Phospholipase A(2) myotoxins from Bothrops snake venoms: Structure-function relationship

Phospholipases A(2) constitute the major components from Bothrops snake venoms and have been extensively investigated not only because they are relatively very abundant in these venoms but mainly because they display a range of many relevant biological effects, including: myotoxic, cytotoxic, edema-inducing, artificial membrane disrupting, anticoagulant, neuromuscular, platelet aggregation inhibiting, hypotensive, bactericidal, anti-HIV, anti-tumoural, anti-malarial and anti-parasitic. The primary structures of several PLA(2)s have been elucidated through direct amino acid sequencing or, inderectly, through the corresponding nucleotide sequencing. Two main subgroups were thus described: (i) Asp49 PLA(2)s, showing low (basic, highly myotoxic) to relatively high (acidic, less or non myotoxic) Ca++-dependent hydrolytic activity upon artificial substrates; (ii) Lys49 PLA(2)s (basic, highly myotoxic) , showing no detectable hydrolytic activity on artificial substrates. Several crystal structures of Lys49 PLAs from genus Bothrops have already been solved, revealing very similar fold patterns. Lack of catalytic activity of myotoxic Lys49-PLA(2)s, first related solely with the fact that Lys49 occupies the position of the calcium ion in the catalyticly active site of Asp49 PLA(2)s, is now also attributed to Lys122 which interacts with the carbonyl of Cys29 hyperpolarising the peptide bond between Cys29 and Gly30 and trapping the fatty acid product in the active site, thus interrupting the catalytic cycle. This hypothesis, supported for three recent structures, is also discussed here. All Asp49 myotoxins showed to be pharmacologically more potent when compared with the Lys49 variants, but phospholipid hydrolysis is not an indispensable condition for the myotoxic, cytotoxic, bactericidal, anti-HIV, anti-parasitic, liposome disrupting or edema-inducing activities. Recent studies on site directed mutagenesis of the recombinant Lys49 myotoxin from Bothrops jararacussu revealed the participation of important amino acid residues in the membrane damaging and myotoxic activities.

LaTBP1: A Leishmania amazonensis DNA-binding protein that associates in vivo with telomeres and GT-rich DNA using a Myb-like domain

Different species of Leishmania can cause a variety of medically important diseases, whose control and treatment are still health problems. Telomere binding proteins (TBPs) have potential as targets for anti-parasitic chemotherapy because of their importance for genome stability and cell viability. Here, we describe LaTBP1 a protein that has a Myb-like DNA-binding domain, a feature shared by most double-stranded telomeric proteins. Binding assays using full-length and truncated LaTBP1 combined with spectroscopy analysis were used to map the boundaries of the Myb-like domain near to the protein only tryptophan residue. The Myb-like domain of LaTBP1 contains a conserved hydrophobic cavity implicated in DNA-binding activity. A hypothetical model helped to visualize that it shares structural homology with domains of other Myb-containing proteins. Competition assays and chromatin immunoprecipitation confirmed the specificity of LaTBP1 for telomeric and GT-rich DNAs, suggesting that LaTBP1 is a new TBP. (C) 2007 Elsevier B.V. All rights reserved.

Inteins in pathogenic fungi: a phylogenetic tool and perspectives for therapeutic applications

Inteins or internal proteins are coding sequences that are transcribed and translated with flanking sequences (exteins). After translation, the inteins are excised by an autocatalytic process and the host protein assumes its normal conformation and develops its expected function. These parasitic genetic elements have been found in important, conserved proteins in all three domains of life. Most of the eukaryotic inteins are present in the fungi kingdom and the PRP8 intein is one of the most widespread inteins, occurring in important pathogens such as Cryptococcus neoformans (varieties grubii and neoformans), Cryptococcus gattii, Histoplasma capsulatum and Paracoccidioides brasiliensis. The knowledge of conserved and non-conserved domains in inteins have opened up new opportunities for the study of population variability in pathogenic fungi, including their phylogenetic relationships and recognition or diagnoses of species. Furthermore, inteins in pathogenic fungi should also be considered a promising therapeutic drug target, since once the autocatalytic splicing is inhibited, the host protein, which is typically vital, will not be able to perform its normal function and the fungal cell will not survive or reproduce.

