O CORPO COMO UM TEXTO VIVO A Festa e a Dança no Candomblé

Este trabalho é um estudo sobre o papel e a construção do corpo, a partir dos rituais públicos do candomblé. Durante esses rituais, dei-me conta de que o corpo, para essa cultura ágrafa, assumia o papel de um texto, no qual se podiam ler, por meio dos gestos e da dança, as histórias e os valores desse grupo social. Todo esse processo só é possível porque a noção de pessoa no candomblé é pensada como um todo, resultado de todas as partes do corpo, diferentemente da noção disjuntiva presente no ocidente. Todos os sentidos do corpo: olfato, tato, visão, audição e paladar, são onsiderados centros de força, e o processo de iniciação coloca em equilíbrio esses centros. Do mesmo modo que a pessoa é múltipla e construída ao longo do processo iniciático, o corpo manifesta suas múltiplas forças e é construído esteticamente, tornando um texto para ser lido pela sociedade. Dessa forma, o corpo se constrói, nos rituais do candomblé, graças à aprendizagem de valores sociais, culturais e religiosos, que se dá por meio da oralidade, dos atos, gestos e da experiência vivida no quotidiano do terreiro. Nos rituais públicos, através da dança de transe, o iniciado mostrará ao grupo seu estágio espiritual, a visão de mundo do grupo e o ethos de seu povo. A pesquisa de campo foi realizada na Casa de Candomblé Ilé Dara Àse Òsun Eyin, comandada pelo Pai Cido de Òsun Eyin, durante os anos de 2001, 2002 e 2003.(AU)

AS RELAÇÕES ENTRE SUPORTE SOCIAL E BALANÇO EMOCIONAL

O objetivo deste estudo foi descrever os níveis de dimensões de suporte social (emocional e prático) e de balanço emocional, analisar as suas correlações e investigar as suas relações com variáveis sócio demográficas de um grupo de pessoas que participam de programa de apoio emocional e informacional em uma instituição beneficente de São Paulo. A amostra pesquisada, escolhida aleatoriamente, consistiu de 95 pessoas do sexo masculino e feminino com idade média de 47,99 anos (DP=12,11). O instrumento de coleta de dados foi um questionário de auto preenchimento composto por duas medidas que aferiram as variáveis de estudo (percepção de suporte social, afetos positivos e negativos), além dos dados sócio demográficos. Foram utilizadas análises estatísticas descritivas, testadas diferenças entre médias, bem como calculados os índices de correlação entre as variáveis. Os resultados mostraram que não há diferenças significativas na percepção de suporte social (emocional e prático) e as variáveis sócio demográficas sexo, trabalho, estudo, voluntariado, permanência na instituição, escolaridade e estado civil. Os mais jovens, com menos de 30 anos, revelaram maior percepção do suporte social (emocional e prático). Revelaram também que não há diferença significativa do balanço emocional em relação às variáveis sócio demográficas, com exceção do trabalho voluntário que repercutiu expressiva e positivamente no balanço emocional. A análise das relações entre suporte social (emocional e prático) e idade revelou existir uma correlação significativa, baixa e negativa, isto é, com o aumento da idade há uma tendência a decrescer levemente a percepção de suporte social. A descrição dos níveis de suporte social revelou que as percepções de suporte emocional e prático são significativamente diferentes, embora a diferença entre as médias seja pequena, prevalece a percepção de maior suporte emocional. A descrição dos escores de balanço emocional revelou que cerca de três quartos dos entrevistados registrou balanço emocional positivo e cerca de um quarto registrou balanço emocional negativo. Não foi constatada correlação significativa entre balanço emocional e idade. As análises das relações entre suporte emocional, suporte prático e balanço emocional revelaram correlações significativas e positivas, isto é, com um acréscimo na percepção de suporte social (emocional e prático) há a tendência de acréscimo no balanço emocional. Portanto, os resultados deste estudo poderão contribuir para a compreensão do quadro psicológico dos indivíduos pesquisados, bem como, suscitar aos gestores de instituições reflexões para o aprimoramento dos serviços de programas assistenciais.(AU)

