Novel Pathogenic Mutations and Copy Number Variations in the VPS13A Gene in Patients With Chorea-Acanthocytosis

Chorea-acanthocytosis (ChAc) is a rare autosomal recessive neurodegenerative disorder caused by loss of function mutations in the vacuolar protein sorting 13 homolog A (VPS13A) gene that encodes chorein. It is characterized by adult-onset chorea, peripheral acanthocytes, and neuropsychiatric symptoms. In the present study, we performed a comprehensive mutation screen, including sequencing and copy number variation (CNV) analysis, of the VPS13A gene in ChAc patients. All 73 exons and flanking regions of VPS13A were sequenced in 35 patients diagnosed with ChAc. To detect CNVs, we also performed real-time quantitative PCR and long-range PCR analyses for the VPS13A gene on patients in whom only a single heterozygous mutation was detected. We identified 36 pathogenic mutations, 20 of which were previously unreported, including two novel CNVs. In addition, we investigated the expression of chorein in 16 patients by Western blotting of erythrocyte ghosts. This demonstrated the complete absence of chorein in patients with pathogenic mutations. This comprehensive screen provides an accurate and useful method for the molecular diagnosis of ChAc. (C) 2011 Wiley-Liss, Inc.

Life cycle of Ixodes luciae (Acari: Ixodidae) in the laboratory

The life cycle of Ixodes luciae was evaluated for five consecutive generations in the laboratory. Wild mice Calomys callosus and laboratory rats Rattus norvegicus were used as hosts for larvae and nymphs. For adult ticks, opossums Didelphis aurita were used as hosts. Off-host developmental periods were observed in an incubator at 27A degrees C and 95% RH. The life cycle of I. luciae lasted 95-97 days, excluding prefeeding periods. C. callosus, one of the natural host species for I. luciae immature stages, was shown to be much more suitable than the artificial host R. norvegicus. Significantly (P < 0.05), more larvae and nymphs successfully fed on C. callosus than on R. norvegicus. When tick-na < ve C. callosus were exposed to three consecutive larval infestations at 24-day intervals, recovery of engorged larvae were greater in the second and third infestations, indicating that previous infestations did not induce acquired resistance to ticks. Larval feeding period typically varied from 5 to 10 days on R. norvegicus, but was significantly (P < 0.05), longer on C. callosus (range, 7-34 days). The majority (71.7%) of I. luciae adult females successfully fed and oviposited after exposed to D. aurita. Mean engorged weight (581.9 mg; range, 237.1-796.0 mg) of these females were much higher than those previously reported for other New World Ixodes species. Our results are in accordance to the current literature that appoints opossums Didelphidae and small rodents (e.g., C. callosus) natural hosts for I. luciae immature and adult stages, respectively.

Avian Metapneumovirus Subtypes Circulating in Brazilian Vaccinated and Nonvaccinated Chicken and Turkey Farms

Avian metapneumovirus (AMPV) causes turkey rhinotracheitis and is associated with swollen head syndrome in chickens, which is usually accompanied by secondary infections that increase mortality. AMPVs circulating in Brazilian vaccinated and nonvaccinated commercial chicken and turkey farms were detected using a universal reverse transcriptase (RT)-PCR assay that can detect the four recognized subtypes of AMPV. The AMPV status of 228 farms with respiratory and reproductive disturbances was investigated. AMPV was detected in broiler, hen, breeder, and turkey farms from six different geographic regions of Brazil. The detected viruses were subtyped using a nested RT-PCR assay and sequence analysis of the G gene. Only subtypes A and B were detected in both vaccinated and nonvaccinated farms. AMPV-A and AMPV-B were detected in 15 and 23 farms, respectively, while both subtypes were simultaneously found in one hen farm. Both vaccine and field viruses were detected in nonvaccinated farms. In five cases, the detected subtype was different than the vaccine subtype. Field subtype B virus was detected mainly during the final years of the survey period. These viruses showed high molecular similarity (more than 96% nucleotide similarity) among themselves and formed a unique phylogenetic group, suggesting that they may have originated from a common strain. These results demonstrate the cocirculation of subtypes A and B in Brazilian commercial farms.

