Purification of a recombinant histidine-tagged lactate dehydrogenase from the malaria parasite, Plasmodium vivax, and characterization of its properties

Lactate dehydrogenase (LDH) of the malaria parasite, Plasmodium vivax (Pv), serves as a drug target and immunodiagnostic marker. The LDH cDNA generated from total RNA of a clinical isolate of the parasite was cloned into pRSETA plasmid. Recombinant his-tagged PvLDH was over-expressed in E. coli Rosetta2DE3pLysS and purified using Ni2+-NTA resin giving a yield of 25-30 mg/litre bacterial culture. The recombinant protein was enzymatically active and its catalytic efficiency for pyruvate was 5.4 x 10(8) min(-1) M-1, 14.5 fold higher than a low yield preparation reported earlier to obtain PvLDH crystal structure. The enzyme activity was inhibited by gossypol and sodium oxamate. The recombinant PvLDH was reactive in lateral flow immunochromatographic assays detecting pan- and vivax-specific LDH. The soluble recombinant PvLDH purified using heterologous expression system can facilitate the generation of vivax LDH-specific monoclonals and the screening of chemical compound libraries for PvLDH inhibitors.

Histone H3K9 acetylation level modulates gene expression and may affect parasite growth in human malaria parasite Plasmodium falciparum

Three-dimensional positioning of the nuclear genome plays an important role in the epigenetic regulation of genes. Although nucleographic domain compartmentalization in the regulation of epigenetic state and gene expression is well established in higher organisms, it remains poorly understood in the pathogenic parasite Plasmodium falciparum. In the present study, we report that two histone tail modifications, H3K9Ac and H3K14Ac, are differentially distributed in the parasite nucleus. We find colocalization of active gene promoters such as Tu1 (tubulin-1 expressed in the asexual stages) with H3K9Ac marks at the nuclear periphery. By contrast, asexual stage inactive gene promoters such as Pfg27 (gametocyte marker) and Pfs28 (ookinete marker) occupy H3K9Ac devoid zones at the nuclear periphery. The histone H3K9 is predominantly acetylated by the PCAF/GCN5 class of lysine acetyltransferases, which is well characterized in the parasite. Interestingly, embelin, a specific inhibitor of PCAF/GCN5 family histone acetyltransferase, selectively decreases total H3K9Ac acetylation levels (but not H3K14Ac levels) around the var gene promoters, leading to the downregulation of var gene expression, suggesting interplay among histone acetylation status, as well as subnuclear compartmentalization of different genes and their activation in the parasites. Finally, we found that embelin inhibited parasitic growth at the low micromolar range, raising the possibility of using histone acetyltransferases as a target for antimalarial therapy.

Differences in host species relationships and biogeographic influences produce contrasting patterns of prevalence, community composition and genetic structure in two genera of avian malaria parasites in southern Melanesia

1. Host-parasite interactions have the potential to influence broadscale ecological and evolutionary processes, levels of endemism, divergence patterns and distributions in host populations. Understanding the mechanisms involved requires identification of the factors that shape parasite distribution and prevalence. 2. A lack of comparative information on community-level host-parasite associations limits our understanding of the role of parasites in host population divergence processes. Avian malaria (haemosporidian) parasites in bird communities offer a tractable model system to examine the potential for pathogens to influence evolutionary processes in natural host populations. 3. Using cytochrome b variation, we characterized phylogenetic diversity and prevalence of two genera of avian haemosporidian parasites, Plasmodium and Haemoproteus, and analysed biogeographic patterns of lineages across islands and avian hosts, in southern Melanesian bird communities to identify factors that explain patterns of infection. 4. Plasmodium spp. displayed isolation-by-distance effects, a significant amount of genetic variation distributed among islands but insignificant amounts among host species and families, and strong local island effects with respect to prevalence. Haemoproteus spp. did not display isolation-by-distance patterns, showed marked structuring of genetic variation among avian host species and families, and significant host species prevalence patterns. 5. These differences suggest that Plasmodium spp. infection patterns were shaped by geography and the abiotic environment, whereas Haemoproteus spp. infection patterns were shaped predominantly by host associations. Heterogeneity in the complement and prevalence of parasite lineages infecting local bird communities likely exposes host species to a mosaic of spatially divergent disease selection pressures across their naturally fragmented distributions in southern Melanesia. Host associations for Haemoproteus spp. indicate a capacity for the formation of locally co-adapted host-parasite relationships, a feature that may limit intraspecific gene flow or range expansions of closely related host species.