AS RELAÇÕES ENTRE SUPORTE SOCIAL E BALANÇO EMOCIONAL

O objetivo deste estudo foi descrever os níveis de dimensões de suporte social (emocional e prático) e de balanço emocional, analisar as suas correlações e investigar as suas relações com variáveis sócio demográficas de um grupo de pessoas que participam de programa de apoio emocional e informacional em uma instituição beneficente de São Paulo. A amostra pesquisada, escolhida aleatoriamente, consistiu de 95 pessoas do sexo masculino e feminino com idade média de 47,99 anos (DP=12,11). O instrumento de coleta de dados foi um questionário de auto preenchimento composto por duas medidas que aferiram as variáveis de estudo (percepção de suporte social, afetos positivos e negativos), além dos dados sócio demográficos. Foram utilizadas análises estatísticas descritivas, testadas diferenças entre médias, bem como calculados os índices de correlação entre as variáveis. Os resultados mostraram que não há diferenças significativas na percepção de suporte social (emocional e prático) e as variáveis sócio demográficas sexo, trabalho, estudo, voluntariado, permanência na instituição, escolaridade e estado civil. Os mais jovens, com menos de 30 anos, revelaram maior percepção do suporte social (emocional e prático). Revelaram também que não há diferença significativa do balanço emocional em relação às variáveis sócio demográficas, com exceção do trabalho voluntário que repercutiu expressiva e positivamente no balanço emocional. A análise das relações entre suporte social (emocional e prático) e idade revelou existir uma correlação significativa, baixa e negativa, isto é, com o aumento da idade há uma tendência a decrescer levemente a percepção de suporte social. A descrição dos níveis de suporte social revelou que as percepções de suporte emocional e prático são significativamente diferentes, embora a diferença entre as médias seja pequena, prevalece a percepção de maior suporte emocional. A descrição dos escores de balanço emocional revelou que cerca de três quartos dos entrevistados registrou balanço emocional positivo e cerca de um quarto registrou balanço emocional negativo. Não foi constatada correlação significativa entre balanço emocional e idade. As análises das relações entre suporte emocional, suporte prático e balanço emocional revelaram correlações significativas e positivas, isto é, com um acréscimo na percepção de suporte social (emocional e prático) há a tendência de acréscimo no balanço emocional. Portanto, os resultados deste estudo poderão contribuir para a compreensão do quadro psicológico dos indivíduos pesquisados, bem como, suscitar aos gestores de instituições reflexões para o aprimoramento dos serviços de programas assistenciais.(AU)