Specific infiltration of langerin-positive dendritic cells in EBV-infected tonsil, Hodgkin lymphoma and nasopharyngeal carcinoma

We report here the existence of a novel subset of langerin (CD207)-positive, immature dendritic cells (DCs) (CD83(neg)) abundantly infiltrating Epstein Barr virus (EBV)-infected areas in tonsil, Hodgkin lymphoma and nasopharyngeal carcinoma. These CD207(+) DCs differ from conventional epidermal Langerhans cells in their lack of CD1a and CCR6 and their unusual tissue localization. CD207(+) DC infiltration strongly correlates with EBV infection because it was neither detected in EBV negative specimens nor in tissues infected with other human viruses. These immature DCs might represent good candidates for induction of the EBV-specific immune response.

Localization of neurotransmitters and calcium binding proteins to neurons of salamander and mudpuppy retinas

We wished to identify the different types of retinal neurons on the basis of their content of neuroactive substances in both larval tiger salamander and mudpuppy retinas, favored species for electrophysiological investigation. Sections and wholemounts of retinas were labeled by immunocytochemical methods to demonstrate three calcium binding protein species and the common neurotransmitters, glycine, GABA and acetylcholine. Double immunostained sections and single labeled wholemount retinas were examined by confocal microscopy. Immunostaining patterns appeared to be the same in salamander and mudpuppy. Double and single cones, horizontal cells, some amacrine cells and ganglion cells were strongly calbindin-immunoreactive (IR). Calbindin-IR horizontal cells colocalized GABA. Many bipolar cells, horizontal cells, some amacrine cells and ganglion cells were strongly calretinin-IR. One type of horizontal cell and an infrequently occurring amacrine cell were parvalbumin-IR. Acetylcholine as visualized by ChAT-immunoreactivity was seen in a mirror-symmetric pair of amacrine cells that colocalized GABA and glycine. Glycine and GABA colocalized with calretinin, calbindin and occasionally with parvalbumin in amacrine cells. (C) 2001 Elsevier Science Ltd. All rights reserved.

On the evaluation of some differential formulations for the pom-pom constitutive model

In recent years, progress has been made in modelling long chain branched polymers by the introduction of the so-called pompom model. Initially developed by McLeish and Larson (1998), the model has undergone several improvements or alterations, leading to the development of new formulations. Some of these formulations however suffer from certain mathematical defects. The purpose of the present paper is to review some of the formulations of the pom-pom constitutive model, and to investigate their possible mathematical defects. Next, an alternative formulation is proposed, which does not appear to exhibit mathematical defects, and we explore its modelling performance by comparing the predictions with experiments in non-trivial rheometric flows of an LDPE melt. The selected rheometric flows are the double step strain, as well as the large amplitude oscillatory shear experiments. For LAOS experiments, the comparison involves the use of Fourier-transform analysis.

Mobilidade social e empoderamento: a percep????o das mulheres benefici??rias do programa Bolsa Fam??lia em Minas Gerais

Esse trabalho teve como objetivo analisar os efeitos relacionados ?? mobilidade social e ao empoderamento das benefici??rias do Programa Bolsa Fam??lia em Minas Gerais. Foram utilizados procedimentos metodol??gicos anal??ticos, em um estudo de caso m??ltiplo com abordagem quantitativa. Foi realizada a valida????o dos constructos de mobilidade social e empoderamento, permitindo-se mensurar a intensidade da rela????o entre essas diferentes dimens??es. Os resultados demonstram a melhoria significativa na vida das benefici??rias, o que pode possibilitar ascend??ncia social. Contudo, observou-se, como fator limitante, o baixo grau de escolaridade das benefici??rias, mostrando-se a necessidade de conex??o dos programas sociais com atividades educacionais e de gera????o de trabalho e renda, para inser????o das mulheres no mercado de trabalho. Dessa forma, considera-se que o Programa Bolsa Fam??lia pode influenciar significativamente tanto no empoderamento quanto na mobilidade social das benefici??rias. Ademais, a articula????o com atividades educacionais e produtivas pode avigorar os resultados de pol??ticas p??blicas que defendam a justi??a social e a diminui????o das desigualdades existentes entre g??neros e classes sociais.

