920 resultados para Kaplan


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High molecular weight kininogen (HK) and factor XII are known to bind to human umbilical vein endothelial cells (HUVEC) in a zinc-dependent and saturable manner indicating that HUVEC express specific binding site(s) for those proteins. However, identification and immunochemical characterization of the putative receptor site(s) has not been previously accomplished. In this report, we have identified a cell surface glycoprotein that is a likely candidate for the HK binding site on HUVECs. When solubilized HUVEC membranes were subjected to an HK-affinity column in the presence or absence of 50 microM ZnCl2 and the bound membrane proteins eluted, a single major protein peak was obtained only in the presence of zinc. SDS/PAGE analysis and silver staining of the protein peak revealed this protein to be 33 kDa and partial sequence analysis matched the NH2 terminus of gC1q-R, a membrane glycoprotein that binds to the globular "heads" of C1q. Two other minor proteins of approximately 70 kDa and 45 kDa were also obtained. Upon analysis by Western blotting, the 33-kDa band was found to react with several monoclonal antibodies (mAbs) recognizing different epitopes on gC1q-R. Ligand and dot blot analyses revealed zinc-dependent binding of biotinylated HK as well as biotinylated factor XII to the isolated 33-kDa HUVEC molecule as well as recombinant gC1q-R. In addition, binding of 125I-HK to HUVEC cells was inhibited by selected monoclonal anti-gC1q-R antibodies. C1q, however, did not inhibit 125I-HK binding to HUVEC nor did those monoclonals known to inhibit C1q binding to gC1q-R. Taken together, the data suggest that HK (and factor XII) bind to HUVECs via a 33-kDa cell surface glycoprotein that appears to be identical to gC1q-R but interact with a site on gC1q-R distinct from that which binds C1q.

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Chédiak-Higashi syndrome in man and the beige mutation of mice are phenotypically similar disorders that have profound effects upon lysosome and melanosome morphology and function. We isolated two murine yeast artificial chromosomes (YACs) that, when introduced into beige mouse fibroblasts, complement the beige mutation. The complementing YACs exist as extrachromosomal elements that are amplified in high concentrations of G418. When YAC-complemented beige cells were fused to human Chédiak-Higashi syndrome or Aleutian mink fibroblasts, complementation of the mutant phenotype also occurred. These results localize the beige gene to a 500-kb interval and demonstrate that the same or homologous genes are defective in mice, minks, and humans.

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The Shc adaptor protein contains two phosphotyrosine [Tyr(P)]binding modules--an N-terminal Tyr(P) binding (PTB) domain and a C-terminal Src homology 2 (SH2) domain. We have compared the ability of the Shc PTB domain to bind the receptors for nerve growth factor and insulin, both of which contain juxtamembrane Asn-Pro-Xaa-Tyr(P) motifs implicated in PTB binding. The Shc PTB domain binds with high affinity to a phosphopeptide corresponding to the nerve growth factor receptor Tyr-490 autophosphorylation site. Analysis of individual residues within this motif indicates that the Asn at position -3 [with respect to Tyr(P)], in addition to Tyr(P), is critical for PTB binding, while the Pro at position -2 plays a less significant role. A hydrophobic amino acid 5 residues N-terminal to the Tyr(P) is also essential for high-affinity binding. In contrast, the Shc PTB domain does not bind stably to the Asn-Pro-Xaa-Tyr(P) site at Tyr-960 in the activated insulin receptor, which has a polar residue (Ser) at position -5. Substitution of this Ser at position -5 with Ile markedly increased binding of the insulin receptor Tyr-960 phosphopeptide to the PTB domain. These results suggest that while the Shc PTB domain recognizes a core sequence of Asn-Pro-Xaa-Tyr(P), its binding affinity is modulated by more N-terminal residues in the ligand, which therefore contribute to the specificity of PTB-receptor interactions. An analysis of residues in the Shc PTB domain required for binding to Tyr(P) sites identified a specific and evolutionarily conserved Arg (Arg-175) that is uniquely important for ligand binding and is potentially involved in Tyr(P) recognition.