Simultaneously targeting inflammatory response and parasite sequestration in brain to treat Experimental Cerebral Malaria

Malaria afflicts around 200 million people annually, with a mortality number close to 600,000. The mortality rate in Human Cerebral Malaria (HCM) is unacceptably high (15-20%), despite the availability of artemisinin-based therapy. An effective adjunct therapy is urgently needed. Experimental Cerebral Malaria (ECM) in mice manifests many of the neurological features of HCM. Migration of T cells and parasite-infected RBCs (pRBCs) into the brain are both necessary to precipitate the disease. We have been able to simultaneously target both these parameters of ECM. Curcumin alone was able to reverse all the parameters investigated in this study that govern inflammatory responses, CD8(+) T cell and pRBC sequestration into the brain and blood brain barrier (BBB) breakdown. But the animals eventually died of anemia due to parasite build-up in blood. However, arteether-curcumin (AC) combination therapy even after the onset of symptoms provided complete cure. AC treatment is a promising therapeutic option for HCM.

Asparagine requirement in Plasmodium berghei as a target to prevent malaria transmission and liver infections

The proteins of Plasmodium, the malaria parasite, are strikingly rich in asparagine. Plasmodium depends primarily on host haemoglobin degradation for amino acids and has a rudimentary pathway for amino acid biosynthesis, but retains a gene encoding asparagine synthetase (AS). Here we show that deletion of AS in Plasmodium berghei (Pb) delays the asexual-and liver-stage development with substantial reduction in the formation of ookinetes, oocysts and sporozoites in mosquitoes. In the absence of asparagine synthesis, extracellular asparagine supports suboptimal survival of PbAS knockout (KO) parasites. Depletion of blood asparagine levels by treating PbASKO-infected mice with asparaginase completely prevents the development of liver stages, exflagellation of male gametocytes and the subsequent formation of sexual stages. In vivo supplementation of asparagine in mice restores the exflagellation of PbASKO parasites. Thus, the parasite life cycle has an absolute requirement for asparagine, which we propose could be targeted to prevent malaria transmission and liver infections.

Despesas com tratamento de doenças causadas ou agravadas pelo álcool : análise de propostas para seu financiamento

Consultoria Legislativa - Área IX - Política e Planejamento Econômicos, Desenvolvimento Econômico, Economia Internacional.

Radiação das antenas do serviço móvel celular e seu tratamento na legislação brasileira e de outros países

Consultoria Legislativa - Área XIV - Comunicação Social, Informática, Telecomunicações, Sistema Postal, Ciência e Tecnologia.

O uso da lenalidomida para o tratamento do mieloma múltiplo

Apresenta uma abordagem simplificada sobre o câncer mieloma múltiplo para um melhor entendimento dos aspectos envolvidos nessa patologia, destacando os tratamentos atualmente disponíveis e aplicados no combate à referida doença. Aborda aspectos relacionados a substância lenalidomida, sua indicação, efeitos indesejáveis, cuidados no uso, contraindicações, entre outros aspectos. Comenta a respeito da decisão tomada pela Anvisa de não conceder o registro da lenalidomida ao laboratório produtor para sua comercialização no Brasil.

PLP 238/2013 : alteração das exigências do art. 14 da LRF para desonerações de receitas públicas : necessidade de tratamento equânime

A presente Nota Técnica, apresentada por solicitação do Deputado JOÃO DADO, SISCONOF 274/2013, visa apresentar análise do Projeto de Lei Complementar nº 238/2013, no qual o Poder Executivo propõe alterações das exigências para concessão de desonerações tributárias presentes no art. 14 da Lei Complementar nº 101/2000, Lei de Responsabilidade Fiscal – LRF, dentre outras propostas

Malaria Vaccine Adjuvants: Latest Update and Challenges in Preclinical and Clinical Research

There is no malaria vaccine currently available, and the most advanced candidate has recently reported a modest 30% efficacy against clinical malaria. Although many efforts have been dedicated to achieve this goal, the research was mainly directed to identify antigenic targets. Nevertheless, the latest progresses on understanding how immune system works and the data recovered from vaccination studies have conferred to the vaccine formulation its deserved relevance. Additionally to the antigen nature, the manner in which it is presented (delivery adjuvants) as well as the immunostimulatory effect of the formulation components (immunostimulants) modulates the immune response elicited. Protective immunity against malaria requires the induction of humoral, antibody-dependent cellular inhibition (ADCI) and effector and memory cell responses. This review summarizes the status of adjuvants that have been or are being employed in the malaria vaccine development, focusing on the pharmaceutical and immunological aspects, as well as on their immunization outcomings at clinical and preclinical stages.

