The formulation of artificial reference standards for use within the ELISPOT assay

Whether to assess the functionality of equipment or as a determinate for the accuracy of assays, reference standards are essential for the purposes of standardisation and validation. The ELISPOT assay, developed over thirty years ago, has emerged as a leading immunological assay in the development of novel vaccines for the assessment of efficacy. However, with its widespread use, there is a growing demand for a greater level of standardisation across different laboratories. One of the major difficulties in achieving this goal has been the lack of definitive reference standards. This is partly due to the ex vivo nature of the assay, which relies on cells being placed directly into the wells. Thus, the aim of this thesis was to produce an artificial reference standard using liposomes, for use within the assay. Liposomes are spherical bilayer vesicles with an enclosed aqueous compartment and therefore are models for biological membranes. Initial work examined pre-design considerations in order to produce an optimal formulation that would closely mimic the action of the cells ordinarily placed on the assay. Recognition of the structural differences between liposomes and cells led to the formulation of liposomes with increased density. This was achieved by using a synthesised cholesterol analogue. By incorporating this cholesterol analogue in liposomes, increased sedimentation rates were observed within the first few hours. The optimal liposome formulation from these studies was composed of 2-dipalmitoyl-sn-glycero-3-phosphocholine (DPPC), cholesterol (Chol) and brominated cholesterol (Brchol) at a 16:4:12 µMol ratio, based on a significantly higher (p<0.01) sedimentation (as determined by a percentage transmission of 59 ± 5.9 % compared to the control formulation at 29 ± 12 % after four hours). By considering a range of liposome formulations ‘proof of principle’ for using liposomes as ELISPOT reference standards was shown; recombinant IFN? cytokine was successfully entrapped within vesicles of different lipid compositions, which were able to promote spot formation within the ELISPOT assay. Using optimised liposome formulations composed of phosphatidylcholine with or without cholesterol (16 µMol total lipid) further development was undertaken to produce an optimised, scalable protocol for the production of liposomes as reference standards. A linear increase in spot number by the manipulation of cytokine concentration and/or lipid concentrations was not possible, potentially due to the saturation that occurred within the base of wells. Investigations into storage of the formulations demonstrated the feasibility of freezing and lyophilisation with disaccharide cryoprotectants, but also highlighted the need for further protocol optimisation to achieve a robust reference standard upon storage. Finally, the transfer of small-scale production to a medium lab-scale batch (40 mL) demonstrated this was feasible within the laboratory using the optimised protocol.

Usability of clay mixed red mud in Hungarian building material production industry

The naturally occurring radionuclide (²²⁶Ra,²³²Th and⁴⁰K) content of building Materials (NORM) contributes to the total radiation dose experienced by humans. In this survey 27 clay and 68 red mud samples were surveyed with gamma spectrometry and screened according to European Basic Safety Standards (BSS) I-index. It was found that average I-index of clays was 0.6 (0.4–0.8) less than the I-index of 1, which makes them suitable for building material production. The average I-index of red mud 2.3 (1.3–3.0). The maximal mixing ratio of red mud was calculated, varied between 12 and 39 %, with 23 % average.

Standardizing Minzu: A Content Analysis of the Depiction of Shaoshu Minzu in Three Chinese Elementary Curriculum Standards and Textbooks

Thesis (Ph.D.)--University of Washington, 2016-08

Comparison of EN & ASME welding and its allied processes standards

This thesis is made in cooperation with Wärtsilä and Sandvik. The main purpose of the thesis is to clarify the best suitable American standards for European standards used in Wärtsilä’s investigation checklist and to make wide and easily readable tables for Wärtsilä and their subcontractors. One of the most important issues is to make clear if the compared American standards are demanding enough for Wärtsilä’s needs. The research is done by comparing EN standards mentioned in Wärtsilä’s investigation checklist to corresponding ASME, AWS, ASNT and ASTM standards. The research shows that there is visible lack of requirements in American standards compared to European ones. Some areas of American standards are more demanding than European standards but in larger scale EN standards are much wider and more demanding than American standards. Because of these reasons, usage of European standards should be recommended for Wärtsilä’s subcontractors to ensure the quality and reliability of production.