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Myosin VIIa is a newly identified member of the myosin superfamily of actin-based motors. Recently, the myosin VIIa gene was identified as the gene defective in shaker-1, a recessive deafness in mice [Gibson, F., Walsh, J., Mburu, P., Varela, A., Brown, K.A., Antonio, M., Beisel, K.W., Steel, K.P. & Brown, S.D.M. (1995) Nature (London) 374, 62-64], and in human Usher syndrome type 1B, an inherited disease characterized by congenital deafness, vestibular dysfunction, and retinitis pigmentosa [Weil, D., Blanchard, S., Kaplan, J., Guilford, P., Gibson, F., Walsh, J., Mburu, P., Varela, A., Levilliers, J., Weston, M.D., Kelley, P.M., Kimberling, W.J., Wagenaar, M., Levi-Acobas, F., Larget-Piet, D., Munnich, A., Steel, K.P., Brown, S.D.M. & Petit, C. (1995) Nature (London) 374, 60-61]. To understand the normal function of myosin VIIa and how it could cause these disease phenotypes when defective, we generated antibodies specific to the tail portion of this unconventional myosin. We found that myosin VIIa was expressed in cochlea, retina, testis, lung, and kidney. In cochlea, myosin VIIa expression was restricted to the inner and outer hair cells, where it was found in the apical stereocilia as well as the cytoplasm. In the eye, myosin VIIa was expressed by the retinal pigmented epithelial cells, where it was enriched within the apical actin-rich domain of this cell type. The cell-specific localization of myosin VIIa suggests that the blindness and deafness associated with Usher syndrome is due to lack of proper myosin VIIa function within the cochlear hair cells and the retinal pigmented epithelial cells.

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The cytokines interleukin 2 (IL-2) and IL-15 have similar biological effects on T cells and bind common hematopoietin receptor subunits. Pathways that involve Janus kinases (JAKs) and signal transducers and activators of transcription (STATs) have been shown to be important for hematopoietin receptor signaling. In this study we identify the STAT proteins activated by IL-2 and IL-15 in human T cells. IL-2 and IL-15 rapidly induced the tyrosine phosphorylation of STAT3 and STAT5, and DNA-binding complexes containing STAT3 and STAT5 were rapidly activated by these cytokines in T cells. IL-4 induced tyrosine phosphorylation and activation of STAT3 but not STAT5. JAK1 and JAK3 were tyrosine-phosphorylated in response to IL-2 and IL-15. Hence, the JAK and STAT molecules that are activated in response to IL-2 and IL-15 are similar but differ from those induced by IL-4. These observations identify the STAT proteins activated by IL-2 and IL-15 and therefore define signaling pathways by which these T-cell growth factors may regulate gene transcription.

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Extensive proteolytic digestion of Na+,K(+)-ATPase (EC 3.6.1.37) by trypsin produces a preparation where most of the extramembrane portions of the alpha subunit have been digested away and the beta subunit remains essentially intact. The fragment Gln-737-Arg-829 of the Na+,K(+)-ATPase alpha subunit, which includes the putative transmembrane hairpin M5-M6, is readily, selectively, and irreversibly released from the posttryptic membrane preparation after incubation at 37 degrees C for several minutes. Once released from the membrane, the fragment aggregates but remains water soluble. Occlusion of K+ or Rb+ specifically prevents release of the Gln-737-Arg-829 fragment into the supernatant. Labeling of the posttryptic membrane preparation with cysteine-directed reagents revealed that Cys-802 (which is thought to be located within the M6 segment) is protected against the modification by Rb+ while this fragment is in the membrane but can be readily modified upon release. Cation occlusion apparently alters the folding and/or disposition of the M5-M6 fragment in the membrane in a way that does not occur when the fragment migrates to the aqueous phase. The ligand-dependent disposition of the M5-M6 hairpin in the membrane along with recent labeling studies suggest a key role for this segment in cation pumping by Na+,K(+)-ATPase.

