879 resultados para ARTIFICIAL ENZYMES


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Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior (CAPES)

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Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado de São Paulo (FAPESP)

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O objetivo do estudo foi caracterizar a reprodução de Cichla kelberi em um lago artificial no município de Leme, Estado de São Paulo, Brasil. A época reprodutiva ocorreu na primavera e verão. O L50 e o L100 desta espécie foram de 192 e 235 mm (L50) para machos e fêmeas, respectivamente e 290 mm (L100) para ambos os sexos. A desova foi do tipo parcelado. O tamanho dos ovócitos maduros foi de 428,4 µm, atingindo o máximo em 2.203,2 µm. A média da fecundidade foi de 12.129,2 ovócitos com média de cada desova de 4.897,7 ovócitos. Esta espécie adequou-se à definição de peixes com fecundação externa, não migradoras e com cuidado parental da prole. Os atributos para a introdução dos tucunarés podem ser tentadores. Porém, suas características reprodutivas e alimentares fazem com que não existam competidores ou predadores naturais e, assim, a sua expansão populacional seja de difícil controle e erradicação.

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Os parâmetros de crescimento e mortalidade foram estimados indiretamente pelas distribuições das frequências de comprimento para espécies de Cichla spp. introduzidas em um lago em Leme (SP) e no reservatório de Volta Grande (SP-MG). em Leme, Cichla kelberi apresentou maior frequência nas classes de comprimentos inferiores, maior taxa instantânea de mortalidade natural e menor número de coortes do que C. kelberi e C. piquiti em Volta Grande. Os valores de performance de crescimento obtidos para as espécies foram próximos, corroborando a validade dos parâmetros estimados de crescimento e de mortalidade. A pressão em crescer rapidamente, devido à predação, aumenta quanto menor e menos diverso for o ambiente. O gênero Cichla adapta-se bem nos locais em que é introduzido, entretanto essa adaptação mostra-se fortemente ajustada a cada ambiente em particular, determinando com isso grande plasticidade e capacidade de estabelecimento.

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A dieta de Cichla kelberi introduzido em um lago artificial em Leme-SP foi composta predominantemente pelas espécies de peixes mais comuns nesse lago (Oreochromis niloticus e o próprio C. kelberi). Na primavera e no verão, o item mais consumido foi O. niloticus. Porém, o canibalismo foi muito comum para esta espécie. As altas frequências de O. niloticus e de C. kelberi revelam que a espécie apresenta um ciclo sazonal, se alimentando das presas mais comuns em cada período do ano, com uma redução da sua atividade alimentar durante o inverno. As dietas foram diferentes entre os exemplares imaturos e maduros, sugerindo que existem diferenças ontogenéticas, principalmente relacionadas ao tipo de presa, como: Ephemeroptera, consumidos pelos tucunarés imaturos e peixes, pelos maduros, além do tamanho das presas.

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O objetivo desse estudo foi caracterizar sazonalmente a dieta de Cichla kelberi em um lago artificial em Leme-SP, determinando os itens alimentares e as relações com os sexos e com a maturação gonadal dos exemplares amostrados. A dieta de C. kelberi apresenta uma dinâmica em três diferentes períodos: os meses de inverno foram caracterizados por baixa atividade alimentar e alta concentração de peixes indeterminados, durante a primavera ocorreu um aumento na atividade alimentar, sendo Tilapia sp. o item alimentar dominante e durante o verão e início do outono foi evidenciada alta taxa de canibalismo. A plasticidade na composição da dieta foi marcada pela quantidade de presas disponíveis durante os períodos do ano e pelo período reprodutivo.