OTIMISMO, SUPORTE SOCIAL E VALORES DO TRABALHO COMO ANTECEDENTES DE BEM ESTAR SUBJETIVO DE TRABALHADORES

Este estudo teve por objetivo verificar a capacidade de otimismo, de suporte social e de valores do trabalho serem preditores de bem estar subjetivo, bem como analisar as relações de variáveis demográficas com essas variáveis de estudo, descrevê-las e examinar as relações entre elas. A amostra consistiu de 47 homens e de 101 mulheres com idade média de 41,00 anos (DP =10,72) que buscavam apoio em instituição para sua transição profissional. O instrumento de coleta de dados foi um questionário de autopreenchimento composto por cinco medidas que aferiram as variáveis incluídas no estudo: otimismo, percepção de suporte social, valores do trabalho, satisfação geral com a vida e afetos positivos e negativos, bem como variáveis demográficas: sexo, idade, estudo, trabalho, voluntariado, estado civil e permanência na instituição. Foram realizadas análises estatísticas descritivas, testadas diferenças entre médias, correlações, análise de variância e calculados modelos de regressão linear múltipla. As relações das variáveis de estudo com variáveis demográficas revelaram que as pessoas que não estudam percebem ter mais suporte prático e dão mais importância a motivações de autopromoção e de prestígio do que as que estudam. Os mais jovens com até 30 anos relataram que se percebem tendo mais apoio emocional e prático do que os mais velhos. Com o avanço da idade diminuem as percepções de suporte emocional e prático, contudo as pessoas com mais de 50 anos revelaram menos afetos negativos e maior satisfação com a vida do que os mais jovens. Casados revelaram dar menos importância do que separados, divorciados, viúvos, etc. à estabilidade no trabalho e segurança financeira; solteiros revelaram ter mais afetos negativos do que os casados. Homens relataram se sentir mais satisfeitos com a vida, ter mais afetos positivos e menos afetos negativos que mulheres. Quem realiza trabalho voluntário revelou ser mais otimista e ter menos afetos negativos do que aqueles que não realizam. Os dados revelaram que os pesquisados têm um bom nível de otimismo e uma percepção de suporte emocional maior do que a percepção de suporte prático; são motivados, principalmente por metas de realização no trabalho e de estabilidade e segurança financeira; sentem-se indiferentes quanto à satisfação com a vida; apresentam afetos positivos um pouco acima da indiferença; contudo sentem poucos afetos negativos. Disso decorre que um pouco mais de dois terços dos pesquisados apresentaram predominância de estados emocionais positivos sobre os negativos. O otimismo foi a variável que estabeleceu associações mais altas e em maior quantidade; correlacionou positivamente com valores de realização no trabalho, com valores de relações sociais, com valores do trabalho de prestígio, com satisfação com a vida e com afetos positivos; e correlacionou negativamente com afetos negativos. A percepção de suporte emocional correlacionou positivamente com valores de prestígio, afetos positivos e com satisfação com a vida; e correlacionou negativamente com afetos negativos. Percepção de suporte prático não apresentou correlações significativas com nenhuma variável de estudo. Afetos positivos correlacionaram-se positivamente com valores do trabalho de relações sociais e com valores do trabalho de prestígio. A partir da análise de três modelos preditivos encontrou-se que otimismo e suporte emocional repercutem positivamente sobre a satisfação com a vida e sobre afetos positivos. Otimismo repercute negativamente sobre afetos negativos. Valores do trabalho de prestígio repercutem positivamente sobre afetos positivos. Valores de estabilidade repercutem negativamente sobre satisfação com a vida e sobre afetos positivos; e positivamente sobre afetos negativos. Os resultados deste estudo mostraram que o estado otimista é um poderoso fator de impacto positivo sobre o estado de saúde denominado bem estar subjetivo.(AU)