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Viruses such as human immunodeficiency virus (HIV) require cellular activation for expression. Cellular activation in lymphoid cells is associated with augmented accumulation of certain phosphatidic acid (PA) species derived from the hydrolysis of glycan phosphatidylinositol (GPI). This suggests that activation of a phospholipid pathway may play a role in initiation of viral replication. To test this hypothesis, we examined the effect of tat gene expression on the production of cellular PA species, as the Tat protein is essential for HIV expression and has been implicated in activating the expression of multiple host cellular genes. Expression of tat increased the expression of PA. We then tested whether synthetic inhibitors of PA metabolism would inhibit activation of the HIV long terminal repeat by Tat and tumor necrosis factor alpha (TNF-alpha). CT-2576 suppressed both PA generation induced by Tat and HIV long terminal repeat-directed gene expression in response to Tat or TNF-alpha at a posttranscriptional step. CT-2576 also inhibited constitutive as well as TNF-alpha- and interleukin 6-induced expression of HIV p24 antigen in chronically infected U1 cells and in peripheral blood lymphocytes acutely infected with a clinical isolate of HIV. Pharmacological inhibition of synthesis of selected PA species may therefore provide a therapeutic approach to suppression of HIV replication.

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Background e scopi dello studio. Il carcinoma renale rappresenta circa il 3% delle neoplasie e la sua incidenza è in aumento nel mondo. Il principale approccio terapeutico alla malattia in stadio precoce è rappresentato dalla chirurgia (nefrectomia parziale o radicale), sebbene circa il 30-40% dei pazienti vada incontro a recidiva di malattia dopo tale trattamento. La probabilità di recidivare può essere stimata per mezzo di alcuni noti modelli prognostici sviluppati integrando sia parametri clinici che anatomo-patologici. Il limite principale all’impiego nella pratica clinica di questi modelli è legata alla loro complessità di calcolo che li rende di difficile fruizione. Inoltre la stratificazione prognostica dei pazienti in questo ambito ha un ruolo rilevante nella pianificazione ed interpretazione dei risultati degli studi di terapia adiuvante dopo il trattamento chirurgico del carcinoma renale in stadio iniziale. Da un' analisi non pre-pianificata condotta nell’ambito di uno studio prospettico e randomizzato multicentrico italiano di recente pubblicazione, è stato sviluppato un nuovo modello predittivo e prognostico (“score”) che utilizza quattro semplici parametri: l’età del paziente, il grading istologico, lo stadio patologico del tumore (pT) e della componente linfonodale (pN). Lo scopo del presente studio era quello di validare esternamente tale score. Pazienti e Metodi. La validazione è stata condotta su due coorti retrospettive italiane (141 e 246 pazienti) e su una prospettica americana (1943 pazienti). Lo score testato prevedeva il confronto tra due gruppi di pazienti, uno a prognosi favorevole (pazienti con almeno due parametri positivi tra i seguenti: età < 60 anni, pT1-T3a, pN0, grading 1-2) e uno a prognosi sfavorevole (pazienti con meno di due fattori positivi). La statistica descrittiva è stata utilizzata per mostrare la distribuzione dei diversi parametri. Le analisi di sopravvivenza [recurrence free survival (RFS) e overall survival (OS)] sono state eseguite il metodo di Kaplan-Meier e le comparazioni tra i vari gruppi di pazienti sono state condotte utilizzando il Mantel-Haenszel log-rank test e il modello di regressione di Cox. Il metodo di Greenwood è stato utilizzato per stimare la varianza e la costruzione degli intervalli di confidenza al 95% (95% CI), la “C-statistic” è stata utilizzata per descrivere l’ accuratezza dello score. Risultati. I risultati della validazione dello score condotta sulle due casistiche retrospettive italiane, seppur non mostrando una differenza statisticamente significativa tra i due gruppi di pazienti (gruppo favorevole versus sfavorevole), sono stati ritenuti incoraggianti e meritevoli di ulteriore validazione sulla casistica prospettica americana. Lo score ha dimostrato di performare bene sia nel determinare la prognosi in termini di RFS [hazard ratio (HR) 1.85, 95% CI 1.57-2.17, p < 0.001] che di OS [HR 2.58, 95% CI 1.98-3.35, p < 0.001]. Inoltre in questa casistica lo score ha realizzato risultati sovrapponibili a quelli dello University of California Los Angeles Integrated Staging System. Conclusioni. Questo nuovo e semplice score ha dimostrato la sua validità in altre casistiche, sia retrospettive che prospettiche, in termini di impatto prognostico su RFS e OS. Ulteriori validazioni su casistiche internazionali sono in corso per confermare i risultati qui presentati e per testare l’eventuale ruolo predittivo di questo nuovo score.