Caracterização e relacionamento antigênico de três novos Bunyavirus no grupo Anopheles A (Bunyaviridae) dos arbovirus

São descritos o isolamento e a caracterização de três novos arbovirus isolados na região da Usina Hidro-Elétrica de Tucuruí (UHE-TUC). Os três novos arbovirus pertencem ao grupo Anopheles A(ANA), gênero Bunyavirus (família Bunyaviridae). Os vírus Tucuruí (TUC), Caraipé (CPE) e Arumateua (ART) são relacionados entre si e com o vírus Trombetas (TBT), formando dentro do grupo ANA um complexo chamado Trombetas. Os arbovirus TUC, CPE e ART foram obtidos a partir de lotes de mosquitos Anopheles (Nyssorhynchus) sp capturados em Tucuruí, nas proximidades da usina hidrelétrica de Tucuruí, Estado do Pará, nos meses de fevereiro, agosto e outubro de 1984, respectivamente. Até o final de 1990 os vírus TUC, CPE e ART foram isolados 12, 32 e 28 vezes respectivamente, sempre na região da UHE-TUC, exceção feita ao vírus TUC, do qual se obteve uma amostra procedente de Balbina, onde também foi construída uma hidroelétrica. Até o presente, esses vírus só foram isolados a partir de mosquitos do grupo An. (Nys.) principalmente, a partir das espécies An. (Nys.) nuneztovari e An. (Nys.) triannulatus também consideradas vetores secundários da malária na Amazônia Brasileira. Testes sorológicos executados com soros humanos e de diversas espécies de animais silvestres foram negativos, com exceção de um soro de um carnívoro de espécie Nasua nasua que neutralizou a amostra TUC em títulos de 2.6 índice logaritmico de neutralização (ILN).

Arquivo documental: relativo à visibilidade internacional da obra de Pedro Costa

O projecto “Principais tendências no cinema português contemporâneo” nasceu no Departamento de Cinema da ESTC, com o objectivo de desenvolver investigação especializada a partir de um núcleo formado por alunos da Licenciatura em Cinema e do Mestrado em Desenvolvimento de Projecto Cinematográfico, a que se juntaram professores-investigadores membros do CIAC e convidados. O que agora se divulga corresponde a dois anos e meio de trabalho desenvolvido pela equipa de investigação, entre Abril de 2009 e Novembro de 2011. Dada a forma que ele foi adquirindo, preferimos renomeá-lo, para efeitos de divulgação, “Novas & velhas tendências no cinema português contemporâneo”.

Fiscalização da empreitada do "Centro de Congressos, Feiras e Exposições de Oeiras": estrutura metálica da cobertura

O presente relatório é referente ao trabalho realizado na empresa Prospectiva, S.A. , e procurou descrever os trabalhos realizados para a execução da estrutura metálica da cobertura do Centro de Congressos de Oeiras. Foi feita uma pequena apresentação da empresa assim como uma descrição global mas pouco detalhada da obra em causa. Foram descritas as principais fases da execução de estruturas metálicas como, o fabrico e a montagem dos elementos, assim como o seu enquadramento com as principais disposições regulamentares impostas a este tipo de estrutura. Na fase de fabrico foram descritos todos os processos envolvidos desde a recepção da matéria-prima até ao produto final das peças, fazendo sempre um acompanhamento com o Plano de Inspecção e Ensaio da fase de fabrico. No caso da montagem da estrutura foi feita a descrição do processo de transporte e o acompanhamento das principais fases da montagem, como o seu planeamento e faseamento, até a sua importância no próprio planeamento global da obra. Foram também apresentados os equipamentos utilizados, estruturas de apoio à montagem e os tipos de ligações executadas.

Aedes albopictus may not be vector of dengue virus in human epidemics in Brazil

Over 60,500 dengue cases were reported in the state of Espírito Santo (ES), Brazil, between 1995 and 1998. The study's purpose was to identify whether Aedes albopictus was transmitting the dengue virus during an epidemic in the locality of Vila Bethânia (Viana County),Vitória, ES. From April 3 to 9, 1998, blood and serum samples were collected daily for virus isolation and serological testing. Four autochthonous cases were confirmed through DEN 1 virus isolation and two autochthonous cases through MAC ELISA testing. Of 37 Ae. aegypti and 200 Ae. albopictus adult mosquitoes collected and inoculated, DEN1 virus was isolated only from a pool of two Ae. aegypti female mosquitoes. The study results suggest that Ae. albopictus still cannot be considered an inter-human vector in dengue epidemics in Brazil.

