929 resultados para Matriz extracelular Teses
Resumo:
O amido um ingrediente com grande versatilidade de aplicao, e as sementes de jaca, fruto bem difundido, porm pouco aproveitado no Brasil, contm uma quantidade considervel de amido, sendo ainda fonte de ferro e protenas. Dessa maneira, os objetivos desse projeto foram a obteno da farinha de sementes de jaca das variedades mole e dura, a extrao do amido utilizando diferentes solventes, e a caracterizao de suas propriedades fsico-qumicas, estruturais e funcionais, bem como a caracterizao reolgica de disperses/gis de amido em cisalhamento estacionrio e oscilatrio. A extrao alcalina do amido, alm de reduzir significativamente o contedo de lipdeos e protenas, deixando o amido mais puro, promoveu um aumento no teor de amilose e influenciou diretamente as caractersticas de inchamento e solubilidade, que apresentaram aumento significativo a partir da temperatura de 70 C. O aumento da temperatura ocasionou aumento no poder de inchamento e solubilidade, que foi mais pronunciado para a variedade dura, porm esses valores ainda foram considerados baixos (< 17%). Os amidos de sementes de jaca apresentaram grnulos lisos, arredondados e em forma de sino, com formato mais truncado para o amido extrado com hidrxido de sdio. O dimetro mdio dos grnulos de amido foi menor para a extrao alcalina, mas sempre com comportamento monomodal. Foi observado um padro de difrao de Raios-X do tipo A para todas as amostras estudadas, e o ndice de cristalinidade foi maior para os amidos de sementes de jaca dura, com uma reduo estimada em 70% para os amidos obtidos por extrao alcalina. A temperatura de gelatinizao dos amidos de semente de jaca foi considerada alta (70-100 C). Os amidos de sementes de jaca dura obtidos na extrao com gua apresentaram maiores valores de viscosidade de pico e de Breakdown, que representa menor resistncia mecnica. A extrao com soluo de NaOH 0,1 M aumentou a tendncia a retrogradao de ~36% (extrao aquosa) para 64% e 45% dos amidos de sementes de jaca das variedades mole e dura, respectivamente. Todas as amostras apresentaram comportamento pseudoplstico (n < 1) nas concentraes e temperaturas estudadas, e as disperses e/ou gis de amido obtidos pela extrao alcalina com NaOH apresentaram menor tixotropia e maiores valores de viscosidade. Os modelos Lei da Potncia e Herschel Bulkley apresentaram timos ajustes aos pontos experimentais (R ~0,998) para as amostras com 2 e 6 % de amido, respectivamente, porm para a concentrao de 5%, o melhor modelo foi funo da variedade do fruto usado na obteno do amido. A dependncia das propriedades reolgicas com a temperatura foi analisada pela equao de Arrhenius e a energia de ativao foi baixa (15-25 kJ/mol). Quanto ao comportamento viscoelstico, as amostras com 5 e 6% de amido apresentaram comportamento de gel fraco e o aumento da concentrao desse polissacardeo produziu um aumento na elasticidade do material. Os mdulos de armazenamento (G\') associados elasticidade do gel de amido aumentaram durante o seu resfriamento nos ensaios de varredura de temperatura, o que pode ser relacionado recristalizao da amilose durante esse processo e mantiveram-se praticamente constantes no aquecimento isotrmico a 80 C, sugerindo boa estabilidade trmica do gel. A farinha isolada da semente de jaca pode ser considerada fonte de fibras e apresentou elevados teores de protenas (~14-16%) e ferro (~85-150 mg/kg). A distribuio do tamanho de partculas da farinha apresentou comportamento bimodal, com grnulos arredondados, presena de fibras e uma matriz proteica envolvendo os grnulos de amido. As propriedades de pasta revelaram maior pico de viscosidade para a farinha de semente de jaca mole. As caractersticas encontradas sugerem que os amidos de semente de jaca poderiam ser aplicados na produo de filmes biodegradveis, e a farinha da semente de jaca poderia ser utilizada em substituio parcial farinha convencional na fabricao de bolos e biscoitos.