Producers' Perceptions and Consumers' Behaviour Toward Certified Beans from Integrated Production (IP) in the Brazilian Central Region

Integrated production (IP) is part of the Brazilian government program to promote sustainable agricultural production. IP ensure minimum food quality standards for domestic market, and export. Furthermore, IP is considered a good option to reduce negative environmental impacts of intensive crops in tropical Savannas, including common beans, as a Brazilian staple food. Although its advantages, and the government’s effort to promote IP, few growers are adopting IP. Maybe, the perception about IP usefulness and/or its ease of use is not too clear. Moreover, the production sector is driven by market signs, and there is few information on the consumer's preferences toward IP certified products in Brazil. In this study, we sought to identify some critical factors that can influence the IP adoption in beans' production. Moreover, we sought to verify the consumers’ perceptions and intention of purchasing IP certified beans (hypothetical product). This report comprises four chapters: (1) an introduction illustrating the context in which the research was based; (2) the results on the study of IP adoption based on the Technology Acceptance Model (TAM); (3) the choice experiment results applied to identify consumers preferences and willingness-to-pay (WTP) for IP label; (4) the results on the Theory of Planned Behaviour (TPB) applied to identify consumers’ perception toward IP certified beans. This research contributes with rich information for the beans’ supply chain, providing several insights to growers, retail and other agents, including policy makers. Beans’ production sector seems to be positively intentioned to adopt IP, but further studies should be conducted to test other adoption indicators using TAM model. Surveyed consumers are willing to pay a premium price for IP labelled beans. They showed a positive attitude toward purchasing IP labelled beans. It is an important information to motivate production sector to offer certified beans to the market.

Examining the use of Simarouba glauca Seed Oil as a Feedstock for the Production of Biodiesel using a Small Scale Model Developed in India

Simarouba glauca, a non-edible oilseed crop native to South Florida, is gaining popularity as a feedstock for the production of biodiesel. The University of Agriculture Sciences in Bangalore, India has developed a biodiesel production model based on the principles of decentralization, small scales, and multiple fuel sources. Success of such a program depends on conversion efficiencies at multiple stages. The conversion efficiency of the field-level, decentralized production model was compared with the in-laboratory conversion efficiency benchmark. The study indicated that the field-level model conversion efficiency was less than that of the lab-scale set up. The fuel qualities and characteristics of the Simarouba glauca biodiesel were tested and found to be the standards required for fuel designation. However, this research suggests that for Simarouba glauca to be widely accepted as a biodiesel feedstock further investigation is still required.

Production d’un profil de sortie intégrant le rôle infirmier rehaussé et actualisé pour le programme Soins infirmiers du Cégep Limoilou