Vivendo com HIV/AIDS : cuidado, tratamento e adesão na experiência do grupo com vida

A presente dissertação aborda a adesão ao tratamento. Entendendo que tratamento não se restringe a prescrição e tomada de medicamentos, o Ambulatório de Medicina Integral do Hospital Universitário Pedro Ernesto (AMI/HUPE/UERJ) desenvolve um trabalho multidisciplinar com pacientes soropositivos. Durante o acompanhamento destes pacientes constatou-se a importância da criação de um espaço coletivo que permitisse a reflexão sobre o viver e conviver com HIV/AIDS. O Grupo COM VIDA começou as suas atividades em julho de 1996, contando com uma equipe multidisciplinar formada por médico, psicólogo e profissional do Serviço Social. Com a evolução do trabalho, a equipe foi lidando a cada dia mais e mais com as questões suscitadas pela terapia anti-retroviral. A adesão ao tratamento passou a ser um pilar no manejo do tratamento de pacientes com HIV/AIDS. A abordagem biopsicossocial do paciente constitui-se como facilitadora da adesão ao processo terapêutico. As variáveis que envolvem a intervenção terapêutica mencionada são consoantes ao processo de adoecimento humano que é complexo e dinâmico, na medida que pressupõe a capacidade de reagir para a pessoa que adoece tem um sentido e um significado. E tornando-se sujeito no processo de adoecimento e cuidado que o paciente desenvolve capacidade autônoma, o que contribui para alcançar os objetivos terapêuticos pactuados.

A primeira reforma psiquiátrica : uma história do tratamento moral

A presente dissertação tem como objetivo descrever o Tratamento Moral desenvolvido por Philippe Pinel no período que se estende do final do século XVIII ao início do século XIX em Paris. Trata-se de um novo método de tratamento da loucura baseado na normatização e em uma atitude mais humana de cuidado com o louco. O asilo torna-se símbolo desse modelo, hegemônico por mais de um século. Neste estudo, pretendemos descrever o que foi o Tratamento Moral, quais os fundamentos deste método e, principalmente quais as mudanças que engendrou na prática do cuidado da loucura. Para tanto, faremos uma breve descrição do tipo de tratamento dado ao louco no período que antecede o surgimento do Tratamento Moral em Paris. Com o Tratamento Moral, nasce a Psiquiatria como especialidade médica, surgem o alienista e o alienado, o asilo transforma-se em local de cura da loucura e a relação médico-paciente da seus primeiros passos. A partir de uma análise bibliográfica de fontes primárias e secundárias buscamos oferecer aos interessados neste tema dados sobre as bases e as práticas do tratamento iniciado por Pinel, parte da história da psiquiatria e da loucura que são constituintes da realidade psiquiátrica atual.

Avaliação prospectiva longitudinal da qualidade de vida de adolescentes submetidos a tratamento ortodôntico

A literatura científica ainda não é consistente em relação aos benefícios psicossociais proporcionados pelo tratamento ortodôntico. Os objetivos deste estudo foram conhecer as alterações na qualidade de vida relacionada com a saúde bucal (OHRQoL) e com a autopercepção estética de adolescentes brasileiros de 12 a 15 anos de idade tratados ortodonticamente, durante dois anos de avaliação prospectiva longitudinal. A amostra foi constituída de 318 jovens: 92 que iniciaram tratamento ortodôntico em uma instituição de ensino (grupo orto), e 226 indivíduos não tratados: 124 que procuraram avaliação ortodôntica na mesma instituição e não receberam tratamento durante os dois anos em que foram acompanhados na pesquisa, pois estavam aguardando uma vaga na lista de espera para iniciar o tratamento (grupo de espera), e 102 que nunca buscaram tratamento ortodôntico e que estudam em uma escola vizinha à instituição (grupo escola). A qualidade de vida foi mensurada utilizando o OHIP-14. A necessidade normativa e estética de tratamento ortodôntico foi avaliada com o índice IOTN, o nível social com o Critério de Classificação Econômica Brasil e a saúde dental com o índice CPO-D. As avaliações foram repetidas em três momentos: no exame inicial (T1); um ano depois do início do tratamento ortodôntico, para o grupo orto, e um ano após o exame inicial, para os grupos de espera e escola (T2); e dois anos depois do início do tratamento para o grupo orto, e dois anos depois do exame inicial para os grupos de espera e escola (T3). O tratamento ortodôntico reduziu significativamente os escores de OHRQoL: as médias do escores tiveram uma redução de 10,4 para 9,2 e para 1,6 entre a primeira, segunda e terceira avaliações (p<0,001). A autopercepção estética se comportou de maneira similar, com uma redução progressiva e significativa (p<0,001) nos pacientes tratados, que também tiveram melhora significativa na gravidade da má oclusão (p<0,001). Porém, os indivíduos que removeram o aparelho tiveram OHRQoL e autopercepção estética significativamente melhores em relação aos pacientes que não finalizaram o tratamento no período de dois anos. Os adolescentes do grupo de espera tiveram significativa piora na OHRQoL, que sofreu um aumento de 10,8 para 12,0 da primeira para a terceira avaliações (p<0,001), o que também ocorreu na autoavaliação estética, que sofreu um aumento significativo (p<0,001). Por outro lado, os adolescentes do grupo escola não tiveram nenhuma alteração desses índices nos períodos de avaliação, apresentando uma tendência estacionária para OHRQoL (p=0,34) e para a autopercepção estética (p=0,09). A gravidade da má oclusão não foi alterada nos grupos não tratados durante os dois anos de avaliação e o CPO-D não teve alteração significativa para nenhum dos três grupos. Foi possível concluir que o tratamento ortodôntico melhorou significativamente a qualidade de vida relacionada com a saúde bucal e a autopercepção estética dos adolescentes brasileiros submetidos a tratamento.