Resumo:
Embora os escamados sejam comumente encontrados em stios fossilferos cenozicos sul−americanos, materiais esquelticos completos so raros. Apenas alguns poucos exemplares assim foram registrados, com a maioria dos achados representando materiais fragmentrios de crnio e mandbulas ou vrtebras isoladas. Dentre as localidades provedoras de vertebrados fsseis na Amrica do Sul, a Formao Chichnales se destaca pela recente descoberta, em seus sedimentos, de um crnio quase completo de um lagarto teideo previamente desconhecido. Dada a fauna associada, a idade da formao definida como Mioceno Temprano (Colhuehuapense). No presente estudo, conclui−se, atravs de uma anlise filogentica contendo 39 espcies viventes e fsseis de escamados e 149 caracteres osteolgicos, que este material pertence a uma nova espcie do gnero contemporneo Callopistes. Uma descrio morfolgica detalhada do fssil, obtida atravs de anlises estereoscpicas e de microtomografia computadorizada de alta resoluo (CT Scan), tambm apresentada. A matriz morfolgica foi analisada com o auxlio do software TNT Verso 1.1, seguindo o princpio de mxima parcimnia, com todos os caracteres tratados com a mesma pesagem, resultando em quatro rvores igualmente parcimoniosas, que foram ento utilizadas para a construo de uma rvore de consenso estrito. Em todas as quatro rvores, o novo txon posicionou−se dentro da famlia Teiidae como um membro do clado formado pelas demais espcies viventes de Callopistes. Entretanto, no foi possvel estabelecer uma relao de grupo−irmo inequvoca entre as duas espcies de Callopistes presentes na anlise e o fssil. A atual distribuio das duas espcies viventes de Callopistes e a localidade de onde foi recuperado o fssil em estudo indicam que esse gnero possua uma distribuio muito mais ampla no passado, chegando a reas patagnicas cis−Andinas, diferentemente das reas trans−Andinas de altitude onde as duas espcies atuais esto restritas
Resumo:
Receptores purinrgicos e canais de clcio voltagem-dependentes esto envolvidos em diversos processos biolgicos como na gastrulao, durante o desenvolvimento embrionrio, e na diferenciao neural. Quando ativados, canais de clcio voltagem-dependentes e receptores purinrgicos do tipo P2, ativados por nucleotdeos, desencadeiam transientes de clcio intracelulares controlando diversos processos biolgicos. Neste trabalho, ns estudamos a participao de canais de clcio voltagem-dependentes e receptores do tipo P2 na gerao de transientes de clcio espontneos e sua regulao na expresso de fatores de transcrio relacionados com a neurognese utilizando como modelo clulas tronco (CTE) induzidas diferenciao em clulas tronco neurais (NSC) com cido retinico. Descrevemos que CTE indiferenciadas podem ter a proliferao acelerada pela ativao de receptores P2X7, enquanto que a expresso e a atividade desse receptor precisam ser inibidas para o progresso da diferenciao em neuroblasto. Alm disso, ao longo da diferenciao neural, por anlise em tempo real dos nveis de clcio intracelular livre identificamos 3 padres de oscilaes espontneas de clcio (onda, pico e unique), e mostramos que ondas e picos tiveram a frequncia e amplitude aumentadas conforme o andamento da diferenciao. Clulas tratadas com o inibidor do receptor de inositol 1,4,5-trifosfato (IP3R), Xestospongin C, apresentaram picos mas no ondas, indicando que ondas dependem exclusivamente de clcio oriundo do retculo endoplasmtico pela ativao de IP3R. NSC de telencfalo de embrio de camundongos transgnicos ou pr-diferenciadas de CTE tratadas com Bz-ATP, o agonista do receptor P2X7, e com 2SUTP, agonista de P2Y2 e P2Y4, aumentaram a frequncia e a amplitude das oscilaes espontneas de clcio do tipo pico. Dados, obtidos por microscopia de luminescncia, da expresso em tempo real de gene reprter luciferase fusionado Mash1 e Ngn2 revelou que a ativao dos receptores P2Y2/P2Y4 aumentou a expresso estvel de Mash1 enquanto que ativao do receptor P2X7 levou ao aumento de Ngn2. Alm disso, clulas na presena do quelante de clcio extracelular (EGTA) ou do depletor dos estoques intracelulares de clcio do retculo endoplasmtico (thapsigargin) apresentaram reduo na expresso de Mash1 e Ngn2, indicando que ambos so regulados pela sinalizao de clcio. A investigao dos canais de clcio voltagem-dependentes demonstrou que o influxo de clcio gerado por despolarizao da membrana de NSC diferenciadas de CTE decorrente da ativao de canais de clcio voltagem-dependentes do tipo L. Alm disso, esse influxo pode controlar o destino celular por estabilizar expresso de Mash1 e induzir a diferenciao neuronal por fosforilao e translocao do fator de transcrio CREB. Esses dados sugerem que os receptores P2X7, P2Y2, P2Y4 e canais de clcio voltagem-dependentes do tipo L podem modular as oscilaes espontneas de clcio durante a diferenciao neural e consequentemente alteram o padro de expresso de Mash1 e Ngn2 favorecendo a deciso do destino celular neuronal.
