Fecundação in vitro no gato doméstico

In vitro fertilization, as a biotechnology applied to domestic and wild felids, is a valuable tool not only for the technique's improvement but also for the treatment of infertility and propagation of some populations. The previous knowledge of the physiology of the species and the understanding of mechanisms that interfere in their results are necessary for the technique success, as daylength influence, oocyte and spermatic selection and in vitro maturation.

Lipid content and apoptosis of in vitro-produced bovine embryos as determinants of susceptibility to vitrification

Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado de São Paulo (FAPESP)

Effect of melatonin on DNA damage of bovine cumulus cells during in vitro maturation (IVM) and on in vitro embryo development

Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado de São Paulo (FAPESP)

Influência do diâmetro e da fase folicular sobre a competência in vitro de oócitos obtidos de novilhas da raça Nelore

Avaliou-se o efeito do diâmetro e da fase do desenvolvimento folicular sobre a competência de oócitos para a produção in vitro de embriões bovinos. A primeira onda folicular foi sincronizada com progestógeno por nove dias e 24 horas após a sua retirada aplicou-se LH. Os ovários foram recuperados 60h (G-60), 96h (G-96) e 108h (G-108) após a ovulação induzida pelo LH. Os folículos foram dissecados ou aspirados e medidos e os oócitos recuperados e submetidos à maturação, fecundação e cultivo in vitro. Os ovários do G-60 apresentaram mais oócitos viáveis (graus I, II e III) (96,6%). A taxa de clivagem teve efeito significativo sobre o diâmetro folicular, sendo maior nos oócitos oriundos de folículos classe 3 (>7mm). Na taxa de produção de blastocisto observou-se interação diâmetro versus fase de desenvolvimento folicular. A taxa de produção de blastocisto foi maior em oócitos obtidos de folículos com diâmetros <5mm (classe 1) no G-60 (64,5%), de 5-7mm (classe 2) no G-96 (33,3%) e >7mm (classe 3) no G-108 (50%). Conclui-se que o diâmetro e a fase de desenvolvimento folicular influenciam a competência oocitária para o desenvolvimento in vitro. Nos estádios iniciais da onda folicular a produção de blastocisto foi maior em oócitos de folículos pequenos; com o avanço da onda, a produção de blastocistos foi maior em oócitos obtidos de folículos maiores.

Efeito da utilização de diferentes diluidores para a produção in vitro de embriões bovinos

Objetivou-se avaliar as características morfológica e funcional do sêmen bovino congelado comparando-se a eficácia de dois diferentes diluidores. O ejaculado de quatro touros foi dividido em duas partes iguais, uma submetida ao diluidor Tris e gema de ovo (A) e outra ao diluidor à base de lecitina de soja (Andromed®) (B). No experimento I, cinco palhetas dos diluidores A e B de cada touro foram descongeladas e avaliadas quanto à motilidade, vigor, concentração, morfologia espermática e teste de termor-resistência lento. Foram feitas, ainda, avaliação da integridade de membranas, por meio da associação das sondas iodeto de propídio, isotiocionato de fluoresceína - Pisum sativum e carbocianina catiônica lipofílica, e avaliação funcional da membrana plasmática com teste hiposmótico. A avaliação da integridade da cromatina foi realizada pelo método de coloração com laranja de acridina. No experimento II, o sêmen com os diferentes diluidores foi utilizado na fecundação in vitro, sendo observadas taxas de clivagem e desenvolvimento embrionário in vitro. em relação aos resultados obtidos, apenas a porcentagem de espermatozoides no sêmen congelado foi discretamente maior com o diluidor A, concluindo-se que o diluidor composto por lecitina de soja pode substituir o composto por Tris e gema de ovo, respeitando-se as variações individuais de cada touro utilizado no presente experimento.

Variação na estrutura da vegetação de duas cultivares de Panicum maximum jacq. (colonião e tabiatã) submetidas a diferentes tipos de manejo. Composição em proteína bruta e digestibilidade In vitro da matéria seca

This work was carried out at FCAV-UNESP, Campus of Jaboticabal, Brazil, to study the effects of nitrogen fertilization (0 and 50 kg N/ha/cut), three sucessive periods of growth (December 21st 1987, January 25th 1988 and February 29th 1988)) and three cutting ages (28, 35 and 42 days) on composition in crude protein and in vitro dry matter digestibility of two cultivars of Panicum maximum Jacq. i.e., Coloniao and Tobiata. Plants were harvested in five vertical layers above soil level (0-20, 20-40, 40-60, 60-80 and over 80 cm). The samples were divided in: green leaves, green stems and dry material. Generally, values of in vitro dry matter digestibility and the levels of crude protein of both cultivars were greater in the higher layers of the vegetation, with a decrease, however, for the other layers and more advanced phases of plants development, mainly with no N fertilization.