Migratory route of Strongyloides venezuelensis in Lewis rats: Comparison of histological analyses and PCR

Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado de São Paulo (FAPESP)

Infection levels of Austrodiplostomum compactum (Digenea, Diplostomidae) metacercariae in Plagioscion squamosissimus (Teleostei, Sciaenidae) from the Nova Avanhandava reservoir, São Paulo State, Brazil

Conselho Nacional de Desenvolvimento Científico e Tecnológico (CNPq)

Morphological and molecular characterization of Strongyloides ophidiae (Nematoda, Strongyloididae)

Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado de São Paulo (FAPESP)

First report of Strongyloides sp. (Nematoda, Strongyloididae) in Leopardus tigrinus (Carnivora: Felidae) in the municipality of Botucatu, State of São Paulo, Brazil

O presente estudo reporta o primeiro caso de infecção por Strongyloides sp. em Leopardus tigrinus no município de Botucatu, Estado de São Paulo, Brasil. Fezes do exemplar parasitado de L. tigrinus foram cultivadas em fezes eqüinas esterilizadas e foi realizada infecção experimental em gato (Felis catus domesticus) com três mil larvas L3 infectantes por via subcutânea, para a identificação da espécie de Strongyloides envolvida no parasitismo. As fêmeas partenogenéticas obtidas do animal experimental foram analisadas porém a comparação dos dados biométricos encontrados com os dados da literatura não permitiu a identificação da espécie. Este é o primeiro relato sobre a ocorrência de Strongyloides sp. em L. tigrinus

New host records of Brazilian pentastomid species

Pentastomida é um táxon de organismos parasitas obrigatórios de sistema respiratório de vertebrados, principalmente répteis. Embora esse táxon seja muito importante para a compreensão da filogenia dos Metazoa, tem recebido pouca atenção. No Brasil, existem poucas coleções que abrigam espécies de pentastomídeos, quais sejam: a Coleção Helmintológica do Instituto Oswaldo Cruz (CHIOC), a Coleção de Invertebrados do Laboratório de Zoologia da Universidade Regional do Cariri (LAZ-URCA) e a Coleção Helmintológica do Laboratório de Parasitologia de Animais Silvestres (LAPAS). O presente trabalho descreve as espécies de pentastomídeos depositados na Coleção Helmintológia do LAPAS. O trato respiratório e as cavidades do corpo dos répteis foram removidos e analisados sob Microscópio Esteroscópico; quando encontrados os pentastomídeos, foram montados slides em meio Hoyer e identificados. Foram identificadas quatro espécies e outras três ficaram identificadas no nível de gênero, tendo sido registrados quatro novos hospedeiros para as espécies de pentastomídeos.

Why is it important to correctly identify Haemonchus species?

Infecções por Haemonchus spp. são uma das principais causas de perda econômica nas criações de ruminantes devido à redução no ganho de peso e mortalidade de bovinos e pequenos ruminantes, especialmente em regiões com clima tropical e subtropical. A identificação precisa das diferentes espécies, bem como o conhecimento sobre a epidemiologia das gastroenterites parasitárias, são fundamentais para a elaboração de estratégias sustentáveis de profilaxia das parasitoses. Essa revisão tem por objetivo central, abordar os principais métodos parasitológicos utilizados na identificação morfológica das espécies, os quais se caracterizam pela facilidade e baixo custo. Na maioria dos estudos realizados no Brasil, a distinção entre as espécies Haemonchus contortus e Haemonchus placei não tem sido considerada. Vários relatos de H. contortus, particularmente em bovinos, podem se tratar na verdade da infecção dos animais por H. placei. A identificação correta das espécies é, portanto, fundamental. Além das medidas dos espículos dos exemplares machos, outros detalhes morfológicos, tais como a sínlofe, devem ser avaliados com o objetivo de auxiliar na diferenciação das espécies. Mensurações das larvas infectantes, obtidas em coproculturas, podem também indicar a espécie de Haemonchus presente. Esse procedimento pode ser útil especialmente em estudos que não envolvem a necropsia de animais, como é o caso de testes destinados a avaliar a resistência anti-helmíntica em rebanhos.

