foi baixa para a maioria das entrevistadas. Nas puérperas que realizaram o pré-natal na Atenção primária a acessibilidade foi estatisticamente maior naquelas que realizaram pré-natal na ESF e naquelas que utilizaram as unidades de saúde do município de Vitória (ES). A longitudinalidade se relacionou ao tipo de unidade de saúde do pré-natal, ao número de consultas realizadas e ao índice de Ápgar no primeiro minuto. A percepção de um pré-natal adequado se relacionou com a utilização da ESF como serviço de pré-natal e à realização de seis ou mais consultas. Apesar de as puérperas do grupo que realizou o pré-natal no HUCAM perceberem o atendimento pré-natal como adequado, algumas questões revelaram fragilidades na assistência, principalmente quanto ao acesso ao serviço. A impossibilidade de receber atendimento pela equipe fora dos horários de funcionamento do ambulatório, a falta de um número de telefone no qual possam sanar dúvidas ou falar com o médico responsável pelo pré-natal, a percepção de dificuldade na marcação de consultas e a espera prolongada no dia do atendimento são pontos que devem ser melhorados nessa assistência.

Análise Imuno-histoquímica de hipóxia renal em modelo de isquemia/reperfusão tratado com Fator Estimulador de Colônia de Granulócitos

O rim demonstra uma capacidade singular em reparar-se após danos locais, no entanto, depois de acometido, as chances de desenvolvimento de lesões renais elevam-se. A patofisiologia da isquemia/reperfusão (IR) é complexa porque há ocorrência simultânea de danos celulares e inflamação. O decréscimo na quantidade de oxigênio requer um sistema capaz de evitar seus efeitos prejudiciais e uma maquinaria molecular HIF (Hypoxia Inducible Factor), um complexo, atua como fator de transcrição de diversos genes desde os da regulação da proliferação celular e apoptose até a sinalização para angiogênese. O Fator Estimulador de Colônia de Granulócitos (G-CSF) é uma glicoproteína conhecida pela sua capacidade de promover a sobrevivência, proliferação e diferenciação de células estimulando a recuperação aos efeitos advindos da IR. Com o intuito de observar as influências dessas proteínas foi realizada uma análise semi-quantitativa de amostras renais submetidas ou não à IR, usando-se descrições microscópicas morfológicas e imunohistoquímicas, com os cálculos e gráficos estatísticos foram feitos no software GraphPad Prism®. Das análises morfológicas, constatou-se que as lesões características de IR foram observadas em espécimes não tratados: bolhas em epitélio tubular; vacuolização citoplasmática, distalização tubular e congestão luminal. De forma análoga, foi encontrada nos tratados, contudo em estágios menos avançados e em animais controle, não foi houve esta diferença tissular. As análises de microscopia eletrônica demonstraram alteração na barreira filtrante com concomitante perda de outras características glomerulares. Aos animais controle foi observada a arquitetura típica, ao passo que para os animais tratados notou-se conservação da barreira. A presença de HIF-1α nos rins contralaterais demonstrouse significante quando comparadas às amostras isquêmicas e tratadas (p<0,05). Já a ocorrência da mesma proteína em rins isquêmicos não apresentou qualquer diferença. Analisando-se a proteína VEGF foi comprovado que em rins contralaterais não há diferença estatística, contudo nos rins esquerdos há significância entre os três grupos (p<0,05). Já a correlação entre estas duas proteínas não se mostrou estatisticamente significante. Em relação às atividades de proliferação e morte celulares, todos os três grupos foram significantes entre si (p<0,05). Ao que concerne o tratamento, foi demonstrada a atividade protetora do medicamento e uma possível interação molecular com a HIF, enquanto que a ativação desta proteína corrobora sua rota metabólica já previamente descrita.

Ácidos húmicos extraídos do lodo de esgoto sanitário e seus efeitos em plantas

O lodo de esgoto possui alto teor de matéria orgânica porém, também estão presentes diferentes poluentes e patógenos. Desta forma, neste trabalho foi extraído ácido húmico (AH) o qual é um composto resultante do fracionamento de substâncias húmicas que compreendem um grupo de compostos de carbono gerados na decomposição de resíduos orgânicos que sofrem ressíntese formando o húmus. O ácido húmico promove diversos benefícios nos vegetais, como crescimento, elongação celular, tolerância a estresses e aumento da permeabilidade da membrana plasmática. Com base nestas características, o presente trabalho teve como objetivo avaliar os efeitos citogenéticos (ensaio Allium cepa), fisiológicos, anatômicos e bioquímicos do ácido húmico do lodo de esgoto sanitário. Foi realizada caracterização elementar do material para a definição das doses. Após 20 dias de tratamento, foram realizadas coletas do material e, posteriormente, analisadas. A caracterização química do AH indicou-o como bom condicionador para culturas apresentando elevadas taxas de C, H e N. Não foi observado efeito de toxicidade, citotoxicidade, genotoxicidade e mutagenicidade do AH. Foi verificado aumento expressivo de todos os pigmentos fotossintéticos vegetais nas concentrações mais altas (2 mM C L-1 e 4 mM C L-1). Houve aumento da expressão da ATPAse em todos os tratamentos e das enzimas do estresse oxidativo (CAT, SOD, APX, GST) em diferentes concentrações. A integração destas análises permitiu concluir que o ácido húmico do lodo de esgoto pode ser utilizado como adubo orgânico, pois foi observado benefícios no vegetal tais como maior crescimento vegetal e aumento da atividade nas enzimas do estresse oxidativo.