Aplicação da técnica de eletrofloculação utilizando corrente alternada de frequência variável no tratamento de água de produção da indústria do petróleo

O principal objetivo da tese está relacionado ao tratamento de águas oleosas através da eletrofloculação utilizando corrente alternada de frequência variável, o qual procurou explorar as potencialidades desta técnica. Com a crescente demanda por petróleo e seus derivados, é cada vez maior a produção dessas águas residuárias que, antes de serem descartadas, precisam ser submetidas a tratamento que satisfaçam aos requisitos legais. O trabalho apresentado descreve o levantamento bibliográfico e os resultados dos ensaios realizados, empregando o tratamento de eletrofloculação com a finalidade de remover as substâncias consideradas poluentes presentes nestes efluentes. O processo de eletrofloculação foi testado tanto para o tratamento em corrente continua quanto em corrente alternada de frequência variável em efluentes sintéticos e reais de alta salinidade, contendo teores elevados de óleos e graxas, turbidez e cor. Eficiências de redução de 99% para óleos e graxas, cor e turbidez foram obtidos utilizando eletrodos de alumínio. O processo de eletrofloculação demonstrou-se bastante vantajoso em função da alta condutividade que permite o tratamento com menor consumo energético. A tecnologia de eletrofloculação com corrente alternada quando comparada com a tecnologia de corrente contínua se mostrou muito eficiente em relação a economia no desgaste de massa de eletrodos, o que, dependendo do tempo de aplicação da corrente elétrica nas mesmas condições de estudo, houve redução de mais da metade do consumo.

Avaliação da eficácia da terapia fotodinâmica como adjunto ao tratamento periodontal de pacientes com periodontite agressiva

A periodontite agressiva é um processo inflamatório de origem bacteriana mediado pelo sistema imunológico do hospedeiro e é provavelmente a forma mais grave de doença periodontal, apresentando destruição das estruturas tanto de proteção quanto de suporte dentário, num período relativamente rápido, normalmente levando a perda prematura dos elementos dentários e, em alguns casos, terapia antimicrobiana adjunta é necessária em adição à terapia mecânica. O objetivo do presente ensaio clínico randomizado controlado foi avaliar o efeito clínico da terapia fotodinâmica como adjunto ao tratamento periodontal não cirúrgico no tratamento da periodontite agressiva Os seguintes parâmetros clínicos foram avaliados: índice de placa visível, sangramento à sondagem, profundidade de bolsa à sondagem, nível de inserção clínica relativo, envolvimento de furca e mobilidade. Foram selecionados dez pacientes com periodontite agressiva, os quais foram examinados no dia zero e após três meses.O desenho do estudo consistiu em um modelo de boca dividida, onde um hemiarco foi tratado com raspagem e alisamento radicular e terapia fotodinâmica (laser diodo) e o outro apenas com raspagem e alisamento radicular. Três meses após o término do tratamento, os grupos terapêuticos apresentaram resultados semelhantes para todos os parâmetros clínicos avaliados: ambas as terapias tiveram sucesso, como redução de profundidade de bolsa, ganho de nível de inserção clínica relativo, redução de índice de placa visível, redução de sangramento à sondagem, diminuição de envolvimento de furca e diminuição de mobilidade, porém sem diferenças estatisticamente significantes entre elas. Dentro das limitações do presente estudo, os resultados sugerem que a terapia fotodinâmica adjuntamente ao tratamento periodontal não cirúrgico mecânico foi tão eficaz quanto o tratamento periodontal não cirúrgico mecânico sozinho.