Avec l’instauration du Renouveau pédagogique, en 1993, un nouveau partage des responsabilités entre le Ministère et les collèges fut défini. Ces établissements d’enseignement devaient, dorénavant, élaborer, mettre en oeuvre et procéder à l’évaluation de programmes d’études permettant l’atteinte d’objectifs et de standards définis par le Ministère selon une approche par compétences. Les programmes d’études se devaient d’être cohérents et adaptés aux besoins du marché du travail. Pour le programme Soins infirmiers du Cégep Limoilou, le programme par compétences fut implanté à l’automne 2001. En 2003, de façon concomitante à l’établissement de ce nouveau programme, l’exercice infirmier se voyait rehaussé par un code législatif renouvelé. À partir de ce moment, ses habiletés à évaluer et à utiliser son jugement clinique furent reconnues et de nouvelles activités furent confiées à ce professionnel de la santé. S’en suivit l’apparition d’un nouvel outil pour la pratique de cette profession, le plan thérapeutique infirmier. Pour le programme Soins infirmiers du Cégep Limoilou, certains ajustements en lien avec ce rôle rehaussé ont été intégrés dans la formation. Toutefois, un doute demeure quant à la capacité de l’étudiante ou de l’étudiant à acquérir et à exercer son jugement clinique, de même qu’à développer une vision globale de la compétence infirmière. Une formation cohérente relativement à la continuité et la progression des apprentissages pourrait remédier à ces faiblesses en plus de répondre à la visée ministérielle. Cette cohérence relevant de l’approche programme s’est toutefois révélée déficiente lors du processus d’évaluation de ce programme d’études en 2006. L’un des outils favorisant cette approche est le profil de sortie, aussi appelé profil du diplômé. Il permet à toutes les personnes impliquées dans la formation de partager une vision commune de l’étudiante ou de l’étudiant que le programme désire former. Cet outil essentiel à l’élaboration d’un programme d’études n’avait jamais été conçu pour le programme Soins infirmiers du Cégep Limoilou. Cette recherche ayant pour objectif d’élaborer un profil de sortie intégrant le rôle infirmier rehaussé et actualisé pour le programme Soins infirmiers du Cégep Limoilou permettra de remédier à ces difficultés. Cette recherche est qualifiée de novatrice, car aucune ayant un tel objectif n’a été réalisée précédemment. La réalisation de cet objectif repose sur un cadre théorique étoffé. Celui-ci dresse d’abord un portrait de la profession infirmière en tenant compte des nombreux changements survenus ces dernières années. Ensuite, il décrit le programme d’études collégiales en soins infirmiers en portant une attention spéciale aux particularités du programme au Cégep Limoilou et enfin, il contient toutes les assises nécessaires à l’élaboration d’un profil de sortie. Ce cadre théorique met en lumière les quatre objectifs spécifiques de cette recherche qui se résument en la création d’une première version du profil de sortie, la validation de celle-ci, la modification de cette version et la formulation de recommandations pour favoriser une utilisation efficace de ce produit. L’accomplissement de ces objectifs a reposé sur une approche méthodologique qualitative inspirée de la posture épistémologique interprétative de l’enseignante-chercheure ayant mené cette recherche. Le choix de celle-ci quant au type de recherche s’est arrêté sur la recherche-développement collaborative puisque cette dernière vise la conception d’un produit nécessitant la contribution de quatre personnes. La première version du profil de sortie réalisée par ce travail collaboratif a été validée auprès de plusieurs sources. Parmi celles-ci, vingt et une personnes enseignant en soins infirmiers du Cégep Limoilou. C’est par l’intermédiaire de trois groupes de discussion que l’enseignante-chercheure a validé cette version auprès de ces personnes. Un guide de discussion fut conçu à cet effet. Cette technique de collecte de données a permis de recueillir des commentaires constructifs sur des énoncés à clarifier ou à ajouter. De plus, ces personnes ont formulé des suggestions en lien avec la formation pour favoriser l’atteinte de ce profil par les étudiantes et étudiants du programme Soins infirmiers. La seconde source consultée représente le marché du travail, elle est constituée de deux membres de la direction des soins infirmiers et d’une ou d’un chef d’unité, tous issus de centres hospitaliers, de même qu’une personne représentant le ministère de la Santé. Pour recueillir les commentaires et suggestions de ces personnes, l’entrevue semi-dirigée utilisant une grille d’entrevue semblable au guide de discussion a été privilégiée. Certains résultats obtenus se rapprochent étroitement de ceux des groupes de discussion, tandis que d’autres amènent une vision nouvelle et des commentaires complémentaires. La dernière source de validation émane de la recension des écrits récents réalisée par l’enseignante-chercheure. Plusieurs modifications quant au rôle infirmier rehaussé et à la pratique actuelle de cette profession ont été apportées au profil de sortie. L’ajout d’habiletés permettant une utilisation efficace de la pratique contemporaine et l’utilisation de données probantes dans la prise de décisions cliniques n’en sont que des exemples. Afin de répondre adéquatement au dernier objectif spécifique poursuivi par l’enseignante-chercheure quant à la formulation de recommandations, un questionnaire a été rempli par vingt-cinq enseignantes et enseignants du programme dans le but de décrire la pratique enseignante. Les résultats de ce questionnaire conçu spécialement pour cette recherche mettent en lumière certaines lacunes concernant l’application de l’approche par compétences et l’approche programme. Lacunes corroborées par l’analyse sommaire des plans-cadres et des plans de cours réalisée par l’enseignante-chercheure. Ces résultats mis en relation avec le cadre théorique ont permis de formuler différentes recommandations pour favoriser l’atteinte du profil de sortie par les étudiantes et les étudiants en soins infirmiers. Étant donné que le produit de cette recherche sert de fondement à la révision du programme Soins infirmiers ayant débuté au Cégep Limoilou, son utilité n’est pas à démontrer. L’amélioration du programme d’études et la préparation adéquate des étudiantes et étudiants aux exigences de la profession sont des retombées envisagées. Enfin, une certaine transférabilité à d’autres institutions offrant le programme Soins infirmiers est envisageable. Le profil de sortie réalisé de même que les recommandations y étant associées peuvent s’avérer inspirants.