Influência do fator de crescimento semelhante à insulina I (IGF-I) adicionado ao meio fluido sintético de tuba uterina (SOF) sobre a maturação in vitro de oócitos caninos (Canis familiaris)

The follicular growth and oocyte maturation knowledge are very important to the development and improvement of new biotechnologies such as in vitro fertilization and somatic cell nuclear transfer. In order to the necessity of clarify the basic mechanisms related to canine oocyte maturation, this investigation focuses on the evaluation of the effect of insulin-like growth factor-i (IGF-I), added to synthetic oviductal fluid medium (SOF) on the in vitro maturation of domestic dog oocytes. Thirty-seven bitches undergoing ovariohysterectomy for castration or due to pathological conditions of the uterus were selected as oocytes' donors (n=875). The oocytes were allocated in the following groups: MO (stained in the collection's time), Control (72h in SOF) and Experimental (72h in SOF plus 100 ng IGF-I). After 72 hours of maturation the oocytes' nuclear status were assessed by Hoechst 33342 dye. The best results in terms of oocyte harvest were observed in those juvenile donors,, females in estrus, nuliparous and pure breeds. No significant differences were observed between treatments control (SOF) or experimental (IGF-I).

Comparison of embryo yield and pregnancy rate between in vivo and in vitro methods in the same Nelore (Bos indicus) donor cows

To investigate why the preferred means to produce bovine embryos in Brazil has changed from in vivo to in vitro, we compared these two approaches in the same Nelore cows (n = 30) and assessed total embryo production and pregnancy rates. Without a specific schedule, all cows were subjected to ultrasound-guided ovum pick up (OPU)/in vitro production (IVP) and MOET, with intervals ranging from 15 to 45 d between procedures, respectively. To produce in vivo embryos, cows were superovulated and embryos were recovered nonsurgically from 1 to 3 times (1.4 +/- 0.6). whereas OPU/IVP was repeated from 1 to 5 times (3.2 +/- 1.2) in each donor cow during a 12-mo interval. Embryos obtained from both methods were transferred to crossbred heifers. on average. 25.6 +/- 15.3 immature oocytes were collected per OPU attempt. The average number of embryos produced by OPU/IVP (9.4 +/- 5.3) was higher (P < 0.05) than the MOET method (6.7 +/- 3.7). However, pregnancy rates were lower (P < 0.05) following transfer of IVP (33.5%) versus in vivo-derived embryos (41.5%) embryos. Embryonic losses between Days 30 and 60 and fetal sex ratio were similar (P > 0.05) between in vivo and in vitro-derived embryos. We concluded that in Nelore cows, with an interval of 15 d between OPU procedures, it was possible to produce more embryos and pregnancies compared to conventional MOET. (C) 2009 Elsevier B.V. All rights reserved.

Apoptotic and developmental effects of bovine Herpesvirus type-5 infection on in vitro-produced bovine embryos

Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado de São Paulo (FAPESP)

Effects of bovine Herpesvirus Type 5 on development of in vitro-produced bovine embryos

Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado de São Paulo (FAPESP)

Evaluation of developmental changes in bovine in vitro produced embryos following exposure to bovine Herpesvirus type 5

Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado de São Paulo (FAPESP)

Chromatin modifying agents in the in vitro production of bovine embryos

The low efficiency observed in cloning by nuclear transfer is related to an aberrant gene expression following errors in epigenetic reprogramming. Recent studies have focused on further understanding of the modifications that take place in the chromatin of embryos during the preimplantation period, through the use of chromatin modifying agents. The goal of these studies is to identify the factors involved in nuclear reprogramming and to adjust in vitro manipulations in order to better mimic in vivo conditions. Therefore, proper knowledge of epigenetic reprogramming is necessary to prevent possible epigenetic errors and to improve efficiency and the use of in vitro fertilization and cloning technologies in cattle and other species. Copyright © 2011 Fabio Morato Monteiro et al.

Macroscopic and Microscopic findings in a set of congenital anomalies in two calves produced through in Vitro production

In vitro production and somatic cell nuclear transfer are biotechnologies widely used for breeding cattle, although may result in congenital anomalies. This paper aims to report a set of congenital anomalies in two Nelore calves, a male and a female, produced through in vitro fertilization. The major anomalies revealed at necropsy were hypospadias, bifid scrotum, atresia ani and rectum ending in blind pouch in the male calf. In the female calf accessory spleen, atresia ani, underdevelopment of extern genitalia and urethral orifice, and rectum ending in blind pouch forming a uterus-rectum fistula were observed.

Avaliação dos efeitos da exposição experimental ao herpesvírus bovino tipo 5 em embriões bovinos produzidos in vitro

Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado de São Paulo (FAPESP)

Suplementação do meio de maturação com gonadotrofinas placentárias na produção in vitro de blastocistos bovinos

Pós-graduação em Ciências Biológicas (Farmacologia) - IBB