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Introdução: O excesso de peso em adultos jovens está associado ao desenvolvimento de doenças crônicas não transmissíveis (DCNT) e à diminuição da qualidade de vida e ao aumento da mortalidade precoce. A transição da adolescência para a fase adulta é o período de maior risco para a incidência da obesidade. Objetivo: Estimar o efeito o índice de massa corpora (IMC) aos 20 anos sobre a incidência de DCNT em adultos brasileiros com idade entre 30 a 49 anos. Métodos: Foram selecionados 12.079 indivíduos de 30 a 49 anos da Pesquisa Nacional de Saúde (PNS), realizada no ano de 2013. O modelo adotado para determinação das DCNT foi aquele proposto pela Organização Mundial de Saúde. A incidência das DCNT (hipertensão, doenças cardiovasculares, diabetes e câncer, entre outras), informada pela data do diagnóstico, foi modelada como função do IMC aos 20 anos. Os indivíduos sem a doença até o presente foram considerados como censura. As estimativas de sobrevida foram calculadas com o método de Kaplan-Meier (KM) para cada uma das doenças, estratificada por sexo e ajustada por escolaridade. A análise dos fatores de risco para as doenças foi feita utilizando-se o modelo de riscos proporcionais de Cox. Resultados: Nas curvas de sobrevida KM, indivíduos com IMC >=25kg/m² apresentaram incidência mais elevada e precoce de DCNT, principalmente hipertensão, diabetes e depressão. A idade mediana para incidência do diabetes em obesos foi de 47 anos para homens e 48 anos para mulheres. A incidência da hipertensão arterial foi 4,2 por mil com sobrevida mediana de 48 e 44 anos em mulheres com excesso de peso e obesidade, respectivamente. Dentre os fatores de risco associados as DCNT, o tabagismo em idade precoce foi associado à incidência de depressão. Conclusão: O excesso de peso em adultos jovens aumenta a incidência precoce de DCNT, com efeitos negativos na qualidade de vida, lazer e produtividade, além de aumentar a demanda por serviços de saúde. Torna-se necessário que a intervenção para redução dessas doenças seja direcionada para o período da infância e adolescência com ações que promovam a redução da exposição desses indivíduos à alimentação de má qualidade e incentivo a prática de atividade, não uso do tabaco e consumo moderado de álcool.

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INTRODUÇÃO: Leishmaniose visceral (LV) é uma doença negligenciada que afeta milhões de pessoas no mundo e que constitui um grave problema de saúde pública. OBJETIVOS: Descrever no tempo e no espaço, a dispersão de Lutzomyia longipalpis e a expansão da LV no estado de São Paulo (SP); identificar fatores associados a estes processos. MÉTODOS: Foram realizados estudos descritivos, ecológicos e de análise de sobrevida. Informações sobre o vetor e os casos foram obtidas na Superintendência de Controle de Endemias e no Sistema de Informações de Agravos de Notificação para o período de 1997 a 2014. A área de estudo foi composta pelos 645 municípios de SP. Foram produzidos mapas temáticos e de fluxo e calcularam-se incidência, mortalidade e letalidade por LV em humanos (LVH). Utilizou-se a técnica de análise de sobrevida (Curvas de Kaplan-Meier e Regressão de Cox) para a identificação de fatores associados à dispersão do vetor e expansão da LV. RESULTADOS: A partir da detecção de Lu. longipalpis em Araçatuba em 1997, deram-se a ocorrência do primeiro caso canino (LVC) (1998) e o primeiro caso humano (LVH) autóctones (1999) em SP. Até 2014, foi detectada a presença do vetor em 173 (26,8 por cento ) municípios, LVC em 108 (16,7 por cento ) e LVH em 84 (13 por cento ). A expansão dos três fenômenos ocorreu no sentido noroeste para sudeste e se deram a velocidades constantes. Na região de São José do Rio Preto, a dispersão do vetor deu-se por vizinhança com municípios anteriormente infestados, a expansão da LV relacionou-se com os municípios sede das microrregiões e a doença ocorreu com maior intensidade nas áreas periféricas dos municípios. A presença da Rodovia Marechal Rondon e a divisa com o Mato Grosso do Sul foram fatores associados à ocorrência dos três eventos, assim como a presença da Rodovia Euclides da Cunha para presença do vetor e casos caninos, e, presença de presídios para casos humanos. CONCLUSÕES: A dispersão do vetor e da LV em SP iniciou-se, a partir de 1997, próximo à divisa com o estado do Mato Grosso do Sul, avançou no sentido noroeste para sudeste, na trajetória da rodovia Marechal Rondon, e ocorreu em progressão aritmética, com as sedes das microrregiões de SP tendo papel preponderante neste processo. A ocorrência autóctone de LVC e LVH iniciou-se na sequência da detecção de Lu. longipalpis em Araçatuba e de seu espalhamento por SP e não a partir dos locais onde anteriormente ele já estava presente. O uso da análise de sobrevida permitiu identificar fatores associados à dispersão do vetor e a expansão da LV. Os resultados deste estudo podem ser úteis para aprimorar as atividades de vigilância e controle da LV, no sentido de retardar sua expansão e/ou de mitigar seus efeitos, quando de sua ocorrência.