Production de biodiesel à partir de microalgues par catalyses homogène et hétérogène

Résumé : Au Canada, près de 80% des émissions totales, soit 692 Mt eq. CO[indice inférieur 2], des gaz à effet de serre (GES) sont produits par les émissions de dioxyde de carbone (CO[indice inférieur 2]) provenant de l’utilisation de matières fossiles non renouvelables. Après la Conférence des Nations Unies sur les changements climatiques, COP21 (Paris, France), plusieurs pays ont pour objectif de réduire leurs émissions de GES. Dans cette optique, les microalgues pourraient être utilisées pour capter le CO[indice inférieur 2] industriel et le transformer en biomasse composée principalement de lipides, de glucides et de protéines. De plus, la culture des microalgues n’utilise pas de terre arable contrairement à plusieurs plantes oléagineuses destinées à la production de biocarburants. Bien que les microalgues puissent être transformées en plusieurs biocarburants tels le bioéthanol (notamment par fermentation des glucides) ou le biométhane (par digestion anaérobie), la transformation des lipides en biodiesel pourrait permettre de réduire la consommation de diesel produit à partir de pétrole. Cependant, les coûts reliés à la production de biodiesel à partir de microalgues demeurent élevés pour une commercialisation à court terme en partie parce que les microalgues sont cultivées en phase aqueuse contrairement à plusieurs plantes oléagineuses, ce qui augmente le coût de récolte de la biomasse et de l’extraction des lipides. Malgré le fait que plusieurs techniques de récupération des lipides des microalgues n’utilisant pas de solvant organique sont mentionnées dans la littérature scientifique, la plupart des méthodes testées en laboratoire utilisent généralement des solvants organiques. Les lipides extraits peuvent être transestérifiés en biodiesel en présence d’un alcool tel que le méthanol et d’un catalyseur (catalyses homogène ou hétérogène). Pour la commercialisation du biodiesel à partir de microalgues, le respect des normes ASTM en vigueur est un point essentiel. Lors des essais en laboratoire, il a été démontré que l’extraction des lipides en phase aqueuse était possible afin d’obtenir un rendement maximal en lipides de 36% (m/m, base sèche) en utilisant un prétraitement consistant en une ébullition de la phase aqueuse contenant les microalgues et une extraction par des solvants organiques. Pour l’estérification, en utilisant une résine échangeuse de cations (Amberlyst-15), une conversion des acides gras libres de 84% a été obtenue à partir des lipides de la microalgue Chlorella protothecoïdes dans les conditions suivantes : température : 120°C, pression autogène, temps de réaction : 60 min, ratio méthanol/lipides: 0.57 mL/g et 2.5% (m/m) Amberlyst-15 par rapport aux lipides. En utilisant ces conditions avec une catalyse homogène (acide sulfurique) et une seconde étape alcaline avec de l’hydroxyde de potassium (température : 60°C ; temps de réaction : 22.2 min; ratio catalyseur microalgue : 2.48% (m/m); ratio méthanol par rapport aux lipides des microalgues : 31.4%), un rendement en esters méthyliques d’acides gras (EMAG) de 33% (g EMAG/g lipides) a été obtenu à partir des lipides de la microalgue Scenedesmus Obliquus. Les résultats démontrent que du biodiesel peut être produit à partir de microalgues. Cependant, basé sur les présents résultats, il sera necessaire de mener d’autre recherche pour prouver que les microalgues sont une matière première d’avenir pour la production de biodiesel.