OTIMISMO, SUPORTE SOCIAL E VALORES DO TRABALHO COMO ANTECEDENTES DE BEM ESTAR SUBJETIVO DE TRABALHADORES

Este estudo teve por objetivo verificar a capacidade de otimismo, de suporte social e de valores do trabalho serem preditores de bem estar subjetivo, bem como analisar as relações de variáveis demográficas com essas variáveis de estudo, descrevê-las e examinar as relações entre elas. A amostra consistiu de 47 homens e de 101 mulheres com idade média de 41,00 anos (DP =10,72) que buscavam apoio em instituição para sua transição profissional. O instrumento de coleta de dados foi um questionário de autopreenchimento composto por cinco medidas que aferiram as variáveis incluídas no estudo: otimismo, percepção de suporte social, valores do trabalho, satisfação geral com a vida e afetos positivos e negativos, bem como variáveis demográficas: sexo, idade, estudo, trabalho, voluntariado, estado civil e permanência na instituição. Foram realizadas análises estatísticas descritivas, testadas diferenças entre médias, correlações, análise de variância e calculados modelos de regressão linear múltipla. As relações das variáveis de estudo com variáveis demográficas revelaram que as pessoas que não estudam percebem ter mais suporte prático e dão mais importância a motivações de autopromoção e de prestígio do que as que estudam. Os mais jovens com até 30 anos relataram que se percebem tendo mais apoio emocional e prático do que os mais velhos. Com o avanço da idade diminuem as percepções de suporte emocional e prático, contudo as pessoas com mais de 50 anos revelaram menos afetos negativos e maior satisfação com a vida do que os mais jovens. Casados revelaram dar menos importância do que separados, divorciados, viúvos, etc. à estabilidade no trabalho e segurança financeira; solteiros revelaram ter mais afetos negativos do que os casados. Homens relataram se sentir mais satisfeitos com a vida, ter mais afetos positivos e menos afetos negativos que mulheres. Quem realiza trabalho voluntário revelou ser mais otimista e ter menos afetos negativos do que aqueles que não realizam. Os dados revelaram que os pesquisados têm um bom nível de otimismo e uma percepção de suporte emocional maior do que a percepção de suporte prático; são motivados, principalmente por metas de realização no trabalho e de estabilidade e segurança financeira; sentem-se indiferentes quanto à satisfação com a vida; apresentam afetos positivos um pouco acima da indiferença; contudo sentem poucos afetos negativos. Disso decorre que um pouco mais de dois terços dos pesquisados apresentaram predominância de estados emocionais positivos sobre os negativos. O otimismo foi a variável que estabeleceu associações mais altas e em maior quantidade; correlacionou positivamente com valores de realização no trabalho, com valores de relações sociais, com valores do trabalho de prestígio, com satisfação com a vida e com afetos positivos; e correlacionou negativamente com afetos negativos. A percepção de suporte emocional correlacionou positivamente com valores de prestígio, afetos positivos e com satisfação com a vida; e correlacionou negativamente com afetos negativos. Percepção de suporte prático não apresentou correlações significativas com nenhuma variável de estudo. Afetos positivos correlacionaram-se positivamente com valores do trabalho de relações sociais e com valores do trabalho de prestígio. A partir da análise de três modelos preditivos encontrou-se que otimismo e suporte emocional repercutem positivamente sobre a satisfação com a vida e sobre afetos positivos. Otimismo repercute negativamente sobre afetos negativos. Valores do trabalho de prestígio repercutem positivamente sobre afetos positivos. Valores de estabilidade repercutem negativamente sobre satisfação com a vida e sobre afetos positivos; e positivamente sobre afetos negativos. Os resultados deste estudo mostraram que o estado otimista é um poderoso fator de impacto positivo sobre o estado de saúde denominado bem estar subjetivo.(AU)

CONTEXTUALIZAÇÃO E AS PERSPECTIVAS DA EDUCAÇÃO SALESIANA A PARTIR DO DOCUMENTO DAS LINHAS ORIENTADORAS DA MISSÃO EDUCATIVA DO INSTITUTO DAS FILHAS DE MARIA AUXILIADORA