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Verificou-se a influência de duas variedades de cana-de-açúcar (Saccharum spp.), incorparados em dieta artificial, na forma de colmos triturados, no desenvolvimento de Diatraea saccharalis (Fabr.) e no parasitismo de Cotesia flavipes (Cam.). A variedade SP71-1081 foi menos adequada ao desenvolvimento de D. saccharalis comparada à SP71-3146, aumentando os períodos larval e pupal (dias) e, diminuindo o peso larval; não houve diferenças para as viabilidades larval e pupal e peso de pupa. Lagartas oriundas das dietas artificiais e lagartas alojadas no interior dos toletes das variedades de cana, foram igualmente parasitadas por C. flavipes. Lagartas criadas em dieta artificial contendo colmos triturados das variedades testadas, promoveram desenvolvimento semelhante de C. flavipes. A percentagem de parasitismo foi semelhante nas larvas criadas em dietas artificiais contendo colmos das variedades SP 71 - 1081 (84,0%) e SP 71-3146 (81,3%).

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Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado de São Paulo (FAPESP)

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Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado de São Paulo (FAPESP)

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Hydrolysis of phospholipids by Group II phospholipase A(2) enzymes involves a nucleophilic attack on the sn-2 ester bond by the His48 residue and stabilization of the reaction intermediate by a Ca2+ ion cofactor bound to the Asp49 residue in the protein active site region, Bothropstoxin-I (BthTX-I) is a PLA, variant present in the venom of the snake Bothrops jararacussu which shows a Asp49 to Lys substitution and which lacks hydrolytic activity yet damages artificial membranes by a noncatalytic Ca2+-independent mechanism. In order to better characterize this unusual mechanism of membrane damage, we have established an expression system for BthTX-I in Escherichia coli. The DNA-coding sequence for BthTX-I was subcloned into the vector pET11-d, and the BthTX-I was expressed as inclusion bodies in E, coli BL21(DE3). The native BthTX-I contains seven disulfide bonds, and a straightforward protocol has been developed to refold the recombinant protein at high protein concentration in the presence of surfactants using a size-exclusion chromatography matrix. After refolding, recovery yields of 2.5% (corresponding to 4-5 mg of refolded recombinant BthTX-I per liter of bacterial culture) were routinely obtained. After refolding, identical fluorescent and circular dichroism spectra were obtained for the recombinant BthTX-I compared to those of the native protein. Furthermore, the native and refolded recombinant protein demonstrated identical membrane-damaging properties as evaluated by measuring the release of an entrapped fluorescent marker from liposomes, (C) 2001 Academic Press.

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A partial pseudo-ternary phase diagram has been studied for the cethyltrimethylammonium bromide/isooctane:hexanol:butanol/potassium phosphate buffer system, where the two-phase diagram consisting of the reverse micelle phase (L-2) in equilibrium with the solvent is indicated. Based on these diagrams two-phase systems of reverse micelles were prepared with different compositions of the compounds and used for extraction and recovery of two enzymes, and the percentage of enzyme recovery yield monitored. The enzymes glucose-6-phosphate dehydrogenase (G6PD) and xylose redutase (XR) obtained from Candida guilliermondii yeast were used in the extraction procedures. The recovery yield data indicate that micelles having different composition give selective extraction of enzymes. The method can thus be used to optimize enzyme extraction processes. (c) 2007 Elsevier B.V. All rights reserved.

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Esterases are a group of enzymes that are reportedly associated with acaricide resistance in Riphicephallus (Boophilus) microplus. A comparative analysis was made of the esterase patterns in malathion and deltamethrin-sensitive, tolerant and resistant tick groups, using non-denaturing polyacrylamide gel electrophoresis. Electrophoretical profiles revealed four bands of esterase activity against alpha-naphthyl acetate; which were dubbed EST-1 to EST-4. The EST-3 and EST-4 were detected in all strains and were classified as carboxylesterases (CaEs). The EST-2, classified as an acetylcholinesterase (AChE), was detected in all groups, but its staining intensity increased from susceptible to resistant groups, indicating an altered production according to the degree of resistance. EST-1, which was also classified as an AChE, was detected exclusively in tolerant and resistant groups to both acaricides, but displayed greater activity in the malathion-resistant group. These data suggest that these AChEs may represent an important detoxification strategy developed to overcome the effects of acaricides. (C) 2008 Elsevier B.V. All rights reserved.