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Phytoplasmas are bacteria with a persistent propagative transmission by insect vectors that generates direct and indirect interactions among them. In order to understand these interactions for maize bushy stunt phytoplasma (MBSP) and the leafhopper vector Dalbulus maidis (Hemiptera: Cicadellidae), two research lines were addressed. The first one aimed to determine the indirect effects of maize infection by MBSP on some biological and behavioral parameters of the vector, whereas a second line investigated direct interactions of the phytoplasma with D. maidis during its movement through the vector body following acquisition from plants, and associated microbiota. Indirect effects were investigated in choice experiments in which alighting and oviposition preferences by D. maidis were compared on healthy vs. MBSP-infected plants with variable incubation time (diseased plants with early and advanced symptoms, or still asymptomatic). Likewise, indirect effect of MBSP on the D. maidis biology was determined in two life table experiments in which the vector was reared on healthy vs. MBSP-infected plants expressing advanced disease symptoms or still asymptomatic. Choice experiments showed that alighting and oviposition preferences of D. maidis on MBSP-infected plants compared to healthy plants depend on the pathogen incubation period in the plant. The leafhopper preferred MBSP-infected plants over healthy ones during the asymptomatic phase of the disease, but rejected infected plants with advanced symptoms. The vector was able to acquire MBSP from asymptomatic infected plants shortly (3 days) after inoculation, but transmission efficiency increased when acquisition occurred at later stages of the pathogen incubation period (≥14 days) in the source plants and the test plants showed disease symptoms faster. These results suggest that MBSP modulates D. maidis preference for asymptomatic infected plants in the early stages of the crop, allowing rapid spread of this pathogen. Maize infection by the phytoplasma had a neutral effect on most life table parameters of D. maidis; a lower net reproductivity rate (Ro) was observed in the cohort reared on MBSP-infected plants with advanced symptoms, which was compensated to some extent by a higher sexual ratio. MBSP acquisition by all vector nymphal stadia was confirmed by PCR, and the pathogen as detected in both male and female reproductive organs. Concerning direct MBSP-vector interactions, transmission electron microscopy analyses showed phytoplasma-like cells in the midgut lumen, microvilli and epithelial cells, suggesting that MBSP enters the epithelium midgut through the microvilli wall. Within the epithelial cells, mitochondria and bacteria-like cells (possibly endosymbionts) were observed together with masses of phythoplasma-like cells. In the hemocoel, phytoplasma-like cells grouped into a matrix were also observed in association with bacteria-like cells similar to those observed in the midgut epithelium. Similar associations were found in the salivary gland. Interestingly, in-situ hybridization (FISH) technique revealed a variation in diversity and abundance of the microbiota in intestine and salivary glands of D. maidis adults over time after MBSP acquisition from plants. Sulcia sp., Cardinium sp. and eubacteria increased their abundance over time, whereas Rickettsia sp. decreased. The frequent association of the vector microbiota with the phytoplasma in some tissues of D. maidis suggests that endosymbiotic bacteria may play some role in MBSP-vector interactions.