A presente dissertação teve como objetivos contextualizar e analisar as perspectivas da educação salesiana a partir do documento das Linhas Orientadoras da Missão Educativa do Instituto das Filhas de Maria Auxiliadora, tendo em vista aprofundar o contexto histórico e sociocultural da fundação do Instituto das Filhas de Maria Auxiliadora e do desenvolvimento da missão educativa salesiana, com a finalidade de atuar no campo da educação, indicar os fundamentos interdisciplinares que compreendem os fundamentos teóricos para a prática educativa em relação aos aspectos sociológicos, antropológicos, teológicos e pedagógicos, além de algumas experiências práticas da educação salesiana. A pesquisa considera a contextualização da sua prática educativa a partir de diversas contribuições teóricas realizadas em torno da história do Instituto e dos conhecimentos interdisciplinares que integram seus propósitos e seus projetos educativos. Com a perspectiva de analisar as orientações e conteúdos do documento é utilizada a técnica da análise documental que permite interpretar o seu significado, analisar e indicar algumas perspectivas de educação salesiana presentes no documento e que envolvem os seus princípios, propósitos e as suas ações em relação à educação. Por meio da observação participante alguns aspectos práticos das perspectivas da educação salesiana foram demonstrados. Portanto, a investigação permite o mapeamento das perspectivas fundamentais da educação salesiana a partir das Linhas Orientadoras e a possibilidade de aprofundar a significatividade das perspectivas de referência para a prática educativa conforme são indicadas no documento: as dimensões cultural, evangelizadora, social e comunicativa da educação, que são os elementos e princípios fundamentais do Sistema Educativo Salesiano. A concepção de educação salesiana que se constrói a partir de uma visão interdisciplinar, complexa e dimensional, com uma perspectiva de uma estratégia projetual. Os seus princípios integram alguns valores que são considerados como fundamentais para a realização de uma educação integral: a comunidade educativa, o trabalho educativo realizado em equipe, a espiritualidade juvenil, a preventividade e a pedagogia do ambiente. Sobretudo, os núcleos centrais indicados pelo documento orientam as comunidades para a realização de um pensamento projetual, considerando as diversas dimensões da educação, com uma especial abertura para uma contínua projeção das suas intenções e da sua prática educativa. Enfim, encontramos algumas contribuições para a educação a partir do pensamento pedagógico e prático da educação salesiana, especialmente em relação à proposta de pensar a educação de forma complexa e multidimensional.

O EVANGELHO SEGUNDO DOSTOIÉVSKI UMA ABORDAGEM INTERTEXTUAL DA IMAGEM DE CRISTO NO ROMANCE O IDIOTA

No romance O Idiota, Dostoiévski cria, por meio do príncipe Míchkin, uma personagem com as características do Cristo. Sabe-se que a Bíblia, principalmente o Novo Testamento, acompanhou o escritor desde sua infância até o momento de sua morte. O primeiro capítulo, dedicado ao referencial teórico da pesquisa, lida com o universo da linguagem. Tanto o texto literário quanto a literatura bíblica procedem do mito. Neste sen-tido, religião e literatura se tocam e se aproximam. O segundo capítulo foi escrito na intenção de mostrar como o Cristo e os Evangelhos são temas, motivos e imagens recorrentes na obra de Dostoiévski. A literatura bíblica está presente, com mais ou menos intensidade, em diversas das principais obras do escritor russo e não somente em O Idiota. A hipótese de que Dostoiévski cria um Cristo e um Evangelho por meio de O Idiota é demonstrada na análise do romance, no terceiro capítulo. A tese proposta é: Dostoiévski desenvolve um evangelho literário, por meio de Míchkin, misto de um Cristo russo, ao mesmo tempo divino e humano, mas também idiota e quixotesco. Na dinâmica intertextual entre os Evangelhos bíblicos e O Idiota, entre Cristo e Míchkin, a literatura e o sagrado se revelam, como uma presença divina. Nas cenas e na estruturação do enredo que compõe o romance, Cristo se manifesta nas ações de Míchkin, na luz, na beleza, mas também na tragicidade de uma trajetória deslocada e antinômica. O amor e a compaixão ganham forma e vida na presen-ça do príncipe, vazio de si, servo de todos.

A COMUNICAÇÃO CORPORATIVA E O DISCURSO DO CONSUMIDOR CONTEMPORÂNEO NOS SITES SOCIAIS DE RECLAMAÇÃO: DECEPÇÃO E COABITAÇÃO NA REDE – DESAFIOS E OPORTUNIDADES