Caracterização da ontogenética do pau-brasil

As ações de reflorestamento com o pau-brasil (Caesalpinia echinata Lam.) depende de informações de suas características ecofisiológicas sujeitas às variações ontogenéticas e ambientais. O objetivo desse trabalho foi caracterizar alguns aspectos morfológicos, anatômicos, fisiológicos e estruturais de parede celular de C. echinata nas fases juvenil, jovem e adulto em condições naturais em um fragmento da Floresta Atlântica. Foi analisada a biometria, concentração de nutrientes e dos pigmentos cloroplastídicos dos foliólulos, anatomia foliar e do xilema secundário do caule e a constituição dos polímeros estruturais de parede celular. Os indivíduos juvenis localizados no estrato inferior da floresta se destacaram pela maior área foliar específica e maiores teores de pigmentos cloroplastídicos bem como pelas maiores dimensões de suas células guardas associado às maiores concentrações de K e Ca foliar. Estruturalmente, os indivíduos juvenis apresentaram menores elementos de vasos e teores de lignina. Os indivíduos jovens apresentaram valores intermediários das variáveis analisadas. Já os indivíduos adultos, cujas copas alcançavam o dossel, se destacaram pelo maior espessamento do limbo, da cutícula e do parênquima lacunoso, teor de água foliar, densidade estomática e teor de lignina foliar e caulinar cuja capacidade de síntese foi associada ao maior teor de P foliar. O conteúdo de celulose foliar e caulinar não variou entre as diferentes fases ontogenéticas. As hemiceluloses são do tipo xilanos com possibilidade de presença de xiloglucano dada a maior fração de xilose (±12% MS) e galactose (±1% MS). A glucose foi o monossacarídeo mais representativo (±40% MS) sem diferenças ontogenéticas. As diferenças morfológicas, anatômicas, fisiológicas e estruturais parecem, também, estarem sob controle da irradiância mais intensa na copa dos indivíduos adultos. Os resultados denotam que o plantio consorciado com espécies de crescimento rápido seja a melhor ação para o reflorestamento de C. echinata.

Estudo Químico-Biológico de Pyrostegia venusta (Ker Gawl.) Miers (Bignoniaceae)

Este trabalho descreve a investigação química e biológica do extrato bruto e das partições hexano e acetato de etila, das folhas de Pyrostegia venusta (Ker Gawl.) Miers, popularmente conhecida como “cipó de São João”. P. venusta é classificada botanicamente como uma liana de porte mediano, tendo como característica uma exuberante floração vermelha, e por isso, sendo utilizada como planta ornamental. Essa planta possui uma larga utilização na medicina popular, sendo utilizada no tratamento de vitiligo, diarreia, bronquite, resfriado, icterícia e infecções. Os objetivos deste trabalho foram identificar as classes de metabólitos secundários presentes, avaliar o potencial antioxidante das amostras de P. vesnuta (extrato bruto, frações acetato de etila e hexano), quantificar o teor de flavonoides no extrato bruto, verificar a segurança do uso dessa planta, em termos de viabilidade celular (VC) frente à macrófagos murinos (RAW 264.7) (ensaio de imunotoxicidade). Adicionalmente os resultados de viabilidade celular foram comparados com quatro compostos anti-inflamatórios comerciais (ácido acetilsalicílico, indometacina, betametasona e piroxicam), e testar o extrato bruto quanto à inibição de catepsinas K e V. Os testes de identificação fitoquímica confirmaram a presença de flavonoides, cumarinas e esteroides nas amostras. A metodologia cromatográfica associada à análises por espectrometria de massas, levou a identificação dos compostos: fitol (1), sitosterol (2), estigmasterol (3) e campesterol (4). O extrato bruto demonstrou ter atividade inibitória frente as duas catepsinas testadas (K e V). A fração acetato de etila foi a que apresentou maior atividade antioxidante nas metodologias de inibição do radical DPPH (IC50 38,62 μg/mL) e radical ABTS (IC50 27,58 μg/mL). O teor de flavonoides total para o extrato bruto foi de 148,5±7,65 μg/mg (14,85 % (m/m)), o que justifica a observada atividade antioxidante, já que estes possuem atividade antioxidante. As amostras de P. venusta obtiveram valores de VC maiores do que os anti-inflamatórios comerciais, estes apresentaram VC abaixo do controle negativo, assim como o extrato bruto e a fração acetato de etila, a fração hexano obteve valores acima do controle negativo, sendo estes os maiores resultados de VC entre as amostras de P. venusta.