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A cetamina uma droga amplamente utilizada e o seu uso inadequado tem sido associado graves consequncias para a sade humana. Embora as propriedades farmacolgicas deste agente em doses teraputicas sejam bem conhecidas, existem poucos estudos sobre os efeitos secundrios induzidos por doses no-teraputicas, incluindo os efeitos nos estados de ansiedade e agressividade. Neste contexto, os modelos animais so uma etapa importante na investigao e elucidao do mecanismo de ao a nvel comportamental. O zebrafish (Danio rerio) um novo organismo-modelo, interessante e promissor, uma vez que apresenta alta similaridade fisiolgica, gentica e neuroqumica com seres humanos, respostas comportamentais bem definidas e rpida absoro de compostos de interesse em meio aquoso alm de apresentar uma srie de vantagens em relao aos modelos mamferos tais como manuteno de baixo custo, prtica e executvel em espaos reduzidos. Nesse sentido, faz-se necessrio a execuo de ensaios comportamentais em conjunto com anlises estatsticas robustas e rpidas tais como ANOVA e Mtodos Multivariados; e tambm o desenvolvimento de mtodos analticos sensveis, precisos e rpidos para determinao de compostos de interesse em matrizes biolgicas provenientes do animal. Os objetivos do presente trabalho foram a investigao dos efeitos da cetamina sobre a ansiedade e a agressividade em zebrafish adulto empregando Testes de Claro-Escuro e Testes do Espelho e mtodos estatsticos univariados (ANOVA) e multivariados (PCA, HCA e SIMCA) assim como o desenvolvimento de mtodo analtico para determinao da cetamina em matriz biolgica proveniente do animal, empregando Extrao Lquido-Lquido e Cromatografia em Fase Gasosa acoplada ao Detector de Nitrognio-Fsforo (GC-NPD). Os resultados comportamentais indicaram que a cetamina produziu um efeito significativo dose-dependente em zebrafish adulto na latncia rea clara, no nmero de cruzamentos entre as reas e no tempo de explorao da rea clara. Os resultados das anlises SIMCA e PCA mostraram uma maior similaridade entre o grupo controle e os grupos de tratamento expostos s doses mais baixas (5 e 20 mg L-1) e entre os grupos expostos s doses de 40 e 60 mg L-1. Na anlise por PCA, dois componentes principais responderam por 88,74% de toda a informao do sistema, sendo que 62,59% da informao cumulativa do sistema foi descrito pela primeira componente principal. As classificaes HCA e SIMCA seguiram uma evoluo lgica na distribuio das amostras por classes. As doses mais altas de cetamina induziram uma distribuio mais homognea das amostras enquanto as doses mais baixas e o controle resultaram em distribuies mais dispersas. No Teste do Espelho, a cetamina no induziu efeitos significativos no comportamento dos animais. Estes resultados sugerem que a cetamina modulador de comportamentos ansiosos, sem efeitos indutores de agressividade. Os resultados da validao do mtodo cromatogrfico indicaram uma extrao com valores de recuperao entre 33,65% e 70,89%. A curva de calibrao foi linear com valor de R2 superior a 0,99. O limite de deteco (LOD) foi de 1 ng e o limite de quantificao (LOQ) foi de 5 ng. A exatido do mtodo cromatogrfico manteve-se entre - 24,83% e - 1,258%, a preciso intra-ensaio entre 2,67 e 14,5% e a preciso inter-ensaio entre 1,93 e 13,9%.
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O objetivo deste trabalho foi desenvolver e avaliar diferentes formulaes de sorbets probiticos e simbiticos a base de polpa de juara (Euterpe edulis), de modo a combinar os efeitos benficos sade dos compostos fenlicos deste fruto com os benefcios dos probiticos e prebiticos. Para isso, foram utilizados os microrganismos L. acidophilus e L. paracasei e a fibra polidextrose, alm da elaborao de uma amostra controle sem tais elementos para efeito de comparao. Primeiramente, a polpa de juara pasteurizada utilizada na produo dos sorbets foi avaliada de acordo com suas caractersticas fsico-qumicas e seus compostos bioativos, tendo apresentado resultados adequados para o emprego na matriz alimentcia em questo. Em seguida, os sorbets foram caracterizados atravs de diversos parmetros. Assim, a anlise centesimal mostrou sorbets com alto ndice de carboidratos e baixo valor calrico, enquanto os teores de slidos solveis apresentaram-se coerentes em todas as formulaes analisadas. Os valores de overrun e densidade aparente relevaram que a incorporao de ar dos sorbets no