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Introdução: Em 2008, o baixo nível de atividade física (< 30 min de atividade moderada/vigorosa por dia) foi responsável por 9 por cento da ocorrência de óbito no mundo. Além disso, está associado ao comprometimento de mobilidade em idosos com 80 anos e mais. No entanto, devido a dificuldades metodológicas, poucos são os estudos populacionais que realizaram a associação entre baixo nível de atividade física e comprometimento de mobilidade e risco para óbito, utilizando método objetivo para avaliação da atividade física, e ainda não se tem conhecimento de pesquisas que verificaram essa associação na América Latina. Objetivo: Identificar a prevalência do baixo nível de atividade física e sua associação com o comprometimento da mobilidade e risco para óbito em idosos com 65 anos e mais residentes no município de São Paulo em 2010. Métodos: Estudo exploratório e quantitativo de base populacional, que utilizou a base de dados do Estudo SABE de 2010 e ocorrência de óbito em 2014. Foram avaliados 599 indivíduos em 2010. O nível de atividade física foi analisado de duas maneiras: 1) baixo nível de atividade física (< 30 minutos de atividade moderada e/ou vigorosa por dia) e alto nível de atividade física (> 30 minutos de atividade moderada e/ou vigorosa por dia); e 2) a amostra foi distribuída em tercis, de acordo com as contagens por minuto, e agrupada em dois grupos, sendo os idosos do mais baixo tercil classificados com baixo nível de atividade física e os idosos dos dois outros tercis como intermediário/alto nível de atividade física. A regressão logística hierárquica foi utilizada para: 1) identificar as variáveis associadas ao baixo nível de atividade física; 2) analisar a associação do baixo nível de atividade física no comprometimento da mobilidade; e 3) estimar o risco para óbito em idosos com baixo nível de atividade física. A curva de sobrevida foi analisada com o método de Kaplan-Meier utilizando o teste de log-rank e o risco proporcional foi calculado pelo modelo de risco proporcional de Cox. Resultados: A prevalência de baixo nível de atividade física em idosos foi de 85,4 por cento e as variáveis associadas, após ajuste, foram sexo (feminino), grupo etário (>75 anos), multimorbidade (> 2 doenças crônicas), dor crônica (dor crônica nos últimos 3 meses) e índice de massa corporal (maior valor médio). O baixo nível de atividade física permaneceu significativamente associado ao comprometimento de mobilidade (OR= 3,49; IC95 por cento = 2,00 6,13) e ao risco para (RP= 2,79; IC95 por cento = 1,71 4,57), mesmo após ajuste das variáveis sóciodemográficas e clínicas. Conclusão: A prevalência do baixo nível de atividade física em pessoas idosas residentes no Município de São Paulo é superior aos encontrados na população brasileira, mas se aproxima de outras populações que utilizaram o mesmo método de avaliação da atividade física. O baixo nível de atividade física (< 30 min de atividades moderadas/vigorosas) foi associado com variáveis sociodemográficas (sexo feminino e grupo etário) e clínicas (multimorbidade, dor crônica e índice de massa corporal). O baixo nível de atividade física (menor tercil de contagens por minuto) foi associado ao comprometimento de mobilidade e risco para óbito em quatro anos. Dessa forma, o baixo nível de atividade física pode ser utilizado como uma forma adequada para identificar idosos com maiores chances de apresentar comprometimento da mobilidade e aumento do risco para óbito.