Nematódeos de ruminantes em pastagem com diferentes sistemas de pastejo com ovinos e bovinos

O objetivo deste trabalho foi avaliar os efeitos de diferentes sistemas de pastejo, com ovinos e bovinos, sobre a quantidade de larvas no estágio L3 de nematódeos de ruminantes. O delineamento experimental foi inteiramente ao acaso, em arranjo fatorial com quatro sistemas de pastejo e quatro períodos de rotação de pastagem. A duração do experimento foi de 91 dias, com sistema rotacionado (7 dias de ocupação e 21 de descanso), em 8 ha de Panicum maximum cv. Tanzânia. Foram avaliados os sistemas de pastejo: alternado, simultâneo e isolado, com ovinos e com bovinos. Foram utilizados 20 bovinos (mestiços), 30 cordeiros e 15 ovelhas adultas (raça Santa Inês). As amostras do capim, para recuperação e identificação dos nematódeos, foram realizadas semanalmente no pré e pós-pastejo dos piquetes. Na média geral de todos os manejos, a ordem decrescente de número de larvas foi: Haemonchus spp., Trichostrongylus spp., Oesophagostomum spp., Strongyloides spp. e Cooperia spp. Correlações médias foram encontradas entre as quantidades de larvas L3 no pré e pós-pastejo. Com o aumento do número de rotações, houve aumento no grau de contaminação da pastagem pelas larvas, independentemente do sistema adotado. O sistema de pastejo simultâneo foi o que apresentou maior controle da carga parasitária de Haemonchus spp. na pastagem de capim-tanzânia.

Efeito do pastejo rotacionado e alternado com bovinos adultos no controle da verminose em ovelhas

Estudaram-se os efeitos do pastejo alternado de ovinos e bovinos e do pastejo rotacionado sobre o controle da verminose em ovelhas. Utilizou-se uma área experimental composta por três módulos de 1,67ha cada. Os módulos foram subdivididos em oito piquetes. Vinte ovelhas foram colocadas no módulo 1 e quatro bovinos adultos no módulo 2. Os animais permaneceram em cada piquete do módulo por cinco dias, totalizando 40 dias de permanência em cada módulo. Ao final desse período, as ovelhas foram transferidas para o módulo onde estavam os bovinos e estes para o módulo onde estavam os ovinos, mantendo esse esquema até o final do experimento. Um grupo-controle de 20 ovelhas foi mantido, também em sistema rotacionado, em um terceiro módulo, sem compartilhar a pastagem. As ovelhas submetidas ao manejo com bovinos apresentaram o menor grau de infecção por nematódeos gastrintestinais e os maiores valores de volume globular. O pastejo rotacionado de ovinos, sem a utilização de bovinos, não foi eficiente no controle da verminose das ovelhas. A utilização do pastejo rotacionado e alternado de ovinos e bovinos adultos exerceu efeito benéfico significativo no controle da verminose ovina.

Relação entre desempenho e infecções por nematódeos gastrintestinais em bovinos Nelore em crescimento

Este estudo teve por objetivo verificar a associação entre o desempenho e a carga parasitária de 28 machos inteiros da raça Nelore (a partir de um ano de idade), naturalmente infectados por nematódeos gastrintestinais. de novembro de 1999 a junho de 2000, os animais foram pesados quinzenalmente, período no qual foram colhidas amostras de fezes e de sangue para a realização, respectivamente, de exames coprológicos e sangüíneos. Os dados da contagem de ovos por grama de fezes (OPG) ajustaram-se ao modelo de distribuição binomial negativa, indicando que a distribuição de nematódeos no rebanho é agregada. Não ficou evidenciada associação entre ganho de peso e contagem de OPG, e entre contagem de OPG e volume globular (VG). de 10 coeficientes de correlação entre ganho de peso e VG, oito foram negativos, mas apenas dois significativos (P<0,05). As estimativas de repetibilidade da contagem de OPG, LOG (OPG+1) e VG foram de 0,26, 0,25 e 0,33, respectivamente. Cooperia punctata foi a espécie mais freqüentemente encontrada parasitando os animais. Além dessa espécie, foram detectados os seguintes nematódeos: Haemonchus placei, Haemonchus similis, Trichostrongylus axei, Bunostomum phlebotomum e Oesophagostomum radiatum. O parasitismo por nematódeos gastrintestinais aparentemente não prejudicou o desenvolvimento dos animais estudados.

Protection of calves against Haemonchus placei and Haemonchus contortus after immunization with gut membrane proteins from H. contortus

Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado de São Paulo (FAPESP)

First assessment of the endoparasitic nematode fauna of four psammophilous species of Tropiduridae (Squamata: Iguania) endemic to north-eastern Brazil

Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado de São Paulo (FAPESP)

Caenorhabditis elegans as a model to screen plant extracts and compounds as natural anthelmintics for veterinary use

Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior (CAPES)