foi to elevada quanto de um sorvete lcteo, embora as amostras adicionadas de polidextrose - capaz de mimetizar as propriedades de corpo e espessamento da gordura - tenham obtido resultados mais prximos aos gelados tradicionais. Foram ainda mensurados os efeitos do armazenamento dos produtos a -18 C durante 120 dias, atravs de avaliaes de pH, colorao instrumental, estabilidade dos compostos fenlicos e antocianinas e viabilidade dos probiticos. O pH das amostras manteve-se constante durante todo o experimento, com valores entre 4,4 e 4,8, enquanto os parmetros de colorao caracterizaram as amostras como vermelhas e apontaram tendncia perda de luminosidade. J os polifenis e antocianinas apresentaram teores elevados, decorrentes da adio da polpa de juara, sem a ocorrncia de degradao destes compostos ao longo da estocagem das amostras sob congelamento. As populaes de ambos os microrganismos adicionados apresentaram-se estveis em cerca de 8 log UFC/ g durante todo o perodo de armazenamento, o que corresponde a um resultado bastante satisfatrio e superior ao recomendado pela legislao brasileira. Por outro lado, a sobrevivncia in vitro de tais probiticos quando submetidos aos fluidos gastrointestinais no apresentou resultados adequados para a garantia da funcionalidade destes produtos, com queda de viabilidade superior a 4 ciclos logartmicos. A aceitabilidade sensorial e inteno de compra apresentaram resultados positivos para todas as formulaes, com maior aceitao das amostras probiticas em relao ao controle e menor interesse pelas amostras com adio de prebitico. Tal resultado demonstra que a incorporao destas bactrias em sorbets de juara capaz de melhorar a qualidade do produto, enquanto a adio de polidextrose pode diminuir sua aceitabilidade nas condies empregadas. Em sntese, os sorbets elaborados apresentaram resultados satisfatrios, demonstrando a viabilidade na produo deste tipo de alimento funcional adicionado de probiticos, prebitico e rico em polifenis, sendo a combinao de tais elementos capaz de potencializar os efeitos benficos destes compostos e trazer vantagens fundamentais microbiota intestinal e sade de quem os consome.
Resumo:
So reconhecidos 90 nomes especficos vlidos de Crenicichla e oito de Teleocichla. Juntos, os dois gneros-alvo do presente estudo compreendem quase 1/5 da diversidade total de Cichlinae, subfamlia neotropical de Cichlidae. Apesar das espcies de Crenicichla e Teleocichla formarem um clado bem corroborado atravs de filogenias baseadas tanto em dados morfolgicos quanto em dados moleculares, as relaes entre as suas espcies foram ainda pouco estudadas. Os dois estudos filogenticos de Crenicichla conhecidos so parcialmente discordantes entre si e incorporaram apenas uma parcela da diversidade do grupo. Baseados apenas em dados moleculares, no foram acompanhados por um estudo de caracteres morfolgicos que indicariam as sinapomorfias ou caractersticas diagnsticas para identificao dos grupos monofilticos delimitados. No presente estudo, os principais objetivos consistem em testar o monofiletismo do grupo formado pelas espcies de Crenicichla e Teleocichla e identificar e definir unidades monofilticas dentro desse grupo, com base na anlise cladstica de caracteres morfolgicos. Como objetivo secundrio, so testadas as recentes hipteses de relaes filogenticas dessas espcies com as demais espcies de cicldeos neotropicais. Foram includas todas as espcies vlidas de Teleocichla e 54 espcies vlidas de Crenicichla (60% das espcies vlidas), alm de uma espcie nova de Teleocichla e cinco provveis espcies novas de Crenicichla. 20 representantes de diferentes linhagens de Cichlinae foram includos, totalizando 88 txons terminais. As anlises cladsticas foram realizadas a partir de uma matriz com 211 caracteres provenientes do estudo comparado de morfologia externa, incluindo padres de colorido e osteologia. Alm da anlise com pesagens igualitrias, foram explorados tambm os resultados das anlises com pesagem implcita utilizando diferentes valores da varivel k e com pesagem sucessiva. A partir da comparao e discusso dos resultados obtidos a partir das diferentes anlises, a topologia obtida atravs da anlise com pesagem implcita utilizando o valor de k=3 foi escolhida para obteno das inferncias filogenticas. Duas classificaes alternativas foram discutidas e, a fim de minimizar mudanas nomenclaturais, aquela baseada no reconhecimento de subgneros de Crenicichla