A expansão das redes sociais virtuais, o aperfeiçoamento das técnicas de informação, a penetrabilidade do capitalismo de concorrência e o fragmentado sujeito pós-moderno constituem, ao lado da sociedade de consumo, os pilares desta tese. Nossa hipótese central é que as redes sociais da Internet ampliam os espaços de participação, compartilhamento, colaboração e manifestação das decepções do consumidor, mas não diminuem as descontinuidades, a incompreensão e o desrespeito oriundos das relações e práticas de consumo, podendo, muitas vezes, aceleraremasconflitualidades. A abertura para o diálogo, o incitamento à tomada de poder do sujeito e a multiplicação das trocas entre empresas e consumidores representam a oportunidade e o desafio de valorizarmos a concepção normativa da comunicação, admitindo as dificuldades da intercompreensão, a urgência da coabitação e a realidade da incomunicação. Recorremos à Análise de Discurso de tradição francesa (AD) como campo teórico-metodológico para analisar o discurso do consumidor inscrito na plataforma Reclame AQUI e construir uma crítica à comunicação corporativa contemporânea; a partir dos conceitos de cenografia, ethos e esquematização enunciativa, verificamos como a ideologia opera no interior das cenas daenunciação do consumo, constituindo uma ordem própria ao discurso do reclamante decepcionado. Esta análise ratificou as discussões teóricas que levamos a cabo, servindo de suporte para a problematização e o debate das sete cenografias que se evidenciaram no/pelo discurso do sujeito/consumidor: respeito/desrespeito, ameaça, promessa e frustração, mau atendimento e problema não resolvido, negociação, clientes novos x antigos e consumidor enganado; a imbricação do nosso corpuse o arcabouço teórico coloca na ribalta a necessidade de políticas de comunicação organizacional norteadas pelo senso prático de outridade, transcendendo as relações puramente mercadológicas; ao mesmo tempo, lança luz sobre apremência de mais solidariedade, compaixão, capacidade de escuta, compreensão e coabitação para as corporações que funcionam em uma sociedade guiada pelo frenesi da ética da concorrência e da consumolatria. Esta tese evidencia que a atuação dos consumidores e das empresas no mundo on-line representa mais que um elemento circunstancial de (in) tolerância mútua; desenha um destino comum que pode ter como rumo a outridade solidária do próximo, aceitando a experiência da alteridade, o risco do fracasso e a esperança da confiança e do respeito que a comunicação pode conceber.

Nuclear-cytoplasmic shuttling of C-ABL tyrosine kinase

The ubiquitously expressed nonreceptor tyrosine kinase c-Abl contains three nuclear localization signals, however, it is found in both the nucleus and the cytoplasm of proliferating fibroblasts. A rapid and transient loss of c-Abl from the nucleus is observed upon the initial adhesion of fibroblasts onto a fibronectin matrix, suggesting the possibility of nuclear export [Lewis, J., Baskaran, R., Taagepera, S., Schwartz, M. & Wang, J. (1996) Proc. Natl. Acad. Sci. USA 93, 15174–15179]. Here we show that the C terminus of c-Abl does indeed contain a functional nuclear export signal (NES) with the characteristic leucine-rich motif. The c-Abl NES can functionally complement an NES-defective HIV Rev protein (RevΔ3NI) and can mediate the nuclear export of glutathione-S-transferase. The c-Abl NES function is sensitive to the nuclear export inhibitor leptomycin B. Mutation of a single leucine (L1064A) in the c-Abl NES abrogates export function. The NES-mutated c-Abl, termed c-Abl NES(−), is localized exclusively to the nucleus. Treatment of cells with leptomycin B also leads to the nuclear accumulation of wild-type c-Abl protein. The c-Abl NES(−) is not lost from the nucleus when detached fibroblasts are replated onto fibronectin matrix. Taken together, these results demonstrate that c-Abl shuttles continuously between the nucleus and the cytoplasm and that the rate of nuclear import and export can be modulated by the adherence status of fibroblastic cells.