Microscopia eletrônica de varredura de ovos de Haemagogus leucocelaenus (Diptera: Culicidae)

OBJETIVO: Observar detalhes morfológicos de ovos de Haemagogus leucocelaenus visualizados pela primeira vez por microscopia eletrônica de varredura (MEV) e realizar morfometria das principais estruturas. MÉTODOS: Foram utilizados ovos de Hg. leucocelaenus provenientes de fêmeas capturadas na Reserva Biológica do Tinguá, RJ, sendo parte destinada à eclosão e outra ao processamento de MEV, dos quais três foram submetidos à análise morfométrica. O material foi fixado em glutaraldeído 2,5% e pós-fixado em tetróxido de ósmio 1%, ambos em tampão cacodilato de sódio 0.1M, pH 7.2, processado e observado ao MEV Jeol 5310. Medições foram realizadas com o auxílio do software de análise Semafore. RESULTADOS: Os ovos apresentaram contorno elíptico com aproximadamente 574 µm de comprimento e 169 µm de largura, sendo o índice do ovo (l/wratio) 3,39 µm. O exocório é extremamente regular, possuindo ornamentação hexagonal e algumas vezes pentagonal. Nas células coriônicas, observaram-se tubérculos simetricamente dispostos com relação ao eixo longitudinal, e, no interior delas, tubérculos menores, individualizados, dispostos na periferia, e poucos agrupados no centro. A superfície do retículo coriônico não apresentou rugosidades. O aparelho micropilar apresenta colar proeminente, contínuo, com disco micropilar bem evidente. CONCLUSÕES: A ornamentação do exocório apresenta diferenças em relação aos tubérculos das células coriônicas e ao retículo coriônico externo entre os ovos de Hg. leucocelaenus comparados aos ovos de Hg. janthinomys e Hg. equinus, bem como com relação aos de Aedes aegypti, Ae. albopictus e Ae bahamensis.

Suscetibilidade de larvas de Aedes aegypti ao inseticida temefós no Distrito Federal

OBJETIVO: Estudar o padrão de suscetibilidade do Aedes aegypti ao inseticida organofosforado temefós. MÉTODOS: Amostras de larvas de Ae. aegypti foram obtidas com armadilhas para oviposição, em oito cidades do Distrito Federal, nos anos 2000 e 2001. As larvas foram submetidas à dose diagnóstica de 0,012 mg/l de temefós, segundo metodologia padronizada pela Organização Mundial da Saúde. As populações de campo foram testadas em paralelo com a cepa de referência Rockefeller e a cepa DIVAL, do insetário da Diretoria de Vigilância Ambiental. A concentração e a pureza das soluções de temefós foram analisadas por cromatografia gasosa. Os cálculos de correlação foram determinados pelo programa StatView - SAS Institute Inc., versão 5. Utilizou-se o teste t de Student para verificar diferenças de suscetibilidade, com níveis de significância, alfa=0,05. RESULTADOS: Em 2000, as populações de larvas de Ae. aegypti nas cidades de Taguatinga, Guará e Núcleo Bandeirante apresentaram-se resistentes ao temefós, com mortalidade de larvas entre 54,1 e 63,4%. As populações do Gama, Planaltina e Sobradinho apresentaram alterações nos níveis de suscetibilidade (mortalidade de 83,6 a 92,8%). A população de Ceilândia foi a única suscetível, com 98% de mortalidade. Em 2001, todas as populações testadas mostraram-se resistentes (44,4 a 66,4% de mortalidade). Nenhuma correlação significativa foi encontrada entre a suscetibilidade das populações e a distância entre essas cidades ou a quantidade de inseticida aplicado nos anos anteriores ao estudo. CONCLUSÕES: Os níveis de suscetibilidade do Ae. aegypti ao temefós vêm se alterando no Distrito Federal. É essencial a continuidade de programas de monitoramento da resistência desse vetor aos inseticidas para se garantir a eficiência dos programas de controle e a proteção da saúde humana.