correspondendo aos grupos monofilticos encontrados foi preferida em detrimento da proposta baseada no reconhecimento de vrios gneros. Isso porque o posicionamento de Crenicichla macrophthalma (espcie-tipo de Crenicichla) continua sendo considerado instvel. O gnero Crenicichla corroborado como um grande clado formado por todas as espcies de Crenicichla e Teleocichla includas e sustentado por 40 sinapomorfias no-ambguas. Um complexo cenrio foi encontrado quanto s relaes entre as espcies de Crenicichla, com vrias linhagens dentro desse grande grupo, assim como era previsto de acordo com estudos filogenticos prvios. As relaes entre essas linhagens, por outro lado, so ainda instveis, podendo variar de acordo com os diferentes tipos de pesagem aplicados e apresentam algumas divergncias em relao aos estudos prvios, que tambm divergem entre si. Teleocichla um grupo monofiltico dentro de Crenicichla e foi considerado como um de seus oito subgneros. O subgnero Crenicichla constitudo apenas por Crenicichla macrophthalma. Os seis subgneros restantes (Wallaciia, Batrachops, Hemeraia, Saxatilia, Lugubria e Lacustria) correspondem totalmente ou parcialmente a grupos de espcies de Crenicichla previamente existentes na literatura. Em Lacustria, quatro complexos de espcies foram delimitados: C. missioneira, C. scotti, C. jaguarensis e C. lacustris sensu stricto. Foram listadas as espcies nominais de cada subgnero e uma diagnose para auxiliar a identificao dos mesmos foi elaborada. Uma nova hiptese de relaes de Crenicichla em Cichlinae inferida a partir da anlise realizada, na qual Crenicichla grupo-irmo de um clado formado por Chaetobranchus flavescens e todos os representantes de Cichlasomatini e Geophagini includos
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A estratgia do Tratamento Diretamente Observado de Curta Durao para o controle da tuberculose (DOTS) tem sido usada por vrios pases do mundo especificamente pelos 22 mais afetados pela doena, que contribuem com cerca de 80% de casos, porm, apesar da estratgia demonstrar a reduo de casos e aumentar a adeso dos pacientes ao tratamento, e ter sido implementada em Moambique desde a dcada de 1980, a doena continua a ser um problema grave de sade pblica no pas. Este estudo tem como objetivo central: analisar a transferncia da poltica do DOTS a partir da viso dos gestores centrais, provinciais e distritais, e profissionais de sade da provncia de Nampula. Trata-se de um estudo qualitativo que usa a Anlise de Discurso de matriz francesa como seu referencial terico metodolgico que busca a compreenso dos sentidos a partir das condies da produo. Participaram deste estudo 15 profissionais de sade que ocupavam as posies de gestores, mdicos e profissionais de enfermagem e/ou tcnicos, e atuavam no Programa nacional de controle de Tuberculose em Moambique com o mnimo de um ano de experincia, nos meses de maio a agosto de 2014, nos nveis central, provincial (Nampula), e distrital (em oito distritos da provncia de Nampula). Para a coleta de dados usou-se um roteiro de entrevista semi-estruturado que permitiu explorar os sentidos produzidos. O corpus em anlise foi constitudo a partir das entrevistas transcritas. Para o auxlio da organizao dos dados usou-se o sofware Atlis.ti verso 6. Este estudo teve a aprovao da Comisso Nacional de Biotica e da autorizao do Ministro da Sade de Moambique. Para a anlise dos dados foram identificados quatro blocos discursivos: experincias adotadas na implementao e manuteno do DOTS; estratgias adotadas na implementao e manuteno de DOTS; potencialidades, fragilidades de DOTS no controle da tuberculose e; discursos no buscados pelo roteiro: possveis solues. Os sentidos produzidos enfatizam dizeres inscritos em formaes discursivas que desconsideram a subjetividade do enfermo; de fragilidades do sistema de sade, falta de recursos humanos, falta de transporte, baixos salrios, insuficincia de laboratrios, distncias longas entre a moradia do paciente e a unidade sanitria. Ainda os entrevistados entendem como potencialidade a participao dos agentes comunitrios e da famlia no tratamento da doena. Conclui-se que para o controle da tuberculose usando a estratgia DOTS o compromisso do governo deve ser pragmtico traduzindo-se em aes concretas como o aumento do financiamento das aes de controle de tuberculose, incluindo as pesquisas, formao dos recursos humanos e, sobretudo, atuar sobre os determinantes socias da sade