Overexpression of transforming growth factor β1 in arterial endothelium causes hyperplasia, apoptosis, and cartilaginous metaplasia

Uninjured rat arteries transduced with an adenoviral vector expressing an active form of transforming growth factor β1 (TGF-β1) developed a cellular and matrix-rich neointima, with cartilaginous metaplasia of the vascular media. Explant cultures of transduced arteries showed that secretion of active TGF-β1 ceased by 4 weeks, the time of maximal intimal thickening. Between 4 and 8 weeks, the cartilaginous metaplasia resolved and the intimal lesions regressed almost completely, in large part because of massive apoptosis. Thus, locally expressed TGF-β1 promotes intimal growth and appears to cause transdifferentiation of vascular smooth muscle cells into chondrocytes. Moreover, TGF-β1 withdrawal is associated with regression of vascular lesions. These data suggest an unexpected plasticity of the adult vascular smooth muscle cell phenotype and provide an etiology for cartilaginous metaplasia of the arterial wall. Our observations may help to reconcile divergent views of the role of TGF-β1 in vascular disease.

Subnuclear localization of the active variant surface glycoprotein gene expression site in Trypanosoma brucei

In Trypanosoma brucei, transcription by RNA polymerase II and 5′ capping of messenger RNA are uncoupled: a capped spliced leader is trans spliced to every RNA. This decoupling makes it possible to have protein-coding gene transcription driven by RNA polymerase I. Indeed, indirect evidence suggests that the genes for the major surface glycoproteins, variant surface glycoproteins (VSGs) in bloodstream-form trypanosomes, are transcribed by RNA polymerase I. In a single trypanosome, only one VSG expression site is maximally transcribed at any one time, and it has been speculated that transcription takes place at a unique site within the nucleus, perhaps in the nucleolus. We tested this by using fluorescence in situ hybridization. With probes that cover about 50 kb of the active 221 expression site, we detected nuclear transcripts of this site in a single fluorescent spot, which did not colocalize with the nucleolus. Analysis of marker gene-tagged active expression site DNA by fluorescent DNA in situ hybridization confirmed the absence of association with the nucleolus. Even an active expression site in which the promoter had been replaced by an rDNA promoter did not colocalize with the nulceolus. As expected, marker genes inserted in the rDNA array predominantly colocalize with the nucleolus, whereas the tubulin gene arrays do not. We conclude that transcription of the active VSG expression site does not take place in the nucleolus.

Two sterol regulatory element-like sequences mediate up-regulation of caveolin gene transcription in response to low density lipoprotein free cholesterol

Caveolae form the terminus for a major pathway of intracellular free cholesterol (FC) transport. Caveolin mRNA levels in confluent human skin fibroblasts were up-regulated following increased uptake of low density lipoprotein (LDL) FC. The increase induced by FC was not associated with detectable change in mRNA stability, indicating that caveolin mRNA levels were mediated at the level of gene transcription. A total of 924 bp of 5′ flanking region of the caveolin gene were cloned and sequenced. The promoter sequence included three G+C-rich potential sterol regulatory elements (SREs), a CAAT sequence and a Sp1 consensus sequence. Deletional mutagenesis of individual SRE-like sequences indicated that of these two (at −646 and −395 bp) were essential for the increased transcription rates mediated by LDL-FC, whereas the third was inconsequential. Gel shift analysis of protein binding from nuclear extracts to these caveolin promoter DNA sequences, together with DNase I footprinting, confirmed nucleoprotein binding to the SRE-like elements as part of the transcriptional response to LDL-FC. A supershift obtained with antibody to SRE-binding protein 1 (SPEBP-1) indicated that this protein binds at −395 bp. There was no reaction at −395 bp with anti-Sp1 antibody nor with either antibody at −646 bp. The cysteine protease inhibitor N-acetyl-leu-leu-norleucinal (ALLN), which inhibits SREBP catabolism, superinhibited caveolin mRNA levels regardless of LDL-FC. This finding suggests that SREBP inhibits caveolin gene transcription in contrast to its stimulating effect on other promoters. The findings of this study are consistent with the postulated role for caveolin as a regulator of cellular FC homeostasis in quiescent peripheral cells, and the coordinate regulation by SREBP of FC influx and efflux.