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Objetivos: Avaliar numa coorte de idosos se há diferenças entre as situações do curso de vida que contribuem para uma maior chance de sobrevida em homens e mulheres com 60 anos e mais. Métodos: 2.143 idosos entrevistados em 2000 foram acompanhados durante quase 15 anos. Utilizou-se na análise estatística o teste de associação para amostras complexas (Rao-Scott), o estimador produto limite de Kaplan-Meier, o teste de log-rank, análise univariada e multivariada do modelo de riscos proporcionais de Cox, sendo construídos, através deste último, dois modelos finais por gênero, ao nível de significância de 5 por cento . Resultados e discussão: Dos 836.204 idosos paulistanos representados pelo estudo 51,6 por cento continuavam vivos (43,0 por cento dos homens e 57,7 por cento das mulheres). Em ambos os gêneros, os/as que tinham boas condições materiais e que realizavam sem dificuldade e sem ajuda mais da metade das atividades básicas e instrumentais de vida diária (ABVD/AIVD) apresentaram maior chance de sobrevivência. O mesmo foi verificado naquelas mulheres com menos de duas limitações de determinadas doenças, nas casadas, nas que ofereciam algum tipo de ajuda e nas que realizaram ações preventivas em relação a sua condição de saúde. Entre os homens o mesmo ocorreu naqueles que se referiram ser chefe de família, nos que tinham participação comunitária, nos que residiam com algum outro morador que foi ou ia à escola, que trabalharam predominantemente como proprietário ou por conta própria e nos que relataram ter tido alguma doença em seus primeiros quinzes anos de vida. Conclusão: As chances de sobrevida são diferentes entre gêneros, e entre si, mesmo em situações aparentemente semelhantes do curso de vida vivenciados e presentes em homens e mulheres idosas.

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Trabalho Final do Curso de Mestrado Integrado em Medicina, Faculdade de Medicina, Universidade de Lisboa, 2014

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Enquadramento: O interesse pelo tema Educação Sexual germinou da conscientiza-ção de que a sexualidade está na essência do homem, com o ideal de ser experimentada e vivida; procura-se cada vez mais expandir esses conhecimentos com responsabilidade e naturalidade, principalmente frente à responsabilidade de educadores por participar de uma capacitação oferecida pelo grupo do Instituto Kaplan Programa / PROJETO VALE SONHAR. Objetivo: Proposemo-nos analisar a importancia da metodologia das oficinas formati-vas na Educação Sexual na Escola;Determinar a eficácia das oficinas nos conhecimentos sobre sexualidade nos adolescentes;Construir conhecimento sobre sexualidade, desmitifi- cando conceitos. Método: Foi desenvolvida uma intervenção formativa com aplicação de 03 (três) ofi-cinas, em que foram avaliados os conhecimentos antes e após a intervenção formativa. Du-rante estas oficinas foram aplicados questionários e coleta de depoimentos dos participantes. A amostra foi constituída por adolescentes de ambos os sexos, que frequentavam o 1º ano do ensino médio na Escola Estadual de Educação Básica Costa Rêgo, no ano letivo de 2013 e 2014. Resultados: Os conhecimentos sobre planejamento familiar, infecções sexualmente transmissíveis e reprodução dos adolescentes na maioria aumentaram após a intervenção formativa no âmbito da afetividade/sexualidade na adolescência. Os conhecimentos estão relacionados com a idade no sentido em que são os mais novos que demonstram mais co-nhecimentos. Na separação dos conhecimentos por sexo são as meninas que manifestam mais conhecimentos, assim como os residentes em meio urbano. A existência de irmãos, a idade e escolaridade dos pais não influenciam os conhecimentos dos adolescentes. Obser-vou-se também que os adolescentes que já tinham iniciado relações sexuais são aqueles que detêm menos conhecimentos. Conclusão: Os dados mostram que as oficinas realizadas e os questionários servi-ram para conscientização dos alunos e contribuiu para a redução dos índices de evasão escolar por motivos de gravidez, mostrando assim a importância de se tratar de educação sexual no ambiente escolar. Palavras-chave: Adolescência, Sexualidade, Educação Sexual, Planejamento Famili-ar, Infecções Sexualmente Transmissíveis.