Sensible use of primary energy in organic greenhouse production.

This document addresses the direct and indirect use of energy in European organic greenhouse horticulture (OGH) with the aim of reviewing available means for making it more environmental friendly and identifying knowledge gaps that should be addressed to attain this aim. The first observation is that there is no common regulation for energy use in OGH, which is not unexpected, since the need for climatisation is not uniformly distributed in the EU (and outside). Accordingly, the EU directive on organic agriculture does not set limitations on the use of energy, but rather promotes the responsible use of energy and of natural resources. The restrictions and rules of most private standards are slightly more stringent. Some standards have specific restrictions on the amount and sources of energy and/or on the seasonal use of energy for heating. Some standards also address processes that may affect (in)direct energy use, such as cultivation methods, mulching, lighting and growing media or substrates. However, most private standards have no or little restrictions or regulations on energy use. Accordingly, it should not surprise that very little quantitative information is available about energy use in OGH. In the present document we have filled the gaps with data with estimates drawn on energy use in conventional greenhouses. With respect to ongoing research, whereas many of the present research results about energy use and saving in conventional greenhouses are relevant (and also applied) in OGH, little research is devoted to address the energy use that is peculiar to OGH, particularly energy use for humidity control. In short, there are still a lot of knowledge gaps to improve quality and to lower energy use in organic greenhouses. The purpose of this document is a summary of present relevant knowledge about energy use and energy saving and of the perspective for improvement. In particular, the goal is to make an overview on the methods and technologies which can be used to reduce the energy use in OGH. We start from the assumption that methods and technologies that are used for reducing direct and indirect energy in conventional greenhouses can also be applied in organic greenhouses. Research on reducing energy use in conventional greenhouses is also more widely available because the area of conventional greenhouse horticulture is much larger than the area of OGH. When implementing these methods and techniques we should take into account the specific characteristics of organic agriculture like soil-based cultivation, use of organic fertilizers and the limited use of crop protection products. This document is organised as follows: first we report the results of a survey about energy use and relevant standards in the countries participating to the COST action (chapter 1); then we review the energy use for climatisation: heating (chapter 2) and humidity (chapter 3). In chapter 4 we review the available design and management means that would either reduce energy use and/or increase energy use efficiency by increasing productivity of OGH. In chapter 5 we present a short summary of existing information on indirect energy use, that is the energy required to manufacture production means (greenhouse structure and cover, fertilisers, equipment etc.) and for crop protection, particularly steaming, and briefly discuss possible savings. Finally (chapter 6) we review briefly the potential for application of renewable energy sources in OGH.

Effect of autochthonous starter cultures in the production of "Paio", a traditional Portuguese dry- cured sausage

Traditional dry-cured sausages are highly appreciated in Mediterranean countries. The aim of the present study was to evaluate the effect of different starter cultures in the sausages Alentejano pig meat was used to prepare drycured sausages in a local factory. Staphylococcus xylosus, Lactobacillus sakei and a yeast strain were inoculated at a concentration of 106 cfu/g meat batter both in separate and in mixed culture. Three independent batches with two replicates per treatment were produced. Samples were collected throughout the ripening process. pH and aw were determined according to the ISO standards. Microbiological counts of total mesophiles, total psycrotrophs, anaerobes, coagulase-negative staphylococci (CNS), lactic acid bacteria (LAB), enterobacteria, yeasts and moulds and Listeria monocytogenes were done according to the respective ISO standards, as well as detection of Salmonella spp. Biogenic amines quantification was performed by HPLC as described by Roseiro et al. (1). The treatment with L. sakei alone was the most effective in reducing the contamination level both with Salmonella spp. and L. monocytogenes, however this effect seems to be lost in the mixed cultures. The presence of the yeast strain seems to increase the levels of phenylethylamine and histamine. The contents in cadaverine, putrescine and tyramine were generally lower in the inoculated sausages. Regarding tyramine, the treatments with L. sakei showed significantly lower values. No significant differences between treatments were observed for both spermine and spermidine.