Nuclear tRNA aminoacylation and its role in nuclear export of endogenous tRNAs in Saccharomyces cerevisiae

Nuclear tRNA aminoacylation was proposed to provide a proofreading step in Xenopus oocytes, ensuring nuclear export of functional tRNAs [Lund, E. & Dahlberg, J. E. (1998) Science 282, 2082–2085]. Herein, it is documented that tRNA aminoacylation also occurs in yeast nuclei and is important for tRNA export. We propose that tRNA aminoacylation functions in one of at least two parallel paths of tRNA export in yeast. Alteration of one aminoacyl-tRNA synthetase affects export of only cognate tRNA, whereas alterations of two other aminoacyl-tRNA synthetases affect export of both cognate and noncognate tRNAs. Saturation of tRNA export pathway is a possible explanation of this phenomenon.

SMAD3/4-dependent transcriptional activation of the human type VII collagen gene (COL7A1) promoter by transforming growth factor β

The human type VII collagen gene (COL7A1) recently has been identified as an immediate-early response gene for transforming growth factor β (TGF-β)/SMAD signaling pathway. In this study, by using MDA-MB-468 SMAD4−/− breast carcinoma cells, we demonstrate that expression of SMAD4 is an absolute requirement for SMAD-mediated promoter activity. We also demonstrate that the SMAD binding sequence (SBS) representing the TGF-β response element in the region −496/−444 of the COL7A1 promoter functions as an enhancer in the context of a heterologous promoter. Electrophoretic mobility-shift assays with nuclear extracts from COS-1 cells transfected with expression vectors for SMADs 1–5 indicate that SMAD3 forms a complex with a migration similar to that of the endogenous TGF-β-specific complex observed in fibroblast extracts. Electrophoretic mobility-shift assays using recombinant glutathione S-transferase-SMAD fusion proteins indicate that both SMAD4 and C-terminally truncated SMAD3, but not SMAD2, can bind the COL7A1 SBS. Coexpression of SMAD3 and SMAD4 in COS-1 cells leads to the formation of two complexes: a DNA/protein complex containing SMAD3 alone and another slower-migrating complex containing both SMAD3 and SMAD4, the latter complex not being detected in fibroblasts. Maximal transactivation of COL7A1 SBS-driven promoters in either MDA-MB-468 carcinoma cells or fibroblasts requires concomitant overexpression of SMAD3 and SMAD4. These data may represent the first identification of a functional homomeric SMAD3 complex regulating a human gene.

tRNA Nuclear Export in Saccharomyces cerevisiae: In Situ Hybridization Analysis

To understand the factors specifically affecting tRNA nuclear export, we adapted in situ hybridization procedures to locate endogenous levels of individual tRNA families in wild-type and mutant yeast cells. Our studies of tRNAs encoded by genes lacking introns show that nucleoporin Nup116p affects both poly(A) RNA and tRNA export, whereas Nup159p affects only poly(A) RNA export. Los1p is similar to exportin-t, which facilitates vertebrate tRNA export. A los1 deletion mutation affects tRNA but not poly(A) RNA export. The data support the notion that Los1p and exportin-t are functional homologues. Because LOS1 is nonessential, tRNA export in vertebrate and yeast cells likely involves factors in addition to exportin-t. Mutation of RNA1, which encodes RanGAP, causes nuclear accumulation of tRNAs and poly(A) RNA. Many yeast mutants, including those with the rna1-1 mutation, affect both pre-tRNA splicing and RNA export. Our studies of the location of intron-containing pre-tRNAs in the rna1-1 mutant rule out the possibility that this results from tRNA export occurring before splicing. Our results also argue against inappropriate subnuclear compartmentalization causing defects in pre-tRNA splicing. Rather, the data support “feedback” of nucleus/cytosol exchange to the pre-tRNA splicing machinery.